专利名称：用Luminol作为底物催化HRP发光的免疫层析方法及其检测试纸条的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种免疫检测方法，特点是一种经免疫层析后在层析膜特定的区域形成抗原—抗体复合物区带，以含有Luminol(5’-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮)的溶液催化免疫复合物区带上的HRP发光，并用X线胶片自显影或光吸收仪器检测。
免疫层析法作为免疫分析技术是用于抗原、半抗原和抗体检测的常用方法，胶体金检测试纸条就是最常见的一种，有许多专利对其进行了描述，现已有各种检测试剂盒面市，该类试剂是以胶体金作为指示剂，具有操作简单、快速和无需仪器检测的优点，目前已广泛用于样品的初筛，但该实验结果是用肉眼判读，分辨率不高，实验系统无信号放大的缺点，因此检测的灵敏度较低，难以进行定量检测，而且目测判读的结果使检测结果不易客观记录和保存。
本发明的目的是在免疫层析技术的基础上，使用Luminol催化免疫复合物上的HRP长时间发光，用X线胶片自显影对光信号进行累积或采用光吸收仪器对光信号进行再次放大，以提高检测的灵敏度。
实施例HbsAg检测(1)以一定量HbsAg单克隆抗体带状物理吸附在层析膜，用2％BSA封闭2小时。
(2)层析膜装配样品垫和吸水垫。
(3)Ing的HbsAg标准品1∶100倍稀释加入样品垫。
(4)HBsAg单克隆抗体HRP结合物加入样品垫。
(5)含Luminol的溶液加入样品垫。
(6)取层析膜对X线胶片暴光6小时。
(7)X线胶片显影定影后有明显光带。
权利要求
1用Luminol作为底物催化HRP发光的免疫层析方法及其检测试纸条具有以下特征(1)用于捕捉的抗原或抗体，通过物理方式吸附在层析膜上。(2)用于检测的抗原或抗体以HRP标记。(3)在样品垫处加入样品液和被标记的抗原或抗体，经毛细扩散作用，在层析膜上形成免疫复合物检测带。(4)加入含有Luminol的溶液，促使免疫复合物检测带上的HRP发光。(5)用X线胶片自显影或配合光吸收仪器检测层析膜。
2如权利要求1所述，用Luminol作为底物催化HRP发光用于免疫层析方法及其检测试纸条。
3如权利要求1所述，Luminol作为底物催化HRP发光的免疫层析方法及其检测试纸条用于抗体IgM、IgA和IgE的检测。
4如权利要求1所述，Luminol作为底物催化HRP发光的免疫层析方法及其检测试纸条用于抗原和半抗原的检测。
5如权利要求1所述，Luminol作为底物催化层析膜上免疫复合物HRP发光用X线胶片自显影或配合光吸收仪器检测。
全文摘要
本发明涉及一种免疫检测方法，特点是一种经免疫层析后在层析膜特定的区域形成抗原－抗体复合物区带，以含有Luminol的溶液催化免疫复合物区带上的辣根过氧化物酶(HRP)发光，用X线胶片自显影或光吸收仪器判读实验结果，以提高免疫层析法检测的灵敏度，可进行定性或定量分析。用于抗原、半抗原和抗体的检测。
文档编号G01N23/223GK101042398SQ20061003447
公开日2007年9月26日 申请日期2006年3月22日 优先权日2006年3月22日
发明者李川江, 周荣, 黄茜华 申请人:广州华银医药科技有限公司