用于校准载脂蛋白a1和载脂蛋白b的校准物的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种载脂蛋白A1和载脂蛋白B校准物的制备方法，其技术方案要点是：1）将血清加入多阴离子化合物和二价金属离子进行预处理；2）低密度脂蛋白的提取；3）高密度脂蛋白的提取；4）将蛋白与基质血清混合制备校准物；5）校准物的定值，本发明的优势在于，简化多阴离子化合物和二价金属离子分步沉淀法提取血清中的LDL和HDL组份，并测得其ApoB和ApoA1含量，可按需要的量加到健康人混合血清中,使ApoA1和ApoB达到预期的含量，方法简便，再在上述混合血清中，加稳定剂，防混浊剂，使制备的冻干校准物，复溶后澄清，稳定性好，不存在基质效应，稀释成5个不同浓度，即可在自动分析仪上作ApoA1和ApoB测定的非线性校准。
【专利说明】用于校准载脂蛋白Al和载脂蛋白B的校准物的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种生物医药领域，具体涉及一种载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法。
【背景技术】
[0002]临床上血清载脂蛋白Al (ApoAl)和载脂蛋白B(ApoB)测定，常作为心脑血管病的风险度估计和药物治疗的疗效监察以及某些异常脂蛋白血症的诊断，目前国际和国内通用的血清ApoAl和ApoB测定试剂盒，均采用免疫比池法(Immunoturbidimetricassay, ITA)，因其快速、准确、精密并适用于各种类型的自动生化分析仪，特别适用于临床实验室作大批量标本的测定。但测定时需釆用多点(一般为5个不同浓度)作非线性校准，因此需要一个ApoAl和ApoB测定范围高端浓度的校准物，血清ApoAl的参考范围:男性为1.04-2.02g/L;女性为1.08-2.25g/L,平均为1.43g/L,在病理情况下血清ApoAl含量都是下降的，因此校准物ApoAl的值应为2.50g/L左右，血清ApoB的参考范围:男性为0.66-1.33g/L;女性为0.60-1.17g/L,平均为0.85g/L.但病理情况下血清ApoB含量都是上升的，因此校准物ApoB的值亦应在2.50g/L左右。
[0003]新鲜健康人混合血清的ApoAl和ApoB含量分别为1.43g/L和0.85g/L左右，两者均要达到2.5g/L的浓度，必需要在人混合血清中添加提纯的人血清低密度脂蛋白组份(LDL，含ApoB)和高密度脂蛋白组份(HDL，含ApoAl)，传统的提纯方法是将健康人的混合血清直接进行超速离心，将血清通过多次超速离心后进行分离提纯，之后通过将提纯后的校准物，然后将校准物质冷冻干燥，在低温下保存。
[0004]传统方法制备Apoal和Apob校准物时，直接将人血清进行超速离心，不仅离心次数多，耗时长，而且无法将血清中的其他蛋白分离，造成了资源的浪费，同时冻干后的校准物复溶后溶液易浑浊，稳定性一般，会出现一定的基质效应。
【发明内容】
[0005]针对现有技术的不足，本发明提供了一种载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，该制备方法的优点有:
1.本发明釆用简化的多阴离子化合物和二价金属离子分步沉淀法提取血清中的LDL和HDL组份(相当血清浓度的20倍)，并测得其ApoB和ApoAl含量，可按需要的量加到健康人混合血清中，使ApoAl和ApoB达到预期的含量，方法简便。
[0006]2.再在上述达到预期的含量的人混合血清中，加稳定剂，防混浊剂，使制备的冻干校准物，复溶后澄清，稳定性好，不存在基质效应，稀释成5个不同浓度，即可在自动分析仪上作ApoAl和ApoB测定的非线性校准。
[0007]为实现上述目的，本发明的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，包括如下步骤:
I)血清的处理:将血清分成两部分，一部分作为基质血清，另一部分作为用于提取低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的组分，往用于提取低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的血清中加入浓度为6%-20%的多阴离子化合物，离心、沉淀低密度脂蛋白；
2)低密度脂蛋白的提取:将沉淀的低密度脂蛋白溶解，用草酸钾沉淀过剩的多阴离子化合物，离心后取上层清液，再次用生理盐水透析；
3)高密度脂蛋白的提取:取沉淀低密度脂蛋白之后的上层液，追加I)浓度为6%-20%的多阴离子化合物和浓度为2-8mol/L的二价金属离子，沉淀其中的极低密度脂蛋白，离心，取上层液再加入相同浓度的多阴离子化合物和二价金属离子，离心，取沉淀物加入草酸钾溶液沉淀多余的多阴离子化合物和二价金属离子，离心，取上层清液用生理盐水透析；
4)基质血清的处理:在基质血清中加入高密度脂蛋白和低密度脂蛋白，调节载脂蛋白Al和载脂蛋白B的浓度，再加入柠檬酸三钠、丙氨酸和海藻糖混匀溶解。
[0008]通过采用上述方案，用多阴离子化合物和二价金属离子来对血清进行处理，能够将血清中的低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白沉淀，与血清中的高密度脂蛋白分离，便于后续Apoal和ApoB的制取，而且溶液中的多阴离子化合物可以被草酸钾沉淀，也能够避免后续反应中引入杂质影响制备，而且减少了传统方法中的超速离心的次数，大大节约了制备的时间，在基质血清当中加入柠檬酸三钠、丙氨酸和海藻糖作为添加剂，能够使得校准物复溶后澄清，稳定性好，不存在基质效应，稀释成5个不同浓度，即可在自动分析仪上作ApoAl和ApoB测定ο
[0009]本发明的进一步设置为，所述低密度脂蛋白的提取和高密度脂蛋白的提取的步骤中，草酸钾的浓度为0.5-1.3mol/L。
[0010]通过采用上述方案，将草酸钾的浓度设置为0.5-1.3mol/L能够刚好对应溶液中的多阴离子化合物的浓度，避免造成材料的浪费。
[0011]本发明的进一步设置为，所述3)步骤中，沉淀了极低密度脂蛋白后的溶液，在加入多阴离子化合物和二价金属离子之后需在4°C下静置2小时。
[0012]通过采用上述方案，在4°C静置2小时能够使溶液中形成HDL-Ca-多阴离子聚合物，避免在离心过程中HDL因离心沉淀，而导致制备的HDL的量减少。
[0013]本发明的进一步设置为，所述步骤4)中，载脂蛋白Al和载脂蛋白B调节后的最终浓度为2.5g/L。
[0014]通过采用上述方案，血清中ApoAl的范围为:男性为1.04-2.02g/L;女性为
1.08-2.25g/L,平均为1.43g/L,在病理情况下血清ApoAl含量都是下降的，因此校准物ApoAl的值应为2.50g/L左右，ApoB的范围为:男性为0.66-1.33g/L;女性为0.60-1.17g/L,平均为0.85g/L.但病理情况下血清ApoB含量都是上升的，因此校准物ApoB的值亦应在
2.50g/L左右，所以需要将载脂蛋白Al和载脂蛋白B调节后浓度至2.5g/L。
[0015]本发明的进一步设置为，所述加入的柠檬酸三钠、丙氨酸和海藻糖的质量比为柠檬酸三钠:丙氨酸:海藻糖=1:20:2。
[0016]通过采用上述方案，通过按上述配比加入柠檬酸三钠、丙氨酸和海藻糖能够使校准物溶液澄清，稳定性好，不存在基质效应。
[0017]本发明的进一步设置为，基质血清处理完成后需进行冷冻干燥，冷冻干燥后密封保存。
[0018]通过采用上述方案，将基质血清冷冻干燥，冻干后保存能够避免校准物长期保存，复溶后即可进行使用。
[0019]本发明的进一步设置为，所述血清中多阴离子化合物、二价金属离子和草酸钾残留的浓度依次分别为6%、0.3mol/L和0.03mol/L。
[0020]通过采用上述方案，通过草酸钾与多阴离子化合物和二价金属离子反应，将三者的浓度控制到多阴离子化合物6%、二价金属离子0.3mol/L和草酸钾0.03mol/L，可以避免弓I入的三种试剂对制备造成影响。
[0021]本发明的进一步设置为，所述2)和3)步骤中，提取获得的低密度脂蛋白和高密度脂蛋白均需通过免疫浊度法测量蛋白含量。
[0022]通过采用上述方案，将低密度脂蛋白和高密度脂蛋白通过免疫浊度法测定，能够使调节载脂蛋白Al和载脂蛋白B的密度时，更加的精确，便于密度的调剂。
[0023]本发明的进一步设置为，所述制备的载脂蛋白Al和载脂蛋白B需通过世界卫生组织的国际参考物载脂蛋白Al SPl-Ol和载脂蛋白B SP3-07作校准，按GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》规定的要求，用载脂蛋白Al和载脂蛋白B免疫浊度法试剂在自动生化分析仪上对制备的校准物定值。
[0024]通过采用上述方案，将校准物进行定值，能够对校准物的质量进行筛选，进一步提升了校准物的质量。
[0025]本发明的进一步设置为，所述用于制备载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的血清均通过乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒表面抗体以及人类免疫缺陷病毒I型和II型抗体检测，且检测结果须呈阴性。
[0026]通过采用上述方案，通过采用上述方案，将制备载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的血清通过病毒检测能够保证本发明提供的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法所制备出的校准物无毒无害，在进行测定时不会对被测定者造成损害，提高了生物安全性。
【具体实施方式】
[0027]本发明的具体步骤可分为:1)血清的预处理；2)LDL的提取；3)HDL的提取；4)通过基质血清获得校准物；5)校准物的定值。
[0028]【具体实施方式】如下:
实施例一:1.收集人混合血清1.5L，[经检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒表面抗体(HCV抗体)以及人类免疫缺陷病毒I型和II型抗体(HIV抗体)均为阴性]，其中0.5L作基质血清，另IL用作提取LDL和HDL组份。
[0029]2.LDL的提取:于IL混合人血清中加10%多阴离子溶液4ml，混匀，立即形成LDL-多阴离子聚合物，分4管，4000转/分，离心20分钟，(上层液收集于另一容器中，作HDL提取用)，将离心管倒值于滤纸上15分，使残留的上层液浙干，每只离心管加0.5 mol/L的草酸钾溶液10ml，用玻璃棒搅拌，多阴离子被沉淀，4000转/分，离心20分钟，上层液为黄色透明的LDL组份，浓度约为血清的20倍，再用生理盐水透析，除去草酸盐，用免疫浊度法测定ApoB含量，备用。
[0030]3.HDL的提取:沉淀LDL后的上层液，追加10%多阴离子溶液Iml和2mol/L的氯化钙溶液50ml，混匀，VLDL-Ca-多阴离子聚合物立即沉出，分4管，4000转/分，离心20分钟，去沉淀，上层液(只含HDL)，再加10%多阴离子溶液50ml和2mol/L的氯化钙溶液50ml，混匀，HDL-Ca-多阴离子聚合物立即形成，置4°C 2小时，分4管，4000转/分，离心20分钟，倒去上层液，将离心管倒值于滤纸上15分，使残留的上钟层液浙干，每只离心管加0.5mol/L草酸钾溶液10ml，用玻璃棒搅拌，多阴离子和Ca离子被沉淀，4000转/分，离心20分钟，上层液为桔黄色透明的HDL组份，浓度约为血清的20倍，再用生理盐水透析，除去草酸盐，用免疫浊度法测定ApoAl含量，备用。
[0031]4.另500mL混合人血清，用免疫浊度法分别测定ApoAl和ApoB含量，然后加入浓缩的HDL和LDL组份，使ApoAl和ApoB的最终浓度都达到2.50g/L,再加入柠檬酸三钠
1.5g，丙氨酸30g，海藻糖3g，混匀溶解后Iml分装于棕色玻璃瓶中，然后置冷冻干燥机中冷冻干燥，冻干后用橡胶塞塞紧瓶口，盖上外盖。
[0032]5.使用 WHO 国际参考物 ApoAl SPl-Ol 和 ApoB SP3-07 作校准，按 GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》规定的要求，用ApoAl和ApoB免疫浊度法试剂在自动生化分析仪上对制备的校准物定值。
[0033]实施例二:1.收集人混合血清1.5L,[经检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒表面抗体(HCV抗体)以及人类免疫缺陷病毒I型和II型抗体(HIV抗体)均为阴性]，其中0.5L作基质血清，另IL用作提取LDL和HDL组份。
[0034]2.LDL的提取:于IL混合人血清中加6%多阴离子溶液4ml，混匀，立即形成LDL-多阴离子聚合物，分4管，4000转/分，离心20分钟，(上层液收集于另一容器中，作HDL提取用)，将离心管倒值于滤纸上15分，使残留的上层液浙干，每只离心管加0.5 mol/L的草酸钾溶液10ml，用玻璃棒搅拌，多阴离子被沉淀，4000转/分，离心20分钟，上层液为黄色透明的LDL组份，浓度约为血清的20倍，再用生理盐水透析，除去草酸盐，用免疫浊度法测定ApoB含量，备用。
[0035]3.HDL的提取:沉淀LDL后的上层液，追加6%多阴离子溶液Iml和2mol/L的氯化钙溶液50ml，混匀，VLDL-Ca-多阴离子聚合物立即沉出，分4管，4000转/分，离心20分钟，去沉淀，上层液(只含HDL)，再加6%多阴离子溶液50ml和2mol/L的氯化钙溶液50ml，混匀，HDL-Ca-多阴离子聚合物立即形成，置4°C 2小时，分4管，4000转/分，离心20分钟，倒去上层液，将离心管倒值于滤纸上15分，使残留的上钟层液浙干，每只离心管加0.5 mol/L草酸钾溶液10ml，用玻璃棒搅拌，多阴离子和Ca离子被沉淀，4000转/分，离心20分钟，上层液为桔黄色透明的HDL组份，浓度约为血清的20倍，再用生理盐水透析，除去草酸盐，用免疫浊度法测定ApoAl含量，备用。
[0036]4.另500mL混合人血清，用免疫浊度法分别测定ApoAl和ApoB含量，然后加入浓缩的HDL和LDL组份，使ApoAl和ApoB的最终浓度都达到2.50g/L,再加入柠檬酸三钠3g，丙氨酸60g，海藻糖6g，混匀溶解后Iml分装于棕色玻璃瓶中，然后置冷冻干燥机中冷冻干燥，冻干后用橡胶塞塞紧瓶口，盖上外盖。
[0037]5.使用 WHO 国际参考物 ApoAl SPl-Ol 和 ApoB SP3-07 作校准，按 GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》规定的要求，用ApoAl和ApoB免疫浊度法试剂在自动生化分析仪上对制备的校准物定值。[0038]实施例三:1.收集人混合血清1.5L,[经检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒表面抗体(HCV抗体)以及人类免疫缺陷病毒I型和II型抗体(HIV抗体)均为阴性]，其中0.5L作基质血清，另IL用作提取LDL和HDL组份。
[0039]2.LDL的提取:于IL混合人血清中加15%多阴离子溶液4ml，混匀，立即形成LDL-多阴离子聚合物，分4管，4000转/分，离心20分钟，(上层液收集于另一容器中，作HDL提取用)，将离心管倒值于滤纸上15分，使残留的上层液浙干，每只离心管加0.5 mol/L的草酸钾溶液10ml，用玻璃棒搅拌，多阴离子被沉淀，4000转/分，离心20分钟，上层液为黄色透明的LDL组份，浓度约为血清的20倍，再用生理盐水透析，除去草酸盐，用免疫浊度法测定ApoB含量，备用。
[0040]3.HDL的提取:沉淀LDL后的上层液，追加15%多阴离子溶液Iml和2mol/L的氯化钙溶液50ml，混匀，VLDL-Ca-多阴离子聚合物立即沉出，分4管，4000转/分，离心20分钟，去沉淀，上层液(只含HDL)，再加15%多阴离子溶液50ml和3mol/L的氯化钙溶液50ml，混匀，HDL-Ca-多阴离子聚合物立即形成，置4°C 2小时，分4管，4000转/分，离心20分钟，倒去上层液，将离心管倒值于滤纸上15分，使残留的上钟层液浙干，每只离心管加0.75mol/L草酸钾溶液10ml，用玻璃棒搅拌，多阴离子和Ca离子被沉淀，4000转/分，离心20分钟，上层液为桔黄色透明的HDL组份，浓度约为血清的20倍，再用生理盐水透析，除去草酸盐，用免疫浊度法测定ApoAl含量，备用。
[0041]4.另500mL混合人血清，用免疫浊度法分别测定ApoAl和ApoB含量，然后加入浓缩的HDL和LDL组份，使ApoAl和ApoB的最终浓度都达到2.50g/L,再加入柠檬酸三钠
1.65g，丙氨酸33g，海藻糖3.3g，混匀溶解后Iml分装于棕色玻璃瓶中，然后置冷冻干燥机中冷冻干燥，冻干后用橡胶塞塞紧瓶口，盖上外盖。
[0042]5.使用 WHO 国际参考物 ApoAl SPl-Ol 和 ApoB SP3-07 作校准，按 GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》规定的要求，用ApoAl和ApoB免疫浊度法试剂在自动生化分析仪上对制备的校准物定值。
[0043]实施例四:1.收集人混合血清1.5L,[经检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒表面抗体(HCV抗体)以及人类免疫缺陷病毒I型和II型抗体(HIV抗体)均为阴性]，其中0.5L作基质血清，另IL用作提取LDL和HDL组份。
[0044]2.LDL的提取:于IL混合人血清中加18%多阴离子溶液4ml，混匀，立即形成LDL-多阴离子聚合物，分4管，4000转/分，离心20分钟，(上层液收集于另一容器中，作HDL提取用)，将离心管倒值于滤纸上15分，使残留的上层液浙干，每只离心管加0.5 mol/L的草酸钾溶液10ml，用玻璃棒搅拌，多阴离子被沉淀，4000转/分，离心20分钟，上层液为黄色透明的LDL组份，浓度约为血清的20倍，再用生理盐水透析，除去草酸盐，用免疫浊度法测定ApoB含量，备用。
[0045]3.HDL的提取:沉淀LDL后的上层液，追加18%多阴离子溶液Iml和3.6mol/L的氯化钙溶液50ml，混匀，VLDL-Ca-多阴离子聚合物立即沉出，分4管，4000转/分，离心20分钟，去沉淀，上层液(只含HDL)，再加18%多阴离子溶液50ml和2mol/L的氯化钙溶液50ml，混匀，HDL-Ca-多阴离子聚合物立即形成，置4°C 2小时，分4管，4000转/分，离心20分钟，倒去上层液，将离心管倒值于滤纸上15分，使残留的上钟层液浙干，每只离心管加0.5mol/L草酸钾溶液10ml，用玻璃棒搅拌，多阴离子和Ca离子被沉淀，4000转/分，离心20分钟，上层液为桔黄色透明的HDL组份，浓度约为血清的20倍，再用生理盐水透析，除去草酸盐，用免疫浊度法测定ApoAl含量，备用。
[0046]4.另500mL混合人血清，用免疫浊度法分别测定ApoAl和ApoB含量，然后加入浓缩的HDL和LDL组份，使ApoAl和ApoB的最终浓度都达到2.50g/L,再加入柠檬酸三钠
2.4g，丙氨酸48g，海藻糖4.8匀溶解后Iml分装于棕色玻璃瓶中，然后置冷冻干燥机中冷冻干燥，冻干后用橡胶塞塞紧瓶口，盖上外盖。
[0047]5.使用 WHO 国际参考物 ApoAl SPl-Ol 和 ApoB SP3-07 作校准，按 GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》规定的要求，用ApoAl和ApoB免疫浊度法试剂在自动生化分析仪上对制备的校准物定值。
[0048]以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【权利要求】
1.一种用于校准载脂蛋白Al和载脂蛋白B的校准物的制备方法，其特征在于:包括如下步骤: . 1)血清的处理:将血清分成两部分，一部分作为基质血清，另一部分作为用于提取低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的组分，往用于提取低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的血清中加入浓度为6%-20%的多阴离子化合物，离心、沉淀低密度脂蛋白； . 2)低密度脂蛋白的提取:将沉淀的低密度脂蛋白溶解，用草酸钾沉淀过剩的多阴离子化合物，离心后取上层清液，再次用生理盐水透析； . 3)高密度脂蛋白的提取:取沉淀低密度脂蛋白之后的上层液，追加浓度为6%-20%的多阴离子化合物和浓度为2-8mol/L的二价金属离子，沉淀其中的极低密度脂蛋白，离心，取上层液再加入相同浓度的多阴离子化合物和二价金属离子，离心，取沉淀物加入草酸钾溶液沉淀多余的多阴离子化合物和二价金属离子，离心，取上层清液用生理盐水透析； .4)基质血清的处理:在基质血清中加入高密度脂蛋白和低密度脂蛋白，调节载脂蛋白Al和载脂蛋白B的浓度，再加入柠檬酸三钠、丙氨酸和海藻糖混匀溶解。
2.如权利要求1所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:所述低密度脂蛋白的提取和高密度脂蛋白的提取的步骤中，草酸钾的浓度为0.5-1.3mol/L。
3.如权利要求1所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:所述3)步骤中，沉淀了极低密度脂蛋白后的溶液，在加入多阴离子化合物和二价金属离子之后需在4°C下静置2小时。
4.如权利要求1所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:所述步骤4)中,载脂蛋白Al和载脂蛋白B调节后的最终浓度为2.5g/L。
5.如权利要求4所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:所述加入的柠檬酸三钠、丙氨酸和海藻糖的质量比为柠檬酸三钠:丙氨酸:海藻糖=1:20:2。
6.如权利要求5所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:基质血清处理完成后需进行冷冻干燥，冷冻干燥后密封保存。
7.如权利要求6所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:所述血清中多阴离子化合物、二价金属离子和草酸钾残留的浓度依次分别为6%、0.3mol/L和.0.03mol/L。
8.如权利要求1所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:所述2)和3)步骤中，提取获得的低密度脂蛋白和高密度脂蛋白均需通过免疫浊度法测量蛋白含量。
9.如权利要求1或8所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:所述制备的载脂蛋白Al和载脂蛋白B需通过世界卫生组织的国际参考物载脂蛋白AlSPl-Ol和载脂蛋白B SP3-07作校准，按GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》规定的要求，用载脂蛋白Al和载脂蛋白B免疫浊度法试剂在自动生化分析仪上对制备的校准物定值。
10.如权利要求1所述的载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的制备方法，其特征在于:所述用于制备载脂蛋白Al和载脂蛋白B校准物的血清均通过乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒表面抗体以及人类免疫缺陷病毒I型和II型抗体检测，且检测结果须呈阴性。
【文档编号】G01N33/96GK104020301SQ201410004190
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年1月6日 优先权日:2014年1月6日
【发明者】杨昌国 申请人:宁波博泰生物技术有限公司