牛羊无动物源冻精稀释液及牛羊冷冻精液的制作方法

文档序号:384220阅读:578来源:国知局
专利名称:牛羊无动物源冻精稀释液及牛羊冷冻精液的制作方法
技术领域
本发明涉及生物与化学科学,特别提供了一种用无动物来源成份配制 的牛羊精液稀释液以及利用此种稀释液制作牛羊冷冻精液的方法。
背景技术
现有技术中,动物的各种精液稀释液的成份组成还没有摆脱完全离开 动物来源成份的发展程度,并且精液稀释液的保存方法主要还停留在现用 现配或冷冻保存的水平。在上述的这种状态下,必然存在着通过稀释液中 的动物来源成份在动物与人类之间传播各种疫病的潜在风险。过于简单的 单一的精液稀释液的保存方法,在很大程度上限制了动物人工授精技术的 推广,增加了配制稀释液的劳动量,浪费了精液稀释液,影响了劳动生产 率的提高。
因此,人们期望获得一种用无动物来源成份配制的动物(例如牛羊) 精液稀释液以及利用此种稀释液制作动物(例如牛羊)冷冻精液的方法。

发明内容
本发明的目的在于从非动物来源成份中筛选出有效物质配制动物的精 液稀释液,杜绝传统稀释液传播疫病的潜在危险;并且改进了传统的精液 稀释液的保存方法,延长了精液稀释液的保存时间,简化了精液稀释液的 使用方法,填补了现有技术在此方面的空白。本发明所述牛羊无动物源冻精稀释液,其特征在于所述稀释液中至 少包含有如下成分之一或其组合海藻糖、丙二醇、大豆卵磷脂、可溶性 大豆蛋白质、氮一三羟甲基氨基乙垸磺酸、十二酰硫酸钠。
优选方案中,在所述稀释液中还包含有如下成分之一或其组合乳糖、果 糖、乙二醇、乙二胺四乙酸、三羟甲基胺基甲烷;
进一步优选方案在所述稀释液中还包含有如下成分之一或其组合胆固 醇、赤藓糖醇、醋铬酸、磷脂酰丝氨酸、大豆异黄酮;
在所述稀释液中还包含有用于提高解冻后的精子活力、延长精子解冻后存 活时间的如下成分之一或其组合氯前列烯醇、维生素B12、咖啡因、维生 素E亚硒酸钠注射液、蔗糖、磷酸盐缓冲液、氮一三羟甲基氨基乙烷磺酸
(TES)、维生素Bl、VE、PG、乙二胺四乙酸(EDTA)、三羟甲基胺基甲烷(Tris)、 磷酸盐缓冲液(PBS.无无犊牛血清BSA成份)、半胱氨酸、甘露醇、青霉素、 链霉素。
优选方案中,所述牛羊无动物源冻精稀释液中所包含的各种成分及其 含量可以为(以下所述的各种物质质量/体积为相对质量/体积比例关 系)果糖蔗糖乳糖海藻糖乙二胺四乙酸(EDTA):三羟甲基胺基 甲烷(Tris):氮一三羟甲基氨基乙烷磺酸(TES):醋酸铬半胱氨酸=
(0. 5g 1.4g): (1.5g 5g): (2g 5g): (0. 3g lg): (lg 2. 5g): (1.5g 4g): (0.001g 0.002g): (0.001g 0.01g): (0.01g 0.2g);
磷酸盐缓冲液(PBS.无犊牛血清BSA成份)VE亚硒酸钠注射溶液磷酸 盐缓冲液乙二醇丙二醇赤蓟糖醇甘露醇胆固醇=(lml 3ml):
(0. lml lml): (lml 6ml): (1ml 5ml): (1. 5ml 7ml): (0. lml 1. 5ml):(0. lml 1.5ml): (0. lml lml)。
本发明所述牛羊无动物源冻精稀释液的配制要求具体可以是(以下所 述的各种物质质量/体积为相对质量/体积比例关系)-
第一步,用电子天平称取果糖0.85g、蔗糖3.10g、乳糖3.75g、海藻 糖0.58g、乙二胺四乙酸(EDTA) 1.80g、三羟甲基胺基甲烷(Tris) 2. 45g、 氮一三羟甲基氨基乙烷磺酸(TES) 0.015g、醋酸铬0.003g、磷酸盐缓冲液 (PBS.无无犊牛血清BSA成份)2.0ml、磷酸盐缓冲液3.0ml、半胱氨酸 0.05g、乙二醇或丙二醇或二者的组合共6.0ml、赤蓟糖醇0.50ml、甘露醇 0.50ml、胆固醇0.30ml;加入双蒸馏水3. Oml后将上述物质充分混合,加 热煮沸后立即冷却,再加入双蒸馏水,使原有物质保持加热煮沸前的体积;
第二步,将上述物质充分混匀后,向通过上述过程获得的混合液中再 加入以下物质:磷脂酰丝氨酸2.18g、可溶性大豆蛋白2.00g、大豆卵磷脂 0.25g、 VB10.18g、 VB120.09g、咖啡因0. Olg、氯前列烯醇0.013g、十二酰硫 酸钠0.50ml、青霉素10万单位、链霉素0.1g;
第三步,将上述物质加入后充分混合,然后放入5。C 1(TC的避光环境 中静置20小时以上,取其上清液,弃去容器底部的不溶成份,在温度为2 °C 8°C、排出空气、避光的条件下密封保存。
本发明牛羊无动物源冻精稀释液的主要成份为糖源、缓冲剂、醇类低 温保护剂、卵磷脂类物质、可溶性大豆蛋白质、B族维生素、氯前列烯醇、 咖啡因、氮一三羟甲基氨基乙烷磺酸及抗菌素等多种药品。其中必要成份为海藻糖、乳糖、果糖、丙二醇、乙二醇、乙二胺四乙酸、三羟甲基胺 基甲垸、十二酰硫酸钠、大豆卵磷脂、可溶性大豆蛋白质、氮一三羟甲基 甲基氨基乙烷磺酸等成份
与以前其它国内稀释液所不同之处在于,首次在稀释液中使用了海藻 糖、丙二醇、胆固醇、赤藓糖醇、大豆卵磷脂、可溶性大豆蛋白质、氮一 三羟甲基氨基乙烷磺酸、十二酰硫酸钠、醋铬酸、磷脂酰丝氨酸、大豆异 黄酮等成份。
而氯前列烯醇、维生素Bi2、咖啡因、维生素E亚硒酸钠注射液等微量 成份及蔗糖、磷酸盐缓冲液的使用,起到了进一步提高了解冻后的精子活 力、延长了精子解冻后的存活时间的作用。
乙二醇、丙二醇、胆固醇、大豆卵磷脂、磷脂酰丝氨酸、大豆异黄酮 等成份的添加提高了精子的耐冻性能,减少了精子在冷冻过程中顶体的破 坏程度,明显减轻了用甘油对精子的毒副作用,最终对提高冻配母羊的受 胎率起到了非常积极的作用。
牛羊细管冻精稀释液的主要特征是取代了传统的稀释液中的卵黄、奶 类、蜂蜜等动物来源的成份,使所研制的牛羊冻精稀释液的成份中不含上 述种类物质,但用于制作细管冻精的使用效果与原来传统配的使用效果无 显著差异。
由于所发明的无动物来源的细管冻精稀释液的原液为浓縮液,渗透压 较高,加之由于浓縮液中含有的抗菌素类药品在稀释后的浓度为抑菌浓度, 而在原液中的浓度为杀菌浓度,从而有力保证了所配制的无动物来源的冻 精稀释液无病源微生物存在,在较低的冷藏温度下可以做到长期保存。本发明牛羊冷冻精液的制作方法,将牛或羊的精子和稀释液充分混合, 然后降温并保存;其特征在于所述稀释液中至少包含有如下成分之一或 其组合海藻糖、丙二醇、大豆卵磷脂、可溶性大豆蛋白质、氮一三羟甲 基氨基乙烷磺酸、十二酰硫酸钠。
优选方案中,在所述稀释液中还包含有如下成分之一或其组合 乳糖、果糖、乙二醇、乙二胺四乙酸、三羟甲基胺基甲烷;胆固醇、 赤藓糖醇、醋铬酸、磷脂酰丝氨酸、大豆异黄酮;氯前列烯醇、维生素Bu、 咖啡因、维生素E亚硒酸钠注射液、蔗糖、磷酸盐缓冲液;氮一三羟甲基 氨基乙垸磺酸(TES)、维生素B1、 VE、 PG、乙二胺四乙酸(EDTA)、三羟甲 基胺基甲烷(Tris)、磷酸盐缓冲液(PBS.无无犊牛血清BSA成份)、半胱 氨酸、甘露醇、青霉素、链霉素。
本发明所述动物冷冻精液的制作过程依次是
第一步,所述的稀释液将精液稀释并混合均匀,稀释倍数为l: 1 1:
20,稀释是精液及稀释液的温度范围要求是3(TC 35'C;
第二步,将用稀释液稀释好的精液以1. 5'C 2. 0'C/min的降温速度进 行降温直至12 18'C,;然后将稀释好的精液以0. 5 1. 5XVmin的速度进 行降温至8°C 10°C;再将稀释好的精液从8'C 1(TC开始以0.1 rC/min 的速度降温至(TC 4t:并在此温度下平衡0. 5小时 2小时;
第三步,在一100'C土5。C的条件下降温冷冻3min 8min后,然后将盛 放动物冷冻精液的容器浸入液氮中包装或/和保存。优选方案在所述动物冷冻精液的制作过程中,对稀释好的精液以1.5 °C 2.0°C/min的降温速度进行降温直至12 18°〇后,将其放入事先已调 好温度的低温柜中(此时灌装机及任何与精液接触的工具的温度均与稀释 好的精液的当前温度相等)进行等温灌装、打印,并摆放于细管架上;当 将稀释好的动物精液降温至0。C 4-C并在等温条件下经0. 5小时 2小时 平衡后,将平衡后的细管精液放入与其等温的温度缓冲箱中,将箱体封闭 后移送到一 100 °C ± 5 °C的槽式冷冻仪内进行降温冷冻;
在实际操作中,对稀释好的动物精液在一10(TC土5'C的条件下降温冷 冻3min 8min后,将冷冻后的动物精液连同其包装抽样取出浸入液氮5秒 钟 0. 5小时,再将其从液氮中取出投入38'C 4(TC的温水中解冻在38°C 下镜检,检査合格后才将冷冻后的动物精液连同其包装全部浸入液氮中包 装和保存。
在配制稀释液的过程中,所用药品均为分析纯化学试剂,所用配药工 具必须经过彻底消毒并要求无任何消毒药剂成份残留;
相对于现有技术而言,本发明所述动物(例如牛羊)的精液稀释液 的成份组成摆脱了动物来源成份,同时精液稀释液的保存方法也脱离了原 有的现用现配或在较短时间内简单冷冻保存的水平。从而彻底消除了通过 稀释液中的动物来源成份在动物与人类之间传播各种疫病的潜在风险。更 为实用、技术效果更好的精液稀释液的保存方法,必将在很大程度上促进 动物人工授精技术的推广,减少配制稀释液的劳动量,减少了精液稀释液的浪费,提高了劳动生产率。其具有巨大的经济和社会价值。
具体实施例方式
实施例1
1)配置动物精液稀释液
用电子天平称取果糖0.85克,蔗糖3.10克,乳糖3.75克,海藻糖0.58 克,乙二胺四乙酸1.80克,三羟甲基胺基甲烷2.45克,氮一三羟甲基 氨基乙垸磺酸0.015克,醋酸铬0.003克,磷酸盐缓冲液(无犊牛血清成 份)液2.0ml, VE亚硒酸钠注射溶液0.30ml,磷酸盐缓冲液3.0ml半胱氨酸 0.05克,乙二醇2.50ml,丙二醇3.50ml,赤蓟糖醇0.50ml,甘露醇0.50ml, 胆固醇0.301111,加入双蒸馏水3.0ml。以上物质充分混合,加热煮沸后立即 冷却,再加入双蒸馏水,使原有物质保持加热煮沸前的体积,用力搅拌, 使用双蒸水与原药液充分混匀,再加入以下物质:磷脂酰丝氨酸2.18克, 可溶性大豆蛋白2.00克,大豆卵磷脂0.25克,大豆异黄酮O. IO克,维生 素810. 18克,维生素w0.09克,咖啡因0.05克,氯前列烯醇0.013克, SLS0.50ml,青霉素IO万单位,链霉素0.1克。在容量瓶中使用权上述物 质充分混合,勿使干粉样药品物质粘于容器的内壁上,加入搅拌子,用搅 拌器充分搅拌1小时,然后放入5'C 1(TC的避光环境中静置20小时以上, 取其上清液,以5000转/分的转速离心20分钟,弃去容器底部的不溶成份, 放入2"C 8。C的棕色容器中,排出空气,密封保存。
在配制稀释液的过程中,所用药品均为分析纯化学试剂,所用配药工 具必须经过彻底消毒并要求无任何消毒药剂成份残留;2) 精液处理
将刚采集的动物(例如牛羊)精液,用注射器量取射精量,通过显 微镜检査合格后,立即用与其等温的稀释液(温度为30°C 35°C)进行稀 释,稀释倍数为1: 1 1: 20,加入稀释液后再用注射器反复缓慢抽推数次 直至精液与稀释液混合均匀。
稀释好的精液以1. 5°C 2. OtV分钟的降温速度进行降温,当稀释好的 精液的温度下降到15'C时,放入事先已调好温度的低温柜中(此时灌装机 及任何与精液接触的工具的温度均为15'C)进行灌装、打印,并摆放于细
管架上。调整低温操作柜,使柜中的精液以rc/分钟的速度进行降温至8
°C 10°C,再从8T: l(TC以0.5/钟的速度降温至0, 'C 4。C平衡0.5小 时 2小时。
3) 精液冷冻-
将平衡后的细管精液放入与其等温的温度缓冲箱中,将箱体封闭后, 反箱体移送到一10(TC土5'C的槽式冷冻仪内,取出已码放好精液的细管架, 放入槽内进行降温冷冻,通过槽内风扇的转动,使槽内各方位降温比较均 匀,冷冻3分钟 8分钟后,将细管冻精取出数剂浸入液氮,再从液氮中取 出投入38。C 4(TC的温水中解冻在38'C下镜检,检査合格后将所剩余精液 全部浸入液氮中包装和保存。
将细管冻精迅速放入38-C 40'C的温水中,至细管冻精表面刚呈现透 明时立即取出,在25t:下进行输精。细管冻精解冻后的活力达54.88%,顶 体完整率达到66. 56%,细管冻精解冻后具有授精能力的时间达到18小时以上,以辽宁绒山羊为实验对象,解冻后输精使母羊的情期受胎率达到87% 以上。
实施例2:
1) 配置动物精液稀释液
用电子天平称取果糖0.85克,蔗糖3.10克,乳糖3.75克,海藻糖0.58 克,乙二胺四乙酸1.80克,三羟甲基胺基甲烷2.45克,氮一三羟甲基 氨基乙垸磺酸0.015克,醋酸铬0.003克,磷酸盐缓冲液(无犊牛血清成 份)2.0ml,磷酸盐缓冲液3.0ml半胱氨酸0.05克,乙二醇6.00ml,赤蓟糖 醇0.50ml,甘露醇0.50ml,胆固醇0.30ml,加入双蒸馏水3.0ml。以上物 质充分混合,加热煮沸后立即冷却,再加入双蒸馏水,使原有物质保持加 热煮沸前的体积,用力搅拌,使用双蒸水与原药液充分混匀,再加入以下 物质:磷脂酰丝氨酸2. 18克,可溶性大豆蛋白2.00克,大豆卵磷脂0.25 克,维生素B10.18克,维生素B120. 09克,咖啡因0. 01克,,青霉素10 万单位,链霉素0.1克。在容量瓶中使用权上述物质充分混合,勿使干粉 样药品物质粘于容器的内壁上,加入搅拌子,用搅拌器充分搅拌1小时, 然后放入5"C 1(TC的避光环境中静置20小时以上,取其上清液,以5000 转/分的转速离心20分钟,弃去容器底部的不溶成份,放入2t: 8-c的棕 色容器中,排出空气,密封保存。
在配制稀释液的过程中,所用药品均为分析纯化学试剂,所用配药工 具必须经过彻底消毒并要求无任何消毒药剂成份残留;
2) 精液处理-
将刚采集的精液,用注射器量取射精量,通过显微镜检査合格后,立即用与其等温的稀释液(温度为30'C 35t:)进行稀释,稀释倍数为l: 1 1: 20,加入稀释液后再用注射器反复缓慢抽推数次直至精液与稀释液混合均匀。
稀释好的精液以1.5-C 2.(TC/分钟的降温速度进行降温,当稀释好的 精液的温度下降到15'C时,放入事先已调好温度的低温柜中(此时灌装机 及任何与精液接触的工具的温度均为15°C)进行灌装、打印,并摆放于细
管架上。调整低温操作柜,使柜中的精液以rc/分钟的速度进行降温至8
°C 10°C,再从8。C l(TC以0.5/钟的速度降温至0, nC 4。C平衡0.5小 时 2小时。
3) 精液冷冻
将平衡后的细管精液放入与其等温的温度缓冲箱中,将箱体封闭后, 反箱体移送到一10(TC士5t:的槽式冷冻仪内,取出己码放好精液的细管架, 放入槽内进行降温冷冻,通过槽内风扇的转动,使槽内各方位降温比较均 匀,冷冻3分钟 8分钟后,将细管冻精取出数剂浸入液氮,再从液氮中取 出投入38。C 4(TC的温水中解冻在38。C下镜检,检査合格后将所剩余精液 全部浸入液氮中包装和保存。
4) 精液解冻
将细管冻精迅速放入38。C 4(TC的温水中,至细管冻精表面刚呈现透明时 立即取出,在25'C下进行输精。
细管冻精解冻后的活力达48.95%,顶体完整率达到60. 50%,细管冻精解冻 后具有授精能力的时间达到ll小时以上,以辽宁绒山羊为实验对象,解冻 后输精使母羊的情期受胎率达到75%以上。
权利要求
1、 牛羊无动物源冻精稀释液,其特征在于所述稀释液中至少包含有 如下成分之一或其组合海藻糖、丙二醇、大豆卵磷脂、可溶性大豆蛋白 质、氮—三羟甲基氨基乙垸磺酸、十二酰硫酸钠。
2、 按照权利要求1所述牛羊无动物源冻精稀释液,其特征在于在所 述稀释液中还包含有如下成分之一或其组合乳糖、果糖、乙二醇、乙二 胺四乙酸、三羟甲基胺基甲垸。
3、 按照权利要求2所述牛羊无动物源冻精稀释液,其特征在于 在所述稀释液中还包含有如下成分之一或其组合胆固醇、赤藓糖醇、醋铬酸、磷脂酰丝氨酸、大豆异黄酮。
4、 按照权利要求3所述牛羊无动物源冻精稀释液,其特征在于 在所述稀释液中还包含有用于提高解冻后的精子活力、延长精子解冻后存活时间的如下成分之一或其组合氯前列烯醇、维生素B12、咖啡因、 维生素E亚硒酸钠注射液、蔗糖、磷酸盐缓冲液、氮一三羟甲基氨基乙垸 磺酸、维生素B1、 VE、 PG、乙二胺四乙酸、三羟甲基胺基甲垸、半胱氨酸、 甘露醇、青霉素、链霉素。
5、 按照权利要求1 4之一所述牛羊无动物源冻精稀释液,其特征在 于其包含有如下成分中的至少一种,各种成分及其含量具体为果糖蔗糖乳糖海藻糖乙二胺四乙酸三羟甲基胺基甲垸氮 一三羟甲基氨基乙烷磺酸醋酸铬半胱氨酸=(0.5g 1.4g): (1.5g 5g): (2g 5g): (0. 3g lg): (lg 2. 5g): (1.5g 4g): (0. 001g 0. 002g):(0. 001g 0. Olg): (0. 01g 0. 2g);磷酸盐缓冲液VE亚硒酸钠注射溶液磷酸盐缓冲液乙二醇丙二醇: 赤蓟糖醇甘露醇胆固醇=(lml 3ml): (0. lml lml): (lml 6ml):(lml 5rnl): (1. 5ml 7ml): (0. lml L 5ml): (0. lml 1. 5ml): (0. lml lml)。
6、 按照权利要求5所述牛羊无动物源冻精稀释液,其特征在于所述 稀释液的配制要求具体是第一步,用电子天平称取果糖0. 85g、蔗糖3.10g、乳糖3. 75g、海藻 糖0.58g、乙二胺四乙酸1.80g、三羟甲基胺基甲烷2.45g、氮一三羟甲基 氨基乙垸磺酸0. 015g、醋酸铬0. 003g、磷酸盐缓冲液2. Oml、磷酸盐缓冲 液3.0ml、半胱氨酸0.05g、乙二醇或丙二醇或二者的组合共6.0ml、赤蓟 糖醇0.50ml、甘露醇0.50ml、胆固醇0.30ml;加入双蒸馏水3. Oml后将上 述物质充分混合,加热煮沸后立即冷却,再加入双蒸馏水,使原有物质保 持加热煮沸前的体积;第二步,将上述物质充分混匀后,向通过上述过程获得的混合液中再 加入以下物质:磷脂酰丝氨酸2.18g、可溶性大豆蛋白2.00g、大豆卵磷脂 0. 25g、 VB10.18g、 VB120.09g、咖啡因0. Olg、青霉素10万单位、链霉素0. lg;第三步,将上述物质加入后充分混合,然后放入5。C 1(TC的避光环境 中静置20小时以上,取其上清液,弃去容器底部的不溶成份,在温度为2 °C 8t:、排出空气、避光的条件下密封保存。
7、 牛羊冷冻精液的制作方法,将牛或羊的精子和稀释液充分混合,然 后降温并保存;其特征在于所述稀释液中至少包含有如下成分之一或其组合海藻糖、丙二醇、大豆卵磷脂、可溶性大豆蛋白质、氮一三羟甲基 氨基乙垸磺酸、十二酰硫酸钠。
8、 按照权利要求7所述牛羊冷冻精液的制作方法,其特征在于 在所述稀释液中还包含有如下成分之一或其组合-乳糖、果糖、乙二醇、乙二胺四乙酸、三羟甲基胺基甲烷;胆固醇、 赤藓糖醇、醋络酸、磷脂酰丝氨酸、大豆异黄酮;氯前列烯醇、维生素Bu、 咖啡因、维生素E亚硒酸钠注射液、庶糖、磷酸盐缓冲液;氮一三羟甲基 氨基乙烷磺酸、维生素Bl、 VE、 PG、乙二胺四乙酸、三羟甲基胺基甲烷、 半胱氨酸、甘露醇、青霉素、链霉素。
9、 按照权利要求8所述牛羊冷冻精液的制作方法,其特征在于所述 动物冷冻精液的制作过程依次是第一步,所述的稀释液将精液稀释并混合均匀,稀释倍数为h 1 1: 20,稀释是精液及稀释液的温度范围要求是3(TC 35-C;第二步,将用稀释液稀释好的精液以1. 5aC 2. (TC/min的降温速度进 行降温直至12 18°C,;然后将稀释好的精液以0. 5 L 5°C/min的速度进 行降温至8°C 10°C;再将稀释好的精液从8。C 1(TC开始以0. l l°C/min 的速度降温至0t: 4'C并在此温度下平衡0. 5小时 2小时;第三步,在一10(TC土5nC的条件下降温冷冻3min 8min后,然后将盛 放动物冷冻精液的容器浸入液氮中包装或/和保存。
10、 按照权利要求9所述牛羊冷冻精液的制作方法,其特征在于所 述动物冷冻精液的制作过程中对稀释好的精液以1. 5。C 2. (TC/min的降温速度进行降温直至12 18'c后,将其放入事先已调好温度的低温柜中进行等温灌装、打印,并摆放于细管架上;当将稀释好的动物精液降温至(TC 4°C并在等温条件下经0. 5小时 2 小时平衡后,将平衡后的细管精液放入与其等温的温度缓冲箱中,将箱体 封闭后移送到一 100 °C ± 5 °C的槽式冷冻仪内进行降温冷冻。
全文摘要
牛羊无动物源冻精稀释液,其至少包含有如下成分之一或其组合海藻糖、丙二醇、大豆卵磷脂、可溶性大豆蛋白质、氮-三羟甲基氨基乙烷磺酸、十二酰硫酸钠。一种使用上述的牛羊无动物源冻精稀释液的牛羊冷冻精液的制作方法,将牛或羊的精子和稀释液充分混合,然后降温并保存。相对于现有技术而言,本发明所述动物精液稀释液摆脱了动物来源成份;其保存方法更为实用、技术效果更好,彻底消除了通过稀释液中的动物来源成份在动物与人类之间传播各种疫病的潜在风险。其必将在很大程度上促进动物人工授精技术的推广,提高了劳动生产率和经济效益;其具有巨大的经济和社会价值。
文档编号A01N1/02GK101310729SQ200710011389
公开日2008年11月26日 申请日期2007年5月23日 优先权日2007年5月23日
发明者刘兴伟, 宋先忱, 张世伟, 张文军, 杨文凯, 豆兴堂, 迪 韩 申请人:辽宁省辽宁绒山羊育种中心;辽宁省辽宁绒山羊原种场有限公司
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