专利名称：阴离子色谱柱的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种阴离子色谱柱的制备方法，特别是涉及涂覆型阴离子色谱柱的制备方法。
背景技术：
离子色谱是目前色谱领域发展最快的一个分枝，离子色谱柱可以用在抑制型或非抑制型离子色谱中，是目前阴离子分析最有效的分析手段，在环境保护、电力、半导体等许多领域广泛应用。离子色谱柱作为离子色谱的心脏，有多种不同的制备方法，其中采用常规的反相高效液相色谱柱或填料涂覆表面活性剂后，制成阴离子色谱柱，制作方便，价格便宜，并可用于常规阴离子的分离和检测；但是现有技术涂覆法，只涂阳离子表面活性剂，而且制成的色谱柱，柱效低，交换容量高，无法满足分析测试的要求。
发明内容
为了克服常规涂覆型离子色谱柱效低、交换容量高且无法控制的问题，本发明提供一种成本低、柱效高、涂覆型阴离子色谱柱的制备方法。
本发明提供的高效阴离子色谱柱的是这样实现的以反相高效液相色谱柱或反相高效液相色谱柱填料为基体，采用动态或静态涂覆方法涂覆非离子表面活性剂和阳离子表面活性剂。可以采用首先涂非离子表面活性剂，然后再涂阳离子表面活性剂的双层涂覆方法，达到高效目的。或采用涂覆混合非离子表面活性剂和阳离子表面活性剂，控制阴离子色谱柱的交换容量。
双层涂覆法的制备步骤为(1)用二次去离子水洗净反相高效液相色谱柱或者其填料为基体，基体用硅胶型C18或C12。(2)将上述基体先涂非离子表面活性剂，如曲拉通X-100，吐温20，Brij35等，然后再涂阳离子表面活性剂，如氯化双十二烷基双甲基铵、溴化十六烷基吡啶等，双层涂覆，可以制成高效阴离子色谱柱。
混合涂覆的制备步骤为(1)用二次去离子水洗净反相高效液相色谱柱或者其填料为基体，基体用硅胶型C18或C12。(2)将上述基体动态涂覆或静动态涂覆非离子表面活性剂和阳离子表面活性剂。非离子表面活性剂采用曲拉通X-100，吐温20，Brij35等，阳离子表面活性剂采用氯化双十二烷基双甲基铵、溴化十六烷基吡啶等。动态涂覆基体通过一定流量的涂覆混合液(浓度为几个mmol/L)，直到饱和；静态涂覆，将基体放入涂覆混合液(浓度几十个mmol/L)涂覆。
本发明的特点是制备工艺简单，制作成本低，而制成的涂覆型阴离子色谱柱不仅柱效高，并可以调节色谱柱的交换容量。
图1通过先涂非离子表面活性剂，然后再涂阳离子表面活性剂，制成的高效阴离子柱在抑制电导离子色谱对阴离子的分析结果高效阴离子交换柱分离无机和有机阴离子色谱图(抑制电导检测)色谱条件色谱柱Dionex Acclaim 120 C18 5μm120_(4.6×100mm，ID)先涂5mMTriton X-100，然后再涂5mM氯化十六烷基吡啶；淋洗液10mM Na2CO3；流速1.0ml/min；检测抑制电导采用抑制器以50mA条件以自再生方式连接；进样量50μL含有2μg/ml氟离子，10μg/ml甲酸根，5μg氯离子，5μg/ml亚硝酸根离子，5μg/ml溴离子，5μg/ml硝酸根，10μg/ml磷酸根，10μg/ml硫酸根，20μg/ml 4-羟基苯甲酸，20μg/ml草酸.色谱峰1.氟离子，2.甲酸根，3.氯离子，4.亚硝酸根，5.磷酸根，6.溴离子，7.硫酸根，8.草酸根，9.硝酸根，10.4-羟基苯甲酸图2通过先涂非离子表面活性剂，然后再涂阳离子表面活性剂，制成的高效阴离子柱在直接紫外检测离子色谱对阴离子的分析结果高效阴离子交换柱分离无机和有机阴离子色谱图(紫外检测)色谱条件色谱柱Phenomenex Synergi 4μmMAX-PR 80_(4.6×150mm，ID)首先涂5mM Triton X-100的30％CAN水溶液，然后再涂5mM十六烷基吡啶；淋洗液2mM NaClO4，流速1.0ml/min；检测UV检测在210nm波长；进样量50μL含有30μg/ml乙酸根，2μg/ml亚硝酸根，2μg/ml溴离子，2μg/ml硝酸根，2μg/ml 4-羟基苯甲酸，30μg/ml草酸，30μg/ml铬酸根，10μg/ml苯甲酸，10μg/ml邻苯二甲酸，30μg/ml硫氰根，10μg/ml碘离子色谱峰11.乙酸根，12.亚硝酸根，13.溴离子，14.硝酸根，15.草酸根，16.碘离子，17.4-羟基苯甲酸，18.铬酸根，19.硫氰根，20.邻苯二甲酸根，21.苯甲酸根。
具体实施例方式
实施例1阴离子色谱柱的制作过程如下，其步骤为(1)采用硅胶型C18或聚合物型反相色谱柱如CERI L-column ODS(150×4.6mm，ID)，DionexNS1 5μm(150×4mm，ID)用去离子水冲洗被色谱柱，直至色谱柱中贮备液全部洗净。(2)用5mmol/L溴化双十二烷基双甲基铵或氯化十六烷基吡啶与合适浓度(约几个mmol/L)的吐温20混合，以1ml/min的流速泵入反相色谱柱1至2小时，直至色谱柱涂覆饱和。(3)采用2mmol/L高氯酸钠作为淋洗液，流速为2ml/min，在紫外200nm波长下进行检测具有紫外吸收的离子。10mmol/L碳酸钠作为淋洗液，流速为1ml/min，抑制电导检测。流动相洗脱平衡后，对被测离子进行分析检测。(4)不同浓度的吐温20，涂覆制成的离子色谱柱会有不同的交换容量。
权利要求
1.一种阴离子色谱柱的制备方法，其特征是以反相高效液相色谱柱或反相高效液相色谱柱填料为基体，采用动态或静态涂覆方法涂覆非离子表面活性剂和阳离子表面活性剂，采用先涂覆非离子表面活性剂，然后再涂覆阳离子表面活性剂的双层涂覆方法，制成高效阴离子色谱柱，或采用涂覆混合非离子表面活性剂和阳离子表面活性剂，控制阴离子色谱柱的交换容量。
2.根据权利要求1所述阴离子色谱柱制备方法，其特征是所述双层涂覆法的制备步骤为a用二次去离子水洗净反相高效液相色谱柱或其填料为基体；b将上述基体先涂覆非离子表面活性剂，然后再涂覆阳离子表面活性剂，双层涂覆。
3.根据权利要求1所述阴离子色谱柱制备方法，其特征是所述混合涂覆的制备步骤为c用二次去离子水洗净反相高效液相色谱柱或其填料为基体；d将上述基体动态涂覆或静动态涂覆非离子表面活性剂和阳离子表面活性剂。
4.根据权利要求1所述阴离子色谱柱制备方法，其特征是所述反相高效液相色谱柱基体为，硅胶型C18或C12。
5.根据权利要求1所述阴离子色谱柱制备方法，其特征是所述非离子表面活性剂为，曲拉通X-100或吐温20或Brij35。
6.根据权利要求1所述阴离子色谱柱制备方法，其特征是所述阳离子表面活性剂为，氯化双十二烷基双甲基铵或溴化十六烷基吡啶。
7.根据权利要求1所述阴离子色谱柱制备方法，其特征是所述动态涂覆，将基体放入以1ml/min的流速，泵入一定量的涂覆混合液中1至2小时，直至涂覆至饱和。
8.根据权利要求1所述阴离子色谱柱制备方法，其特征是所述静态涂覆，将基体放入一定量的涂覆液中，超声波浸涂后用匀浆法装柱。
全文摘要
本发明提供了一种阴离子色谱柱的制备方法，其特征是以反相高效液相色谱柱或反相高效液相色谱柱填料为基体，动态或静态涂覆方法涂覆混合的非离子表面活性剂和阳离子表面活性剂，以控制阴离子色谱柱的交换容量，采用首先涂覆非离子表面活性剂，然后再涂阳离子表面活性剂的二次涂覆方法，制成高效阴离子色谱柱。
文档编号G01N30/60GK1506681SQ0215622
公开日2004年6月23日 申请日期2002年12月12日 优先权日2002年12月12日
发明者朱岩, 叶明立, 张培敏, 朱 岩 申请人:浙江大学