专利名称：四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法
技术领域：
本发明涉及一种化学分析方法，特别是涉及一种抗溃疡药物的手 性分离分析方法。
技术背景毛细管电泳技术为上世纪80年代兴起的一种分离分析技术，具备以 下特点(1)毛细管柱一般不需要填充或复杂的处理，价格相对较低； (2)运行环境是在水介质缓冲溶液中，不造成二次污染；(3)样品消耗 量很少，每次进样量仅为纳升级；(4)在电场的驱动下运行，缓冲溶液 的消耗约为液相色谱中溶剂消耗的百万分之一；(5)分离柱效高；(6) 应用范围广，而且对样品的预处理要求较低。四个抗溃疡药物为质子泵 抑制剂(PPIs)包括泰妥拉唑，泮托拉唑，兰索拉唑和雷贝拉唑。PPIs 主要用于治疗十二指肠溃疡、胃溃疡、反流性食管炎等与胃酸分泌相关 的疾病。PPIs具有相似的分子结构，分子中具有一个手性硫原子中心， 存在R， S两个对映异构体，临床以外消旋体的形式使用。目前，此类药物中第一代PPI奥美拉唑左旋体-S-奥美拉唑(商品名耐信)在美国上市，成为世界上销量最大的抗渍疡药。对此类抗溃疡药物单一对映体的 研究开发已成为热点。由于两个对映体具有相似的理化性质，常规的方 法很难分离，目前对此类药物手性分离分析方法主要采用手性固定相高 效液相色谱法。发明内容本发明的目的在于提供一种采用毛细管电泳法(CE)，以环糊精衍 生物为手性选择剂，分离分析四个抗溃疡药物对映体。用于此类抗溃疡 手性药物的体内分析和产品光学纯度检测，为此类手性药品的研究开发 提供技术保障。本发明的目的是通过以下技术方案实现的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，包括设置电泳分离 条件、样品操作、洗柱和进样四个步骤a. 电泳分离条件为泮托拉唑，兰索拉唑、雷贝拉唑对映和泰妥拉 唑对映体分离背景电解质、分离电压、紫外检测波长；b. 样品操作背景电解质和样品溶液过滤，并超声脱气；c. 洗柱方式毛细管柱依次用O. 1M NaOH冲洗，二次蒸馏水冲洗， 背景电解质冲洗后走基线，待基线平稳后进样；d. 进样方式采用虹吸进样，正极进样负极检测。所述的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，其所述的 电泳分离条件泮托拉唑，兰索拉唑和雷贝拉唑对映。背景电解质50mM硼砂含30g/L的磺丁基-3 -CD用NaH2P(UI pH 至7.0;分离电压15kv;紫外检测波长290 nm。其所述的电泳分离条件泰妥拉唑对映体背景电解质50mM硼砂含50g/L磺丁基-P-CD用NaH2PCU)§ pH至6.6;分离电压10kv;检测波长306腿。所述的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，其所述的样品操作背景电解质和样品溶液均经0.45 um微孔滤膜过滤，并超 声脱气，样品用O. 1M NaOH溶解，4 。C冰箱保存备用。所述的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，其所述的 洗柱方式毛细管总长55cm,有效长度38 cm，内径50 y m;毛细管 柱依次用0. 1M NaOH冲洗5 min， 二次蒸馏水冲洗5 min，背景电解质 冲洗3min后走基线，待基线平稳后约2min左右进样。所述的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，其所述的进 样方式采用虹吸进样，进样高度差10cm，进样时间10s，正极进样负 极检测。本发明的优点与效果是本发明采用毛细管电泳法(CE)简单、环保、成本低，可以用于此 类抗溃疡手性药物的体内分析和产品光学纯度检测，为此类手性药品的 研究开发提供技术保障。
图l是本发明CE分离泮托拉唑对映体色谱图； 图2是本发明CE分离兰索拉唑对映体色谱图； 图3是本发明CE分离雷贝拉唑对映体色谱图； 图4是本发明CE分离泰妥拉唑对映体色谱图。
具体实施方式
下面参照附图对本发明进行详细说明。CE在手性药物分离中已得到广泛应用。图1为CE分离泮托拉唑对映体色谱图，两对映体分析时间在23分钟内，分离度为1.7。图2为CE分离兰索拉唑对映体色谱图，两对映体分析时间在17分 钟内，分离度为3.3。图3为CE分离雷贝拉唑对映体色谱图，两对映体分析时间在14分 钟内，分离度为1.6。图4为CE分离泰妥拉唑对映体色谱图，两对映体分析时间在14分 钟内，分离度为1.6。 实施例一1. 精密称取泮托拉唑，兰索拉唑和雷贝拉唑消旋体各10mg，分别 置10ml容量瓶中，用0. 1MNa0H定容至刻度，制备成lmg/mL的样品储 备液，4 r冰箱保存。从储备液中精密量取lml至10ml容量瓶中，用 0. 1M NaOH定容至刻度，配置成三个浓度为100 u g/mL供试液，经0. 45 ix m微孔滤膜过滤备用。2. 配制50mM硼砂含30g/L的磺丁基-P -环糊精，用NaH2P(Uj| pH 至7.0经0.45 um微孔滤膜过滤，并超声脱气备用。毛细管柱依次用 0. 1M NaOH冲洗5 min， 二次蒸馏水冲洗5 min，背景电解质冲洗3 min 后走基线，待基线平稳后(大约2min左右)采用虹吸进样，进样高度 差10cm，进样时间10s，记录电泳图。进样间用背景缓冲液冲洗3 min 及走基线2min后进行下一个样品进样。分离电压15kv，紫外检测波 长290 nm。分离电泳图见图1_图3，泮托拉唑，兰索拉唑和雷贝拉 唑对映体得到分离度大于1. 5的基线分离。实施例二1. 精密称取10mg泰妥拉唑消旋体，置10ml容量瓶中，用0. 1MNa0H 定容至刻度，制备成lmg/mL的储备液，4 "C冰箱保存。从储备液中精 密量取lml至10ml容量瓶中，用0. 1M NaOH定容至刻度，配置成浓度 为100ug/mL供试液，经0.45 um微孔滤膜过滤备用。2. 配制50 mM硼砂含50g/L磺丁基-P -环糊精用NaH2P(UJi pH至 6.6;经0.45 um微孔滤膜过滤，并超声脱气备用。毛细管柱依次用 0. 1M NaOH冲洗5 min， 二次蒸馏水冲洗5 min，背景电解质冲洗3 min 后走基线，待基线平稳后(大约2min左右)进样。采用虹吸进样，进 样高度差10cm，进样时间10s，记录电泳图。分离电压10kv，紫外检 测波长306 nm。分离电泳图见图4，泰妥拉唑对映体得到分离度大于 1.5的基线分离。
权利要求
1.四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，包括设置电泳分离条件、样品操作、洗柱和进样四个步骤，其特征在于a.电泳分离条件为泮托拉唑，兰索拉唑、雷贝拉唑对映和泰妥拉唑对映体分离背景电解质、分离电压、紫外检测波长；b.样品操作背景电解质和样品溶液过滤，并超声脱气；c.洗柱方式毛细管柱依次用0.1M NaOH冲洗，二次蒸馏水冲洗，背景电解质冲洗后走基线，待基线平稳后进样；d.进样方式采用虹吸进样，正极进样负极检测。
2. 根据权利要求1所述的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，其特征在于所述的电泳分离条件泮托拉唑，兰索拉唑和 雷贝拉唑对映背景电解质50mM硼砂含30 g/L的磺丁基-P -环糊精用NaH2P04 调pH至7.0;分离电压15kv;紫外检测波长290 nm;所述的电泳分离条件泰妥拉唑对映体背景电解质50mM硼砂含50 g/L磺丁基-3-环糊精用NaH2P04 调pH至6.6;分离电压10kv;检测波长306腦。
3. 根据权利要求1所述的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，其特征在于所述的样品操作背景电解质和样品溶液均经0.45 "m微孔滤膜过滤，并超声脱气，样品用O. 1M NaOH溶解， 4 "C冰箱保存备用。
4.根据权利要求1所述的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离 分析方法，其特征在于所述的洗柱方式毛细管总长55cm，有效长 度38 cm，内径50 um;毛细管柱依次用0. 1M NaOH冲洗5 min， 二次蒸馏水冲洗5 min，背景电解质冲洗3 min后走基线，待基线 平稳后约2min左右进样。
5.根据权利要求1所述的四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离 分析方法，其特征在于所述的进样方式采用虹吸进样，进样高度差 10cm，进样时间10s，正极进样负极检测。
全文摘要
四个抗溃疡药物毛细管电泳手性分离分析方法，涉及一种化学分析方法，包括设置电泳分离条件、样品操作、洗柱和进样四个步骤，电泳分离条件为泮托拉唑，兰索拉唑、雷贝拉唑对映和泰妥拉唑对映体分离背景电解质、分离电压、紫外检测波长；样品操作背景电解质和样品溶液过滤，并超声脱气；洗柱方式毛细管柱依次用0.1M NaOH冲洗，二次蒸馏水冲洗，背景电解质冲洗后走基线，待基线平稳后进样；进样方式采用虹吸进样，正极进样负极检测。本发明用于此类抗溃疡手性药物的体内分析和产品光学纯度检测，为此类手性药品的研究开发提供技术保障。
文档编号G01N27/447GK101334376SQ20081001262
公开日2008年12月31日 申请日期2008年8月5日 优先权日2008年8月5日
发明者瑾 关, 李发美, 爽 石, 峰 阎 申请人:沈阳化工学院