专利名称：降压避风片的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，涉及中药的检测方法，尤其是一种降压避风片的质量 控制方法。
背景技术：
降压避风片由黄芩、盐酸甲基丙炔苄胺、槐角、氢氯噻嗪、落花生枝叶组成，制备方 法以上五味，盐酸甲基丙炔苄胺、氢氯噻嗪和黄芩138. 3g分别粉碎成细粉，过筛备用；其 余黄芩提取制成黄芩素，干燥，粉碎成细粉，备用。落花生枝叶、槐角用水提取两次，第一次2 小时，第二次1小时，合并水提取液，滤过，溶液浓缩至适量。将浓缩液继续浓缩成稠膏，加 入黄芩细粉及辅料，混勻，干燥，粉碎成细粉，加入黄芩素、盐酸甲基丙炔苄胺、氢氯噻嗪细 粉，制成颗粒，干燥；或将浓缩液喷雾干燥成干膏粉，加入黄芩细粉、黄芩素、盐酸甲基丙炔 苄胺、氢氯噻嗪细粉及辅料适量，混勻，制成颗粒，包衣，即得。目前国际上虽然尚无植物类中药的国际标准，但是美国、欧盟、我国及传统出口中 药的东南亚地区均有提高中药标准的趋势，在此情况下，需要提出适合我国产品质量的标 准以适应国际标准，我国有数千年的中药使用历史，世界各国在制订相应的植物药产品质 量标准中多参考我国的中药标准，所以完善、提高中药的质量标准更已经迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物 成分的降压避风片的质量控制方法，本方法具有检测手段简单、检测结果准确的特点。本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种降压避风片的质量控制方法，其特征在于其方法的步骤是(1)薄层色谱法鉴别降压避风片中是否含有黄芩成分；(2)薄层色谱法鉴别降压避风片中是否含有槐角成分；(3)高效液相色谱法检测降压避风片中黄芩的含量；(4)高效液相色谱法检测降压避风片中盐酸甲基丙炔苄胺含量；(5)高效液相色谱法检测降压避风片中氢氯噻嗪含量。而且，所述黄芩的薄层色谱鉴别的方法为①供试品溶液的制备取降压避风片10片，去包衣，研细，取lg，加甲醇20ml，超声 处理20分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加水IOml溶解，加甲酸3滴，离心，弃上清液，沉淀加甲 醇2ml溶解作为供试品溶液；②对照品溶液的制备另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为 对照品溶液；③薄层色谱条件及结果薄层色谱试验，吸取上述三种溶液各5 μ 1，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇甲酸=4 :3:1: 2为展开剂，展 开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液并在日光下检视，检视供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上是否显相同颜色的斑点，进而确定供试样品中是否含有黄芩成分。而且，所述槐角的薄层色谱鉴别的方法为①供试品溶液的制备取本品10片，去包衣，研细，取lg，加甲醇20ml，超声处理 20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml溶解，加入甲酸3滴，离心10分钟，倾去上清液，沉 淀加甲醇2ml溶解作为供试品溶液；②对照品溶液的制备另取芦丁对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对 照品溶液；③薄层色谱条件及结果薄层色谱试验，吸取三种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以乙酸乙酯甲酸甲醇水=6 0.3 2 1为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以10%三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，检视供试品色谱中在与对照品色 谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，进而确定供试样品中是否含有槐角成分。而且，所述高效液相色谱法测定黄芩的含量的方法为①色谱条件色谱柱:YMC公司ODS-A (4. 6mmX 150mm, 5 μ m)；流动相甲醇水 磷酸=45 55 0.2 ；检测波长:280nm ；流速1. Oml/min ；柱温:40°C ；②对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加70%乙醇制成每Iml含 0. 3mg的溶液作为储备液，摇勻，即得；③供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，研细，取50mg，精密称定，精密加入 70%乙醇25ml，称定重量，密塞，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失 的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；④结果与分析分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入高效液相 色谱仪，测定，计算，即得，本品每片含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于5. Omg0而且，所述高效液相色谱法测定盐酸甲基丙炔苄胺的含量的方法为①色谱及检测条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0. 05mol/L磷酸 二氢钾=13 87为流动相，其中0.05mol/L磷酸二氢钾用10%磷酸调pH值3. O ；检测波 长为210nm ；理论塔板数按盐酸甲基丙炔苄胺峰计算不低于2000 ；②对照品溶液的制备取盐酸甲基丙炔苄胺对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 Iml含0. Img的溶液，即得；③供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取400mg，精密称 定，精密加入甲醇25ml，称定重量，密塞，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足损 失量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；④结果分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测 定，即得，本品每片含盐酸甲基丙炔苄胺C11H13N .HCl为标示量的85.0% 115.0%，本品每 片含盐酸甲基丙炔苄胺为标示量的85.0% 115.0%。而且，所述氢氯噻嗪的含量测定的方法为①色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相乙腈磷酸二氢钠溶 液=15 85 ；检测波长为；柱温35°C ；流速1. Oml/min，理论板数按氢氯噻嗪峰计 算不低于3000 ；②对照品溶液的制备取氢氯噻嗪对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 SOug的溶液，即得
③供试品溶液的制备取本品适量，除去包衣，研细，取0.4g，精密称定，精密加入 甲醇50ml，称定重量，超声处理60分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，即得；④检测结果精密吸取对照品、供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即 得，本品含氢氯噻嗪为标示量的85. 0% -115. 0%。本发明的优点和积极效果是本发明在原标准基础上，增加了黄芩、槐角的薄层鉴别方法和以黄芩苷为对照品， 制定了黄芩的含量测定方法，增加了盐酸甲基丙炔苄胺的含量测定，由于在长期的检验中 发现氢氯噻嗪的检测方法不理想，因此对原有的氢氯噻嗪含量测定方法进行了修改，修订 后的质量标准，提高了药品的质量控制。
图1为本发明黄芩薄层色谱鉴别方法A的色谱图，从左至右依次为1、0601846，2、 0601848，3、0703087，4、黄芩苷对照品，5、阴性对照溶液；图2为本发明黄芩薄层色谱鉴别方法B色谱图，从左至右依次为1、0601846，2、 0601848，3、0703087，4、黄芩苷对照品，5、阴性对照液；图3为本发明槐角薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次为1、0601846，2、 0601848，3、0703087，4、芦丁对照品，5、阴性对照液；图4为本发明黄芩苷对照品色谱图；图5为本发明降压避风片在黄芩苷中供试品色谱图；图6为本发明黄芩阴性对照色谱图；图7为本发明盐酸甲基丙炔苄胺对照品色谱图；图8为本发明降压避风片盐酸甲基丙炔苄胺检测中供试品色谱图；图9为本发明盐酸甲基丙炔苄胺阴性对照色谱10为本发明氢氯噻嗪对照品溶液色谱图；图11为本发明氢氯噻嗪检测中供试样品溶液色谱图；图12为本发明氢氯噻嗪阴性对照溶液色谱图。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的， 不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。一种降压避风片的质量控制方法，其方法的步骤是(1)黄芩的薄层色谱鉴别①供试品溶液的制备取降压避风片10片，去包衣，研细，取lg，加甲醇20ml，超声 处理20分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加水IOml溶解，加甲酸3滴，离心，弃上清液，沉淀加甲 醇2ml溶解作为供试品溶液；②阴性对照溶液的制备按处方配比，取除去黄芩的其他味药材，按原药制备工艺 制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液；③对照品溶液的制备另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为 对照品溶液；
④薄层色谱条件及结果照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B) 试验，吸取上述三种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以方法A 乙酸乙 酯甲酸甲醇水=6 0.3 2 1和方法B:三氯甲烷乙酸乙酯甲醇甲酸= 4:3:1: 2为展开剂，展开，取出，晾干，A喷以10%三氯化铝乙醇溶液，并在紫外光灯 365nm下检视，B喷以2%三氯化铁乙醇溶液并在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色 谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照液则无此斑点，由于三氯化铁乙醇溶液显色效 果较好，所以选择方法B三氯甲烷乙酸乙酯甲醇甲酸=4 :3:1: 2为展开剂，三 氯化铁乙醇溶液作为显色剂，结果见图1、图2。(2)槐角的薄层色谱鉴别①供试品溶液的制备取本品10片，去包衣，研细，取lg，加甲醇20ml，超声处理 20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml溶解，加入甲酸3滴，离心10分钟，倾去上清液，沉 淀加甲醇2ml溶解作为供试品溶液；②阴性对照溶液的制备按处方配比，取除去槐角的其他味药材，按原药制备工艺 制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液；③对照品溶液的制备另取芦丁对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对 照品溶液；④薄层色谱条件及结果照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试 验，吸取三种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯甲酸甲醇水= 6 0. 3 2 1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外 光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对 照液则无此斑点，结果见图3。(3)高效液相色谱法测定黄芩的含量高效液相色谱仪SP8800 ；数据处理分析之星色谱工作站；紫外FO⑶S检测器。黄芩苷(批号110715-200514)购自中国药品生物制品检定所；甲醇、磷酸为分 析纯，水为纯净水。色谱柱YMC公司ODS-A (4. 6mmX 150mm, 5 μ m)；流动相甲醇水磷酸= 45 55 0. 2;检测波长280nm;流速1.0ml/min;柱温40°C。①对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加70%乙醇制成每Iml含 0. 3mg的溶液作为储备液，摇勻；精密量取1ml，置5ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇勻，即 得(每Iml含黄芩苷0. 06mg)，入液相检测，如图4所示；②供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约50mg，精密称 定，置60ml锥形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，称定重量，密塞，超声处理30分钟，放冷，称 定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇勻，取续滤液作为供试品溶液，入液相检测，如图5 所示；③空白对照溶液的制备按处方配比，取除去黄芩的其他味药材，按制法项下的 工艺制成样品，再按步骤②供试品溶液制备方法制成空白对照溶液，入液相检测，如图6所 示；④结果与分析分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入高效液相 色谱仪，测定，计算，即得，本品每片含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于5.0mg。
(4)高效液相色谱法测定盐酸甲基丙炔苄胺的含量①色谱及检测条件色谱柱YMC公司0DS-A(4. 6mmX 250mm, 5 μ m)；流动相甲 醇0.05mol/L磷酸二氢钾(10%磷酸调PH值3.0) =13 87 ；检测波长210nm ；流速 1. Oml/min ；柱温40°C ；②对照品溶液的制备精密称取盐酸甲基丙炔苄胺对照品适量，加甲醇制成每 Iml含0. 2032mg的溶液作为对照品储备液，摇勻；精密量取2. 5ml，置5ml量瓶中，加甲醇至 刻度，摇勻，即得(每Iml含盐酸甲基丙炔苄胺0. 1016mg)；③供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约400mg，精密 称定，精密加入甲醇25ml，称定重量，密塞，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足 损失量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；④阴性对照溶液的制备按处方配比，取除去盐酸甲基丙炔苄胺的其他味药材，按 制法项下的工艺制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液，；⑤结果分别精密吸取对照品溶液、阴性对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入 液相色谱仪，测定，即得，检测结果分如图7，图8，图9所示即得，本品每片含盐酸甲基丙 炔苄胺(C11H13N^HCl)应为标示量的85.0% 115.0%。，本品每片含盐酸甲基丙炔苄胺 (C11H13N · HCl)应为标示量的 85. 0% 115. 0% (1. 42 1. 92mg/ 片)。(5)氢氯噻嗪的含量测定①色谱条件=YMC-PackODS-A C18 柱 Q50X4. 6mml. D.，5 μ m)；流动相乙 腈0. 05mol/L磷酸二氢钠溶液(磷酸调节pH = 3. 0) = 15 85 ；检测波长为2沈歷；柱 温35°C ；流速1. Oml/min，理论板数按氢氯噻嗪峰计算应不低于3000 ；②对照品溶液的制备取氢氯噻嗪对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 SOug的溶液，即得③供试品溶液的制备取本品适量，除去包衣，研细，取0.4g，精密称定，精密加入 甲醇50ml，称定重量，超声处理60分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，即得；④阴性对照溶液的制备按处方配比取除去氢氯噻嗪的各味药材，按原药制备工 艺制得样品，再按供试品溶液制备方法，制得阴性对照溶液；⑤检测结果精密吸取对照品、供试品溶液，阴性对照品溶液各10μ 1，注入液相 色谱仪，测定，检测结果分如图10，图11，图12所示即得，本品含氢氯噻嗪应为标示量的 85. 0% -115. 0%。
权利要求
1.一种降压避风片的质量控制方法，其特征在于其方法的步骤是(1)薄层色谱法鉴别降压避风片中是否含有黄芩成分；(2)薄层色谱法鉴别降压避风片中是否含有槐角成分；(3)高效液相色谱法检测降压避风片中黄芩的含量；(4)高效液相色谱法检测降压避风片中盐酸甲基丙炔苄胺含量；(5)高效液相色谱法检测降压避风片中氢氯噻嗪含量。
2.根据权利要求1所述的降压避风片的质量控制方法，起特征在于所述黄芩的薄层 色谱鉴别的方法为①供试品溶液的制备取降压避风片10片，去包衣，研细，取lg，加甲醇20ml，超声处理 20分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加水IOml溶解，加甲酸3滴，离心，弃上清液，沉淀加甲醇aiil 溶解作为供试品溶液；②对照品溶液的制备另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照 品溶液；③薄层色谱条件及结果薄层色谱试验，吸取上述三种溶液各5μ 1，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇甲酸=4 :3:1: 2为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液并在日光下检视，检视供试品色谱中在与对照品色谱 相应位置上是否显相同颜色的斑点，进而确定供试样品中是否含有黄芩成分。
3.根据权利要求1所述的降压避风片的质量控制方法，起特征在于所述槐角的薄层 色谱鉴别的方法为①供试品溶液的制备取本品10片，去包衣，研细，取lg，加甲醇20ml，超声处理20分 钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml溶解，加入甲酸3滴，离心10分钟，倾去上清液，沉淀加 甲醇2ml溶解作为供试品溶液；②对照品溶液的制备另取芦丁对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品 溶液；③薄层色谱条件及结果薄层色谱试验，吸取三种溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以乙酸乙酯甲酸甲醇水=6 0.3 2 1为展开剂，展开，取出，晾干，喷 以10%三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，检视供试品色谱中在与对照品色谱 相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，进而确定供试样品中是否含有槐角成分。
4.根据权利要求1所述的降压避风片的质量控制方法，起特征在于所述高效液相色 谱法测定黄芩的含量的方法为①色谱条件色谱柱YMC公司ODS-A(4. 6mmX 150mm, 5 μ m)；流动相甲醇水磷酸 =45 55 0. 2 ；检测波长:280nm ；流速1. Oml/min ；柱温:40°C ；②对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加70%乙醇制成每Iml含0.3mg 的溶液作为储备液，摇勻，即得；③供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，研细，取50mg，精密称定，精密加入70% 乙醇25ml，称定重量，密塞，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重 量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；④结果与分析分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入高效液相色谱 仪，测定，计算，即得，本品每片含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于5. Omg0
5.根据权利要求1所述的降压避风片的质量控制方法，起特征在于所述高效液相色 谱法测定盐酸甲基丙炔苄胺的含量的方法为①色谱及检测条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢 钾=13 87为流动相，其中0.05mol/L磷酸二氢钾用10%磷酸调pH值3.0;检测波长为 210nm ；理论塔板数按盐酸甲基丙炔苄胺峰计算不低于2000 ；②对照品溶液的制备取盐酸甲基丙炔苄胺对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml 含0. Img的溶液，即得；③供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取400mg，精密称定，精 密加入甲醇25ml，称定重量，密塞，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足损失量， 摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；④结果分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即 得，本品每片含盐酸甲基丙炔苄胺C11H13N · HCl为标示量的85. 0% 115. 0%，本品每片含 盐酸甲基丙炔苄胺为标示量的85.0% 115.0%。
6.根据权利要求1所述的降压避风片的质量控制方法，起特征在于所述氢氯噻嗪的 含量测定的方法为①色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相乙腈磷酸二氢钠溶液= 15 85 ；检测波长为；柱温35°C ；流速1. Oml/min，理论板数按氢氯噻嗪峰计算不 低于3000 ；②对照品溶液的制备取氢氯噻嗪对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含SOug的 溶液，即得③供试品溶液的制备取本品适量，除去包衣，研细，取0.4g，精密称定，精密加入甲醇 50ml，称定重量，超声处理60分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，即得；④检测结果精密吸取对照品、供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得，本 品含氢氯噻嗪为标示量的85. 0% -115. 0%。
全文摘要
本发明涉及一种降压避风片的质量控制方法，步骤是采用薄层色谱法，鉴别降压避风片处方中是否含黄芩、槐角成分，再用液相色谱法检测降压避风片处方中黄芩、盐酸甲基丙炔苄胺、氢氯噻嗪的含量。本发明在原标准基础上，增加了黄芩、槐角的薄层鉴别方法和以黄芩苷为对照品，制定了黄芩的含量测定方法，增加了盐酸甲基丙炔苄胺的含量测定，由于在长期的检验中发现氢氯噻嗪的检测方法不理想，因此对原有的氢氯噻嗪含量测定方法进行了修改，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
文档编号G01N30/90GK102100743SQ20091024482
公开日2011年6月22日 申请日期2009年12月16日 优先权日2009年12月16日
发明者孔繁娟, 李欣, 李菁, 王宏, 郭秀霞, 陈玉杰 申请人:天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂