从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种提取分离醉茄内酯类化合物的方法，具体涉及一种从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法。
【背景技术】
[0002]醉茄内醋类化合物是一类天然存在的麦角留烷26羧酸内醋，为最早的天然来源的甾体。早在60至70年代就已发现该类化合物具有较明显的生物活性，特别是在抗菌、抗炎、细胞毒、细胞免疫和抗肿瘤等方面。
[0003]醉爺内醋类化合物基本分布在爺科的一些植物属中，主要有醉爺(睡爺)属，其次还有酸浆属、曼陀罗属、枸杞属等。醉茄属植物广泛分布于南非、南美洲、亚洲西部、大西洋东北部等地，特别是在印度阿育吠陀医药中广泛运用，其中南非醉茄被称为印度人参。据民间报道，其鲜叶捣烂敷用可治烧伤、日光灼伤、肿胀；与大蒜共捣敷用可治虫蝎、蛇咬伤；根粉末治妇女不育。巴基斯坦用其治疗各种溃疡、肿瘤、腺结核和痈，还被用作利尿剂和解热药。经查阅资料，从枸杞枝中可以分离得到醉茄内酯A和醉茄内酯B两种化合物。
[0004]枸杞全身都是宝，是名贵的药材和滋补品，能够养肝明目安神，令人长寿。枸杞富含枸杞蛋白多糖、维生素C、磷、铁等多种营养成分，能补虚生精，用来入药或泡茶、泡酒、炖汤，如能经常饮用，可强身健体。枸杞的叶、花、根也是上等的美食补品。枸杞中富含的有效成分枸杞多糖(LBP)对骨髓造血功能和各项细胞免疫指标有明显的增强作用，能明显提高机体血液、肝和肌组织的超氧化歧化酶(SOD)的活性含量，从而有利于活性氧的清除，延缓衰老和抗疲劳；增加抗体形成细胞的数量，提高抗体效果。枸杞的产区主要集中在西北地区，宁夏的枸杞最为著名，另外甘肃、青海等地的枸杞品质也很高。
[0005]由于枸杞具有良好的保健作用，近年来在国内外的消费量逐年增加。历来国内外的科学工作者对宁夏枸杞的药用活性成分、药理研究、综合利用、产品开发等方面展开的系统深入和富有成效的研究，无疑为宁夏枸杞的临床广泛运用奠定了坚实的基础。然而，对于与宁夏枸杞一根同生的宁夏枸杞枝的基础研究和应用研究则极少报道。特别是每年春季，茨农为提高产量，对枸杞进行剪枝，大量的枸杞废枝堆积在路边田埂，当垃圾处理掉，对我国西北干旱地区来说，是一种极大的资源浪费。据估计，我国每年春季经过剪枝产生的枸杞废枝在50万吨以上。如果能将这部分枸杞废枝进行开发，将会产生可观的经济效益。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其提取所得率高、所得各单体纯度高。
[0007]为了达到上述目的，本发明提供一种从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中包括如下步骤:
[0008](I)取枸杞废枝用乙醇进行提取，合并提取液，回收乙醇，得到浓缩液；
[0009](2)向步骤⑴中的浓缩液中加入乙酸乙酯萃取，回收有机相后浓缩至浸膏；
[0010](3)将步骤(2)中的浸膏稀释，上选择性大孔吸附树脂柱，用乙醇洗脱，所得洗脱液回收乙醇后，用乙醇结晶得醉茄内酯类化合物；
[0011](4)将步骤(3)中的醉茄内酯类化合物结晶上硅胶柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液洗脱，分段收集洗脱液，依次分别得到醉茄内酯A和醉茄内酯B ；
[0012](5)回收步骤⑷中的分段洗脱液中的溶剂，再用乙醇结晶分别得到醉茄内酯A和醉茄内酯B单体。
[0013]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(I)中的乙醇体积浓度为60-80%。
[0014]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(I)中，枸杞废枝用乙醇提取的次数为三次，第一次提取时枸杞废枝与乙醇的配比按枸杞废枝的重量:乙醇的体积=I: 8-10，提取时间为1-3小时；第二次提取时枸杞废枝与乙醇的配比按枸杞废枝的重量:乙醇的体积=I: 6-8，提取时间为1-3小时；第三次提取时枸杞废枝与乙醇的配比按枸杞废枝的重量:乙醇的体积=I: 5-7，提取时间为1-3小时。
[0015]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(I)中的提取温度为50-70°C。
[0016]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(2)中加入的乙酸乙酯的体积与浓缩后的提取液的体积比为1: 1，萃取的次数为3次。
[0017]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(3)中的选择性大孔吸附树脂型号为ADS-15或ADS-17或ADS-F8。
[0018]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(3)中洗脱用乙醇的体积浓度为50-70%，结晶用乙醇的体积浓度为50-80%。
[0019]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(3)中浸膏用50-200倍于其重量的水稀释后上柱，所述洗脱剂乙醇的体积用量为浸膏重量的30-60倍。
[0020]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(4)中正己烷和乙酸乙酯混合液中，正己烷和乙酸乙酯的体积比为9: 1-2: 8。
[0021]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法，其中所述步骤(4)中，用体积浓度为60-80 %的乙醇对醉茄内酯A洗脱液进行结晶，得到醉茄内酯A单体；用体积浓度为30-70%的乙醇对醉茄内酯B洗脱液进行结晶，得到醉茄内酯B单体。
[0022]采用上述方案后，本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法通过采用特殊的选择性极性无孔吸附树脂进行除杂，可除掉大部分影响硅胶柱分离的杂质，实现了一次上柱即可分离得到醉茄内酯类化合物A、醉茄内酯类化合物B，且各单体的纯度达到99%以上；本发明方法的工艺路线合理，产品收率高，特别是对作为废弃物处理的大量枸杞废枝，提供了一条可行的能产生经济效益的途径。
【具体实施方式】
[0023]下面结合具体实施例，进一步阐述本发明，但这些实施例仅限于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。
[0024]实施例1
[0025]本发明从枸杞废枝中提取分离醉茄内酯类化合物的方法实施例，其包括如下步骤:
[0026](I)取10千克枸杞废枝，用100升体积浓度为80%的乙醇在50°C时对枸杞废枝提取I小时，用200目的滤布将枸杞废枝分离出来；再用60升体积浓度为80%的乙醇在70°C时对枸杞废枝提取I小时，用200目的滤布将枸杞废枝分离出来；再用50升体积浓度为80%的乙醇在50°C时对枸杞废枝提取I小时，用200目的滤布将枸杞废枝分离出来；合并三次提取所得的提取液，回收乙醇，将提取液浓缩至100升浓缩液；
[0027](2)向浓缩液中加入100升乙酸乙酯萃取3次，合并萃取分离出的有机相，回收有机相后浓缩得到500克浸膏；
[0028](3)将步骤(2)中所得浸膏加50倍体积水稀释后上ADS-15柱，先用水洗，直至流出液无色，再用15升体积浓度为50%的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至浸膏，再用体积浓度为50%的乙醇结晶，得到25克醉茄内酯类化合物晶体；
[0029](4)将醉茄内酯类化合物结晶上硅胶柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液进行梯度洗脱，其中，正己烷和乙酸乙酯的体积比为9: 1-2: 8;在洗脱过程中，以高效液相在线检测定位，分段收集洗脱液，依次得到含有醉茄内酯A和醉茄内酯B的洗脱液；
[0030](5)回收步骤(4)中收集的各洗脱液中的溶剂，用体积浓度为60%的乙醇对醉茄内酯A洗脱液进行结晶，得到2.3