一种石油污染土壤的微生物修复方法与流程

技术特征：

1.一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于按下列步骤进行：

a. 采集油井附近石油污染土壤，将其晒干碾碎，去除挥发性烃类和水份；

b. 将步骤a的土壤中按体积比10-30%加入粒径为1-5 mm的生物质粉末为棉杆粉末、锯末、稻壳、玉米杆粉末混合均匀，并调节含水率为20-30%，调节pH为7.5；

c.制备表面活性剂粗品：将无机盐培养基为NH₄Cl 0.776g，KH₂PO₄ 0.05g，K₂HPO₄0.05g，CaCl₂ 0.001g，MgSO₄ 0.01g，超纯水100mL，pH 7.5，放入250mL锥形瓶中，并加入4g正十六烷，温度121℃高温灭菌20min，待冷却后接入铜绿假单胞菌液Pseudomonas aeruginosa，并用透气膜封口，放入温度30℃恒温摇床中，120r/min培养96小时，得到表面活性剂粗品；

d.将铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa和无色杆菌Achromobacter sp按体积比0.9 : 1混合，将混合菌液接入步骤b所得土壤体系中，接菌量为1×10⁹～1.5×10⁹个/g土壤，同时加入200-500 mL/kg的表面活性剂粗品，再加入NH₄Cl、KH₂PO₄和K₂HPO₄作为营养液氮源和磷源，其中氮∶磷质量比为10:1；

e．将步骤d中配好的反应体系堆成堆状，控制反应温度20-30℃，保持反应体系中水分含量为20-30%，定期搅拌通气，反应45天后取样检测。