一种替格瑞洛中异构体杂质含量的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于化学中的分析检测领域，具体涉及一种替格瑞洛中异构体杂质含量的 检测方法。
【背景技术】
[0002] 替格瑞洛(Ticagrelor商品名：BRILINTA)，化学名为（lS，2S，3R，5S)-3-[7-[[(lR， 23)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基]氨基]-5-丙硫基-3!1-1，2,3-三唑基[4,5-(1]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基）-1，2_环戊烷二醇（分子式：C 23H28F2N604S)，是由阿斯利康制药有限公司 (AstraZeneca AB)开发的一种选择性的二磷酸腺苷(ADP)受体诘抗剂，通过激活P2Y12-受 体，可逆性的阻滞ADP介导的血小板活化和聚集。
[0003] 由于受生产工艺和控制水平的限制，生产所得的替格瑞洛产品中，往往存在有多 种杂质，例如，（11?，21?，35,51〇-3-[7-{[(11?，25)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基]氨基}-5-丙硫 基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基）环戊烷-1,2-二醇、（1R，2R，3S， 51〇-3-[7-{[(13,210-2-(3,4-二氟苯基)环丙基]氨基}-5-丙硫基-3!1-1，2,3-三唑[4,5-(1] 嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基)环戊烷-1,2-二醇、（lS，2S，3R，5S)-3-[7-{[(lS，2R)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基]氨基}-5_丙硫基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基） 环戊烧-1,2-二醇等（参见：替卡格雷杂质列表，http://wenku.baidu.com/view/ 69885bd8fd0a79563cle72aa.html?re = view，公开时间为2014年 10月 17日），严重影响替格 瑞洛的产品质量和患者的用药安全。
[0004] 然而，对于检测替格瑞洛而言，目前仅有一篇专利文献CN 104634887A检测了替格 瑞洛中的一种杂质含量：（13,25,31?，55)-3-(7-((15,21〇-2-(3,4-二氟苯基)环丙胺基)-5-(丙硫基)-3H- [ 1，2，3 ]三唑[4，5-d ]嘧啶-3-基)-5- (2-羟基乙氧基)环戊烷-1，2-二醇，很难 全面地反映替格瑞洛的产品质量。
[0005] 为了对替格瑞洛中更多的杂质进行检测，同时，也为了更全面地监控替格瑞洛的 产品质量，进一步保证患者的用药安全，需要发明一种新的检测方法。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种替格瑞洛中异构体杂质含量的检测方法。
[0007] 本发明提供的一种替格瑞洛中异构体杂质含量的检测方法，它包括以下步骤：
[0008] a、取异构体杂质的对照品，制备对照品溶液；
[0009] b、取待检的替格瑞洛样品，制备供试品溶液；
[0010] c、采用高效液相色谱方法分别对对照品溶液、供试品溶液进行检测，所述高效液 相色谱方法的检测条件为：
[0011] 色谱柱：固定相为直链淀粉-三(3，5-二甲苯基氨基甲酸酯）；
[0012] 流动相:正己烷-乙醇溶液，正己烷与乙醇的体积比为88% :12%~92% :8%，所述 的乙醇中含有〇.1%~〇.5%1111/1111的二乙胺；
[0013] 检测波长：200nm ~300nm;
[0014] d、按外标法以峰面积计算，或者根据峰面积与浓度之间的标准曲线计算，得到替 格瑞洛样品中的异构体杂质含量。
[0015]进一步的，所述的异构体杂质至少包括（lR，2R，3S，5R)-3-[7-{[(lR，2S)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基]氨基}-5_丙硫基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基） 环戊烧_1，2-二醇。
[0016] 进一步的，所述的异构体杂质至少包括（lR，2R，3S，5R)-3-[7-{[(lR，2S)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基]氨基}-5_丙硫基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基） 环戊烧 _1，2-二醇和（1R,2R，3S,5R)-3_[7_{ [ (IS,2R)_2_(3，4_二氣苯基)环丙基]氨基}_5_ 丙硫基-3H-1，2，3-三唑[4，5-d ]嘧啶-3-基]-5-( 2-羟乙氧基)环戊烷-1，2-二醇；
[0017] 优选的，所述的异构体杂质同时包括（lR，2R，3S，5R)-3-[7-{[(lR，2S)-2-(3,4-: 氟苯基)环丙基]氨基}-5_丙硫基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基)环 戊烧-1，2-二醇、（1R, 2R, 3S，5R)-3_[7_{ [ (IS，2R)_2_(3，4_二氣苯基)环丙基]氨基}_5_丙 硫基-3H-1，2，3-三唑[4，5-d ]嘧啶-3-基]-5- (2-羟乙氧基)环戊烷-1，2-二醇和（1S，2S，3R， 5S)-3_[7_{ [ (IS, 2R)_2_(3，4_ 二氣苯基)环丙基]氛基}_5_ 丙硫基-3H-1，2，3_ 二唑[4,5_d] 嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基)环戊烷-1，2-二醇。
[0018] 进一步的，步骤a中，制备对照品溶液的溶剂为步骤c中的流动相;步骤b中，制备供 试品溶液的溶剂为步骤c中的流动相。
[0019] 进一步的，步骤c中，所述的色谱柱为CHIRALPAK^_AD-H，长度为250mm，内径为 4 · 6mm，填料的粒径为5μηι。
[0020] 进一步的，步骤C中，所述色谱柱的柱温为25°C~35°C。
[0021] 进一步的，步骤c中，正己烷与乙醇的体积比为9 0 % : 10 % ;所述的乙醇中含有 0· 2%ml/ml的二乙胺。
[0022] 进一步的，步骤c中，所述流动相的流速为0.9ml/min~1. lml/min;优选的，所述流 动相的流速为1 .〇ml/min。
[0023]进一步的，步骤c中，所述的检测波长为230nm~250nm;优选的，所述的检测波长为 242nm〇
[0024] 进一步的，步骤c中，进样体积为10μ1~50μ1;优选的，进样体积为20μ1。
[0025] 本发明提供了一种替格瑞洛中异构体杂质含量的新检测方法，各色谱峰之间的分 离度高，相互之间无干扰，可以同时实现对杂质Β和杂质Α、杂质C的准确检测，而且，操作简 便，容易控制，检测成本低，并具有良好的线性关系、专属性、精密度、稳定性、灵敏度和重复 性，加样回收率高，检测结果准确、可靠，为监控替格瑞洛药物中异构体杂质的含量提供了 一种行之有效的检测方法，进一步保证了替格瑞洛的产品质量和患者的用药安全。
[0026] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离 本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0027]以下通过实施例形式的【具体实施方式】，对本发明的上述内容再作进一步的详细说 明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容 所实现的技术均属于本发明的范围。
【附图说明】
[0028]图1为本发明检测条件下杂质A对照品溶液的HPLC图。
[0029]图2为本发明检测条件下杂质B对照品溶液的HPLC图。
[0030]图3为本发明检测条件下杂质C对照品溶液的HPLC图。
[0031]图4为本发明检测条件下杂质A、杂质B、杂质C混合溶液的HPLC图。
[0032]图5为本发明检测条件下替格瑞洛供试品溶液的HPLC图。
[0033]图6为本发明检测条件下替格瑞洛和杂质A、杂质B、杂质C混合溶液的HPLC图。
[0034]图7为对比试验1色谱条件下杂质A对照品溶液的HPLC图。
[0035]图8为对比试验1色谱条件下杂质B对照品溶液的HPLC图。
[0036]图9为对比试验1色谱条件下杂质C对照品溶液的HPLC图。
[0037]图10为对比试验1色谱条件下替格瑞洛供试品溶液的HPLC图 [