专利名称：一种氟喹诺酮类药物通用半抗原、人工抗原、广谱单克隆抗体及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及食品安全领域，具体涉及一种氟喹诺酮类药物的通用半抗原、人工抗原和广谱单克隆抗体及其制备方法与应用。
背景技术：
第三代喹诺酮类药物是一类人工合成的具有6-氟-7-哌嗪-4-喹诺酮环基本结构的抗菌药，也称为氟喹诺酮类药物。氟喹诺酮类药物毒性低，半衰期长，抗菌谱广，抗菌活性强，广泛用于动物和人类多种感染性疾病的治疗。沙拉沙星就是氟喹诺酮类药物的典型代表。随着氟喹诺酮类药物在食品动物中的广泛应用，其在动物源性食品中的残留问题 也引起广泛的关注。氟喹诺酮类药物的残留除了其毒副作用直接危害人体健康外，更为严重的是动物源性食品中残留的药物容易诱导人类致病菌产生耐药性，从而不利于该类药物在人类疾病的治疗。因此，必须十分重视此类药物在动物源性食品中的残留问题。美国和欧盟都规定了该类药物的最高残留限量，中国农业部也颁发了氟喹诺酮类药物的最高残留限量，为阻止此类药物的滥用和残留起到了巨大的作用。目前，对动物源性产品中氟喹诺酮类药物的残留检测主要采用高效液相色谱法、液-质联用法、气相色谱法等仪器分析方法。但是仪器分析法受样品的净化、浓缩等步骤的影响较大，测定方法复杂，需要专业技术人员，耗费时间长，无法对大批次产品进行检测，而且成本较高，不适宜进行推广普及。而免疫分析法，是现在兽药残留检测的重要方法，其方便、快捷，可应用于大批量样品的筛选，宜于推广普及。免疫分析法的核心试剂是抗体。现有的文献报道大多是利用某一种氟喹诺酮类药物分子中的羧基直接与载体蛋白连接作为免疫原来制备抗体，所得抗体不能识别所有氟喹诺酮类药物。因此，提供一种广谱适用的氟喹诺酮类药物免疫分析用抗体就成为该技术领域急需解决的技术难题。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种氟喹诺酮类药物的通用半抗原。本发明的上述发明目的是通过以下技术方案达到的一种氟喹诺酮类药物的通用半抗原，其分子结构式如式I所示
权利要求
1.一种氟喹诺酮类药物通用半抗原，其分子结构式如式I所示才H
2.一种如权利要求I所述氟喹诺酮类药物通用半抗原的制备方法，包括如下步骤 (a)用沙拉沙星与2-氯乙胺在75 85°C、pH = 7. 5 8. 5条件下反应； (b)反应完全后，在55 65°C、pH= 5. 5 6. 5条件下析出结晶，得到式I结构的氟喹诺酮类药物通用半抗原。
3.一种氟喹诺酮类药物通用人工抗原，其分子结构式如式2所示
4.如权利要求3所述的氟喹诺酮类药物通用人工抗原，其特征在于，所述的载体蛋白为卵清蛋白或牛血清白蛋白。
5.如权利要求3或4所述的氟喹诺酮类药物通用人工抗原的制备方法，包括如下步骤 (a)将式I结构的半抗原溶解于N，N-二甲基甲酰胺中，搅拌溶解得A液，将载体蛋白溶解于磷酸盐缓冲溶液中，得B液； (b)将所述溶液A滴加至所述溶液B中，充分搅拌得到溶液C； (c)向溶液C中逐滴加入质量分数为25%的戊二醒水溶液,室温反应4 5小时后，4000转/分钟离心5分钟； (d)将步骤(c)所得液体置于透析袋中，在4 20°C用磷酸盐缓冲透析3 4天。
6.一种氟喹诺酮类药物的广谱单克隆抗体，是能与权利要求3或4所述的氟喹诺酮类药物通用人工抗原发生特异性免疫反应的免疫球蛋白。
7.如权利要求6所述的氟喹诺酮类药物的广谱单克隆抗体的应用，用于动物源性食品中氟喹诺酮类药物的免疫检测。
全文摘要
本发明公开了一种氟喹诺酮类药物通用半抗原、人工抗原、广谱单克隆抗体及其制备方法与应用，设计合成了一种含有氟喹诺酮类药物母核结构的通用半抗原、人工抗原，制备出了能识别多种氟喹诺酮类药物的广谱单克隆抗体。本发明的氟喹诺酮类药物通用半抗原、人工抗原以及单克隆抗体可以用于氟喹诺酮类药物的免疫分析和筛选，提高检测效率，缩短检测时间，降低检测成本。
文档编号G01N33/577GK102827076SQ20121031566
公开日2012年12月19日 申请日期2012年8月25日 优先权日2012年8月25日
发明者赵国先, 王建平, 刘彦政, 刘静, 张会彩 申请人:河北农业大学