血清白蛋白检测试剂和血清白蛋白检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及检测试剂技术领域，尤其是涉及一种血清白蛋白检测试剂。本发明还 公开了 一种血清白蛋白检测方法。
【背景技术】
[0002] 血清白蛋白（Albumin，ALB)是血浆中含量最多的蛋白质，占血清总蛋白的55%~ 65%，由肝实质细胞合成，广泛存在于人体的血液、淋巴、肌肉组织中，为非专一性的运输蛋 白。血清白蛋白是临床实验室的常规肝功能检测项目，其含量的测定对临床疾病的诊断、治 疗、预后判断都具有非常重要的意义。不同年龄段血清白蛋白的正常值也不相同，新生儿正 常值范围为28-44g/L，14岁后正常值范围为38-54g/L，成人正常值范围为35-50g/L，60岁后 正常值范围为34-48g/L。一般情况下，血清白蛋白增高主要见于血液浓缩而致相对性增高， 如严重脱水和休克、严重烧伤、烫伤等。血清白蛋白降低常见于肝脏疾病、营养不良、肾病综 合征、严重出血等危重病人，故低白蛋白血症常作为营养评价指标、肝脏疾病指标、危重病 人病情及预后指标等。因此，在常规肝功能检查中，可根据血清白蛋白的检查结果来判断疾 病。
[0003] 作为临床实验室的常规肝功能检测项目，血清白蛋白测定结果的准确性尤为重 要。目前，用于临床血清白蛋白检测的方法主要为溴甲酚绿法(BCG法）和溴甲酚紫法(BCP 法）。其中，BCG法缺乏特异性，在血液透析等白蛋白/球蛋白比例降低的患者中结果偏高； BCP法灵敏度低，因不能检测到与胆红素共价结合的白蛋白导致结果偏低。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种血清白蛋白检测试剂，它具有特异性强，且检测快速、灵 敏的特点。本发明还公开了 一种血清白蛋白检测方法。
[0005] 本发明所采用的技术方案是：血清白蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2和校准 品，
[0006] 所述试剂R1包括:pH为5.0-9.0、浓度为20-500mmol/L的缓冲液，质量浓度为0.01-2.00g/L的表面活性剂，质量浓度为0.10-12. OOg/Ι的反应促进剂，浓度为50-500mmol/L的 电解质，质量浓度为〇. 10-10. 〇〇g/L的防腐剂，以及质量浓度为0.10-20.00g/L的稳定剂；
[0007] 所述试剂R2包括:pH为6.0-9.0、浓度为20-300mmol/L的缓冲液，质量浓度为2.00-100.00g/L的抗人白蛋白抗体，浓度为50-500mmol/L的电解质，质量浓度为0.10-10.00g/L 的防腐剂，以及质量浓度为〇. 10-20.00g/L的稳定剂；
[0008] 校准品包括：pH为6.0-9.0、浓度为20-300mmol/L的缓冲液，质量浓度为3.00-6.00g/L的人白蛋白，浓度为50-500mmol/L的电解质，质量浓度为0.10-10.0 Og/Ι的防腐剂， 以及质量浓度为〇. 10-20.00g/L的稳定剂。
[0009] 所述缓冲液为Tri s缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、磷酸缓冲液中的一种。
[0010] 所述表面活性剂为Tween20、Tween40、Span20、Span40、Triton X-100中的一种。
[0011] 所述反应促进剂为聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000中 的一种。
[0012] 所述电解质为正价金属离子中的一种或多种。
[0013] 所述防腐剂为叠氮钠、叠氮锂、庆大霉素、山梨酸盐类、Proclin 200中的一种。
[0014] 所述稳定剂为蛋白质、金属络合剂、助悬剂中的一种，其中，该蛋白质为牛血清蛋 白或明胶，该金属络合剂为HEDTA、CMOM、CMOS中的一种，该助悬剂包括葡萄糖、乳糖、蔗糖、 甘油中的一种。
[0015]血清白蛋白检测方法，
[0016] 所用检测仪器为自动生化分析仪；
[0017] 分析方法为:两点终点法；
[0018]反应方向为:上升反应；
[0019] 校准方式为:Spline;
[0020] 测定波长为：340nm;
[0021] 测定温度为:37°C;
[0022] 样本：Rl:R2 = 6yl:250yl:50yl;
[0023] 操作方法为:6μ1样本和250μ1试剂R1混匀后于37°C孵育3-5min，读取第1读数点吸 光度A1，随即加入50μ1试剂R2，混匀后37°C孵育5min，读取第2读数点吸光度A2，计算A2-A1 差值，根据校准曲线计算样本中血清白蛋白含量；
[0024] 所述校准曲线由不同浓度系列的校准品，按照血清白蛋白检测方法规定的步骤， 测定吸光度，以校准品浓度为横坐标，反应吸光度为纵坐标，绘制而成；
[0025] 其中，R1为前述的试剂R1，R2为前述的试剂R2,校准品为前述的校准品。
[0026] 本发明和现有技术相比所具有的优点是：
[0027] 1、检测快速:适用自动生化分析仪，满足批量检测需求，检测快速简便；
[0028] 2、检测灵敏度高:试剂缓冲液、表面活性剂等成分的配比提高了反应的灵敏度；
[0029] 3、特异性强:采用抗原-抗体特异结合方式测定结果，增强反应特异性，提高检测 结果的准确性；
[0030] 4、线性范围宽:为3-100g/L，涵盖各个年龄段的正常值范围，基本满足临床需要；
[0031] 5、准确度高:采用优化的试剂配比，并溯源至国际参考物质IRMM ERM DA470k，与 进口试剂的相关性达到〇. 9961，保证测定结果的准确度；
[0032] 6、试剂稳定:试剂各成分配比优化，试剂在2_8°C密闭条件下可稳定18个月，开瓶 稳定性可达30天。
【附图说明】
[0033]下面结合附图和实施例对本发明进一步说明：
[0034] 图1是本发明的实施例中血清白蛋白检测方法的操作步骤；
[0035] 图2是本发明的血清白蛋白试剂和罗氏比对试剂/方法相关性；
[0036]图3是本发明的白蛋白试剂线性范围测定；
[0037]图4是本发明的白蛋白的溯源性。
【具体实施方式】 [0038] 实施例1
[0039 ]血清白蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2和校准品。具体的讲：
[0040] 试剂R1包括：ρ Η值5.0的缓冲液2 0 mm ο 1 / L，表面活性剂0.01 g / L，反应促进剂 12 · 00g/L，电解质50mmol/L，防腐剂10 · 00g/L，稳定剂0 · 10g/L。
[0041] 试剂R2包括：pH值6.0的缓冲液20mmol/L，抗人白蛋白抗体2.00g/L，电解质 50mmol/L，防腐剂10.00g/L，稳定剂 0· 10g/L。
[0042] 校准品包括:pH值6 · 0的缓冲液20mmo 1 /L，人白蛋白3 · 00g/L，电解质50mmo 1 /L，防 腐剂10 · 00g/L，稳定剂0 · 10g/L。
[0043] 其中，缓冲液采用Tris缓冲液，表面活性剂采用TWeen20,反应促进剂采用聚乙二 醇2000，电解质采用氯化钠，防腐剂采用叠氮钠，稳定剂采用牛血清白蛋白，抗人白蛋白抗 体采用羊抗人白蛋白抗体。
[0044]校准品用缓冲液稀释成浓度为3 · 00g/L、2 · 25g/L、1 · 50g/L、0 · 75g/L、0 · 38g/L、 O.OOg/L的系列校准品。
[0045]见图1所示，采用前述血清白蛋白检测试剂进行血清白蛋白检测的方法为：
[0046]所用检测仪器为自动生化分析仪。比如，采用日立7020自动生化分析仪。
[0047]分析方法:两点终点法;反应方向：上升反应;校准方式:Spline;测定波长:340nm; 测定温度：37°C;样本:Rl:R2 = 6yl:250yl:50yl。
[0048] 操作方法:6μ1样本和250μ1试剂R1混匀后于37°C孵育3-5min，读取第1读数点吸光 度A1，随即加入50μ1试剂R2,混匀后37°C孵育5min，读取第2读数点吸光度A2,计算A2-A1差 值，根据校准曲线计算样本