一种分析测定甘草酸含量的方法
【专利摘要】本发明涉及一种分析测定甘草酸含量的方法，包括如下步骤：1)：精密称取甘草酸纯品24mg至50mL容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密吸取溶液0.5mL、1.5mL、2.5mL、3.75mL、6.25mL至10mL容量瓶中，流动相溶解定容至刻度；按色谱条件进行高效液相色谱分析；以浓度对峰面积进行回归分析，得甘草酸标准曲线，计算回归方程；2)、精密称取甘草酸样品0.01g，加流动相定容至25ml，用0.22μm的微孔滤膜过滤，按色谱条件进行高效液相色谱分析；将峰面积带入甘草酸标准曲线，即可计算甘草酸含量。本发明为进一步深入研究与开发甘草酸提供更多有利依据。
【专利说明】一种分析测定甘草酸含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种分析检测方法，涉及一种高效液相色谱分析测定甘草酸含量的方 法。
【背景技术】：
[0002] 甘草酸是豆科（Iegumrrihiza)甘草属（glycyrrhiza)植物的根或根莖中提取的 一种天然甜味剂，又名甘草酸素、甘草皂昔。它的特点是高甜度（其甜度为蔗糖的200-300 倍）、低热能、安全无毒，起泡性和溶血作用很低，可广泛用于食品、饮料、医药、化妆品、烟草 等行业。因此，近年来关于甘草提取物甘草酸研究备受人们关注。本发明旨在建立分析测 定甘草酸含量的方法，为进一步深入研究与开发这一优势资源提供更多有利依据，并为低 热量甜味剂的开发提供理论基础。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是建立一种高效液相色谱分析测定甘草酸含量的方法。
[0004] 本发明采用的技术方案为：
[0005] -种高效液相色谱分析测定甘草酸含量的方法，包括如下步骤：
[0006] 1):标准曲线的绘制
[0007] 精密称取甘草酸纯品24mg至50mL容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀； 分别精密吸取溶液〇. 5mL、l. 5mL、2. 5mL、3. 75mL、6. 25mL至IOmL容量瓶中，流动相溶解定容 至刻度；按色谱条件进行高效液相色谱分析；以浓度对峰面积进行回归分析，得甘草酸标 准曲线，计算回归方程；
[0008] 2)、样品前处理：
[0009] 精密称取甘草酸样品0. 〇lg，加流动相定容至25ml，用0. 22 ii m的微孔滤膜过滤， 按色谱条件进行高效液相色谱分析；将峰面积带入甘草酸标准曲线，即可计算甘草酸含量。
[0010] 所述高效液相色谱分析条件为：
[0011] 色谱条件：柱型：Kromasil C18 柱（150X4. 6mm ID，5 u m);
[0012] 流动相：甲醇-0? 2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（66 :33 :1)
[0013] 流速：0? 8mL/min，柱温：25°C，进样量：20. Oii L
[0014] 检测波长：250nm。
[0015] 本发明所具有的有益效果：
[0016] 本发明通过高效液相分析对甘草酸进行含量分析，为从甘草中提取甘草酸这种甜 味物质提供有力的参考依据。为以后甘草提取物中甘草酸纯度，提取率等提供计算方法。
[0017] 一般实验中综合采用提取率和粗品中甘草酸的纯度来评价提取工艺。
[0018] 甘草酸提取率(%) = E X100 Illo
[0019] HI1-甘草酸粗品中甘草酸质量
[0020] mQ-甘草粉末中甘草酸总质量
[0021] 甘草酸纯度(%) = 1IUX100 m2
[0022] Hi1-甘草酸粗品中甘草酸质量
[0023] m2-甘草酸粗粉质量。
【专利附图】
【附图说明】
[0024] 图1为甘草酸纯品的高效液相色谱图。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不限定本发明的保护范围。
[0026] -种高效液相色谱分析测定甘草酸含量的方法，包括如下步骤：
[0027] 1):标准曲线的绘制
[0028] 精密称取甘草酸纯品24mg至50mL容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀； 分别精密吸取溶液〇. 5mL、l. 5mL、2. 5mL、3. 75mL、6. 25mL至IOmL容量瓶中，流动相溶解定容 至刻度；按色谱条件进行高效液相色谱分析；以浓度对峰面积进行回归分析，得甘草酸标 准曲线，计算回归方程；
[0029] 2)、样品前处理：
[0030] 精密称取甘草酸样品0. 〇lg，加流动相定容至25ml，用0. 22 i! m的微孔滤膜过滤， 按色谱条件进行高效液相色谱分析；将峰面积带入甘草酸标准曲线，即可计算甘草酸含量。
[0031] 所述高效液相色谱分析条件为：
[0032] 色谱条件：柱型：Kromasil C18 柱（150X4. 6mm ID，5 u m);
[0033] 流动相：甲醇-0? 2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（66 :33 :1)
[0034] 流速：0? 8mL/min，柱温：25°C，进样量：20. 0 ii L
[0035] 检测波长：250nm。
【权利要求】
1. 一种高效液相色谱分析测定甘草酸含量的方法，其特征在于：包括如下步骤： 1) :标准曲线的绘制 精密称取甘草酸纯品24mg至50mL容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀；分别 精密吸取溶液0. 5mL、l. 5mL、2. 5mL、3. 75mL、6. 25mL至10mL容量瓶中，流动相溶解定容至刻 度；按色谱条件进行高效液相色谱分析；以浓度对峰面积进行回归分析，得甘草酸标准曲 线，计算回归方程； 2) 、样品前处理： 精密称取甘草酸样品〇. 〇lg，加流动相定容至25ml，用0. 22 y m的微孔滤膜过滤，按色 谱条件进行高效液相色谱分析；将峰面积带入甘草酸标准曲线，即可计算甘草酸含量。
2. 根据权利要求1所述一种高效液相色谱分析测定甘草酸含量的方法，其特征在于： 所述高效液相色谱分析条件为： 色谱条件：柱型：Kromasil 018柱（150X4.6mm ID，5iim); 流动相：甲醇2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（66 :33 :1) 流速：0? 8mL/min，柱温：25°C，进样量：20. Oil L 检测波长：250nm。
【文档编号】G01N30/88GK104374856SQ201410471055
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年9月16日 优先权日:2014年9月16日
【发明者】吕丽 申请人:天津春发生物科技集团有限公司