本发明属于婴幼儿配方奶粉技术领域，具体为一种婴幼儿配方奶粉中脂肪过氧化值的测定方法。
背景技术：
婴幼儿配方奶粉是母乳的最佳替代物，为了给婴幼儿的生长发育带来近似于母乳的效果，婴幼儿配方奶粉通过改善配方内的蛋白组成、脂肪组成、碳水化合物组成、矿物质组成、维生素组成及微量免疫物质等来使婴幼儿配方奶粉更近母乳。婴幼儿配方奶粉的母乳化，使其含有20-32％的脂肪，其中不饱和脂肪的含量约占总脂肪的50％，特别是DHA、ARA、亚油酸、亚麻酸和棕榈酸等不饱和脂肪酸很容易与氧发生化学反应。这些不饱和脂肪酸被氧化的结果就是产生过氧化物(直接导致过氧化值增高)、小分子的醛、酮类物质，而过度氧化会严重影响婴幼儿配方奶粉的风味，降低婴幼儿奶粉的营养价值，甚至会产生有毒物质，大大缩短婴幼儿奶粉的货架期。过氧化值是评价脂肪氧化程度的一个重要指标，经常用于评价食品中脂肪的氧化。因此，对婴幼儿配方奶粉的过氧化值进行测定，用于监控其货架期具有非常重要的现实意义。
婴幼儿配方奶粉成分复杂，在乳粉喷雾干燥过程中，蛋白质可以包埋脂肪形成油脂被蛋白质包埋的颗粒，另外部分强化的DHA、ARA等油脂大多经过包埋处理，因此完全提取出婴幼儿配方奶粉内的脂肪较为困难。但是，乳粉脂肪的提取率越高(前提是提取过程不会引起二次氧化)，所测定的过氧化值的准确性越高，这是因为奶粉内被包埋的脂肪相对于未被包埋的脂肪更难被氧化，但是未被包埋的脂肪却更易被提取，如果提取率较低，提取的脂肪多为未被包埋的脂肪，则易引起过氧化值偏高的结果。另外，脂肪提取过程中脂肪的二次氧化程度越低，所测定的过氧化值的准确性越高。目前，我国并无婴幼儿配方奶粉过氧化值的检测方法，可参考的过氧化值检测方法为GB 5009.227-2016食品中过氧化值的测定，该标准中有关脂肪的提取方法为有机溶剂浸泡过夜法(浸提12h以上)，这一方法提取时间长，脂肪与氧气接触时间长易发生二次氧化，且该方法脂肪提取率低，并不能真实反应乳粉内脂肪的过氧化值。
技术实现要素：
为解决现有技术中婴幼儿乳粉中脂肪过氧化值检测准确度低、操作时间长的缺陷，本发明提供了婴幼儿配方奶粉中脂肪过氧化值的测定方法，实现的目的为使测定的过氧化值准确性高，测定方法操作简单、快速。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为，一种婴幼儿配方奶粉中脂肪过氧化值的测定方法，包括如下步骤，(1)婴幼儿配方奶粉中脂肪的一次提取：将婴幼儿配方奶粉充分溶解于水中后，再加入萃取剂，在室温条件下经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相A；
(2)婴幼儿配方奶粉中脂肪的二次提取：将步骤(1)离心后得到的沉淀与水均匀混合，然后再次加入萃取剂，在室温条件下再经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相B；
(3)脂肪的精提：将步骤(1)、(2)得到的有机相A、有机相B混合后，加入无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液旋转蒸发，得到脂肪提取物；
(4)脂肪过氧化值的定量：①脂肪的滴定：称量步骤(3)得到的脂肪，以淀粉作为指示剂，用硫代硫酸钠溶液进行滴定，设置空白对照，直至滴定终点时，记录滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量V、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量V0；
②采用①中滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量，计算得到脂肪过氧化值，计算公式如下：
X＝(V-V0)×c×0.1269×100/m，
X为脂肪过氧化值(g/100g)；
V为滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
V0为空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
c为硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269为与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当
的碘的质量；
m为称量步骤(3)脂肪的质量(g)。
本发明采用的方法，经历三次提取，能够将婴幼儿配方奶粉中被包覆的脂肪最大化的提取出来，从而使得计算过氧化值更为精确，且方法步骤都是从现有技术常用的操作手段选择出来进行的组合，也无特殊条件，使得提取脂肪的方法简便、易操作，更为快捷的测定出脂肪过氧化值。
进一步的，所述步骤(1)中将婴幼儿配方奶粉溶解于35-45℃的水中，所使用水的质量为婴幼儿配方奶粉质量的2-4倍，选择该温度、水的用量使得奶粉得以在最短的时间、最不耗能的条件下充分溶解。
进一步的，所述步骤(1)中添加的萃取剂为水体积的5-8倍。选择该体积的萃取剂，能够使脂肪最大化萃取出来。
进一步的，所述方法步骤中所用的水为去离子水、纯水、超纯水中任意一种。最佳的为超纯水，选用这几种水，杂质较少，不会带来不良的负影响。
进一步的，所述步骤(1)和步骤(2)所用的萃取剂为正己烷与异丙醇按照70％：30％-80％：20％的体积百分比混合得到的溶液；优选该体积比得到的萃取剂，在最短的时间内，提取出的脂肪提取率最高。
进一步的，所述步骤(1)和步骤(2)中磁力搅拌速度均为400转/分-800转/分，磁力搅拌的时间均为10-20min。磁力搅拌所选择的条件参数是为了使得萃取剂与奶粉溶液充分混匀，为保证最大化的萃取率提供有利条件。
进一步的，所述步骤(1)和步骤(2)中超声频率均为20kHz-40kHz，超声时间均为30-90s。超声所选取的条件，配合萃取剂，以最快的速度，保证提取出最多的脂肪。
进一步的，所述步骤(1)和步骤(2)中离心转速均为6000g-9000g，离心时间均为8-15min。优选的离心条件，进一步保证脂肪与其他杂质最大程度的分离，收集得到最纯的脂肪。
进一步的，所述步骤(2)中加入的萃取剂为与离心后得到的沉淀混合所使用水体积的1.5-2.5倍。此时离心后的沉淀中脂肪含量要低于第一次提取的量，选择该体积的萃取剂，在使用量最低的条件下，最快将脂肪萃取出。
进一步的，所述步骤(3)中旋转蒸发为真空旋转蒸发。在真空条件下旋转蒸发，最快速度地将脂肪杂质除去，保证脂肪的提取率。
进一步的，所述真空旋转蒸发的方法为先用冷凝水在5℃条件下、水浴25℃条件下旋转蒸发，蒸发至有机相A、有机相B混合液体积为8-15mL，调整水浴温度在35℃条件下旋转蒸发至得到的脂肪提取物恒重时停止。优选的该真空旋转蒸发条件，脂肪不会分解，也使脂肪快速与其他杂质分离。
进一步的，所述步骤(3)中无水硫酸钠与有机相A、有机相B的质量比为1：6-1：8。
进一步的，所述步骤(4)中称取1.5-3.5g的脂肪，和/或硫代硫酸钠溶液的浓度为0.002mol/L或0.005mol/L(当消耗0.002mol/L的硫代硫酸钠溶液超过15mL时，需要使用0.005mol/L的硫代硫酸钠溶液)，质量浓度0.5-1.0％淀粉溶液1mL对脂肪进行滴定。该质量配比的滴定体系中，滴定所用时间最短，得到的结果最为稳定。
进一步的，所述步骤(4)中滴定的方法为，将脂肪充分溶解于三氯甲烷冰乙酸溶液中，再加入碘化钾溶液，混合均匀，避光放置后再加入水充分混匀，用硫代硫酸钠溶液滴定，滴定至淡黄色时，加入淀粉，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为滴定终点。
上述滴定体系中，优选用到的各试剂量配比关系：所述步骤(4)中将脂肪充分溶解于25-45mL的三氯甲烷冰乙酸溶液中；
三氯甲烷冰乙酸溶液为三氯甲烷与冰乙酸按照40％：60％的体积百分比混合得到；
碘化钾溶液的加入量为0.5-1.0mL；
碘化钾溶液中碘化钾的质量百分比为66.7％；
或避光放置后再加入70-100mL的水；
所加入的淀粉为质量百分比为0.5-1.0％的淀粉溶液。
进一步的，所述步骤(4)中避光放置的时间为2-4min，优选的放置时间使得碘化钾充分与脂肪接触，使滴定终点准确。
本发明的有益效果在于，本发明方法通过对婴幼儿配方奶粉的简单复原，萃取，超声，蒸发等实现了婴幼儿配方乳粉中脂肪的高提取，通过进一步萃取溶剂的优选、超声功率的优选和蒸发条件的改进，该方法所测定过氧化值检测结果准确度高，脂肪的二次氧化可得到有效控制。本发明方法易操作，时间短，检测可信度高可用于婴幼儿配方奶粉脂肪过氧化值的快速、简便测定，还可以为婴幼儿乳粉的货架期评估提供有利依据，并可用于指导婴幼儿配方奶粉新工艺新包装的开发。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明做进一步的详细描述。
实施例一：本发明公开的一种婴幼儿配方奶粉中脂肪过氧化值的测定方法，包括如下步骤，(1)婴幼儿配方奶粉中脂肪的一次提取：将婴幼儿配方奶粉充分溶解于水中后，再加入萃取剂，在室温条件下经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相A；
(2)婴幼儿配方奶粉中脂肪的二次提取：将步骤(1)离心后得到的沉淀与水均匀混合，然后再次加入萃取剂，在室温条件下再经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相B；
(3)脂肪的精提：将步骤(1)、(2)得到的有机相A、有机相B混合后，加入无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液旋转蒸发，得到脂肪提取物；
(4)脂肪过氧化值的定量：①脂肪的滴定：称量步骤(3)得到的脂肪，以淀粉作为指示剂，用硫代硫酸钠溶液进行滴定，设置空白对照，直至滴定终点时，记录滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量V、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量V0；
②采用①中滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量，计算得到脂肪过氧化值，计算公式如下：
X＝(V-V0)×c×0.1269×100/m，
X为脂肪过氧化值(g/100g)；
V为滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
V0为空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
c为硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269为与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘质量；
m为称量步骤(3)脂肪的质量(g)。
本发明上述方法步骤中溶解是指在水中形成稳定、均一的体系。所述萃取溶剂为本领域常规的萃取溶剂，所述的室温为本领域常规室温，较佳地为23-27℃，更佳地为25℃，在没有特殊说明下，上述操作手法、条件参数均是采用的现有技术常规的技术手段，采用本发明方法三次提取，可使脂肪提取率达到95％，使得过氧化值计算的更为准确。
实施例二：本发明公开的一种婴幼儿配方奶粉中脂肪过氧化值的测定方法，包括如下步骤，(1)婴幼儿配方奶粉中脂肪的一次提取：将婴幼儿配方奶粉充分溶解于水中后，再加入萃取剂，在室温条件下经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相A；
(2)婴幼儿配方奶粉中脂肪的二次提取：将步骤(1)离心后得到的沉淀与水均匀混合，然后再次加入萃取剂，在室温条件下再经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相B；
(3)脂肪的精提：将步骤(1)、(2)得到的有机相A、有机相B混合后，加入无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液旋转蒸发，得到脂肪提取物；
(4)脂肪过氧化值的定量：①脂肪的滴定：称量步骤(3)得到的脂肪，以淀粉作为指示剂，用硫代硫酸钠溶液进行滴定，设置空白对照，直至滴定终点时，记录滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量V、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量V0；
②采用①中滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量，计算得到脂肪过氧化值，计算公式如下：
X＝(V-V0)×c×0.1269×100/m，
X为脂肪过氧化值(g/100g)；
V为滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
V0为空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
c为硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269为与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘的质量；
m为称量步骤(3)脂肪的质量(g)。
进一步的，所述步骤(1)中将婴幼儿配方奶粉溶解于35℃的水中，所使用水的质量为婴幼儿配方奶粉质量的2倍，添加的萃取剂为水体积的5倍，所用的水均为去离子水。
所述步骤(1)和步骤(2)所用的萃取剂均为正己烷与异丙醇按照75％：25％的体积百分比混合得到的溶液，所述步骤(1)和步骤(2)中磁力搅拌速度均为400转/分，磁力搅拌的时间均为10min，所述步骤(1)和步骤(2)中超声频率均为20kHz，超声时间均为90s，所述步骤(1)和步骤(2)中离心转速均为6000g，离心时间均为15min。
进一步的，所述步骤(2)中加入的萃取剂为与离心后得到的沉淀混合所使用水体积的1.5倍。
进一步的，所述步骤(3)中旋转蒸发为真空旋转蒸发，真空旋转蒸发的方法为先用冷凝水在5℃条件下、水浴25℃条件下旋转蒸发，蒸发至有机相A、有机相B混合液体积为8-15mL，调整水浴温度在35℃条件下旋转蒸发至得到的脂肪提取物恒重时停止，所述步骤(3)中无水硫酸钠与有机相A、有机相B的质量1:6。
所述步骤(4)中称取1.5g的脂肪，硫代硫酸钠溶液的浓度为0.002mol/L，质量浓度0.5％淀粉溶液1mL对脂肪进行滴定，滴定的方法为，将脂肪充分溶解于三氯甲烷冰乙酸溶液中，再加入碘化钾溶液，混合均匀，避光放置后再加入水充分混匀，用硫代硫酸钠溶液滴定，滴定至淡黄色时，加入淀粉，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为滴定终点，
其中，将脂肪充分溶解于25mL的三氯甲烷冰乙酸溶液中；
三氯甲烷冰乙酸溶液为三氯甲烷与冰乙酸按照40％：60％的体积百分比混合得到；
碘化钾溶液的加入量为0.5mL；
碘化钾溶液中碘化钾的质量百分比为66.7％；
避光放置后再加入70mL的水；
所加入的淀粉为质量百分比为0.5％的淀粉溶液。
上述避光放置的时间为2min。
实施例三：本发明公开的一种婴幼儿配方奶粉中脂肪过氧化值的测定方法，包括如下步骤，(1)婴幼儿配方奶粉中脂肪的一次提取：将婴幼儿配方奶粉充分溶解于水中后，再加入萃取剂，在室温条件下经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相A；
(2)婴幼儿配方奶粉中脂肪的二次提取：将步骤(1)离心后得到的沉淀与水均匀混合，然后再次加入萃取剂，在室温条件下再经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相B；
(3)脂肪的精提：将步骤(1)、(2)得到的有机相A、有机相B混合后，加入无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液旋转蒸发，得到脂肪提取物；
(4)脂肪过氧化值的定量：①脂肪的滴定：称量步骤(3)得到的脂肪，以淀粉作为指示剂，用硫代硫酸钠溶液进行滴定，设置空白对照，直至滴定终点时，记录滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量V、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量V0；
②采用①中滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量，计算得到脂肪过氧化值，计算公式如下：
X＝(V-V0)×c×0.1269×100/m，
X为脂肪过氧化值(g/100g)；
V为滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
V0为空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
c为硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269为与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘的质量；
m为称量步骤(3)脂肪的质量(g)。
进一步的，所述步骤(1)中将婴幼儿配方奶粉溶解于45℃的水中，所使用水的质量为婴幼儿配方奶粉质量的4倍，添加的萃取剂为水体积的8倍，所用的水均为去离子水。
所述步骤(1)和步骤(2)所用的萃取剂均为正己烷与异丙醇按照80％：20％的体积百分比混合得到的溶液，所述步骤(1)和步骤(2)中磁力搅拌速度均为800转/分，磁力搅拌的时间均为20min，所述步骤(1)和步骤(2)中超声频率均为40kHz，超声时间均为30s，所述步骤(1)和步骤(2)中离心转速均为9000g，离心时间均为8min。
进一步的，所述步骤(2)中加入的萃取剂为与离心后得到的沉淀混合所使用水体积的2.5倍。
进一步的，所述步骤(3)中旋转蒸发为真空旋转蒸发，真空旋转蒸发的方法为先用冷凝水在5℃条件下、水浴25℃条件下旋转蒸发，蒸发至有机相A、有机相B混合液体积为8-15mL，调整水浴温度在35℃条件下旋转蒸发至得到的脂肪提取物恒重时停止，所述步骤(3)中无水硫酸钠与有机相A、有机相B的质量比1:8。
所述步骤(4)中称取3.5g的脂肪，硫代硫酸钠溶液的浓度为0.005mol/L，质量浓度1％淀粉溶液1mL对脂肪进行滴定，滴定的方法为，将脂肪充分溶解于三氯甲烷冰乙酸溶液中，再加入碘化钾溶液，混合均匀，避光放置后再加入水充分混匀，用硫代硫酸钠溶液滴定，滴定至淡黄色时，加入淀粉，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为滴定终点，
其中，将脂肪充分溶解于45mL的三氯甲烷冰乙酸溶液中；
三氯甲烷冰乙酸溶液为三氯甲烷与冰乙酸按照40％：60％的体积百分比混合得到；
碘化钾溶液的加入量为1mL；
碘化钾溶液中碘化钾的质量百分比为66.7％；
避光放置后再加入100mL的水；
所加入的淀粉为质量百分比为1％的淀粉溶液。
上述避光放置的时间为4min。
实施例四：本发明公开的一种婴幼儿配方奶粉中脂肪过氧化值的测定方法，包括如下步骤，(1)婴幼儿配方奶粉中脂肪的一次提取：将婴幼儿配方奶粉充分溶解于水中后，再加入萃取剂，在室温条件下经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相A；
(2)婴幼儿配方奶粉中脂肪的二次提取：将步骤(1)离心后得到的沉淀与水均匀混合，然后再次加入萃取剂，在室温条件下再经磁力搅拌、超声、离心，收集上层有机相得到有机相B；
(3)脂肪的精提：将步骤(1)、(2)得到的有机相A、有机相B混合后，加入无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液旋转蒸发，得到脂肪提取物；
(4)脂肪过氧化值的定量：①脂肪的滴定：称量步骤(3)得到的脂肪，以淀粉作为指示剂，用硫代硫酸钠溶液进行滴定，设置空白对照，直至滴定终点时，记录滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量V、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量V0；
②采用①中滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量、空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量，计算得到脂肪过氧化值，计算公式如下：
X＝(V-V0)×c×0.1269×100/m，
X为脂肪过氧化值(g/100g)；
V为滴定脂肪消耗硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
V0为空白对照硫代硫酸钠标准溶液的用量(mL)；
c为硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269为与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘的质量；
m为称量步骤(3)脂肪的质量(g)。
进一步的，所述步骤(1)中将婴幼儿配方奶粉溶解于40℃的水中，所使用水的质量为婴幼儿配方奶粉质量的3倍，添加的萃取剂为水体积的7倍，所用的水均为去离子水。
所述步骤(1)和步骤(2)所用的萃取剂均为正己烷与异丙醇按照75％：25％的体积百分比混合得到的溶液，所述步骤(1)和步骤(2)中磁力搅拌速度均为650转/分，磁力搅拌的时间均为15min，所述步骤(1)和步骤(2)中超声频率均为30kHz，超声时间均为50s，所述步骤(1)和步骤(2)中离心转速均为7500g，离心时间均为12min。
进一步的，所述步骤(2)中加入的萃取剂为与离心后得到的沉淀混合所使用水体积的2倍。
进一步的，所述步骤(3)中旋转蒸发为真空旋转蒸发，真空旋转蒸发的方法为先用冷凝水在5℃条件下、水浴25℃条件下旋转蒸发，蒸发至有机相A、有机相B混合液体积为8-15mL，调整水浴温度在35℃条件下旋转蒸发至得到的脂肪提取物恒重时停止，所述步骤(3)中无水硫酸钠与有机相A、有机相B的质量比为1:7。
所述步骤(4)中称取2.5g的脂肪，硫代硫酸钠溶液的浓度为0.002mol/L，质量浓度0.75％淀粉溶液1mL对脂肪进行滴定，滴定的方法为，将脂肪充分溶解于三氯甲烷冰乙酸溶液中，再加入碘化钾溶液，混合均匀，避光放置后再加入水充分混匀，用硫代硫酸钠溶液滴定，滴定至淡黄色时，加入淀粉，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为滴定终点，
其中，将脂肪充分溶解于30mL的三氯甲烷冰乙酸溶液中；
三氯甲烷冰乙酸溶液为三氯甲烷与冰乙酸按照40％：60％的体积百分比混合得到；
碘化钾溶液的加入量为0.75mL；
碘化钾溶液中碘化钾的质量百分比为66.7％；
避光放置后再加入85mL的水；
所加入的淀粉为质量百分比为0.75％的淀粉溶液。
上述避光放置的时间为3min。
以下为采用本发明方法进行的对比试验例，用以说明本发明从婴幼儿配方奶粉中提取脂肪的效率高、过氧化值更为精确的有益效果。
本试验例所使用的试剂包括：正己烷、异丙醇、硫代硫酸钠、二氯甲烷、石油醚、三氯甲烷、冰乙酸、碘化钾、可溶性淀粉，市售购得；市售婴儿配方粉，从市场上购买获得。
所用的仪器包括：磁力搅拌器、超声仪、离心机、旋转蒸发仪、烘箱、电子天平、碱式滴定管。
所述的饱和碘化钾：称取20g碘化钾，加入10mL新煮沸冷却的水，摇匀后储存于棕色瓶中，于避光处放置。
所述的1％淀粉指示剂：称取1g可溶性淀粉，加少量水调成糊状。边搅拌边加入100mL煮沸的水，再煮沸搅匀后放冷备用。所述百分比为质量百分比。
所述的0.75％淀粉指示剂：称取0.75g可溶性淀粉，加少量水调成糊状。边搅拌边加入100mL煮沸的水，再煮沸搅匀后放冷备用。所述百分比为质量百分比。
所述的0.5％淀粉指示剂：称取0.5g可溶性淀粉，加少量水调成糊状。边搅拌边加入100mL煮沸的水，再煮沸搅匀后放冷备用。所述百分比为质量百分比。
所述的三氯甲烷-冰乙酸(2:3)：量取40mL三氯甲烷和60mL冰乙酸，混合均匀，备用。
所述的正己烷-异丙醇(3:1)：量取300mL正己烷和100mL冰乙酸，混合均匀，备用。
所述的二氯甲烷-甲醇(3:2)：量取300mL二氯甲烷和200mL甲醇，混合均匀，备用。
试验例1婴幼儿乳粉脂肪的提取率及过氧化值测定
从市场购买婴儿配方奶粉2批，幼儿配方奶粉1批。婴儿配方奶粉分别标记为样品1和样品2，幼儿配方乳粉标记为样品3。将所购婴幼儿配方粉用于乳粉脂肪提取及过氧化值检测。
检测步骤为：
①待检样品脂肪的一次提取：
将待检样品15g充分溶解于40℃，45g的去离子水中，然后加入270mL正己烷-异丙醇(3:1)的萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，30kHz超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相A；所述待检样品指乳基婴幼儿配方粉；所述的溶解是指在水中形成稳定、均一的体系。所述的正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，为正己烷75％，异丙醇25％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
②待检样品脂肪的二次提取：
将①离心后的沉淀再次与水相混合均匀，然后加入80mL正己烷-异丙醇(3:1)的萃取溶剂萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，30kHz超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相B；其中，所述的混合均匀指沉淀物在水中形成均一的体系。所述的正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，为正己烷75％，异丙醇25％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
③旋转蒸发：
将步骤①所述的有机相A、步骤②所述的有机相B混合，加入35g无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液进行旋转蒸发，得到脂肪提取物。其中，所述无水硫酸钠为本领域常规的无水硫酸钠。所述旋转蒸发为本领域常规的旋转蒸发，蒸发条件为先冷凝水5℃，水浴25℃旋转蒸发旋蒸至溶液体积为10mL左右，再调整水浴为35℃旋转蒸发至恒重。
④滴定：
从步骤③所述的脂肪提取物称取约2.5g的脂肪，用0.002mol/L硫代硫酸钠标准溶液进行滴定。记录硫代硫酸钠的用量。其中，所述滴定为把称取的脂肪放置于250mL的碘量瓶中，溶解于30mL的三氯甲烷冰乙酸溶液，轻轻振摇溶解样品，加入1.00mL饱和碘化钾溶液，塞紧瓶盖，轻摇30s，避光放置3min。取出加入100mL水，充分混匀，立即用硫代硫酸钠标准溶液进行滴定，滴定至淡黄色，加入1.00mL淀粉指示剂，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为终点，记录硫代硫酸钠标准溶液用量。所述的三氯甲烷冰乙酸溶液为本领域常规的三氯甲烷冰乙酸溶液，较佳地为三氯甲烷40％，冰乙酸60％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述的饱和碘化钾溶液为本领域常规的饱和碘化钾溶液，较佳地，所述饱和碘化钾溶液，碘化钾66.7％，所述百分比为质量百分比。所述的淀粉指示剂为本领域常规的淀粉指示剂，较佳地，所述淀粉指示剂，淀粉1％，所述百分比为质量百分比。
⑤计算：
根据步骤①样品的质量，步骤⑤所述称取的脂肪质量及硫代硫酸钠的用量。计算得出乳粉脂肪的提取率及过氧化值。
脂肪提取率的计算公式为：
p＝m1/(m0×a)×100；
p:脂肪提取率(％)；
m1:提取脂肪的质量(g)；
m0:样品的质量(g)；
a:样品脂肪的理论含量(％)；
乳粉过氧化值的计算公式：
X1＝(v1-v0)×c×0.1269×100/m；
X2＝X1×78.8；
X1:过氧化值(g/100g)；
X2:过氧化值(meq/kg)；
v1:试样消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
v0:空白实验消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
c:硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269:与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘质量；
m:试样的质量(g)；
100:换算系数
78.8:换算系数
表1婴幼儿乳粉脂肪的提取率及过氧化值
表1结果可知，利用本方法3个样品的脂肪提取率均值都高于95％，且实验结果的相对标准偏差约为2％，显示出该方法脂肪的提取率高，并且具有很好的重复性。利用本方法3个样品的脂肪过氧化值均值都高于95％，且实验结果的相对标准偏差在4.5-5.7％，显示出该方法在过氧化值的检测上具有很好的重复性。
试验例2婴幼儿配方奶粉货架期跟踪乳粉脂肪的提取率及过氧化值测定
在光明乳业股份有限公司生产婴儿配方奶粉1批，幼儿配方奶粉1批，包装为铝箔充氮，用于婴幼儿儿配方奶粉的加速实验，乳粉生产一个月后进入加速试验。实验条件为温度42℃，相对湿度75％的加速实验。分别于加速0d、30d和60d取样进行婴幼儿奶粉的过氧化值检测。
检测步骤为：
①待检样品脂肪的一次提取：
将待检样品15g充分溶解于40℃，45g的去离子水中，然后加入270mL正己烷-异丙醇(3:1)的萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，30kHz超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相A；所述待检样品指乳基婴幼儿配方粉；所述的溶解是指在水中形成稳定、均一的体系。所述的正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，为正己烷75％，异丙醇25％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
②待检样品脂肪的二次提取：
将①离心后的沉淀再次与水相混合均匀，然后加入80mL正己烷-异丙醇(3:1)的萃取溶剂萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，30kHz超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相B；其中，所述的混合均匀指沉淀物在水中形成均一的体系。所述的正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，为正己烷75％，异丙醇25％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
③旋转蒸发：
将步骤①所述的有机相A、步骤②所述的有机相B混合，加入35g无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液进行旋转蒸发，得到脂肪提取物。其中，所述无水硫酸钠为本领域常规的无水硫酸钠。所述旋转蒸发为本领域常规的旋转蒸发，蒸发条件为先冷凝水5℃，水浴25℃旋转蒸发旋蒸至溶液体积为10mL左右，再调整水浴为35℃旋转蒸发至恒重。
④滴定：
从步骤③所述的脂肪提取物称取约2.5g的脂肪，用0.002mol/L或0.005mol/L(当消耗0.002mol/L的硫代硫酸钠溶液超过15mL时，需改用0.005mol/L的硫代硫酸钠溶液)硫代硫酸钠标准溶液，进行滴定。记录硫代硫酸钠的用量。其中，所述滴定为把称取的脂肪放置于250mL的碘量瓶中，溶解于30mL的三氯甲烷冰乙酸溶液，轻轻振摇溶解样品，加入1.00mL饱和碘化钾溶液，塞紧瓶盖，轻摇30s，避光放置3min。取出加入100mL水，充分混匀，立即用硫代硫酸钠标准溶液进行滴定，滴定至淡黄色，加入1.00mL淀粉指示剂，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为终点，记录硫代硫酸钠标准溶液用量。所述的三氯甲烷冰乙酸溶液为本领域常规的三氯甲烷冰乙酸溶液，较佳地为三氯甲烷40％，冰乙酸60％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述的饱和碘化钾溶液为本领域常规的饱和碘化钾溶液，较佳地，所述饱和碘化钾溶液，碘化钾66.7％，所述百分比为质量百分比。所述的淀粉指示剂为本领域常规的淀粉指示剂，较佳地，所述淀粉指示剂，淀粉1％，所述百分比为质量百分比。
⑤计算：
根据步骤①样品的质量，步骤⑤所述称取的脂肪质量及硫代硫酸钠的用量。计算得出乳粉脂肪的提取率及过氧化值。
脂肪提取率的计算公式为：
p＝m1/(m0×a)×100；
p:脂肪提取率(％)；
m1:提取脂肪的质量(g)；
m0:样品的质量(g)；
a:样品脂肪的理论含量(％)；
乳粉过氧化值的计算公式：
X1＝(v1-v0)×c×0.1269×100/m；
X2＝X1×78.8；
X1:过氧化值(g/100g)；
X2:过氧化值(meq/kg)；
v1:试样消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
v0:空白实验消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
c:硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘质量；
m:试样的质量(g)；
100:换算系数
78.8:换算系数
检测结果见表2：不同加速期婴幼儿乳粉脂肪的提取率及过氧化值
表2结果可知，婴幼儿乳粉在不同加速实验期，本发明方法提取的脂肪其脂肪提取率较稳定且提取率高，多在95％左右，这间接说明本发明的脂肪提取方法稳定可靠；其过氧化值的检测结果显示，奶粉随着加速储存期的延长，其过氧化值在逐渐增高，说明本发明可以用于婴幼儿乳粉的货架期验证。
对比试验例1萃取溶剂对婴幼儿乳粉脂肪的提取率及过氧化值的影响
以市场购买的婴儿配方奶粉样品1为实验对象。
通过更换萃取溶剂，来验证萃取溶剂的不同对婴儿配方奶粉脂肪提取率和过氧化值检测的影响。待验证的萃取溶剂分别为：正己烷-异丙醇(3:1)，二氯甲烷-甲醇(3:2)，正己烷，石油醚。
所有萃取溶剂的使用量在一次提取时都为260mL，二次提取时都为85mL；其它步骤的操作条件都一致。
具体实施步骤为：
①待检样品脂肪的一次提取：
将待检样品15g充分溶解于40℃，45g的去离子水中，然后加入260mL萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，40kHz超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相A；所述待检样品指乳基婴幼儿配方粉；所述的溶解是指在水中形成稳定、均一的体系。所述的萃取溶剂，为正己烷-异丙醇(3:1)，二氯甲烷-甲醇(3:2)，正己烷，石油醚四种中的一种。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
②待检样品脂肪的二次提取：
将①离心后的沉淀再次与水相混合均匀，然后加入相当于去离子水85mL萃取溶剂萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，40kHz超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相B；其中，所述的混合均匀指沉淀物在水中形成均一的体系。所述的萃取溶剂，为与一次提取时萃取溶剂一致。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
③旋转蒸发：
将步骤①所述的有机相A、步骤②所述的有机相B混合，加入35g无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液进行旋转蒸发，得到脂肪提取物。其中，所述无水硫酸钠为本领域常规的无水硫酸钠。所述旋转蒸发为本领域常规的旋转蒸发，蒸发条件为先冷凝水5℃，水浴25℃旋转蒸发旋蒸至溶液体积为10mL左右，再调整水浴为35℃旋转蒸发至恒重。
④滴定：
从步骤③所述的脂肪提取物称取约2.5g的脂肪，用0.002mol/L硫代硫酸钠标准溶液进行滴定。记录硫代硫酸钠的用量。其中，所述滴定为把称取的脂肪放置于250mL的碘量瓶中，溶解于30mL的三氯甲烷冰乙酸溶液，轻轻振摇溶解样品，加入1.00mL饱和碘化钾溶液，塞紧瓶盖，轻摇30s，避光放置3min。取出加入100mL水，充分混匀，立即用硫代硫酸钠标准溶液进行滴定，滴定至淡黄色，加入1.00mL淀粉指示剂，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为终点，记录硫代硫酸钠标准溶液用量。所述的三氯甲烷冰乙酸溶液为本领域常规的三氯甲烷冰乙酸溶液，较佳地为三氯甲烷40％，冰乙酸60％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述的饱和碘化钾溶液为本领域常规的饱和碘化钾溶液，较佳地，所述饱和碘化钾溶液，碘化钾66.7％，所述百分比为质量百分比。所述的淀粉指示剂为本领域常规的淀粉指示剂，较佳地，所述淀粉指示剂，淀粉1％，所述百分比为质量百分比。
⑤计算：
根据步骤①样品的质量，步骤⑤所述称取的脂肪质量及硫代硫酸钠的用量。计算得出乳粉脂肪的提取率及过氧化值。
脂肪提取率的计算公式为：
p＝m1/(m0×a)×100；
p-脂肪提取率(％)；
m1-提取脂肪的质量(g)；
m0-样品的质量(g)；
a-样品脂肪的理论含量(％)；
乳粉过氧化值的计算公式：
X1＝(v1-v0)×c×0.1269×100/m；
X2＝X1×78.8；
X1:过氧化值(g/100g)；
X2:过氧化值(meq/kg)；
v1:试样消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
v0:空白实验消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
c:硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘质量；
m:试样的质量(g)；
100:换算系数
78.8:换算系数
表3萃取溶剂对婴幼儿乳粉脂肪的提取率及过氧化值的影响
表3结果可知，不同的萃取溶剂会影响奶粉脂肪的提取和过氧化值的测定，四种萃取溶剂正己烷-异丙醇(3:1)，二氯甲烷-甲醇(3:2)，正己烷，石油醚在相同的操作条件下，正己烷-异丙醇(3:1)的提取率最高，正己烷的提取率最低；对过氧化值而言，提取率越高其过氧化值越低，正己烷和石油醚萃取时过氧化值较高，而正己烷-异丙醇(3:1)和二氯甲烷-甲醇(3:2)萃取时过氧化值较低。考虑到较高的脂肪提取率是保证过氧化值准确测定的基础，因为婴幼儿乳粉内的脂肪有部分经过包埋工艺被包埋，如果提取方法不能把包埋的脂肪提取出来，就会造成过氧化值检测值的偏高。综合以上结果，萃取溶剂优选正己烷-异丙醇(3:1)。
一、超声对脂肪提取率及过氧化值的影响
以市场购买的婴儿配方奶粉样品1为实验对象。
通过调整超声功率，来验证超声功率的不同对婴儿配方奶粉脂肪提取率和过氧化值检测的影响。
超声功率设置为4个梯度：0kHz、20kHz、40kHz和60kHz，超声时间都定为60s。一次提取和二次提取的超声条件保持一致。实验的其它条件都保持一致。
具体实施步骤为：
①待检样品脂肪的一次提取：
将待检样品15g充分溶解于40℃，40g的去离子水中，然后加入280mL正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，按试验设置功率超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相A；所述待检样品指乳基婴幼儿配方粉；所述的溶解是指在水中形成稳定、均一的体系。所述的正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，为正己烷75％，异丙醇25％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
②待检样品脂肪的二次提取：
将①离心后的沉淀再次与水相混合均匀，然后加入85mL正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，按试验设置功率超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相B；其中，所述的混合均匀指沉淀物在水中形成均一的体系。所述的萃取溶剂，为与一次提取时萃取溶剂一致。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
③旋转蒸发：
将步骤①所述的有机相A、步骤②所述的有机相B混合，加入35g无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液进行旋转蒸发，得到脂肪提取物。其中，所述无水硫酸钠为本领域常规的无水硫酸钠。所述旋转蒸发为本领域常规的旋转蒸发，蒸发条件为先冷凝水5℃，水浴25℃旋转蒸发旋蒸至溶液体积为10mL左右，再调整水浴为35℃旋转蒸发至恒重。
④滴定：
从步骤③所述的脂肪提取物称取约2.5g的脂肪，用0.002mol/L硫代硫酸钠标准溶液进行滴定。记录硫代硫酸钠的用量。其中，所述滴定为把称取的脂肪放置于250mL的碘量瓶中，溶解于30mL的三氯甲烷冰乙酸溶液，轻轻振摇溶解样品，加入1.00mL饱和碘化钾溶液，塞紧瓶盖，轻摇30s，避光放置3min。取出加入100mL水，充分混匀，立即用硫代硫酸钠标准溶液进行滴定，滴定至淡黄色，加入1.00mL淀粉指示剂，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为终点，记录硫代硫酸钠标准溶液用量。所述的三氯甲烷冰乙酸溶液为本领域常规的三氯甲烷冰乙酸溶液，较佳地为三氯甲烷40％，冰乙酸60％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述的饱和碘化钾溶液为本领域常规的饱和碘化钾溶液，较佳地，所述饱和碘化钾溶液，碘化钾66.7％，所述百分比为质量百分比。所述的淀粉指示剂为本领域常规的淀粉指示剂，较佳地，所述淀粉指示剂，淀粉1％，所述百分比为质量百分比。
⑤计算：
根据步骤①样品的质量，步骤⑤所述称取的脂肪质量及硫代硫酸钠的用量。计算得出乳粉脂肪的提取率及过氧化值。
脂肪提取率的计算公式为：
p＝m1/(m0×a)×100；
p:脂肪提取率(％)；
m1:提取脂肪的质量(g)；
m0:样品的质量(g)；
a:样品脂肪的理论含量(％)；
乳粉过氧化值的计算公式：
X1＝(v1-v0)×c×0.1269×100/m；
X2＝X1×78.8；
X1:过氧化值(g/100g)；
X2:过氧化值(meq/kg)；
v1:试样消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
v0:空白实验消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
c:硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘质量；
m:试样的质量(g)；
100:换算系数
78.8:换算系数
表4超声功率对奶粉脂肪提取和过氧化值的影响
表4结果可知，超声功率会影响奶粉脂肪的提取和过氧化值的测定。超声功率为20kHz和40kHz时，萃取溶剂和奶粉脂肪接触率高，脂肪提取率最高，且20kHz和40kh时过氧化值测定值较为一致。当超声功率达到60kHz时，脂肪提取率有所下降，过氧化值检测值偏低。这是因为，较低的超声功率有利于脂肪与萃取溶剂的充分接触，进而有利于脂肪的提取，而过高的超声功率导致了蛋白质的大量沉淀，脂肪反而被进一步包埋，影响其提取。针对过氧化值，过高的超声功率会使过氧化物加速反应，进而使测定值偏低。综合以上结果，给予奶粉一定的超声可以有效的提高其脂肪的提取率，使过氧化值检测更为准确。
二、旋转蒸发条件的改变对过氧化值的影响
以市场购买的婴儿配方奶粉样品1为实验对象。
通过调整旋转蒸发的条件，来验证旋转蒸发条件的不同对婴儿配方奶粉脂肪过氧化值检测的影响。
旋转蒸发条件的调整主要为旋转蒸发的冷凝水温度和水浴温度的调整，具体调整信息为：⑴冷凝水15℃，水浴35℃；⑵冷凝水5℃，水浴35℃；⑶冷凝水5℃，水浴25℃；⑷先冷凝水5℃，水浴25℃旋蒸至溶液体积为10mL左右，再调整水浴为35℃。实验的其它条件都保持一致。
具体实施步骤为：
①待检样品脂肪的一次提取：
将待检样品15g充分溶解于40℃，45g的去离子水中，然后加入270mL正己烷-异丙醇(3:1)的萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，30kHz超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相A；所述待检样品指乳基婴幼儿配方粉；所述的溶解是指在水中形成稳定、均一的体系。所述的正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，为正己烷75％，异丙醇25％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
②待检样品脂肪的二次提取：
将①离心后的沉淀再次与水相混合均匀，然后加入80mL正己烷-异丙醇(3:1)的萃取溶剂萃取溶剂，室温下600转/分，磁力搅拌15min，30kHz超声60s，7500g离心10min，收集上层有机相得有机相B；其中，所述的混合均匀指沉淀物在水中形成均一的体系。所述的正己烷-异丙醇(3:1)萃取溶剂，为正己烷75％，异丙醇25％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述磁力搅拌为本领域常规的磁力搅拌。所述超声为本领域常规的超声。所述离心为本领域常规的离心。
③旋转蒸发：
将步骤①所述的有机相A、步骤②所述的有机相B混合，加入35g无水硫酸钠干燥过滤，然后取过滤液进行旋转蒸发(蒸发条件依据试验设置而定)，得到脂肪提取物。其中，所述无水硫酸钠为本领域常规的无水硫酸钠。所述旋转蒸发为本领域常规的旋转蒸发。
④滴定：
从步骤③所述的脂肪提取物称取约2.5g的脂肪，用0.002mol/L硫代硫酸钠标准溶液进行滴定。记录硫代硫酸钠的用量。其中，所述滴定为把称取的脂肪放置于250mL的碘量瓶中，溶解于30mL的三氯甲烷冰乙酸溶液，轻轻振摇溶解样品，加入1.00mL饱和碘化钾溶液，塞紧瓶盖，轻摇30s，避光放置3min。取出加入100mL水，充分混匀，立即用硫代硫酸钠标准溶液进行滴定，滴定至淡黄色，加入1.00mL淀粉指示剂，继续滴定并强烈振摇至溶液蓝色消失，即为终点，记录硫代硫酸钠标准溶液用量。所述的三氯甲烷冰乙酸溶液为本领域常规的三氯甲烷冰乙酸溶液，较佳地为三氯甲烷40％，冰乙酸60％的混合液，所述百分比为体积百分比。所述的饱和碘化钾溶液为本领域常规的饱和碘化钾溶液，较佳地，所述饱和碘化钾溶液，碘化钾66.7％，所述百分比为质量百分比。所述的淀粉指示剂为本领域常规的淀粉指示剂，较佳地，所述淀粉指示剂，淀粉1％，所述百分比为质量百分比。
⑤计算：
根据步骤①样品的质量，步骤⑤所述称取的脂肪质量及硫代硫酸钠的用量。计算得出乳粉脂肪的过氧化值。
乳粉过氧化值的计算公式：
X1＝(v1-v0)×c×0.1269×100/m；
X2＝X1×78.8；
X1:过氧化值(g/100g)；
X2:过氧化值(meq/kg)；
v1:试样消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
v0:空白实验消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(mL)；
c:硫代硫酸钠标准溶液的浓度(mol/L)；
0.1269与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液(c＝1.000mol/L)相当的碘质量；
m:试样的质量(g)；
100:换算系数
78.8:换算系数
表5蒸发条件对过氧化值的影响
表5结果可知，当冷凝水温度为15℃，水浴温度为35℃时旋转蒸发的时间较长，所提取的脂肪与氧气接触时间较长水浴温度较高，不利于过氧化值的检测；当冷凝水温度为5℃，水浴温度为35℃时旋转蒸发的时间短，所提取的脂肪在较高的水浴温度下与氧接触，过氧化值的检测结果偏高；当冷凝水温度为5℃，水浴温度为25℃时旋转蒸发的时间长，所提取的脂肪在较低的水浴温度下与氧长时间接触，过氧化值的检测较为准确；当冷凝水温度为5℃，先水浴温度为25℃旋转蒸发至溶液体积为10mL左右，再调整水浴温度为35℃旋转蒸发时间适中，所提取的脂肪在较高的水浴温度下与氧长时间短，过氧化值的检测较为准确。综合以上结果，考虑检测时间及检测准确度，选择旋蒸条件为先冷凝水5℃，水浴25℃旋蒸至溶液体积为10mL左右，再调整水浴为35℃旋转蒸发至恒重。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。