专利名称：附子纳哌林型二萜生物碱酰化物与合成及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及附子中纳哌林型二萜生物碱酰化物的合成方法及其应用，属于医药、农药药 物合成技术领域。
(二)
背景技术：
纳哌林型二萜生物碱是毛茛科乌头属植物中的一类天然化合物，主要包括宋果灵、欧乌 头碱、12-表-欧乌头碱、兴国乌头碱及准葛尔碱等。其中，宋果灵为毛茛科植物乌头"c朋it"历 csr肌'c/A^乃'Debx.)的子根(中药附子)中的一种重要有效成分，多以盐酸盐的形式存在于 乌头中。据《神农本草经》记载，附子有回阳救逆、驱寒散风之功效，但因其有大毒而被列 为下等药。近代药理研究表明，二萜生物碱具有抗炎、镇痛、强心、抗癌和抗心律失常等主 要作用。除做中药外，我国古时的人民曾将附子浸提液制用于制作毒箭及杀虫害之用。随着 植物源农药的开发，关于二萜生物碱杀虫作用越来越多的被报道。丁伟等发现乌头的乙醇、 乙醚提取物对粘虫具有一定的防效。杜晓英等发现乌头甲醇提取物对赤拟谷盗、家蝇具有一 定的毒杀和趋避活性。余大刚还将乌头液作为配方之一申请了复配中草药农药的专利。高占 林发现北乌头C4co"/^m ^训ezo^O的丙酮浸液对禾谷缢管蚜、绣线菊蚜和菜缢管岈具有较高 的生物活性，对吡虫啉和氧化乐果均表现明显增效。陈立等研究发现，瓜叶乌头对小菜蛾和 斜蚊夜蛾有明显杀虫活性。王海丽等发现露蕊乌头甲醇提取物对纹夜蛾的拒食活性约为72%。
国外亦有文献报道关于阿替生型二萜生物碱的新作用，Patricia Gonz'alez等将43种阿替生型 二萜生物碱作用于寄生虫，发现其对利什曼原虫有抗增殖作用，而其中15, 22-0-二乙酰基-19-过氧二羟基阿替生有显著作用。主要是押制原虫的前鞭毛体生长并且对宿主细胞无毒害作用。 在地中海地区利什曼原虫可导致人与狗患内脏利什曼病。近年来随着对附子及其主要成分杀 虫作用的研究越来越多，也有关于宋果灵杀虫作用的研究，杨小生等在文献已经报道宋果灵
在一定浓度下对乙酰胆碱酯酶有一定的抑制作用。
王勇等人对二萜生物碱构效关系进行了总结，发现二萜生物碱取代基种类、位置不同，
毒性不同。含氧取代基多的毒性大于含氧取代基少的；C3位的不同酯基对毒性和镇痛活性 都有关系；羟基的酯化程度、酯基数目和大小对二萜生物碱的毒性也有影响。对二萜生物碱 进行结构修饰研究虽已开展多年，但都主要针对其镇痛活性、抗肿瘤活性、抗心律失常等医
药用途的活性为研究点，但针对其杀虫活性的研究并未见报道。四川大学王锋鹏课题组对二萜生物碱的发现、结构改造及其抗肿瘤和镇痛等药理活性进行了较为深入的研究。如以滇乌 碱为原料分别对结构中的ABC环进行结构修饰来得到紫杉醇类似结构并对其进行抗肿瘤活 性的筛选。西北师范大学高黎明等运用氧化剂KMn04对天然二萜生物碱talatisamine (它拉乌 头胺)的结构进行改造，得到了内酰胺型、亚胺型和酰化型等4个非天然产物。
(三)
发明内容
1、 发明目的本发明的目的是提供一种具有生物活性的附子纳哌林型二萜生物碱酰化物 的合成方法。
2、 技术方案实现发明采用的手段是将附子纳哌林型二萜生物碱溶于吡啶，加入酰化试 剂在冰浴或室温条件下反应，即可合成酰化衍生物。
本发明将宋果灵溶于吡啶，与摩尔量1~5倍的酰化试剂反应6~30小时即可生成酰化衍生
物。使用的酰化试剂有乙酸酐、丙酸酐、邻氯苯甲酰氯、对氯苯甲酰氯、苯甲酰氯、正己酰
氯等酸酐或酰氯。反应在在0-4(TC下进行，碱化反应体系pH值至8 10。采用的萃取方法， 将生物碱全部转移到小极性溶剂层中。溶剂通过减压蒸馏的方式用旋转蒸发仪进行回收。得 到的产品可能是单一化合物，只需要进行简单的纯化处理，如重结晶；产品也可能是多种酯 化的生物碱混合物，应根据极性的差异对其进行柱层析分离。所有的生物碱利用红外色谱、 电子轰击电离质谱、核磁共振等波谱联合进行表征和分析。
(四) 具体实施
实施例1
将46. 6mg宋果灵溶解于lml吡啶中，再逐滴加入0. 5ml乙酸酐，室温下搅拌20小时。 饱和碳酸钠溶液调pH到9，氯仿萃取后，氯仿层分别用水和饱和食盐水洗3次，干燥，减压 蒸馏得1-0-乙酰基-15-0-乙酰基宋果灵53mg。
产物结构用质谱检测证实，EI-Msm/z: 442(M+);
核磁检测，1HNMR(CDC13) (ppm): 5.64， 5.25 (eachlH， s,环外双键氢)，2.11， 2.03 (each3H， s, COCH3)，3.15 (3H, t, NCH2CH3), 0.75 (3H， s， 18-CH3);
核磁检测，13CNMR(CDC13) S : 208.8，170.6, 170.3,145.2, 112.9, 50.6, 13.5 (NCH2CH3).
实施例2
将37. 9mg宋果灵溶解于lml吡啶中，再逐滴加入0. 5ml丙酸酐，室温下搅拌20小时。 饱和碳酸钠溶液调pH到9，氯仿萃取后，氯仿层分别用水和饱和食盐水洗3次，干燥，减压蒸馏得宋果灵丙酰化混合物38. lmg。上硅胶柱用石油醚/丙酮5:l洗脱，得1-0-丙酰基-15-0-丙酰基宋果灵28. 3mg。
产物结构用质谱检测证实，EI-Msw/z: 470.3 (M+);
核磁检测，'HNMR(CDCl3)(Ppm): 5.66(1H ,s)，5.25(lH, d),5.03(lH, dd), 4.99(1H, s), 2.75(1H: q), 2.58(1H, m)， 2.53(1H, d)， 2.44(1H, m), 2.30(3H， m)， 2.21(1H, d)， 2.18(1H, m), 2.13(3H， s), 2.02(1H， m), 1.94(1H, m)， 1.60(4H, m)， 1.43(1H, dd), 1.41(1H, d), 1.23(3H， t), 1.19(3H, t), U5(3H,t)
实施例3
杀虫活性的测定用分析天平(O.OOOlg)称取一定质量的原药，加含有0.1%吐温一80 的溶剂(DMF)，配制成5%制剂。称取一定质量的制剂，加蒸馏水(点滴法稀释用丙酮)稀 释配制成测定所需浓度的药液，普筛浓度为500mg/L。将蚕豆叶片剪去两端，背面朝上放在 小块棉花上，置于塑料培养皿内，加少量水，接苜蓿蚜成蚜以产若蚜。24h后去除成蚜，继 续培养2d后将叶片在药液中充分浸润5s后，重新置于棉花上，自然凉干。以丁硫克百威(IO mg/L)和空白CK为对照。24h后检查结果，1-0-乙酰基-15-0-乙酰基宋果灵和1-0-丙酰基 -15-0-丙酰基宋果灵有较好的杀虫活性。
权利要求
1、附子纳哌林型二萜生物碱酰化物，为如下分子式通式(I)所示的化合物式中R1和R2为氢、羟基或酰基(R1和R2中至少有一个酰基)；R3为1-4个碳原子的烷基。
2、如权利要求1所述附子纳哌林型二萜生物碱酰化物的合成方法，其特征是以纳哌林型 二萜生物碱(分子式通式(II))为原料，在0-40。C下与酰化试剂搅拌反应，反应完毕后调 pH值到8-10，萃取后减压蒸馏，通过重结晶或柱层析获得的纳哌林型二萜生物碱酰化物。<formula>formula see original document page 2</formula>(II)式中K和R2为氢或羟基；&为1-4个碳原子的垸基c
3、 如权利要求2所述的附子纳哌林型二萜生物碱酰化物的合成方法，其特征在于所述酰化试剂为乙酸酐、丙酸酐、邻氯苯甲酰氯、对氯苯甲酰氯、苯甲酰氯、正己酰氯等酸酐或酰氯0
4、 如权利要求书1所述的纳哌林型二萜生物碱酰化物的应用，其特征是作为杀虫药物应用。
5、 如权利要求书l所述的纳哌林型二萜生物碱酰化物的应用，其特征是作为镇痛、抗心 律失常、抗肿瘤药物应用。
全文摘要
本发明公开了一种乌头属植物乌头中天然纳哌林型二萜生物碱的酰化物(化合物结构如图)的制备及应用，属于医药、农药药物合成技术领域。该纳哌林型二萜生物碱酰化物的制备方法是以附子中纳哌林型二萜生物碱化合物为原料，在0-40℃下与酰化试剂酰氯或酸酐搅拌反应，反应完毕后调pH值到8-10，萃取后减压蒸馏，通过重结晶或柱层析获得纳哌林型二萜生物碱酰化物。该纳哌林型二萜生物碱酰化物可应用于农药杀虫剂方面，还可用于抗肿瘤、抗炎镇痛及抗心律失常等医药方面的开发。式中R<sub>1</sub>和R<sub>2</sub>为氢、羟基或酰基(R<sub>1</sub>和R<sub>2</sub>中至少有一个酰基)；R<sub>3</sub>为1-4个碳原子的烷基。
文档编号A01P7/00GK101440064SQ20081014798
公开日2009年5月27日 申请日期2008年12月24日 优先权日2008年12月24日
发明者侯大斌, 徐春霞, 杨海君, 惠 王, 袁小红, 贺新生, 林 马 申请人:西南科技大学