药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒及其检测方法
【专利摘要】本发明公开了药物诱导型溶血性贫血检测的试剂盒，本发明还公开了使用该试剂盒检测的方法。当患者血浆、抗体释放液和相应的药物致敏红细胞发生阳性反应，与未致敏的红细胞发生阴性反应；或将药物添加到血浆中，血浆或抗体释放液中的药物抗体与正常红细胞产生阳性反应，而未添加药物的血浆或放散液与正常红细胞产生阴性反应。根据结果准确诊断出引起溶血性贫血的药物种类，指导临床正确选择合适的药物用于对患者的治疗。该方法具有准确性好，适用于试管法或微柱凝胶卡法检测。
【专利说明】药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒及其检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物检测领域，尤其是涉及药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒，本发明还涉及使用该试剂盒检测药物诱导型溶血性贫血的方法。
【背景技术】
[0002]随着药物品种的大量增加，尤其是抗生素类在临床的大量使用，使得药物诱导型溶血性贫血病例大量增加，由于免疫因素从而引起红细胞大量破坏，临床上出现贫血、黄疸、酱油色尿等溶血表现，轻则影响治疗效果，重则延误病情危及患者生命安全。
[0003]如何避免患者因使用药物而导致药物诱导型溶血性贫血，就必须要对患者进行药物诱导型溶血性贫血进行及时准确的检测，停止使用能使患者产生药物诱导型溶血性贫血的药物，指导临床为患者选择合适的药物，来提高治疗效果。
[0004]目前，对于药物诱导型溶血性贫血检测在临床均未得到有效开展。其原因是药物诱导型溶血性贫血检测属于免疫血液学检测范围，而免疫血液学检测仅在临床医院的输血科或血库进行，输血科或血库仅负责输血前检查的内容，均未开展药物诱导型溶血性贫血检测工作，因此对于药物诱导型溶血性贫血患者不能得到及时的检测诊断，导致患者致死率高达30%以上。
[0005]药物有时会引起对药物本身的抗体形成，形成的药物抗体可以致敏或吸附在患者红细胞上，导致患者红细胞直接抗人球蛋白试验阳性，引起患者红细胞破坏，产生免疫性溶血，患者血色素下降。结果是:1、治疗患者所使用的药物疗效被降低或抑制。2、患者因药物诱导的溶血导致贫血。
[0006]为了避免因药物引起的溶血性贫血，提高药物的治疗效果，需要对药物引起的溶血性贫血进行血清学检查，以确定是哪种药物引起的溶血性贫血，来指导临床正确选择合适的药物用于对患者的治疗。
[0007]目前检测药物诱导型溶血性贫血尚无检测试剂盒，也没有能检测免疫性溶血性贫血究竟是那种药物引起的检测试剂。本发明用于检测确认药物引起患者溶血性贫血的药物种类，指导临床正确选择合适的药物用于对患者的治疗。
【发明内容】
[0008]本发明的目的在于提供检测药物诱导型溶血性贫血的试剂盒，使用该试剂盒可以准确判断出是哪种药物引起的溶血性贫血；本发明还公开了使用该试剂盒的使用方法，该方法准确性好，适用于试管法或微柱凝胶卡法检测。
[0009]为实现上述目的，本发明可采用下述技术方案:
本发明所述的检测药物诱导型溶血性贫血的试剂盒，包括药物稀释液、抗体释放试剂和抗体筛查试剂。对于直接抗人球蛋白试验阳性的药物诱导型溶血性贫血患者，利用血清学方法确认是何种药物导致的溶血性贫血。药物诱导型溶血性贫血患者血浆或抗体释放液中的药物抗体与其相应的药物致敏的红细胞可以发生阳性反应，而与未致敏的红细胞发生阴性反应；或在药物添加到血浆或抗体释放液中条件下，血浆或抗体释放液中的药物抗体与正常红细胞产生阳性反应，而未添加药物的血浆或放散液与正常红细胞产生阴性反应。采用患者近期使用的药物制备药物致敏红细胞检测患者血浆中相应的抗体；将药物添加到血浆或放散液中，检测患者血浆、放散液中相应的抗体。确定药物诱导型溶血性贫血是哪种药物引起的溶血性贫血，来指导临床正确选择合适的药物用于对患者的治疗，并为临床选择合适的药物用于治疗提供依据。
[0010]所述药物稀释液包括巴比妥缓冲液、磷酸盐缓冲液和牛血清白蛋白溶液。
[0011]所述抗体筛查试剂为广谱抗人球蛋白试剂，即抗IgG和抗C3d。
[0012]所述药物诱导型溶血性贫血检测分别使用药物致敏红细胞和酶处理红细胞进行检测。
[0013]所述抗体释放试剂是将抗体从红细胞上解离的试剂，即放散洗脱试剂。
[0014]所述抗体释放试剂为热放散试剂、柠檬酸放散试剂、氯仿/三氯乙烯放散试剂、二甲苯放散试剂、甘氨酸-盐酸/乙二胺四乙酸二钠放散试剂中的一种或几种。
[0015]所述的酶处理红细胞为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果酶处理的红细胞中的一种或几种。
[0016]本发明试剂盒的检测方法，包括下述步骤: 第一步，选择正常人O型红细胞，患者近期使用的药物制备药物致敏红细胞；
第二步，使用抗体释放试剂将结合在红细胞膜表面的抗体释放下来，制备抗体释放
液；
第三步，使用药物致敏红细胞进行药物诱导型溶血性贫血的检测；
第四步，使用酶处理的正常人O型红细胞进行药物诱导型溶血性贫血的检测。
[0017]本发明的目的在于通过试管法或微柱凝胶卡法检测药物诱导型溶血性贫血，当结果符合表1和表2时可以确定是该药物引起的溶血性贫血。
[0018]表1使用药物致敏红细胞进行药物诱导型溶血性贫血的检测结果
【权利要求】
1.一种药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒，其特征在于:它包括药物稀释液、抗体释放试剂和抗体筛查试剂。
2.根据权利要求1所述的药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒，其特征在于:所述药物稀释液包括巴比妥缓冲液、磷酸盐缓冲液和牛血清白蛋白溶液。
3.根据权利要求1或2所述的药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒，其特征在于:所述抗体筛查试剂为广谱抗人球蛋白试剂，即抗IgG和抗C3d。
4.根据权利要求1或2所述的药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒，其特征在于:所述药物诱导型溶血性贫血检测分别使用药物致敏红细胞和酶处理红细胞进行检测。
5.根据权利要求1或2所述的药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒，其特征在于:所述抗体释放试剂是将抗体从红细胞上解离的试剂，即放散洗脱试剂。
6.根据权利要求7所述的药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒，其特征在于:所述抗体释放试剂为热放散试剂、柠檬酸放散试剂、氯仿/三氯乙烯放散试剂、二甲苯放散试剂、甘氨酸-盐酸/乙二胺四乙酸二钠放散试剂中的一种或几种。
7.根据权利要求4所述的药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒，其特征在于:所述的酶处理红细胞为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果酶处理的红细胞中的一种或几种。
8.使用权利要求1所述的药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒的检测方法，其特征在于，所述方法包括下述步骤: 第一步，选择正常人O型红细胞，患者近期使用的药物制备药物致敏红细胞； 第二步，使用抗体释放试剂将结合在红细胞膜表面的抗体释放下来，制备抗体释放液； 第三步，使用药物致敏红细胞进行药物诱导型溶血性贫血的检测； 第四步，使用酶处理的正常人O型红细胞进行药物诱导型溶血性贫血的检测。
【文档编号】G01N33/68GK103675297SQ201310674565
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年12月13日 优先权日:2013年12月13日
【发明者】周珍祯, 陈芳芳 申请人:江苏中济万泰生物医药有限公司