[0127]
[0128] 具体如图7及表26所示，a)线性相关系数r2 0.990;b)在6.0-20.0mg/L范围内，线 性绝对偏差不超过±3.Omg/L;在20.1-1000.Omg/L范围内，线性相对偏差不超过± 15.0%， 说明线性合格。
[0129] 表27检测下限
[0130]
[0131] 表28抗原过剩验证 「01321
[0133] 从表24~28可以看出，实施例7的微量白蛋白试剂，在6.0-20.Omg/L范围内，线性 绝对偏差未超过± 3. Omg/L;在20.1-1000.0 mg/L范围内，线性相对偏差未超过± 15.0%，且 检测下限也能达到3.0mg/L(精密度CV<20%)，符合国家相关法规要求，证明线性范围达到 6 .Omg/L~1000 .Omg/L;另外，从抗原过剩验证可以看出，实际抗原过剩范围达到53975mg/ L，满足抗原过剩范围达到50000mg/L的要求。但抗体用量太大，处于标记工艺的极限水平， 且成本过高。
[0134] 实施例8
[0135]本实施例的胶乳颗粒粒径为350nm，每升试剂2标记22ml Dako公司生产的兔抗人 白蛋白多克隆抗体(货号:Q〇328)，使用胶乳免疫比浊中最常规的磷酸盐缓冲液作为试剂1， 采用自动分析仪最常见参数试剂1:试剂2比例250μ1:50μ1，样本预先稀释88倍后加入3μ1稀 释过的样本到反应体系中（即样本与抗体比例为1:15)。
[0136] 使用Hitachi7170全自动生化分析仪，波长为660nm单波长，两点终点法18-34读点 计算，数据如下。
[0137] 表29校准数据
[0138]
[0139] ~表30线性稀释 ' '
' ' ' '
[0140]
L0141J 具体如图8及表30所示，a)线性相关糸数r2 0.990;b)在6.0-20.0mg/L范围内，线 性绝对偏差不超过± 3. Omg/L;在20.1-1000.0 mg/L范围内，线性相对偏差不超过± 15.0 %， 说明线性合格。
[0142] 表31检测下限
[0145] 表32抗原过剩验证[0146]
[0143] -
[0144]
[0147] 从表29~32可以看出，实施例8的微量白蛋白试剂，在6.0-20.Omg/L范围内，线性 绝对偏差未超过± 3. Omg/L;在20.1-1000.0 mg/L范围内，线性相对偏差未超过± 15.0%，且 检测下限也能达到3.0mg/L(精密度CV<20%)，符合国家相关法规要求，证明线性范围达到 6 .Omg/L~1000 .Omg/L;另外，从抗原过剩验证可以看出，实际抗原过剩范围达到53975mg/ L，满足抗原过剩范围达到50000mg/L的要求。但抗体用量太大，处于标记工艺的极限水平， 且成本过高。
[0148] 通过实施例2~4对比可以看出，在抗体用量和抗原抗体比例一定的情况下，提高 胶乳颗粒粒径有利于试剂灵敏度，但因为胶乳试剂稳定性限制，不能无限制提高胶乳粒径， 优选的胶乳粒径范围为150nm~350nm〇
[0149] 通过实施例2对比实施例5,实施例4对比实施例6可以看出，在胶乳颗粒粒径和抗 原抗体比例一定的情况下，提高抗体用量，有利于提高灵敏度，但受到标记工艺以及成本限 制，不能无限制提高抗体量，优选抗体使用体积范围为12m 1~2 2m 1 /L试剂2。
[0150] 通过对比实施例7和实施例8,在胶乳粒径和抗体使用量一定的情况下，可以看出 抗原与抗体比例在增加时，灵敏度提高，但抗原过剩范围下降，反之灵敏度下降，抗原过剩 范围提高，故而，将抗原抗体比例控制在一定范围内能够有效的确保试剂线性和抗原过剩， 作为一种优选，抗原抗体比例范围为1:12~1:22。
[0151] 实施例9
[0152]本实施例的胶乳颗粒粒径为230nm，每升试剂2标记17ml Dako公司生产的兔抗人 白蛋白多克隆抗体(货号:Q〇328)，使用胶乳免疫比浊中最常规的Good's缓冲液作为试剂1， 采用自动分析仪最常见参数试剂1:试剂2比例250μ1:50μ1，样本预先稀释60倍后加入3μ1稀 释过的样本到反应体系中（即样本与抗体比例为1:17)。
[0153]使用Hitachi7170全自动生化分析仪，波长为660nm单波长，两点终点法18-34读点 计算，数据如下。
[0154]表33校准数据 「01551
[0156] 表34线性稀释
[0159] 具体如图9及表34所不，a)线性相夫糸数r2 0.990;b)在6.0-20.0mg/L范围内，线 性绝对偏差不超过±3.Omg/L;在20.1-1000.Omg/L范围内，线性相对偏差不超过± 15.0%， 说明线性合格。[0160] 表35检测下限
[0157] 1
[0161]
[0162] 表36抗原过剩验证
[0163]
[0170]
[0171] ^表38线性稀释 ' '
' ' ' '
[0172]
[0173]
[0174] 具体如图10及表38所示，a)线性相关系数r 2 0.990;b)在6.0-20.0 mg/L范围内，线 性绝对偏差不超过±3.Omg/L;在20.1-1000.Omg/L范围内，线性相对偏差不超过± 15.0%， 说明线性合格。
[0175] 表39检测下限
[0176]
[0177] ~表40抗原过剩验证
[0178]
[0179]
[0180] 从表37~40可以看出，实施例10的微量白蛋白试剂，在6.0-20.Omg/L范围内，线性 绝对偏差未超过± 3. Omg/L;在20.1-1000.0 mg/L范围内，线性相对偏差未超过± 15.0%，且 检测下限也能达到3.0mg/L(精密度CV<20%)，符合国家相关法规要求，证明线性范围达到 6 .Omg/L~1000 .Omg/L;另外，从抗原过剩验证可以看出，实际抗原过剩范围达到53975mg/ L，满足抗原过剩范围达到50000mg/L的要求。
[0181] 实施 11
[0182] 本实施例的胶乳颗粒粒径为230nm，每升试剂2标记17ml GeneTex生产的兔抗人白 蛋白多克隆抗体，使用胶乳免疫比浊中最常规的磷酸盐缓冲液作为试剂1，采用自动分析仪 最常见参数试剂1:试剂2比例250μ1:50μ1，样本预先稀释60倍后加入3μ1稀释过的样本到反 应体系中（即样本与抗体比例为1:17)。
[0183] 使用Hitachi7170全自动生化分析仪，波长为660nm单波长，两点终点法18-34读点 计算，数据如下。
[0184]表41校准数据 「01851
[0186] 表42线性稀释
[0187]
[0188]
[0189] 具体如图11及表42所示，a)线性相关系数r 2 0.990;b)在6.0-20.0 mg/L范围内，线 性绝对偏差不超过±3.Omg/L;在20.1-1000.Omg/L范围内，线性相对偏差不超过± 15.0%， 说明线性合格。
[0190] 表43检测下限 「01911 '[0192]~表44抗原过剩验i!E
' '
[0193]
[0194]
[0195] 从表41~44可以看出，实施例11的微量白蛋白试剂，在6.0-20.0 mg/L范围内，线性 绝对偏差未超过± 3. Omg/L;在20.1-1000.0 mg/L范围内，线性相对偏差未超过± 15.0%，且 检测下限也能达到3.0mg/L(精密度CV<20%)，符合国家相关法规要求，证明线性范围达到 6 .Omg/L~1000 .Omg/L;另外，从抗原过剩验证可以看出，实际抗原过剩范围达到53975mg/ L，满足抗原过剩范围达到50000mg/L的要求。
[0196] 按照上述实施例，便可很好地实现本发明。
【主权项】
1. 一种高性能的人尿液微量白蛋白检测试剂盒，包括试剂2,其特征在于:所述试剂2为 标记有兔抗人白蛋白多克隆抗体的胶乳颗粒溶液； 其中，所述胶乳颗粒粒径范围为150nm~350nm，每升试剂2中抗体的用量为12ml~ 22ml 〇2. 根据权利要求1所述的一种高性能的人尿液微量白蛋白检测试剂盒，其特征在于，所 述试剂盒对样本进行检测时，样本与抗体的体积比为1:12~1:22。3. 根据权利要求1或2所述的一种高性能的人尿液微量白蛋白检测试剂盒，其特征在 于，采用化学偶联方法将兔抗人白蛋白多克隆抗体标记在胶乳颗粒上。4. 根据权利要求1或2所述的一种高性能的人尿液微量白蛋白检测试剂盒，其特征在 于，所述试剂盒是基于胶乳免疫比浊法检测人尿液微量白蛋白，其线性范围为6. Omg/L~ 1000.0mg/L，抗原过剩范围达到50000mg/L。5. 根据权利要求1或2所述的一种高性能的人尿液微量白蛋白检测试剂盒，其特征在 于，所述兔抗人白蛋白多克隆抗体为Dako公司生产的兔抗人白蛋白多克隆抗体，或为 GeneTex公司生产的兔抗人白蛋白多克隆抗体。6. 根据权利要求1或2所述的一种高性能的人尿液微量白蛋白检测试剂盒，其特征在 于，所述试剂盒适用于具有自动样本稀释功能的全自动分析仪器。7. 根据权利要求1或2所述的一种高性能的人尿液微量白蛋白检测试剂盒，其特征在 于，还包括试剂1，所述试剂1为磷酸盐缓冲液、Good's缓冲液或甘氨酸缓冲液。
【专利摘要】本发明公开了一种高性能的人尿液微量白蛋白检测试剂盒。本发明的试剂盒，包括试剂2，所述试剂2为标记有兔抗人白蛋白多克隆抗体的胶乳颗粒溶液；其中，所述胶乳颗粒粒径范围为150nm～350nm，每升试剂2中抗体的用量为12ml～22ml。本发明可替代进口试剂，节约病患开支；同时能够提高检测效率。
【IPC分类】G01N33/68
【公开号】CN105675887
【申请号】CN201610227990
【发明人】骆春梅, 王钊
【申请人】柏荣诊断产品（上海）有限公司
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2016年4月13日