本发明涉及生物源农用杀菌剂领域，具体涉及一种复配杀菌组合物及其应用。
背景技术：
：葡萄霜霉病是葡萄上主要病害，当葡萄叶幕过密、降雨较多、葡萄园排水不畅时易发病，当春秋季节连续阴雨天气是发病较重。葡萄霜霉病主要危害葡萄叶片和果实，发病严重时造成明显减产。目前生产上主要采用化学农药防治霜霉病，大量化学农药的施用导致农田生态系统的破坏，同时带来了防治对象抗药性、化学农药残留等问题。随着公众对食品安全的越来越重视，全球保护环境的日益渐高的呼声，开发和利用与环境具有良好兼容性，对人类无害的生物农药资源也成为了科研人员的研究重点和热点。生物源农药亦称生物农药或生物源天然产物农药,是指直接利用生物活体或生物代谢过程中产生的具有生物活性的物质或从生物体提取物质作为防治病虫害的农药，其有效成分是自然存在的，具有低毒、无污染、专一性强、易于降解、在生态环境中积累毒性可能性小、具有环境相容性好的特点。生物源农药对有机食品和绿色食品生产具有保证作用，避免或减轻使用化学农药造成负面影响，且具有使病原菌难以产生抗药性等优点，是理想的农药类型。丁子香酚属于植物源农药存在于丁香油、肉桂叶油、肉桂皮油、樟脑油、肉豆蔻油等多种植物油中。丁子香酚可以由植物的叶、茎、根部吸收具有向上传导功能且安全、环保无残留，药效治疗迅速，持效期长。极细链格孢激活蛋白属于微生物蛋白农药，主要是通过提高植物自身的免疫系统而激活植物对植物病害的抗性。在农业生产实际过程中，通过不同品种成分进行复配，是防治病害、减少抗性的常见方法。绝大多数情况下，农药的复配效果都是加和效应，真正有增效作用的复配很少。经过发明人研究，发现将丁子香酚与极细链格孢激活蛋白互相复配，在一定范围内有很好的增效作用，在提高葡萄对葡萄霜霉病抗病免疫力的同时起到良好的治疗效果，且目前关于丁子香酚与极细链格孢激活蛋白相关复配用于防治葡萄霜霉病的，目前国内外尚未见相关报道。技术实现要素：为解决上述问题，本发明提供了一种复配杀菌组合物及其应用，该组合物具有高效、低毒、低残留等优点，特别适用于葡萄霜霉病防治。为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种复配杀菌组合物，由以下质量百分比的原料制备而成：丁子香酚0.1％-5％，极细链格孢蛋白0.01％-8％，余量为常规辅料添加物。优选地，所述丁子香酚和极细链格孢蛋白质量配比为25:1-1:25，其增效比例为1:15-25:1。优选地，所述丁子香酚和极细链格孢蛋白质量配比为1:6。上述复配杀菌组合物可用于制备防治葡萄霜霉病的药物。本发明具有以下有益效果：通过室内毒力测定试验和田间试验测定了生物源农药丁子香酚和极细链格孢蛋白单独使用和复配后对葡萄霜霉病的防控效果，确立了两生物源农药的最优配比，供生产使用，以达到减少农药环境污染以及病菌抗药性发生发展的目的；其中，丁子香酚和极细链格孢蛋白1:15-25:1的配比范围内均表现出增效作用，其中以1:6的配比增效最大，增效系数为1.89；生物源农药丁子香酚和极细链格孢蛋白作用方式不同，复配后不易使病菌产生抗药性，不易造成环境污染。具体实施方式为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。本发明实施例提供了一种复配杀菌组合物，由以下质量百分比的原料制备而成：丁子香酚0.1％-5％，极细链格孢蛋白0.01％-8％，余量为常规辅料添加物。所述丁子香酚和极细链格孢蛋白质量配比为25:1-1:25，其增效比例为1:15-25:1，所述丁子香酚和极细链格孢蛋白的最优质量配比为1:6。实施例1室内生物测定试验试验靶标葡萄霜霉病菌(Plasmoparaviticola),菌种采自于田间。试材准备选用葡萄感病品种瑰宝，自上向下4叶位～6叶位，剪取相同部位、长势一致、带有1cm～2cm叶柄的叶片，用湿棉球包裹叶柄放置在培养皿中，保湿备用。试验药剂极细链格孢蛋白原药，中国农科院植保所廊坊农药中试厂提供，98％丁子香酚，江苏金坛市威德龙化学有限公司产品；1.4％丁子香酚·极细链格孢蛋白复配杀菌剂，山西省农科院果树研究所配制。对照药剂98％烯酰吗啉原药，辽宁省沈阳丰收农药有限公司产品。试验步骤S1、孢子囊悬浮液配制选择田间自然发病叶片，用4℃蒸馏水洗下叶片背面霜霉病菌孢子囊，配成悬浮液(浓度控制在每毫升1×105个～1×107个孢子囊)，4℃下存放备用。S2、药剂配制将几种待试药剂用0.05％的吐温80水溶液溶解稀释，配成10000mg/L母液备用。每个药剂，设置5个系列质量浓度。S3、药剂处理将药液均匀喷施于叶片背面，待药液自然风干后，将各处理叶片叶背向上，按处理标记后排放在保湿盒中；试验设不含药剂的处理作空白对照。S4、接种与培养用准备好的新鲜孢子囊悬浮液点滴10微升接种于叶片背面。每叶片接种4滴，每处理不少于5片叶。保护性试验在药剂处理后24h接种，治疗性试验在药剂处理前24h接种。接种后盖上皿盖，置于人工气候箱或有光照的保湿箱，在每天连续光照/黑暗12h交替，温度为22℃，相对湿度90％以上的条件下培养。5～7d调查试验结果。视空白对照发病情况测量记录病斑直径，单位为毫米(mm)。数据统计及分析根据调查数据，按公式(1)计算防治效果，以百分数(％)表示，计算结果保留小数点后两位。式中：P—防治效果；D0—空白对照病斑直径；D1—药剂处理病斑直径。根据各药剂浓度对数值及对应的防效机率值作回归分析，计算各药剂的EC50、EC90等值及其95％置信限。进行药剂联合毒力测定时，根据Wadley法或孙云沛法计算混剂的增效系数(SR)或共毒系数(CTC)，评价混剂的联合作用类型。Wadley法：根据增效系数(SR)来评价药剂混用的增效作用，即SR<0.5为拮抗作用，0.5≤SR≤1.5为相加作用，SR>1.5为增效作用。增效系数(SR)按公式(2)、(3)计算：式中：X1—混剂的EC50理论值，单位为毫克每升(mg/L)；PA—混剂中A的百分含量，单位为百分率(％)；PB—混剂中B的百分含量，单位为百分率(％)；A—混剂中A的EC50值，单位为毫克每升(mg/L)；B—混剂中B的EC50值，单位为毫克每升(mg/L)。式中：SR—混剂的增效系数；X1—混剂EC50理论值，单位为毫克每升(mg/L)；X2—混剂EC50实测值，单位为毫克每升(mg/L)。试验结果通过室内试验评价了丁子香酚和极细链格孢蛋白两种单剂及其不同配比混配制剂对葡萄霜霉病的防治效果，结果表明两种单剂室内对葡萄霜霉病均表现出良好的抑制效果，EC50分别为0.6912mg/L和2.4564mg/L。田间防治霜霉病的常用药剂烯酰吗啉的EC50为5.4923mg/L。丁子香酚和极细链格孢蛋白两者有效成分比例为1:15-25:1时均表现出增效作用，尤其以1:6配比增效最为显著，其EC50为0.7932mg/L,增效系数为1.89.说明1.4％丁子香酚·极细链格孢蛋白复配杀菌剂对葡萄霜霉病具有很高的杀菌活性。表1丁子香酚和极细链格孢蛋白最佳配比及对照药剂抑菌活性测定实施例2田间药效试验根据室内筛选出的丁子香酚和极细链格孢蛋白最佳复配比例1:6，配置了1.4％丁子香酚和极细链格孢蛋白复配杀菌剂，其中含0.2％丁子香酚和1.2％极细链格孢蛋白。田间以3％极细链格孢蛋白WP800倍与0.3％丁子香酚SL800倍桶混、50％烯酰吗啉WP1500倍作为对照药剂开展开展田间药效试验。试验对象为霜霉病。试验作物为葡萄，试验葡萄品种选用瑰宝。环境条件试验园区篱架式栽培，树龄9年生，历年霜霉病发生普遍而均匀。试验期间(8月1日-8月30日)葡萄生育期至新梢生长期。所有试验小区栽培条件以及树体长势一致，并与当地的栽培措施相一致。试验设计和安排试验药剂：1.4％丁子香酚·极细链格孢蛋白复配杀菌剂，山西省农科院果树研究所配制。对照药剂：3％极细链格孢蛋白WP，中国农科院植保所廊坊农药中试厂产品；0.3％丁子香酚SL，山东省亿嘉农化有限公司产品；50％烯酰吗啉WP，德国巴斯夫贸易股份有限公司产品。小区排列试验药剂、对照药剂和空白对照的小区处理采用随机排列。小区的面积和重复每小区葡萄树为15株，重复4次。表2田间药效试验设计处理编号药剂施药剂量11.4％丁子香酚·极细链格孢蛋白复配杀菌剂1000倍21250倍31500倍43％极细链格孢蛋白WP+0.3％丁子香酚SL桶混800倍550％烯酰吗啉WP1500倍6空白对照施药方式使用方式兑水喷雾，用少量水先溶解后再加足所需水量；喷雾时使叶片正反面均匀着药，滴水为止。使用器械的类型：背负喷雾器，喷孔直径0.8mm施药的时间和次数田间葡萄霜霉病发生前期首次施药，共喷施3次，具体施药时间为2015年8月1日，8月8日，8月18日。使用剂量和容量：每公顷的药液用量2249L/hm2。防治其他病虫害药剂的资料要求：试验期间，各小区除喷施试验药剂外，未喷施其他任何杀菌剂；记录这类药剂施用的准确数据。每小区随机调查20个当年抽生新蔓，自上而下调查全部叶片，按下列分级方法记录各级病叶数及总叶数。叶片分级方法：0级：无病斑；1级：病斑面积占整个叶面积的5％以下；3级：病斑面积占整个叶面积的6％～25％；5级：病斑面积占整个叶面积的26％～50％；7级：病斑面积占整个叶面积的51％～75％；9级：病斑面积占整个叶面积的75％以上。调查时间和次数药前无霜霉病，施药结束后10d(8月28日)调查一次药效。药效计算方法：对作物的其他影响试验药剂、对照药剂对供试葡萄品种安全、无药害。试验结果1.4％丁子香酚·极细链格孢复配杀菌剂1000倍、1250倍均表现出良好的防效，防效分别为96.78％、91.20％，5％水平上显著高于50％烯酰吗啉WP1500倍、3％极细链格孢蛋白WP+0.3％丁子香酚SL桶混剂的防效，1.4％丁子香酚·极细链格孢复配杀菌剂1500倍86.34％与两对照组间没有显著差异，充分说明，1.4％丁子香酚·极细链格孢复配杀菌剂对葡萄霜霉病具有良好的杀菌活性，其防治效果与化学农药相当，可部分取代化学农药，具有广阔的应用前景和开发价值。此期间调查，各处理对供试寄主植物安全，无药害。表3注：表中数据均为各处理平均数据。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3