/L，稳定剂7 · 00g/L。
[0139] 其中，缓冲液采用磷酸缓冲液，表面活性剂采用TWeen20,反应促进剂采用聚乙二 醇2000,电解质采用氯化镁，防腐剂采用叠氮锂，稳定剂采用甘油，抗人白蛋白抗体采用羊 抗人白蛋白抗体。
[0140] 校准品用缓冲液稀释成浓度为3 · 00g/L、2 · 25g/L、1 · 50g/L、0 · 75g/L、0 · 38g/L、 O.OOg/L的系列校准品。
[0141] 见图1所示，采用前述血清白蛋白检测试剂进行血清白蛋白检测的方法为：
[0142] 所用检测仪器为自动生化分析仪。比如，采用日立7060自动生化分析仪。
[0143] 分析方法:两点终点法;反应方向：上升反应;校准方式:Spl ine;测定波长:340nm; 测定温度：37°C;样本:Rl:R2 = 6yl:250yl:50yl。
[0144] 操作方法:6μ1样本和250μ1试剂R1混匀后于37°C孵育3-5min，读取第1读数点吸光 度A1，随即加入50μ1试剂R2,混匀后37°C孵育5min，读取第2读数点吸光度A2。计算A2-A1差 值，根据校准曲线计算样本中血清白蛋白含量。
[0145] 前述校准曲线由前述不同浓度系列的校准品，按照血清白蛋白检测方法规定的步 骤，测定吸光度，以校准品浓度为横坐标，反应吸光度为纵坐标，绘制而成。
[0146] 抗干扰性测试
[0147] 干扰效应结果如下：
[0148]当血清白蛋白浓度为10g/L(异常），胆红素< 60mg/dL，脂肪乳< 750mg/dL，血红蛋 白 < 750mg/dL〇
[0149] 当血清白蛋白浓度为40g/L(正常），胆红素< 60mg/dL，脂肪乳< 750mg/dL，血红蛋 白 < 750mg/dL〇
[0150] 效果例
[0151] 1.本发明试剂与其他品牌试剂比较
[0152]本发明试剂和某厂家BCG法试剂进行性能分析比较，分别比较其线性范围、精密 度、有效期、稳定性、相对误差等。精密度测定:本发明试剂与某厂家试剂分别测定血清浓度 正常和异常的两个样本，批内精密度由lh内重复测定20次等到结果计算;批间精密度由每 天分别测定1次，连续测定20d，计算批间精密度。相对误差测定：用已知浓度的血清(48.6g/ L)检测20次，计算出检测结果平均值，本发明试剂(免疫比浊法)检测值为49.2g/L，结果偏 离已知浓度的1.3% ;某厂家试剂(BCG法)检测值为53.7g/L，结果偏离已知浓度的10.4%。 结果如表1所示。
[0153] 表1本发明试剂与其他品牌试剂比较
[0154]
[0155] 2.本发明方法学与其他方法学比较
[0156] 本发明方法学(免疫比浊法)和溴甲酚绿法(BCG法，某厂家方法学）同时测定167例 样本，其中低值异常组50例（<35g/L)，正常组75例（35~54g/L)，高值异常组42例（> 54g/ L)，结果如下表，两种方法学之间差异无统计学意义(P>0.05)，如表2所示。研究表明，溴甲 酚绿(BCG)法中溴甲酚绿会与非白蛋类蛋白质结合而导致测定结果偏高（肖晋，等.免疫透 射比浊法与溴甲酚绿法检测血清白蛋白的结果对比分析[J].吉林医学，2013,34(15): 2893-2894.)，因此免疫比浊法可能更接近真值。
[0157] 表2两种方法学白蛋白检测结果的比较(g/L)
[0158] Lu I ay」 见团J/yT不，,夺汉明HS H tfJ
纨'1土氾困见，；/如-iUUg/ L,?[显食T千Wf权tfJ 正常值范围（新生儿正常值范围为28-44g/L，14岁后正常值范围为38-54g/L，成人正常值范 围为35-50g/L，60岁后正常值范围为34-48g/L。），基本满足临床需要；
[0160] 准确度测试
[0161] 见图4所示，采用优化的试剂配比，并溯源至国际参考物质IRMM ERM DA470k，保证 了测定结果的准确度;见图2所示，与进口试剂的相关性达到0.9961，保证了测定结果的准 确度。
[0162] 以上所述仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用 本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术 领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
【主权项】
1. 血清白蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2和校准品，其特征在于： 所述试剂1?1包括4!1为5.0-9.0、浓度为20-500111111 〇1/1^的缓冲液，质量浓度为0.01- 2. OOg/L的表面活性剂，质量浓度为0.10-12. OOg/Ι的反应促进剂，浓度为50-500mmol/L的 电解质，质量浓度为〇. 10-10. 〇〇g/L的防腐剂，以及质量浓度为0.10-20.00g/L的稳定剂； 所述试剂R2包括：pH为6.0-9.0、浓度为20-300mmol/L的缓冲液，质量浓度为2.00-100.00g/L的抗人白蛋白抗体，浓度为50-500mmol/L的电解质，质量浓度为0.10-10.00g/L 的防腐剂，以及质量浓度为〇. 10-20.00g/L的稳定剂； 校准品包括:pH为6.0-9.0、浓度为20-300mmol/L的缓冲液，质量浓度为3.00-6.00g/L 的人白蛋白，浓度为50-500mmol/L的电解质，质量浓度为O.lO-lO.OOg/1的防腐剂，以及质 量浓度为〇. 10-20.00g/L的稳定剂。2. 根据权利要求1所述的血清白蛋白检测试剂，其特征在于:所述缓冲液为Tris缓冲 液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、磷酸缓冲液中的一种。3. 根据权利要求1所述的血清白蛋白检测试剂，其特征在于：所述表面活性剂为 Tween20、Tween40、Span20、Span40、Triton X-100中的一种。4. 根据权利要求1所述的血清白蛋白检测试剂，其特征在于:所述反应促进剂为聚乙二 醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000中的一种。5. 根据权利要求1所述的血清白蛋白检测试剂，其特征在于:所述电解质为正价金属离 子中的一种或多种。6. 根据权利要求1所述的血清白蛋白检测试剂，其特征在于:所述防腐剂为叠氮钠、叠 氮锂、庆大霉素、山梨酸盐类、Proclin 200中的一种。7. 根据权利要求1所述的血清白蛋白检测试剂，其特征在于:所述稳定剂为蛋白质、金 属络合剂、助悬剂中的一种，其中，该蛋白质为牛血清蛋白或明胶，该金属络合剂为HEDTA、 CMOM、CMOS中的一种，该助悬剂包括葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘油中的一种。8. 血清白蛋白检测方法，其特征在于： 所用检测仪器为自动生化分析仪； 分析方法为:两点终点法； 反应方向为:上升反应； 校准方式为:Spline; 测定波长为:340nm; 测定温度为:37°C; 样本:R1 :Κ2 = 6μμμ; 操作方法为:μ样本和μ试剂混匀后于°C孵育，读取第读数点吸光度，随即加入μ试剂，混 匀后°C孵育，读取第读数点吸光度，计算差值，根据校准曲线计算样本中血清白蛋白含量； 所述校准曲线由不同浓度系列的校准品，按照血清白蛋白检测方法规定的步骤，测定 吸光度，以校准品浓度为横坐标，反应吸光度为纵坐标，绘制而成； 其中，为权利至中任一项所述的试剂，为权利要求至中任一项所述的试剂，校准品为权 利要求至中任一项所述的校准品。
【专利摘要】本发明公开了一种血清白蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2和校准品，试剂R1包括：缓冲液、表面活性剂、反应促进剂、电解质、防腐剂、稳定剂；试剂R2包括：缓冲液、抗人白蛋白抗体、电解质、防腐剂、稳定剂；校准品包括：缓冲液、人白蛋白、电解质、防腐剂、稳定剂。本发明的优点是：特异性强，且检测快速、灵敏的特点。本发明还公开了一种血清白蛋白检测方法。
【IPC分类】G01N33/68
【公开号】CN105548560
【申请号】CN201510967813
【发明人】林清菁, 范华, 王剑
【申请人】宁波普瑞柏生物技术有限公司
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月18日