一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法与流程

技术特征：

1.一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：

a、制备阿维拉霉素对照品溶液和样品溶液；

b、标准曲线绘制：将3-5份不同浓度的对照品溶液分别注入HPLC-ELSD进行测定，洗脱方式为梯度洗脱，记录对照品色谱图和峰面积；以A组分峰面积的对数值与相应A组分浓度值的对数进行线性回归；

c、样品测定与结果计算：将样品溶液注入HPLC-ELSD进行测定，记录色谱图和峰面积，并以b步骤所得线性回归方程分别计算样品溶液色谱图中A、B组分及杂质的含量百分比。

2.根据权利要求1所述的一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：HPLC-ELSD进行测定的色谱条件如下：

色谱柱：C185.0μm 4.6*250mm；

柱温：30-40℃；

进样量：10-50μL；

流速：0.9-1.1mL/min；

漂移管温度：115-130℃；

增益系数：1；

气体流速：2.0-2.8L/min；

运行时间：40-50min；

流动相A：甲醇/乙酸铵溶液＝50/50；

流动相B：甲醇/乙酸铵溶液＝80/20。

3.根据权利要求1所述的一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：所述梯度洗脱程序为：

时间minA％B％0703037030373565407030457030

4.根据权利要求1所述的一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：所述阿维拉霉素对照品溶液以乙腈/磷酸氢二铵缓冲液(1/1)为溶剂，浓度为0.16-1.6mg/mL。

5.根据权利要求1或4所述的一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：所述阿维拉霉素样品溶液的制备方法为：取阿维拉霉素加甲醇制成每1mL中含阿维拉霉素0.8-1.3mg的溶液，充分搅拌或超声40-90min，摇匀，滤纸过滤，吸取滤液5mL置培养皿中，通风橱中室温晾干，定量加入乙腈/磷酸氢二铵缓冲液(1/1)，玻璃棒搅拌使溶解均匀，用微孔滤膜过滤，作为阿维拉霉素样品溶液。

6.根据权利要求2所述的一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：所述流动相A和流动相B中所用乙酸铵溶液的浓度为0.04mol/L。

7.根据权利要求2所述的一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：所述流动相A和流动相B的处理方法为：甲醇和乙酸铵溶液分别用有机系和水系微孔滤膜真空抽滤，然后分别按照50/50和80/20的比例混合均匀，分别作为流动相A和流动相B，然后超声脱气15-30min。

8.根据权利要求1所述的一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：所述阿维拉霉素样品溶液为预混剂样品溶液。

9.根据权利要求5所述的一种HPLC-ELSD检测阿维拉霉素预混剂的方法，其特征在于：所述微孔滤膜的孔径为0.45μm。