长余辉-胶体金联用检测新冠病毒的免疫层析试纸条的制作方法

本实用新型属于免疫层析检测技术领域，特别涉及长余辉-胶体金联用检测新冠病毒的免疫层析试纸条。

背景技术：

年末突然爆发的2019新型冠状病毒(sars-cov-2)，使得广大民众还处于惊慌之中，境外区域感染者也在不断增加。感染后仍无症状的患者，也存在感染他人的风险，最有效方式就是对疑似病患进行专业的免疫检测，确认其显性还是隐性。

免疫检测中最常用的即是免疫试纸条，常用的免疫试纸条为荧光免疫层析试纸条与胶体金试免疫层析试纸条。荧光免疫层析试纸条技术是以抗原抗体间特异性识别为基础，以荧光微球作为信号标签，通过荧光信号实现对待测样本中目标分析物精准和快速定量，广泛应用于临床医学领域。基于长余辉发光微球的免疫层析试纸条，由于无激发光等造成的背景信号干扰，能获得更高的信噪比，有利于试纸条的精准检测。

单独的长余辉免疫层析试纸条或胶体金试纸条很难精确判断感染阶段。

技术实现要素：

本实用新型的目的是提供长余辉-胶体金联用检测新冠病毒的免疫层析试纸条，解决了现有荧光试纸条或是胶体金试纸条难以精确判断感染阶段的技术问题。

本实用新型提供的技术方案如下：长余辉-胶体金联用检测新冠病毒的免疫层析试纸条，包括底板，所述底板上依次搭接有样品垫、结合垫、nc膜和吸水纸；所述结合垫上含有s蛋白和/或n蛋白偶联的胶体金、n蛋白偶联的长余辉微球与s蛋白偶联的长余辉微球；

所述nc膜上设有胶体金lgm线、长余辉n-lgg线、长余辉s-lgg线与质控线；所述胶体金lgm线上设有抗人lgm；所述长余辉n-lgg线上设有抗人n蛋白特异性lgg；所述长余辉s-lgg线上设有抗人s蛋白特异性igg；所述质控线上分别设有活性验证物；所述活性验证物用于指示s蛋白和/或n蛋白偶联胶体金、n蛋白偶联长余辉微球与s蛋白偶联长余辉微球的有效性。测试时，于样品垫上滴加待测样品，待测样品中含有人igm、人抗新冠病毒n蛋白lgg与人抗新冠病毒s蛋白lgg。

以上长余辉为现有长余辉材料，为在激发光激发后，关闭光源能发出余辉光。

新冠病毒s蛋白和/或n蛋白为现有的，通过常用偶联方式连接到胶体金上，得到s蛋白和/或n蛋白偶联的胶体金；新冠病毒n蛋白与s蛋白分别通过常用的、公知的偶联方式连接到长余辉微球上，分别得到n蛋白偶联的长余辉微球与s蛋白偶联的长余辉微球。

作为优选地，所述nc膜上并排设有第一通道与第二通道；所述质控线包括作为胶体金质控线的第一质控线与作为长余辉质控线的第二质控线；所述胶体金lgm线与第一质控线依次平行设置于第一通道上；所述长余辉n-lgg线、长余辉s-lgg线与第二质控线依次平行设置于第二通道上。

作为优选地，所述胶体金lgm线、长余辉n-lgg线、长余辉s-lgg线与质控线依次间隔平行设置于nc膜上。质控线包括胶体金质控线与长余辉质控线，两线可以设于同一位置，也可以设于错开位置；所述胶体金质控线为肉眼可见的红色显色条，但是长余辉质控线则需要在特定光线下才能观察到显色，故而设于同一处，也不会造成大的影响。

作为优选地，所述活性验证物为羊抗鸡lgy；所述结合垫上还设有鸡lgy标记的胶体金与鸡lgy标记的长余辉微球。

作为优选地，所述样品垫、结合垫、nc膜和吸水纸呈线性排布；所述nc膜设于底板的中部，所述结合垫与吸水纸分别搭接于nc膜的两侧，所述样品垫搭设于结合垫于远离nc膜一侧。

作为优选地，所述试纸条外侧卡扣有卡壳；所述卡壳包括上卡盖与下卡座。

作为优选地，所述上卡盖于第一通道延长线上设有第一加样孔，并于第二通道延长线上设有第二加样孔。测试时，于样品垫上滴加待测样品，第一加样孔中加入的待测样中含有人igm；第二加样孔中加入的待测样中含有人抗新冠病毒n蛋白lgg与人抗新冠病毒s蛋白lgg。

作为优选地，所述上卡盖上设有用于填写文字标识信息的信息栏；所述信息栏设于远离第一加样孔(也可以是第二加样孔)一侧。

作为优选地，所述上卡盖上设有包括项目信息和/或生产信息的二维码；所述二维码设于远离第一加样孔(也可以是第二加样孔)一侧。

作为优选地，所述试纸条外侧套设有包装袋；所述包装袋在对应所述信息栏和二维码的区域设置为透明；所述包装袋可为真空包装。

有益效果：本实用新型为针对新冠病毒的s蛋白与n蛋白，研制lgm抗体和lgg抗体检测卡试纸条。新冠病毒抗体类型表现为igm，对应是近期的急性感染；表现为igg，则对应为慢性的或者隐形的感染或者是体内有抗病毒抗体，对病毒有免疫力。同时对于图3中的a点和b点，n-igg浓度差不多，需要辅助以s-igg的结果，判断更精确的时期。两种试剂联合使用，可以快速判断出病人是否感染过新冠病毒，并有效区分早期、中期、后期感染，为新冠病毒的检测、防治提供重要依据。

附图说明

下面将以明确易懂的方式，结合附图说明优选实施方式，对长余辉-胶体金联用检测新冠病毒的免疫层析试纸条的上述特性、技术特征、优点及其实现方式予以进一步说明。

图1是本实用新型实施例1中的试纸条；

图2为本实用新型实施例2中的试纸条；

图3为不同感染阶段对应lgm、n-lgg与s-lgg目标物浓度的示意图。

附图标号说明

1-底板；2-样品垫；3-结合垫；4-nc膜；41-胶体金lgm线；42-长余辉n-lgg线、43-长余辉s-lgg线；5-吸水纸。

具体实施方式

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对照附图说明本实用新型的具体实施方式。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图，并获得其他的实施方式。

实施例1

如图1所示，长余辉-胶体金联用检测新冠病毒的免疫层析试纸条包括底板1，底板1上依次搭接有样品垫2、结合垫3、nc膜4和吸水纸5；结合垫3上喷涂有s蛋白和/或n蛋白偶联的胶体金、n蛋白偶联的长余辉微球、s蛋白偶联的长余辉微球、鸡lgy标记的胶体金与鸡lgy标记的长余辉微球；

nc膜4上并排设有第一通道与第二通道；第一通道依次平行设有胶体金lgm线41与第一质控线；第二通道依次平行设有长余辉n-lgg线42、长余辉s-lgg线43与第二质控线；胶体金lgm线41上设有抗人lgm；长余辉n-lgg线42上设有抗人n蛋白特异性lgg；长余辉s-lgg线43上设有抗人s蛋白特异性igg；第一质控线与第二质控线上分别设有羊抗鸡lgy，用于指示s蛋白和/或n蛋白偶联胶体金、n蛋白偶联长余辉微球与s蛋白偶联长余辉微球的有效性。测试时，于样品垫2上滴加待测样品，第一加样孔加入人igm，第二加样孔加入人抗新冠病毒n蛋白lgg与人抗新冠病毒s蛋白lgg。

实施例2

如图2所示，长余辉-胶体金联用检测新冠病毒的免疫层析试纸条包括底板1，底板1上依次搭接有样品垫2、结合垫3、nc膜4和吸水纸5；结合垫3上含有s蛋白和/或n蛋白偶联的胶体金、n蛋白偶联的长余辉微球、s蛋白偶联的长余辉微球、鸡lgy标记的胶体金与鸡lgy标记的长余辉微球；

胶体金lgm线41、长余辉n-lgg线42、长余辉s-lgg线43与质控线(胶体金质控线与长余辉质控线设于同一处)依次间隔平行设置于nc膜4上；胶体金lgm线41上设有抗人lgm；长余辉n-lgg线42上设有抗人n蛋白特异性lgg；长余辉s-lgg线43上设有抗人s蛋白特异性igg；质控线上设有羊抗鸡lgy。测试时，于样品垫2上滴加，待测样品中含有人igm、人抗新冠病毒n蛋白lgg与人抗新冠病毒s蛋白lgg的待测样品。

对于试纸条对新冠病毒进行测试时，对应的检测方法如下：

s1、取实施例1与实施例2制得的试纸条，在加入待测样品后，试样的前沿爬升，从加样孔至质控线，之后再越过质控线。直接观察胶体金显色，胶体金显示肉眼即可观察得的紫红色。本实用新型借用扫描仪器，采集得到胶体金lgm线41上与对应质控线上胶体金的显色深度，并将其进行积分。经计算的到对应的浓度。

s2、经步骤s1之后，将试纸条移至激发环境下，由激发光照射，之后采集长余辉n-lgg线42、长余辉s-lgg线43与对应质控线的长余辉发光，并分别对其进行积分。经计算的到对应的浓度。

s3、将以上步骤s1与步骤s2对应值结合图3，即可得到对应的感染阶段。通过该新型的试纸条检测，可以对所处感染阶段更准确地定位区分。例如，图3中点a和点b，n-igg的浓度是相近的，但是所处的感染时期不同：其中点a偏早中期感染，点b偏中后期感染。结合该新型的试纸条检测的三项指标的检测，获得三种待测目标物浓度信息，便可进行准确定位区分：例如，在只能检测含有lgm时，表示感染处于早期；当只有s-lgg时，表示已经是感染后期了。但是在早期和后期之间，会同时存在n-lgg和s-lgg时，以判断n-lgg和s-lgg谁多谁少，即可得到相对准确的感染时段。

如，检测得知s-igg浓度较低，那么可判断处于点a，为偏早中期感染。

应当说明的是，上述实施例均可根据需要自由组合。以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。