小柴胡颗粒复方制剂的指纹图谱检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种中药复方制剂检测技术领域，且特别设及一种小柴胡颗粒复方制 剂的指纹图谱检测方法。
【背景技术】
[0002] 小柴胡颗粒复方制剂是由柴胡、黄琴、姜半夏、党参、生姜、甘草和大要经提取精制 而成，具有解表散热，疏肝和胃的功效。用于外感病，邪犯少阳证，症见寒热往来，胸胁苦满， 食欲不振，屯、烦喜呕，口苦咽干。
[0003] 小柴胡颗粒复方制剂目前《中国药典》现行的质量控制鉴别项仅通过黄琴巧、甘草 对照药材和柴胡对照药材进行薄层鉴别，含量测定选择测定其中一种成分黄琴巧；另外现 行的许多文献报道也仅仅是选择其中两Ξ种药材进行指纹鉴别或者薄层鉴别，含量测定则 选择黄琴和柴胡，仍缺乏对产品质量的全面控制。如果只通过控制柴胡或者黄琴药材品质 来说明整个复方制剂的内在质量，是非常片面的。所W现有的质量标准和其他现有技术中 尚无较好较完整的质量控制方法来全面准确的控制产品质量，不能较好的保证其临床疗 效。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种小柴胡颗粒复方制剂的指纹图谱检测方法，W建立完 整的指纹图谱对小柴胡颗粒复方制剂进行了全面的检测，有利于更为全面有效地控制小柴 胡颗粒复方制剂的质量。
[000引本发明解决其技术问题是采用W下技术方案来实现的。
[0006] -种小柴胡颗粒复方制剂的指纹图谱检测方法，其中包括柴胡、黄琴、党参、生姜、 甘草，首先，取黄琴素、黄琴巧、党参烘巧、柴胡皂巧C、汉黄琴素、6-姜辣素、甘草酸锭、柴胡 皂巧A和柴胡皂巧B2配置成对照品混合溶液。其次，取待测试小柴胡颗粒复方制剂提取制成 供试品溶液。再次，吸取对照品混合溶液注入高效液相色谱仪，记录对照色谱图。接着，吸取 供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录供试品色谱图。然后，比较供试品色谱图与对照色 谱图。
[0007] 进一步地，上述所述的指纹图谱检测方法，所述黄琴素、所述黄琴巧、所述党参烘 巧、所述柴胡皂巧C、所述汉黄琴素、所述6-姜辣素、所述甘草酸锭、所述柴胡皂巧A和所述柴 胡皂巧B2通过加入甲醇进行溶解并定容配置成所述对照品混合溶液。
[0008] 小柴胡颗粒复方制剂进一步地，上述所述的指纹图谱检测方法，配置所述供试品 溶液包括:将所述待测试小柴胡颗粒研成细粉，再加入甲醇，进行超声提取，放冷后过滤，将 过滤后的滤液浓缩至干，残渣用甲醇定容溶解，摇匀后离屯、，取上清液为所述供试品溶液。
[0009] 进一步地，上述所述的指纹图谱检测方法，利用所述高效液相色谱仪记录所述对 照色谱图和所述供试品色谱图，W乙腊为流动相A，W甲醇为流动相B，W低浓度酸水为流动 相C，进行梯度洗脱。
[0010] 进一步地，上述所述的指纹图谱检测方法，吸取所述供试品溶液，注入高效液相色 谱仪，记录所述供试品色谱图包括:取多个批次的所述供试品溶液依次进样，得到多个供试 品色谱图；
[0011] 比较所述供试品色谱图与所述对照色谱图包括：W黄琴素峰为参照峰，计算所述 对照色谱图和每个所述供试品色谱图中多个特征峰的相对保留时间，相对峰面积W及峰面 积比值；W及利用所述相对保留时间，相对峰面积W及峰面积比值比较所述对照色谱图与 所述多个供试品色谱图的相似度，用W判定所述待测试小柴胡颗粒复方制剂是否含有所述 活性成分。
[0012] 进一步地，上述所述的指纹图谱检测方法，所述多个供试品色谱图之间对应的相 对保留时间的相对标准偏差小于等于20%。
[0013] 进一步地，上述所述的指纹图谱检测方法，所述指纹图谱检测方法检测小柴胡颗 粒复方制剂相似度应为0.8-1.0时小柴胡颗粒复方制剂。
[0014] 进一步地，上述所述的指纹图谱检测方法，还包括系统适应性，所述系统适应性包 括：
[0015] 取同一所述供试品溶液，连续多次进样，获得多个供试品色谱图，考察所述多个供 试品色谱图的多个色谱峰的保留时间、峰面积的一致性；
[0016] 取同一所述供试品溶液，分别在多个时间检测，获得多个供试品色谱图，考察所述 多个供试品色谱图的多个色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性；W及
[0017] 再取同一批号的所述待测试小柴胡颗粒复方制剂多次配置成的多个所述供试品 溶液检测，获得多个供试品色谱图，考察所述多个供试品色谱图的多个色谱峰的相对保留 时间、峰面积比值的一致性。
[0018] 进一步地，上述所述的指纹图谱检测方法，所述高效液相色谱的色谱柱的柱溫为 25~45摄氏度，流速为0.9~1. Iml/min，检测波长为190nm~400nm。
[0019] 本发明实施例的提供的小柴胡颗粒复方制剂的指纹图谱检测方法的有益效果是： 选用党参烘巧、黄琴巧、汉黄琴素、柴胡皂巧C，6-姜辣素、甘草酸锭、柴胡皂巧A和柴胡皂巧C 作为小柴胡颗粒复方制剂中的柴胡、黄琴、党参、生姜和甘草五种活性成分的指标成分，配 置对照品溶液和供试品溶液来采用高效液相色谱法测试得到对应的对照色谱图和供试品 色谱图，通过比较对照色谱图和供试品色谱图判定供试品溶液是否含有上述九种对照成 分，从而对小柴胡颗粒复方制剂中的五种配方成分做出定性判断，测试过程简单方便，相对 于现有的小柴胡颗粒复方制剂的质量控制鉴别，运种检测方法对小柴胡颗粒复方制剂的检 测更为全面、准确，能够更为有效地控制小柴胡颗粒复方制剂的质量。
【附图说明】
[0020] 为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附 图作简单地介绍，应当理解，W下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对 范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可W根据运 些附图获得其他相关的附图。
[0021] 图1为本发明实施例的对照品混合溶液与五个批次的供试品溶液的色谱比较图。
【具体实施方式】
[0022] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中 的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建 议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可W通过市售购买获得的常规产 品。
[0023] 中药指纹图谱是指某种中药材或中成药中所共有的具有特征性的某类或者某数 类成分的色谱谱图。在现阶段中药的有效成分绝大多数没有明确的情况下，中药指纹图谱 对于有效控制中药材或者中成药的质量具有重要的意义。
[0024] 下面对本发明实施例的小柴胡颗粒复方制剂的指纹图谱检测方法进行具体说明。
[0025] 本发明实施例的小柴胡颗粒复方制剂活性成分的指纹图谱检测方法选用党参烘 巧、黄琴素、黄琴巧、汉黄琴素、柴胡皂巧C，6-姜辣素、甘草酸锭、柴胡皂巧A和柴胡皂巧B2作 为小柴胡颗粒复方制剂中的五种配方组成(包括柴胡、黄琴、党参、生姜和甘草）的指标成 分。
[0026] 首先，配置对照品混合溶液：即取黄琴素、黄琴巧、党参烘巧、柴胡皂巧C、汉黄琴 素、6-姜辣素、甘草酸锭、柴胡皂巧A和柴胡皂巧B2配置成对照品混合溶液。
[0027] 具体地，选取其中上述其中一种成分，置于容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度， 配成该种成分的对照品储备溶液。参照上述成分对照品储备溶液的配置方法，分别配置其 他8种成分的对照品储备溶液。在进行指纹图谱检测时，将上述黄琴素、黄琴巧、党参烘巧、 柴胡皂巧C、汉黄琴素、6-姜辣素、甘草酸锭、柴胡皂巧A和柴胡皂巧B2对照品储备溶液等量 混合形成对照品混合溶液，采用配置成的对照品混合溶液进行后续操作。
[0028] 在国家标准的小柴胡颗粒复方制剂中上述九种成分的含量具有一个标准值，因 此，上述黄琴素、黄琴巧、党参烘巧、柴胡皂巧C、汉黄琴素、6-姜辣素、甘草酸锭、柴胡皂巧A 和柴胡皂巧B2对照品溶液的浓度比是按照与国家标准小柴胡颗粒复方制剂中对应的成分 的浓度比的换算值相等来进行配置，使得对照品混合溶液与实际的小柴胡颗粒标准制剂的 条件越接近，最终进行测试供试品中是否含有对应成分的结论更加具有可靠性、科学性。
[0029] 其次，配置供试品溶液:即取待测试小柴胡颗粒复方制剂提取制成供试品溶液。
[0030] 具体地，将待测试小柴胡颗粒复方制剂研磨成细粉，取适量，加入甲醇，进行超声 混合，放置冷却后，对溶液进行过滤，将滤液浓缩至干，浓缩后的残渣再用甲醇溶解并定容。 将上述定容溶解后的溶液摇匀，取适量进行离屯、操作，取上清液，即得供试品溶液。
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