技术领域一种搅拌棒吸附萃取检测农药残留的方法，尤其是一种搅拌棒吸附萃取-液相色谱-串联质谱检测蔬菜水果中苯霜灵、扑灭津、哒螨灵及吡螨胺残留的方法，属于分析化学检测领域。
背景技术：
苯霜灵、扑灭津、哒螨灵及吡螨胺是大蒜种植中较为常用的几种农药，能够在短期内达到除害、增产的效果。随着农药的广泛使用，农药残留问题也越来越引起人们的关注和研究。现有的水果蔬菜中苯霜灵、扑灭津、哒螨灵及吡螨胺残留检测方法前处理一般采用提取、过柱分离、浓缩、定容等手段，操作繁琐，检验周期较长，检验成本高。搅拌棒吸附萃取技术（StirBarSorptiveExtraction，SBSE）是ErikBaltussen和PatSandra等人提出的一种新型样品前处理技术，它利用搅拌棒表面的吸附材料，在搅拌棒自身搅拌的同时完成吸附萃取，近年来得到广泛的研究和应用。该技术简单、高效，无溶剂，不会造成二次污染。关于搅拌棒吸附萃取检测蔬菜水果中苯霜灵、扑灭津、哒螨灵及吡螨胺残留的方法未见报道。
技术实现要素：
本发明提供了一种搅拌棒吸附萃取检测农药残留的方法。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种搅拌棒吸附萃取检测农药残留的方法，包括如下步骤。（1）提取：称取10g样品置于l00mL塑料离心管中，加入0.1%乙酸/乙腈溶液30mL，加6g无水硫酸钠，用玻璃棒充分搅拌均匀，于均质机上高速均质1min，9000r/min高速离心6min，将上清液转移至150mL梨形瓶中，40℃旋转蒸发至约1mL。（2）吸附萃取：将步骤（1）中旋转蒸发后的样液用超纯水稀释至10mL，加入搅拌棒及一定量的氯化钠在振荡条件下进行吸附萃取。（3）解吸：吸附萃取后用体积比为8:2的甲醇水解吸6min，过有机相滤膜，注入进样瓶。（4）检测：加入步骤（3）所得的进样瓶，使用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）进行检测。本方法所述农药包括苯霜灵、扑灭津、哒螨灵、吡螨胺。步骤（2）所使用的搅拌棒为聚二甲基硅氧烷（PDMS）涂层；萃取时间：30min；盐浓度：15%；振荡速度：180r/min。步骤（4）所使用的液相色谱-串联质谱配有电喷雾离子源（ESI）。检测时的色谱条件为：检测时的色谱条件为：色谱柱：HypersilGOLD-1.9μm，50mm×2.1mm(i.d)；柱温：30℃；进样体积：5μL；流动相：A为0.1%甲酸水，B为甲醇；流动相梯度洗脱程序：0-1min，80%A；1-3min，80%-30%A；3-7.1min，30%-10%A；7.1-8min，10%-80%A；8-10min，80%A；流速：0.25mL/min。检测时的质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描模式：正离子模式；检测方式：选择反应监测；电喷雾电压：4500V；鞘气压力：2.07×105Pa；清扫气压力：0；辅助气压力：6.89×104Pa；离子源温度：350℃，各化合物的质谱采集参数见表1。表1各化合物的质谱采集参数。本发明的有益效果是，利用搅拌棒吸附萃取技术，建立了蔬菜水果中苯霜灵、扑灭津、哒螨灵、吡螨胺残留的检测方法，方法操作简单、快速，能够减少样品基质干扰。所建立的方法检测限、回收率、精密度均能满足检测的相关技术要求。附图说明图1是本发明所涉及苯霜灵、扑灭津、哒螨灵、吡螨胺的选择反应监测色谱图。其中，1、扑灭津；2、苯霜灵；3、吡螨胺；4、哒螨灵。具体实施方式以大蒜检测为例来说明本发明。仪器和试剂：美国Thermo公司TSQQuantumAccess高效液相色谱-串联质谱仪；德国IKA公司HS260B型电动摇床；日本Hitachi公司CR22GⅢ型高速冷冻离心机；德国IKA公司旋涡混匀器；瑞士BUCHI公司R215型旋转蒸发仪。搅拌棒：聚二甲基硅氧烷（PDMS）涂层。甲醇、乙腈均为色谱纯；实验用水为超纯水；无水硫酸钠（用前在500℃马弗炉内烘5h，冷却取出装瓶备用）、氯化钠均为分析纯。标准品：苯霜灵、扑灭津、哒螨灵、吡螨胺标准物质购于德国Dr.公司。标准溶液制备：分别称取苯霜灵、扑灭津、哒螨灵、吡螨胺标准品10mg，置于4个100mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解、定容，配制浓度为100mg/L的贮备液。分别移取以上标准贮备液1.0mL，置于100mL棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，质量浓度为1mg/L，使用时再稀释为系列浓度的混合标准工作液。样品前处理。称取样品10g（精确到0.01g），置于l00mL塑料离心管中，加入0.1%乙酸/乙腈溶液30mL,加6g无水硫酸钠，用玻璃棒充分搅拌均匀，于均质机上高速均质1min，9000r/min高速离心6min，将上清液转移至150mL梨形瓶中，40℃旋转蒸发至约1mL，用超纯水稀释至10mL用于SBSE萃取。样品萃取条件：PDMS搅拌棒；样品溶液体积：10mL；萃取时间：30min；盐浓度：15%（m/V）；振荡速度：180rpm。样品解析条件：解析液：甲醇+水（8+2）；解析时间：6min。液相色谱条件。色谱柱：HypersilGOLD-1.9μm，50mm×2.1mm(i.d)。柱温：30℃。进样体积：5μL。流动相梯度洗脱程序：A为0.1%甲酸水，B为甲醇；流动相梯度洗脱程序：0-1min，80%A；1-3min，80%-30%A；3-7.1min，30%-10%A；7.1-8min，10%-80%A；8-10min，80%A；流速：0.25mL/min。质谱条件。离子源：电喷雾离子源。扫描模式：正离子模式。检测方式：选择反应监测。电喷雾电压：4500V。鞘气压力：2.07×105Pa。清扫气压力：0。辅助气压力：6.89×104Pa。离子源温度：350℃。碰撞气：高纯氩。各化合物的质谱采集参数。方法的线性范围及相关系数。分别配制浓度为0.005、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2mg/L的4种化合物标准水溶液，按优化后的实验条件进行萃取、解析，然后上机测定。结果表明：在0.005~0.2mg/L浓度范围内呈现较好的线性关系，相关系数R2=0.9907~9985。基质样品实验。为了验证方法的准确性，进行了基质样品实验。取阴性大蒜样品3份，每份准确称取10g（精确至0.01g），分别准确添加0.005、0.01、0.05mg/kg水平的4种化合物混合标准溶液，在优化的实验条件下进行前处理并上机测定，采用相同实验条件下的空白基质标准品进行定量，计算回收率和精密度，平均回收率为85.8%~96.1%，变异系数为6.8%~10.9%。所述实施例仅仅是本发明的一个优选的实施例，并不是对本发明的范围进行限定。基于本发明实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下，对本发明的技术方案进行的各种改进、优化，进而获得的所有其他实施例，均属于本发明权利要求书所声明的保护范围。