专利名称：一种检测个体抗氧化遗传易感性的试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及分子生物学和医学领域，更具体的，本发明涉及一种检测个体抗氧化遗传易感性的试剂盒， 通过同时检测与抗氧化能力密切相关的过氧化氢酶基因(CAT)、还原型辅酶叶绿醇基因(CYBA)、内皮型 一氧化氮合成酶基因(N0S3)、胞外过氧化物岐化酶基因(S0D3)、对氧磷酯酶1基冈(P0N1)的单核苷酸 多态性位点基因型来评估个体抗氧化遗传易感性。
背景技术：
人体内存在着一个非常重要的平衡系统氧化一还原系统。这一系统调节着体内氧C3由基的产生和代 谢，维持着体内适当的氧化能力和氧t3由基的清除能力，从而保障了生命活动的进行。氧化一还原系统失 衡、过多氧自由基的积累会引起一系列的心脑血管、神经系统、消化系统等疾病以及过早的衰老。因此抗 氧化能力在人的生命活动中十分重要。遗传体质不同的人在相同的环境下有着不同水平的抗氧化能力，面对不同的抗氧化能力缺陷风险需要 采取不同的干涉手段。因此，综合利用现代科学研究成果，开发一项基F分子遗传基础的抗氧化易感遗传 风险检测及个性化干预提示产品会对由于抗氧化能力缺陷而引起疾病的发生起到预警、个性化防治的提示 作用，具有很强的社会意义和市场前景。目前，涉及抗氧化能力的一些基因，己经被很好的进行研究。其作用机制、生化功能、信号通路、调 控、转录等等方面都有明确可靠的研究结果；研究手段、方法、仪器设备和试剂等都已经发展到了一个相 当的高度。目前，经证实并且机理研究清楚的与抗氧化能力密切相关的基冈有过氧化氢酶基因(CAT)、还 原型辅酶叶绿酵基因(CYBA)、内皮型一氧化氮合成酶基因(N0S3)、胞外过氧化物岐化酶基因(S0D3)、对 氧磷酯酶l基因(P0N1)。过氧化氢酶CAT全称catalase，编码此酶的CAT基因位f 11p13，全长33130bp,包含13个外显子， niRNA长2294bp，编码528个氨基酸。过氧化氢酶是人体内一种天然的、很重要的抗氧化酶，在R0S的清 除过程中作为S0D (超氧化物岐化酶)的下游抗氧化蛋白，通过催化超氧阴离子Q由基的自身氧化还原反 应，有效清除自由基,维持体内自由基和氧化还原状态的动态平衡，以避免损伤机体的组织细胞。随着对 许多疾病的研究深入，研究者发现体内的氧化还原状态与常见的一些疾病关系发生有着越来越紧密的联 系，如高血压，动脉粥样硬化，亨廷顿氏综合症(Hungtington' s),阿尔茨海默病(Alzhemeimer)等。 由于其抗氧化的特性，过氧化氢酶基因目前己成为心血管疾病研究的候选基。rs7692M是位丁-过氧化氢酶 基因启动子区域上的一个A/G多态，即A-844G多态，在世界人群中该多态的分布为G: A=0. 40: 0.60。有 研究表明，此位点的多态性可导致下游过氧化氢酶的表达水平的不同，从而影响与原发性高血压的发病有 关的脂质过氧化等生理生化反应。通过分别将含有-844A和-844G的的CAT基因启动子的片断克隆到pGL3 载体中，转染293细胞，再进行荧光素酶检测，最后发现此多态性位点为G时的荧光素酶表达水平比为A 时要高，而且具有显著性差异。关于这种由A和G造成的转录调控水平的差异，研究表明可能是由T两种 启动子结合了两种不同的转录因子，或对同一种转录因子的亲和力不同。A等位基冈含有MZF1和AP2的结 合位点，AP2调节表皮和神经特异基因的表达，而MZF1参与造血过程的调节；G等位基因含有Ikaros-2 和LYK-1的结合位点，Ikaros-2是淋巴细胞发育的土要调节冈子。此项研究表明此多态性位点的存在会影 响卜游过氧化氛酶的表达。CYBA为NAD(P)H氧化酶编码基因，是血管平滑肌细胞和内皮细胞氧G由基最重要的来源。由氧Q由基 诱发的氧化应激反应，参与了高血压、动脉粥样硬化、心肌梗死等心血管病的发生发展。CYBA编译的酶是 中胚层来源的多种细胞膜上的一组酶类。它不仅存在于巨噬细胞、神经细胞，而且还存在于心血管系统的 内皮细胞、平滑肌细胞和血管外膜成纤维细胞。NAD(P)H氧化酶系统是一个多个亚单位组成的酶的复合体， 包括P22phox 、 P47phox 、 P67phox 、 Rac和gp91phox或其他Nox家族。而在所有的NAD(P)H氧化酶中 P22phox亚单位是决定酶活性的关键部分。NADP在NAD(P)H氧化酶作用下形成MD(P)H,并通过P22phox 将电子传递给氧，形成超氧阴离子或其衍生物，此过程是血管壁上活性氧的主要来源途径。rs4673是位于 第16号染色体上CYBA基因上的一个C/T多态，引起基因编码蛋A的第72个氨基酸由His变为Tyr。在世界人群频率C: 0.72T: 0.28;亚洲人群中C: 0.93 T: 0.07。 CYBA基因第242位核苷酸的C点突变为T， 使氨基酸序列第72位组氨酸被酪氨酸取代，组氨酸是血红蛋白的结合位点，C-*T突变与NAD(P)H氧化海 功能降低密切相关，而NAD(P)H氧化酶在冠心病等心脑血管疾病发生发展中起着重要的作用。内皮型一氧化氮合成酶NOS3即nitric oxide synthase 3 (endothelial cell),常用名为eNOS。 eNOS 主要分布于冠状血管及心腔面的内膜，主要功能是参与精氨酸和脯氨酸代谢，并催化生成(N0)。 一氧化 氮是一种内皮松弛因子，具有舒张血管、调节血流、抑制血管平滑肌细胞增殖、抑制血小板和白细胞粘附 等重要功能，参与了多种疾病的病理生理过程。在该基因第7外显子上，894位碱基G突变成T (G894T， rsl799983),相应蛋白产物第298位上的谷氨酸则被替换成大冬氨酸(Glu298Asp)，这个位点的突变导致 eNOS功能受损，N0产生减少，血管紧张性增高而引起高血压。2004年，van Onna等人发现了在动脉动脉 粥样硬化患者中，eNOS基因298Asp多态要明显高f对照组(0R=1. 44， 95%CI=1. 00-2. 09)。动脉粥样硬 化与高血压经常是相伴发生的；而且催化的动脉血管，更是诱发高血压的原因。2005年，Zhu等人在美国 人群中，证实了 eN0S基因的298Asp多态，可以影响到高血压发生的性别偏向和发病年龄，以及高血.压发 病风险的增加。Pereira等人于2006年的最新发表的研究显示，eNOS基因的298A印多态在高血压患者中 的分布，依据血压高低有区别。在血压值高T正常血压的50^的病人中，298Asp多态表现除了显著的相 关性。同时，他们还指出，298Asp多态会严重影响到病人的血脂含量。最后，他们得到结论是，298Asp 多态会影响到血脂的量，并调节血压。贾崇奇等对中国人群研究了内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因第7 外显子G894T(Glu298Asp)变异与超重交互作用对早发冠心病的影响。发现eNOS基因G894T变异与超重在 早发冠心病的患病中存在明显的正相加模型交互作用，使早发冠心病患病危险性增加近3倍；G894T变异 与超重同时存在时，早发冠心病患病危险性中约27%是由于-两者交互作用所导致。S0D3 (Superoxide dismutase , extracellular)基因为胞外过氧化物岐化酶编码基因。S0D3是SOD同 工酶的一种，与其他SOD同工酶一样，可以消除体内代谢产生的反应氧族，抵御内外环境中超氧离子的损 伤，作为唯一可在胞外表达的SOD,其在脉管系统抵御氧自由基所造成损伤方面起到歪要作用，与冠心病、 动脉粥样硬化、高血压等心脑血管疾病密切相关。S0D3以Cu2+、 Zn2+为辅基，属丁CuZn-SOD,分布于-血 液、淋巴、滑膜液及组织中。rsl799895是位f第四号染色体上S0D3基冈第3个外显子处的一个G/C多态， 引起S0D3基因编码的蛋白第231个氨基酸由Arg变为Gly，目前研究表明该氨基酸位于构成S0D3肝磷脂 结合功能域的阳性氨基酸残基的C末端群的中心位置。变异C没有影响到S0D3的酶活力，但使其对f肝 磷脂的结合能力下降，使得S0D3从组织间隙释放入脉管的速度大为增加。这样最终导致了 S0D3在血浆中 的浓度上升了 1(T30倍。相应的，SOD3在血液中的活性大为提高，而同时伴随着组织内活性的下降。P0N1全称paraoxonasel ( I型二乙基对氧磷酸酯酶)基因位于第七号染色体7q21. 3位置。P0N1基 因全长26.9kb, mRNA全长2393bp，含9个外显子，8个内含子，编码含356个氨基酸的蛋白质。人血清 对氧磷酶主要由肝脏分泌，它是一种广谱非专一酯酶，可以水解有机磷酸酯、芳香族碳酸酯和氨基甲酸酯 等，在有机磷神经毒剂解毒中起重要作用。其主要功能为保护LDL免受氧化修饰，降低氧化型LDL (ox-LDL) 水平，防止HDL免受氧化修饰，抑制T2DM患者DNA的氧化修饰，防止内皮细胞的损伤。P0N1基因多态性 与脑卒中、动脉粥样硬化、冠心病及2型糖尿病发病等有密切关系。rs662是位于第7号染色体上P0N1基 因第632位的一个A/G多态，引起基因编码蛋白的第192个氨基酸由Gln变为Arg。第192个氨基酸的多 态性使酶出现2种对对氧磷酶水解活力不同的同型异构体，A型192位为精氨酸，活力低；B型192位为 谷氨酸，具有高活力。多冈素logistic冋归分析表明P0N1的192R单倍型是动脉瘁挛、II艰糖尿病合并 冠心病的独立危险因子。发明内容基于过氧化氢酶基因(CAT)、还原型辅酶叶绿醇基因(CYBA)、内皮型一氧化氮合成酶基因(N0S3)、 胞外过氧化物岐化酶基因(S0D3)、对氧确酯酶1基因(P0N1)上的5个SNPs位点多态性可用来评估个付 遗传抗氧化能力的基础上，本发明提供一种检测个体抗氧化遗传易感性的试剂盒。该试剂盒包括-.检溯过氧化教酶基因上rs769214号SNP多态性基因型的特异性引物对及特异性荧光探针对； 检测还原型辅酶叶绿醇基因上rs4673号SNP多态性基因型的特异性引物对及特异性荧光探针对；检测内皮型一氧化氮合成酶基因上rs 1799983号SNP多态性基因型的特异性弓I物对及特异性荧光探针对；检测胞外过氧化物岐化酶基因上rsl799895号SNP多态性基因型的特异性引物对及特异性荧光探针对；检测对氧磷酯酶1基因上rs662号SNP多态性基因型的特异性引物对及特异性荧光探针对； 荧光定量PCR反应组件(包括Taq酶、dNTP混合液、MgC:b溶液、反应缓冲液、去离子水等)。本试剂盒中所述的特异性引物对是指针对过氧化氢酶基因上rs769214号SNP位点、还原型辅酶叶绿 醇基因上rs4673号SNP位点、内皮型一氧化氮合成酶基因上rsl799983号SNP位点、胞外过氧化物岐化 酶基因上rsl799895号SNP位点、对氧磷酯酶1基因上rs662号SNP位点而设计，能特异性扩增出包含这 5个SNPs位点的DNA片段的引物对。设计这类引物对是本领域技术人员能够轻易完成的。优选地，试剂盒 中包含具有SEQ ID NO: l和2、 3和4、 5和6、 7和8、 9和10所示序列的引物对。特异性引物对可用常 规的合成技术进行合成。本领域的技术人员能够理解，本发明的引物不限T这五对引物。本试剂盒中所述的特异性荧光探针对是指针对过氧化氢酶基冈上rs769214号SNP位点、还原型辅酶 叶绿醇基因上rs4673号SNP位点、内皮型一氧化氮合成酶基因上rsl799983号SNP位点、胞外过氧化物 岐化酶基因上rsl799895号SNP位点、对氧磷酯酶1基因上rs662号SNP位点而设计，能通过荧光定量PCR 技术特异性检测出这五个SNPs位点基因型的T叫raan探针对。设计这类探针是本领域技术人员能够轻易完 成的。优选地，试剂盒中包含具有SEQ ID NO: 11和12、 13和14、 15和16、 17和18、 19和20所示序 列的T叫raan探针对。特异性荧光探针对可用常规的探针合成技术进行合成。本领域的技术人员能够理解， 本发明的特异性荧光Taq脑n探针对不限于这五对探针，所有可用f荧光定量PCR法检测本发明中所述用 来评估抗氧化遗传易感性的五个SNPs位点的探针均在本发明范围内。本发明试剂盒的组分和含量包括-5nl 10 X荧光定量PCR反应缓冲液，0. 5nl 25raM dNTP混合液，3^1 25mM MgCl2溶液，0. 125fil (5units/|iil) Taq DNA聚合酶，20nM特异性引物对每条引物各0.225nl，WjxM特异性荧光探针对每条探针各0.25p1,去离子水26. 625nl。本试剂盒供一人份检测应用，试剂盒的保存温度为-20°C 。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规 条件，或按照厂商所建议的条件。实施例l.检测试剂盒的使用 步骤l: DM模板的抽取 用硅胶吸附法抽提口腔上皮细胞的基因组DNA。 步骤2:荧光定量PCR反应使用可个体抗氧化遗传易感性的荧光定量PCR检测试剂盒，其中，含有下列引物对和荧光探针对有义引物l: 5' _ TTTCAAAATTCCTGCTTAC -3' (SEQ ID NO: 1)反义引物l: 5' - AGAAATCTGCTTCCCC -3' (SEQ ID NO: 2)有义引物2: 5' _ TCCTCCCTCCC -3' (SEQ ID NO: 3)反义引物2: 5' - MCAGCTTCACCAC -3' (SEQ ID NO: 4)有义引物3: 5' - CCCTGCTGCTGC -3' (SEQ ID NO: 5)反义引物3: 5， - GGGGCAGAAGGAA -3' (SEQ ID NO: 6)有义引物4: 5' — GGAGCA(TCAGAGC -3' (SEQ ID NO: 7)反义引物4: 5' - GCCTTGCACTCGCTC -3' (SEQ ID NO: 8) 有义引物5: 5' - GGACCTGAGCACTTTTATG -3' (SEQ ID NO: 9) 反义引物5: 5' - TTGGACTATAGTAGACAACA -3' (SEQ ID NO: 10) 带VIC荧光基团探针l: 5' — CTGGGaGTAAAAT _3' (SEQ ID NO: 11) 带FAM荧光基团探针l: 5' - CTGGGgGTAMA-3' (SEQ ID NO: 12) 带VIC荧光基团探针2: 5' - AGMGcACATGAC -3' (SEQ ID NO: 13) 带PAM荧光基团探针2: 5' - AGAAGtACATGACC-3' (SEQ ID NO: 14) 带VIC荧光基团探针3: 5' — AgCCCCCAGAAC -3' (SEQ ID NO: 15) 带FAM荧光基团探针3: 5' - GAtCCCCCAGAAC-3' (SEQ ID NO: 16) 带VIC荧光基团探针4: 5' - AGAAGcGGCGG -3' (SEQ ID NO: 17) 带FAM荧光基团探针4: 5' - AGMGgGGCGG-3' (SEQ ID NO: 18) 带VIC荧光基团探针5: 5' - CgATCCTGGGAGA -3' (SEQ ID NO: 19) 带FAM荧光基团探针5: 5' — CaATCCTGGGAGAT-3' (SEQ ID NO: 20)有义引物1，反义引物1、带VIC荧光基团探针1、带FAM荧光基团探针1特异地针对检测过氧化氢酶 基因上rs769214号SNP位点多态性；有义引物2,反义引物2、带VIC荧光基团探针2、带FAM荧光基团探针2特异地针对检测还原型辅酶 叶绿醇基因上rs4673号SNP位点多态性；有义引物3，反义引物3、带VIC荧光基团探针3、带PAM荧光基团探针3特异地针对检测内皮型一氧 化氮合成酶基因上rsl799983号SNP位点多态性；有义引物4，反义引物4、带VIC荧光基团探针4、带FAM荧光基团探针4特异地针对检测胞外过氧化 物岐化酶基因上rsl799895号SNP位点多态性；有义引物5，反义引物5、带VIC荧光基团探针5、带FAM荧光基团探针5特异地针对检测对氧磷酯酶 1基因上rs662号SNP位点多态性5个SNPs位点分别进行5次独立的荧光定量PCR反应，每个反应的体系为总体积1(^1，包含浓度为 20ng/nl的DNA模板2pl、 lpl 10 X荧光定量PCR反应缓冲液、0. lpl 25mM dNTP混合液、0. 61 25mMMgCl2 溶液、0.025nl (5units/nl) Taq DNA聚合酶、20nM的有义引物和反义引物各0. 225^1、 lOpM的带VIC 荧光探针和带FAM荧光探针各0. 25^1，去离子水5. 325til。在ABI9700型PCR扩增仪上进行反应，反应条件为50'C、 2分钟，95°C、 10分钟，进行60个循环的 95°C、 30秒，60°C、 l分钟。反应结束后在ABI7900型荧光定量PCR仪上读取样品荧光量。步骤3: SNP基因型分析熟悉荧光定量PCR技术的本领域技术人员能够通过辨识荧光定量PCR仪上显示的最终样品荧光量，根 据不同序列探针VIC和FAM荧光信号的强弱即可确定所检测的SNP位点的基因型。实施例2.对人们进行个体抗氧化遗传易感性检测的服务 步骤l: DNA提取由医院检验科医师指导被检者使用口腔采样拭进行口腔上皮细胞取样，采用硅胶吸附法进行口腔上皮 细胞的DNA抽提。步骤2:基因分型检测使用本发明提供的试剂盒，对被检测者基因组DNA的过氧化氢酶基冈上rs76924号SNP位点、还原 型辅酸叶绿醇基因上rs4673号SNP位点、内皮型一氧化氮合成酶基因上rsl799983号SNP位点、胞外过 氧化物岐化酶基因上rsl799895号SNP位点、对氧磷酯酶1基因上rs662号SNP位点分别进行荧光定量PCR 检测，确定这五个SNPs位点的基因型。步骤3:个体抗氧化遗传易感性的分析通过对被检测者SNPs基因型的分析，出具个体抗氧化遗传易感性的分析报告单。报告中详细说明了 被检测者抗氧化遗传能力的髙低，并由医师向被检者详细说明和解读个体抗氧化遗传易感性分析报告单。序列表<110〉上海主健生物工程有限公司<120> —种检测个体抗氧化遗传易感性的试剂盒<勝20<210〉 1 <211〉 19 <212> DNA <213>人工序列〈220〉<223〉引物 <400> 1TTTCAAAATT CCTGCTTAC 19〈210〉 2 <211> 16 <212〉腿 <213>人工序列〈220〉<223>引物 <400> 2AGAAATCTGC TTCCCC 16<210> 3 〈211> 11 <212>腿 <213〉人工序列<220>〈223>引物 <400> 3TCCTCCCTCC C 11〈210〉 4<211〉 14 〈212〉 DNA <213>人工序列<220〉<223〉引物 <400〉 4AACAGCTTCA CCAC<210> 5 〈211〉 12 <212> DNA <213>人工序列<220><223〉引物 <400〉 5CCCTGCTGCT GC<210> 6 <211〉 13 <212> DNA <213>人工序列<220><223>引物 <400> 6GGGGCAGAAG GAA〈210〉 7 〈211〉 14 <212> DNA 〈213〉人工序列<220〉<223>引物 <400〉 7GGAGCACTCA GAGC<210> 8<211> 15<212> DNA <213>人工序列〈220><223>引物200710037167. 5■> 8GCCTTGCACT CGCTC<210> 9 <211〉 19 <212〉鹏 <213>人工序列<220〉<223〉引物 <400> 9GGACCTGAGC ACTTTTATG<210> 10 <211> 20 <212〉 DNA <213>人工序列<220〉<223〉引物 <400> 10TTGGACTATA GTAGACAACA〈210> 11 <211> 13 <212> DNA <213>人工序列<220〉<223〉探针 <400> 11CTGGGaGTAA AAT〈210〉 12<211> 12<212〉 DNA <213>人工序列<220〉〈223〉探针 <400〉 12CTGGGaGTAA AA200710037167. 5说明书第8/9页<210> 13 <211> 13 <212>腿 〈213>人工序列<220〉<223>探针 〈400> 13AGAAGcACAT GAC 13<210> 14 <211> 14 〈212〉 DNA <213>人工序列<220><223>探针 <400> 14AGAAGtACAT GACC 14<210> 15 <211> 12 <212〉 DNA <213>人工序列<220>〈223 >探针 〈德15AgCCCCCAGA AC 12<210> 16 <211> 13 <212> DNA <213>人工序列〈220〉<223>探针 <400> 16GAtCCCCCAG AAC 13 〈210> 17〈211〉 11 <212> DNA <213〉人工序列<220〉〈223〉探针 <400> 17AGAAGcGGCG G U<210> 〈211〉 <212> 〈213>18 11 腿人工序列<220〉<223>探针 <400〉 18AGAAGgGGCG G 11<210> 19 <211> 13 <212>腿 <213〉人工序列<220>〈223>探针 〈400〉 19CgATCCTGGG AGA 13<210> <211〉 <212> <213>20 14 DNA人工序列<220><223〉探针 〈400〉 20CaATCCTGGG AGAT 1权利要求
1. 一种检测个体抗氧化遗传易感性的试剂盒，其特征在于包括同时检测过氧化氢酶基因上rs769214号SNP位点、还原型辅酶叶绿醇基因上rs4673号SNP位点、内皮型一氧化氮合成酶基因上rs1799983号SNP位点、胞外过氧化物岐化酶基因上rs1799895号SNP位点、对氧磷酯酶1基因上rs662号SNP位点的特异性引物对及特异性荧光探针对、Taq酶、dNTP混合液、MgCl2溶液、荧光定量PCR反应缓冲液、去离子水。
2. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的特异性引物对是指针对过氧化氢酶基因上 rs769214号SNP位点、还原型辅酶叶绿醇基因上rs4673号SNP位点、内皮型一氧化氮合成酶基因上 rsl799983号SNP位点、胞外过氧化物岐化酶基因上rsl799895号SNP位点、对氧磷酯酶1基因上rs662 号SNP位点而设计，能特异性扩增出包含这5个SNPs位点的DNA片段的引物对。
3. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的特异性荧光探针对是指针对过氧化氢酶基因 上rs769214号SNP位点、还原型辅酶叶绿醇基因上rs4673号SNP位点、内皮型 一氧化氮合成酶基因上 rsl799983号SNP位点、胞外过氧化物岐化酶基因上rsl799895号SNP位点、对氧磷酯酶1基丙上rs662 号SNP位点而设计，能通过荧光定量PCR技术特异性检测出这五个SNPs位点基因型的T叫腿n探针对。
4. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在T:所含的特异性引物对选自具有SEQIDNO: l和2、 3 和4、 5和6、 7和8、 9和IO所示序列的引物对。
5. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所含的特异性荧光探针选Q具有SEQ ID N0: 11和 12、 13和14、 15和16、 17和18、 19和20所示序列的Taqman探针对。
6. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于试剂盒的组分和含量包括5^1 IOX荧光定量PCR反 应缓冲液、0. 5nl 25mM dNTP混合液、3^1 25mMMgCl2溶液、0. 125pl (5units/nl) T叫DNA聚合嗨、20nM 特异性引物对每条引物各0.225nl、 1(^M特异性荧光探针对每条探针各0.25fil、去离子水26. 625"。本 试剂盒供一人份检测应用，试剂盒的保存温度为-20°C 。
全文摘要
本发明公开了一种检测个体抗氧化遗传易感性的试剂盒。该试剂盒包括同时检测过氧化氢酶基因(CAT)上rs769214号SNP位点、还原型辅酶叶绿醇基因(CYBA)上rs4673号SNP位点、内皮型一氧化氮合成酶基因(NOS3)上rs1799983号SNP位点、胞外过氧化物岐化酶基因(SOD3)上rs1799895号SNP位点、对氧磷酯酶1基因(PON1)上rs662号SNP位点的特异性引物对及特异性荧光探针对、用于荧光定量PCR检测的常规组件等。本发明的试剂盒通过同时检测与抗氧化能力密切相关的CAT、CYBA、NOS3、SOD3、PON1的单核苷酸多态性位点基因型来评估个体抗氧化遗传易感性。
文档编号G01N21/00GK101241066SQ20071003716
公开日2008年8月13日 申请日期2007年2月6日 优先权日2007年2月6日
发明者冯哲民, 邹祖烨 申请人:上海主健生物工程有限公司