专利名称：一种胃液提取物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种胃液提取物及其制备方法。
背景技术：
胃癌是人类常见的恶性肿瘤之一，对其要早发现、早治疗，才有可能减小其对 患者的伤害。目前常用的胃癌诊断方法有胃镜、钡餐造影等。但是这些方法操作比 较复杂，费用昂贵，敏感性和特异性有限，还会给患者带来痛苦。因此，亟待需要 一种快速诊断胃癌的方法。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种胃液提取物。
本发明所提供的胃液提取物，它的有效组分包括结构与色氨酸类似的、相对分
子质量为216，具有吲哚结构的物质。
其中，所述胃液提取物可以是将离体的胃液进行高效液相色谱分离得到的； 所述高效液相色谱分离包括如下步骤以20%(体积百分含量)甲醇和水的混
合溶液作为流动相进行洗脱，混合溶液的流速为lml/min，收集保留时间为10. 5
11.5min的洗脱峰，即得胃液提取物；
所述高效液相色谱分离中所用的色谱柱的填充介质可以为0DS-3，孔径5um。 所述高效液相色谱分离中在进行分离前还可包括将所述离体的胃液进行离心
浓縮的步骤。
本发明的另一个目的是提供一种制备胃液提取物的方法。
本发明所提供的制备胃液提取物的方法，是将离体的胃液进行高效液相色谱分 离得到胃液提取物；
所述高效液相色谱分离包括如下步骤以20%(体积百分含量)甲醇和水的混 合溶液作为流动相进行洗脱，混合溶被的流速为lml/min，收集保留时间为10. 5 11.5min的洗脱峰，即得胃液提取物；
其中，所用的色谱柱的填充介质可为0DS-3，孔径5um。
所述高效液相色谱分离中在进行分离前还可包括将所述离体的胃液进行离心 浓縮的步骤。本发明的胃液提取物可用来辅助诊断胃癌，具体可以是通过高效液相检测提取 物的峰面积值来判断是否患有胃癌，实验证明，结果可靠、安全、快速；另外，本 发明制备胃液提取物的方法简单、省时省力。因此，本发明的胃液提取物及其制备 方法在胃癌诊断领域中具有广阔的应用前景。
图1为胃癌患者和正常人的胃液提取物的高效液相色谱图。
具体实施例方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。 实施例l、胃液提取物的制备及应用 一、制备方法
1、 取离体的人胃液20ml， 3000 rpm离心5min，取上清液10ml，低温离心浓 縮至500ul。
2、 将上清液进行高效液相分离-
色谱柱为InertsilC-18(GL Sciences公司，JAPAN)，柱长250陽，孔径4. 6mm， 填充介质为ODS-3，孔径5um;柱温25"C; 自动进样器进样，进样量100ul;
梯度洗脱液为流动相的组成为20%的甲醇(A液)-水溶液(B液)；流速
为1 ml/min;梯度洗脱时间为lh;
检测器为荧光检测器，检测激发波长288nm，发射波长为330nm; 收集保留时间为10. 5 11. 5min的洗脱峰，得到胃液提取物，并记录峰面积值。
梯度洗脱步骤如下
时间(分) A(%) B(%)
0 10 35 65
11 20 50 50
21 30 65 35
31 40 80 20
41 50 95 5
51 60 100 03、 比较正常人和胃癌患者的胃液提取物的峰面积值
在如上色谱条件下，取20例正常人的离体胃液和20例胃癌患者的离体胃液进 行提取。
结果，正常人的胃液提取物的峰面积值为328553土119425，胃癌患者的胃液提 取物的峰面积值为2225455±1824224 (图l， A为胃癌患者，B为正常人)。
4、 胃液提取物中组分的鉴定
将上述提取物进行质谱鉴定MALDI-T0F测定质荷比(m/z)。
结果测得，胃液提取物的平均相对分子质量为216，包含色氨酸的吲哚环。
二、胃液提取物的应用
另取20例已知胃癌患者的胃液，按照上述实验一中所述方法进行提取，再进 行峰面积值记录。结果表明，其峰面积值也均为2225455士1824224。 上述结果表明，本发明的胃液提取物可用于辅助诊断胃癌。
权利要求
1、一种胃液提取物，它的有效组分包括相对分子质量为216且具有吲哚结构的物质。
2、 根据权利要求l所述的胃液提取物，其特征在于所述胃液提取物是将离体的胃液进行高效液相色谱分离得到的；所述高效液相色谱分离包括如下步骤以20%(体积百分含量)甲醇和水的混合溶液作为流动相进行洗脱，混合溶液的流速为lral/min，收集保留时间为10. 5 11.5min的洗脱峰，即得胃液提取物。
3、 根据权利要求2所述的胃液提取物，其特征在于所述高效液相色谱分离中所用的色谱柱的填充介质为0DS-3，孔径5um。
4、 根据权利要求2或3所述的胃液提取物，其特征在于所述高效液相色谱分离中在进行分离前包括将所述离体的胃液进行离心浓縮的步骤。
5、 一种制备胃液提取物的方法，是将离体的胃液进行高效液相色谱分离得到胃液提取物；所述高效液相色谱分离包括如下步骤以20%(体积百分含量)甲醇和水的混合溶液作为流动相进行洗脱，混合溶液的流速为lml/min，收集保留时间为10. 5 11.5min的洗脱峰，即得胃液提取物。
6、 根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述高效液相色谱分离中所用的色谱柱的填充介质为0DS-3，孔径5rnn。
7、 根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述高效液相色谱分离中在进行分离前包括将所述离体的胃液进行离心浓縮的步骤。
全文摘要
本发明公开了一种胃液提取物及其制备方法。该胃液提取物的有效组分包括相对分子质量为216且具有吲哚结构的物质。本发明的胃液提取物可用来辅助诊断胃癌，具体可以是通过高效液相检测提取物的峰面积值来判断是否患有胃癌，实验证明，结果可靠、安全、快速；另外，本发明制备胃液提取物的方法简单、省时省力。因此，本发明的胃液提取物及其制备方法在胃癌诊断领域中具有广阔的应用前景。
文档编号G01N30/06GK101498696SQ200910078859
公开日2009年8月5日 申请日期2009年3月4日 优先权日2009年3月4日
发明者周丽雅, 渊 李, 林三仁 申请人:北京大学第三医院