1.一种巨紫荆组培苗继代培养的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、无菌外植体的获取;
(2)、巨紫荆继代增殖步骤:
(2.1)试验材料;
(2.2)巨紫荆继代培养的实验方案设计;
(3)、巨紫荆生根培养步骤;
(3.1)选取继代培养的巨紫荆组培苗,选取标准为高度1.8~3.5cm、健壮、叶片舒展的单株组培苗;
(3.2)将选取的继代培养的巨紫荆组培苗接种至1/2MS生根培养基上;
(3.3)生根培养基激素筛选,接种30天后统计生根率,生根率=生根株数/接种株数×100%;
(4)、巨紫荆继代培养及生根培养条件;
(5)、巨紫荆组培苗的炼苗与移栽;
(5.1)巨紫荆大棚炼苗种苗要求;
(5.2)巨紫荆大棚炼苗条件;
(5.3)巨紫荆大棚炼苗基质特点。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,选取1~2年生带芽包的健壮枝条于室内进行水培,待新芽萌发后切割成1~2cm长的顶芽或带腋芽的茎段,剪去叶片留3~5mm叶柄,用75%酒精擦拭外植体表面,用洗衣粉水浸泡2min,再置于流水下冲洗0.5~1h;在超净工作台上,用0.05~0.1%的升汞处理5~15min,用无菌水冲洗5~6次,接种至诱导培养基中,按照MS+0.1~1mg/L 6-BA+30g/L糖+7g/L琼脂,每瓶接种一株,获得的无菌外植体的成功率为85%。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2.1)中,(2.1)试验材料,选取步骤1中诱导出来的芽直接进行增殖培养,所选材料生长健壮、叶片舒展,利用顶芽及茎段进行繁殖,其中顶芽高0.5~1cm左右、茎段高0.5~1cm左右含至少一个腋芽。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2.2)中,改良MS培养基包括KNO3 2000~2100mg/L、NH4NO3 1645~1600mg/L、MgSO4·7H2O 555~740mg/L与KH2PO4 255~340mg/L,细胞分裂素的最佳浓度为0.3~1.0mg/L,生长素为IBA,浓度范围为0.03~0.1mg/L,因此,巨紫荆继代培养最佳增殖培养基配方为:改良MS+0.3~1.0mg/L6-BA+0.03~0.1mg/L IBA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3.2)中,1/2MS生根培养基中包括:NH4NO3 825mg/L、KNO3 950mg/L、KH2PO4 85mg/L、MgSO4·7H2O 185mg/L、CaCl2·2H2O 220mg/L、FeSO4·7H2O 13.9mg/L、Na2·EDTA·2H2O 18.65mg/L、KI 0.42mg/L、H3BO3 3.1mg/L、MnSO4·H2O 8.45mg/L、ZnSO4·7H2O 4.25mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.05mg/L、CoCl2·6H2O 0.0125mg/L、CuSO4·5H2O 0.0125mg/L、肌醇50mg/L、烟酸0.25mg/L、盐酸吡哆醇0.25mg/L、盐酸硫胺素0.05mg/L、甘氨酸1.0mg/L、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)、20g/L蔗糖、7g/L琼脂。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3.3)中,IBA与NAA配合使用时巨紫荆生根率明显提高,其中筛选出的最适生根配方为:1/2MS+0.5~1.0mg/L NAA+0.5~1.0mg/L IBA+20g/L蔗糖+7g/L琼脂。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:其中,步骤(4)中,巨紫荆组培苗继代及生根培养的条件为:光培养与暗培养交替进行,光培养条件为连续进行12h光照,光照强度为3000lx,培养温度为26℃;暗培养条件为连续进行12h,温度为20℃。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(5.1)中,生根培养35~45天的生根苗可进温室炼苗移栽,选取叶色正常、无枯叶黄叶的健壮植株进行移栽。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(5.2)中,将巨紫荆生根苗根系上的培养基洗净,种植在含蛭石、珍珠岩、草炭等基质的营养杯或穴盘中,湿度控制在80~90%,待新根与新叶发出后逐渐降低湿度,培养45~60天,即可得巨紫荆容器苗,巨紫荆生根苗大棚炼苗成活率为90%以上。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(5.3)中,上述所说基质配方包括上下两层,其中上层1/3容量体积为蛭石:珍珠岩=2:1;下层2/3容量体积为草炭:蛭石:珍珠岩=3:1:1,该基质配方的特点是上层基质疏松透气、保水保湿,利于炼苗前期新根及新叶的发出;下层基质营养丰富,利于后期组培苗营养生长,且根系与基质易于成团、便于容器苗运输。