>[0047] 实施例3层析柱
[0048] 玻璃层析柱管的内径1. 0cm，管长度为13cm。娃酸镁粒径范围为150-250ym，石墨 化碳粒径范围为37-125ym。
[0049] 在干燥清洁的玻璃层析柱管中依次装入适量脱脂棉，无水硫酸钠3g，石墨化碳 100mg，娃酸镁3g，无水硫酸钠3g。
[0050] 各组分自成一层，彼此独立，不相混合。
[0051] 实施例4层析柱及农药残留的净化
[0052] 玻璃层析柱管的内径1. 0cm，管长度为13cm。娃酸镁粒径范围为150-250ym，石墨 化碳粒径范围为37-125ym。
[0053] 在干燥清洁的玻璃层析柱管中依次装入适量脱脂棉，无水硫酸钠3g，石墨化碳 100mg，娃酸镁3g，无水硫酸钠3g。
[0054] 各组分自成一层，彼此独立，不相混合。
[0055] 样品上样前，用正己烷6mL预淋洗层析柱。
[0056] 在待净化葱样品中加入3mL正己烷-丙酮（8:2,v/v)超声溶解后上柱净化，重复 三次，再加入6mL正己烷-丙酮（8:2,v/v)洗脱目标化合物。收集所有15mL洗脱液于鸡心 瓶中，旋转蒸发至近干后，氮气吹干，加入50yL内标化合物（最终浓度为0. 15mg/L)，用正 己烧定容至lmL。
[0057] 气相色谱-质谱法测定葱样品经净化后的回收率，结果见图1，本发明层析柱的净 化效果好，化合物的色谱峰清晰可辨。
[0058] 实施例5层析柱及农药残留的净化
[0059] 玻璃层析柱管的内径1. 0cm，管长度为13cm。娃酸镁粒径范围为150-250ym，石墨 化碳粒径范围为37-125ym。
[0060] 在干燥清洁的玻璃层析柱管中依次装入适量脱脂棉，无水硫酸钠3g，石墨化碳 100mg，娃酸镁3g，无水硫酸钠3g。
[0061] 各组分自成一层，彼此独立，不相混合。
[0062] 样品上样前，用正己烧5mL预淋洗层析柱。
[0063] 在待净化姜样品中加入3mL正己烷-丙酮（9:1，v/v)超声溶解后上柱净化，重复 三次，再加入16mL正己烷-丙酮（9:1，v/v)洗脱目标化合物。收集所有25mL洗脱液于鸡 心瓶中，旋转蒸发至近干后，氮气吹干，加入50yL内标化合物（最终浓度为0. 15mg/L)，用 正己烧定容至lmL。
[0064] 实施例6层析柱及农药残留的净化
[0065] 玻璃层析柱管的内径1. 0cm，管长度为13cm。娃酸镁粒径范围为150-250ym，石墨 化碳粒径范围为37-125ym。
[0066] 在干燥清洁的玻璃层析柱管中依次装入适量脱脂棉，无水硫酸钠3g，石墨化碳 100mg，娃酸镁3g，无水硫酸钠3g。
[0067] 各组分自成一层，彼此独立，不相混合。
[0068] 样品上样前，用正己烷10mL预淋洗层析柱。
[0069] 在待净化蒜样品中加入3mL正已烷-乙酸乙酯-丙酮（90:5:5,v/v/v)超声溶解 后上柱净化，重复三次，再加入40mL正已烷-乙酸乙酯-丙酮（90:5:5,v/v/v)洗脱目标化 合物。收集所有49mL洗脱液于鸡心瓶中，旋转蒸发至近干后，氮气吹干，加入50yL内标化 合物（最终浓度为〇. 15mg/L)，用正己烧定容至lmL。
[0070] 实验例1不同石墨化碳用量对样品回收率的影响
[0071] 玻璃层析柱管主体管身的内径1.0cm，管长度为13cm。层析柱管上端杯体内径 3. 8cm，长度6cm。硅酸镁粒径范围为150-250ym，石墨化碳粒径范围为37-125ym。
[0072]在干燥清洁的玻璃层析柱管中依次装入适量脱脂棉，无水硫酸钠3g，石墨化碳，硅 酸镁3g，无水硫酸钠3g;各组分自成一层，彼此独立，不相混合；其中，石墨化碳用量分别为 0. 04g、0. 06g、0. 08g、0.lg、0. 2g、0. 3g和0. 4g;净化方法按照实施例4进行，气相色谱-质 谱法测定葱样品经净化后的回收率。
[0073] 同时，使用Carb-氨基复合柱（购于迪马科技），操作方法参照国标GB/T 19648-2006方法进行葱样品净化，测定样品回收率。
[0074] 结果见表1。结果表明，石墨化碳用量0.lg最好，样品回收率高；石墨化碳用量为 0. 04-0. 08g时，净化效果一般，仍有化合物不能准确定量，表现出回收率偏高等现象；当石 墨化碳用量为0.2-0. 4g，部分样品回收率偏低，可能是由于石墨化碳对农药本身的吸附所 致，尤其是当石墨化碳用量为〇. 4g时，百菌清和虫螨腈完全无法回收和定量。
[0075] 本发明层析柱与商品化的Carb-氨基复合柱的对比结果表明，本发明层析柱的 净化效果更好，所得待进样溶液澄清透明；化合物的色谱峰清晰可辨，样品回收率高；操 作方法更简便、快速，操作效率高；而使用Carb-氨基复合柱，操作方法参照国标GB/T 19648-2006的方法，所得待进样溶液白色浑浊；部分样品回收率低，百菌清和异菌脲无回 收，虫螨腈、氯氰菊酯、溴氰菊酯的峰形差，影响准确定量；同时，操作方法耗时也更长。
[0076] 表1样品回收率（％ )
【主权项】
1. 一种用于复杂基质中多农药残留分析的层析柱，包括层析柱管和填料，其特征在于， 所述填料包括以下各组分：无水硫酸钠，石墨化碳和硅酸镁。
2. 按照权利要求1所述的层析柱，其特征在于，各组分在层析柱管中的顺序为：无水硫 酸钠、石墨化碳、硅酸镁和无水硫酸钠；其中，各组分自成一层，彼此独立，不相混合； 优选的，按照从层析柱管的下端到上端的顺序，依次为无水硫酸钠、石墨化碳、硅酸镁 和无水硫酸钠； 所述层析柱管的内径〇. 6-1. 5cm，长度10-20cm ;优选的，所述层析柱管的内径1. Ocm， 长度13cm。
3. 按照权利要求1或2所述的层析柱，其特征在于，各组分的用量为：无水硫酸钠 2_5g/层，石墨化碳40-400mg/柱，娃酸镁2-6g/柱。
4. 按照权利要求3所述的层析柱，其特征在于，各组分的用量为：无水硫酸钠3g/层， 石墨化碳l〇〇mg/柱，娃酸镁3g/柱。
5. -种应用权利要求1所述层析柱进行复杂基质中多农药残留分析的方法，其特征在 于，包括以下步骤： (1) 用淋洗液预淋洗权利要求1所述层析柱； (2) 在待净化样品中加入洗脱溶剂溶解，制备上样液； (3) 将上样液加到步骤（1)处理的层析柱中； (4) 用洗脱溶剂洗脱，收集洗脱液，即得。
6. 按照权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤（1)所述淋洗液是正己烷；优选的， 所述正己烷的用量为5-10mL。
7. 按照权利要求5所述的方法，其特征在于：按照体积比计，步骤（2)或（4)所述洗脱 溶剂为由正己烷：丙酮按照8 :2的比例组成的混合物，由正己烷：丙酮按照9 :1的比例组 成的混合物，或由正已烷：乙酸乙酯：丙酮按照90 :5 :5的比例组成的混合物；优选的，步骤 (2)和（4)所述洗脱溶剂的总用量为10-50mL。
8. 按照权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤（4)还包括将洗脱液干燥，加入内标 化合物，定容，即可上机分析；优选的，所述干燥是将洗脱液旋转蒸发至近干后，氮气吹干； 所述定容是用正己烧定容至lmL。
9. 按照权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤（2)所述待净化样品是从复杂基质 中提取的含有多种农药残留成分的样品；所述复杂基质为葱、姜或蒜。
10. 按照权利要求5所述的方法，其特征在于，所述多农药残留包括：五氯硝基苯、 a-666、0-666、y-666、6-666、百菌清、乙烯菌核利、三唑酮、氟虫腈、三氯杀螨醇、二甲戊 乐灵、腐霉利、虫螨腈、联苯菊酯、甲氰菊酯、异菌脲、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氟 氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯。
【专利摘要】本发明公开了一种用于复杂基质中多农药残留分析的层析柱及其应用方法，属于农药残留监测领域。本发明首先公开了一种用于复杂基质中多农药残留分析的层析柱，包括层析柱管和填料，其中所述填料包括以下各组分：无水硫酸钠，石墨化碳和硅酸镁。本发明进一步公开了应用所述层析柱进行复杂基质中多农药残留分析的方法，包括以下步骤：(1)用淋洗液预淋洗层析柱；(2)在待净化样品中加入洗脱溶剂溶解，制备上样液；(3)将上样液加到步骤(1)处理的层析柱中；(4)用洗脱溶剂洗脱，收集洗脱液，即得。本发明层析柱的净化效果好，目标化合物的色谱峰清晰可辨，样品回收率高；操作方法简便、快速。
【IPC分类】G01N30-14, G01N30-02
【公开号】CN104614472
【申请号】CN201510078407
【发明人】王新全, 齐沛沛, 徐浩, 章虎, 王祥云, 汪志威, 王强, 李振
【申请人】浙江省农业科学院
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2015年2月13日