本发明涉及杀菌剂领域，尤其是涉及一种杀菌增效剂的制备方法。
技术背景
杀菌剂又称杀生剂、杀菌灭藻剂、杀微生物剂等，通常是指能有效地控制或杀死水系统中的微生物—细菌、真菌和藻类的化学制剂。在国际上，通常是作为防治各类病原微生物的药剂的总称。全世界对植物有害的病原微生物(真菌、强菌、立克次氏体、支原体、病毒、藻类等)有8万种以上。植物病害对农业造成巨大损失，全世界的农作物由此平均每年减少产量约500mt。历史上曾多次发生因某种植物病害流行而造成严重饥荒，甚至大量人口饿死的灾祸。使用杀菌剂是防治植物病害的一种经济有效的方法。有机溶剂和助剂在农药使用过程中会全部进入环境，在造成严重污染环境的同时，还会损害人体健康。随着人们健康意识的提高，降低农药残留量，努力开发新型杀菌剂增效剂是经济社会可持续发展的需要。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种杀菌增效剂的制备方法，杀菌增效剂制备工艺简单，来源于植物，价格低廉，可以扩大植物表面气孔的张开尺寸，从而有利于药液的渗入，大大提高杀菌剂的杀菌作用，同时杀菌增效剂还具有灭菌功能，增效剂有效成分的制备过程可以大大提高其纯度与产率，增强对杀菌剂的增效作用。
本发明针对
背景技术：
中提到的问题，采取的技术方案为：
一种杀菌增效剂，为黄原胶、茶皂素与西芹根提物的混合物，具体为重量比为10:2～3:5～6的黄原胶、茶皂素与西芹根提物的混合物；杀菌增效剂可在对杀菌剂增效的同时参与对病原菌的灭杀，大幅度提高杀菌剂的杀菌效果，是一种制备简单、效果显著的杀菌增效剂。
一种杀菌增效剂，其制备方法为：将黄原胶完全溶解于5～8倍量50～70％的酒精中，暗光、1～2℃温度下，再依次将茶皂素、西芹根提物溶解于黄原胶的酒精溶液中，搅拌至完全溶解即得杀菌增效剂；黄原胶、茶皂素与西芹根提物复配杀菌增效剂对取代苯类杀菌剂如甲基托布津、百菌清、敌克松、五氯硝基苯等与唑类杀菌剂如粉锈宁、多菌灵、恶霉灵、苯菌灵、噻菌灵等具有较强的增效增益作用，黄原胶与酒精溶液不仅可以明显降低药液的表面张力，利于药液在叶片上的润湿和展开，而且二者配合能增强药液的均一性，使药液均匀的粘附在植物表面耐雨水冲刷，从而提高药效、延长时效；茶皂素与西芹根提物可以扩大植物表面气孔的张开尺寸，从而有利于药液的渗入，同时，渗入植物组织的茶皂素与西芹根提物还对部分致病菌如枯萎病病原菌产生灭杀作用，二者协同作用可以渗透入病原菌体内，阻挠病原菌的基因转录，破坏乙酰辅酶a的生成机制，降低乙酰辅酶a的分泌与活性，并进一步降低病原菌三羧酸循环的发生效率，抑制病原菌制造能量，从而灭杀病原菌，在对杀菌剂增效的同时还参与对病原菌的灭杀，大幅度提高杀菌剂的杀菌效果。
作为优选，茶皂素的提取方法为：将油茶饼粕粉碎过60～100目筛，使用石油醚作为浸提溶剂，在提取温度55～60℃、料液比1g:8～10ml的条件下脱脂6～10h，得到已去除残油的油茶饼粕；称取脱脂饼粕干燥后粉碎，置于容器中，按1g:7～8ml料液比，加入重量比为10～11:100的四氢呋喃与乙醇溶液的混合液，其中四氢呋喃中预先溶解有0.5～0.55‰的(r)-(+)-甲基对甲苯基亚砜，乙醇溶液的质量分数为68～70％，在60～62℃水浴下回流100～110min，趁热过滤，将滤液进行真空浓缩，然后加入丙酮沉淀出茶皂素，过滤并收集沉淀，干燥即得茶皂素；使用本方法提取茶皂素，茶皂素的得率可达12.5～15.8％，低浓度的乙醇会使得浸提液浓缩十分困难，气泡现象严重，随着乙醇浓度的逐渐增加，蛋白质、果胶等物质会加快凝固，从而导致茶皂素提取得率减少，而在乙醇溶液中加入特定配比的四氢呋喃与(r)-(+)-甲基对甲苯基亚砜则可以大大提高茶皂素的得率，二者在特定配比的情况下具有增益作用，该作用可以防止变性蛋白质、果胶等集合体对茶皂素的吸附，增强乙醇溶液对茶皂素的溶解性能，从而可以大大降低随变性蛋白质、果胶等凝胶团而析出的茶皂素的含量，并最终提高茶皂素的得率与纯度；茶皂素是一种性能优良的非离子表面活性剂，具有较强的发泡、乳化、分散、湿润等作用，并具有抗菌、消炎、镇痛、抗癌等生理活性，可用来制造各类洗涤剂、化妆品、泡沫剂、防腐剂、乳化剂、杀虫剂及其它药剂。
作为优选，西芹根提物的提取方法为：在西芹8～10叶期，随机选取西芹，取鲜根洗净，剪成长度为0.5～0.1cm的小段后按照1g:3～5ml的量浸泡入无水乙醇，常温下振荡18～24h，然后以细纱布过滤除残渣，再以无菌过滤器滤去真菌即得母液；以无水乙醇为洗脱液利用硅胶柱层析法对浸提液母液进行分离，固定相选用硅胶，硅胶粒径为100～150μm，层析并干燥层析产物得西芹根提物；西芹根提物可以抑制枯萎病病原菌所分泌的细胞壁降解酶的活性，从而降低了病原菌分解细胞壁的能力，西芹根提物还可以打破枯萎病病原菌内部保护酶系统原有的平衡状态，使其对活性氧的清除能力降低，导致自由基清除系统出现障碍，h2o2大量积累，破坏了菌体细胞膜，使病原体受到损伤和破坏，大大降低枯萎病病原菌的致病能力。
作为对本发明的进一步优化，提取西芹根提物过程中，无水乙醇中含有0.5～0.8％的2-氨基-5-氟吡啶与0.12～0.15‰的(-)-金雀花碱；提取西芹根提物过程中，微量且特殊配比的2-氨基-5-氟吡啶与(-)-金雀花碱能有效的破坏西芹根际细胞的细胞壁，可以使西芹根际细胞细胞壁的蛋白质发生交联降解，从而破坏细胞壁，使细胞内容物溶出，大大增加内容物中有效抑菌物质的提取速率，同时还可以缩短提取时间，降低提取功耗，提高有效抑菌物质的含量与纯度，从而增强增效剂的抑菌效果与增效作用。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
1)黄原胶、茶皂素与西芹根提物复配杀菌增效剂对取代苯类杀菌剂与唑类杀菌剂具有较强的增效增益作用，黄原胶与酒精溶液可以明显降低药液的表面张力，利于药液在叶片上的润湿和展开，从而增效杀菌剂的杀菌效果；
2)渗入植物组织的茶皂素与西芹根提物二者协同可以渗透入枯萎病病原菌体内，阻挠病原菌的基因转录，破坏乙酰辅酶a的生成机制，降低乙酰辅酶a的分泌与活性，进一步降低病原菌三羧酸循环的发生效率，抑制病原菌制造能量，从而灭杀病原菌；
3)提取西芹根提物过程中，微量且特殊配比的2-氨基-5-氟吡啶与(-)-金雀花碱能有效的破坏西芹根际细胞的细胞壁，可以使西芹根际细胞细胞壁的蛋白质发生交联降解，从而破坏细胞壁，使细胞内容物溶出，缩短提取时间，降低提取功耗，提高有效抑菌物质的含量与纯度，从而增强增效剂的抑菌效果与增效作用。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
一种杀菌增效剂，为黄原胶、茶皂素与西芹根提物的混合物，具体为重量比为10:2:5的黄原胶、茶皂素与西芹根提物的混合物；杀菌增效剂可在对杀菌剂增效的同时参与对病原菌的灭杀，大幅度提高杀菌剂的杀菌效果，是一种制备简单、效果显著的杀菌增效剂。
一种杀菌增效剂，其制备方法为：将黄原胶完全溶解于5倍量50％的酒精中，暗光、1℃温度下，再依次将茶皂素、西芹根提物溶解于黄原胶的酒精溶液中，搅拌至完全溶解即得杀菌增效剂；黄原胶、茶皂素与西芹根提物复配杀菌增效剂对取代苯类杀菌剂如甲基托布津、百菌清、敌克松、五氯硝基苯等与唑类杀菌剂如粉锈宁、多菌灵、恶霉灵、苯菌灵、噻菌灵等具有较强的增效增益作用，黄原胶与酒精溶液不仅可以明显降低药液的表面张力，利于药液在叶片上的润湿和展开，而且二者配合能增强药液的均一性，使药液均匀的粘附在植物表面耐雨水冲刷，从而提高药效、延长时效；茶皂素与西芹根提物可以扩大植物表面气孔的张开尺寸，从而有利于药液的渗入，同时，渗入植物组织的茶皂素与西芹根提物还对部分致病菌如枯萎病病原菌产生灭杀作用，二者协同作用可以渗透入病原菌体内，阻挠病原菌的基因转录，破坏乙酰辅酶a的生成机制，降低乙酰辅酶a的分泌与活性，并进一步降低病原菌三羧酸循环的发生效率，抑制病原菌制造能量，从而灭杀病原菌，在对杀菌剂增效的同时还参与对病原菌的灭杀，大幅度提高杀菌剂的杀菌效果。
实施例2：
一种杀菌增效剂，其制备方法为：
1)提取茶皂素：将油茶饼粕粉碎过60目筛，使用石油醚作为浸提溶剂，在提取温度55℃、料液比1g:8ml的条件下脱脂6h，得到已去除残油的油茶饼粕；称取脱脂饼粕干燥后粉碎，置于容器中，按1g:7ml料液比，加入重量比为1:10的四氢呋喃与乙醇溶液的混合液，其中四氢呋喃中预先溶解有0.5‰的(r)-(+)-甲基对甲苯基亚砜，乙醇溶液的质量分数为68％，在60℃水浴下回流100min，趁热过滤，将滤液进行真空浓缩，然后加入丙酮沉淀出茶皂素，过滤并收集沉淀，干燥即得茶皂素；使用本方法提取茶皂素，茶皂素的得率可达15％，低浓度的乙醇会使得浸提液浓缩十分困难，气泡现象严重，随着乙醇浓度的逐渐增加，蛋白质、果胶等物质会加快凝固，从而导致茶皂素提取得率减少，而在乙醇溶液中加入特定配比的四氢呋喃与(r)-(+)-甲基对甲苯基亚砜则可以大大提高茶皂素的得率，二者在特定配比的情况下具有增益作用，该作用可以防止变性蛋白质、果胶等集合体对茶皂素的吸附，增强乙醇溶液对茶皂素的溶解性能，从而可以大大降低随变性蛋白质、果胶等凝胶团而析出的茶皂素的含量，并最终提高茶皂素的得率与纯度；茶皂素是一种性能优良的非离子表面活性剂，具有较强的发泡、乳化、分散、湿润等作用，并具有抗菌、消炎、镇痛、抗癌等生理活性，可用来制造各类洗涤剂、化妆品、泡沫剂、防腐剂、乳化剂、杀虫剂及其它药剂；
2)提取西芹根提物：在西芹8叶期，随机选取西芹，取鲜根洗净，剪成长度为1cm的小段后按照1g:5ml的量浸泡入无水乙醇，常温下振荡24h，然后以细纱布过滤除残渣，再以无菌过滤器滤去真菌即得母液；以无水乙醇为洗脱液利用硅胶柱层析法对浸提液母液进行分离，固定相选用硅胶，硅胶粒径为150μm，层析并干燥层析产物得西芹根提物；西芹根提物可以抑制枯萎病病原菌所分泌的细胞壁降解酶的活性，从而降低了病原菌分解细胞壁的能力，西芹根提物还可以打破枯萎病病原菌内部保护酶系统原有的平衡状态，使其对活性氧的清除能力降低，导致自由基清除系统出现障碍，h2o2大量积累，破坏了菌体细胞膜，使病原体受到损伤和破坏，大大降低枯萎病病原菌的致病能力。
3)复配：将黄原胶完全溶解于5倍量70％的酒精中，暗光、2℃温度下，再依次将茶皂素、西芹根提物溶解于黄原胶的酒精溶液中，黄原胶、茶皂素与西芹根提物的重量比为10:3:6，搅拌至完全溶解即得杀菌增效剂；黄原胶、茶皂素与西芹根提物复配杀菌增效剂对取代苯类杀菌剂如甲基托布津、百菌清、敌克松、五氯硝基苯等与唑类杀菌剂如粉锈宁、多菌灵、恶霉灵、苯菌灵、噻菌灵等具有较强的增效增益作用，黄原胶与酒精溶液不仅可以明显降低药液的表面张力，利于药液在叶片上的润湿和展开，而且二者配合能增强药液的均一性，使药液均匀的粘附在植物表面耐雨水冲刷，从而提高药效、延长时效；茶皂素与西芹根提物可以扩大植物表面气孔的张开尺寸，从而有利于药液的渗入，同时，渗入植物组织的茶皂素与西芹根提物还对部分致病菌如枯萎病病原菌产生灭杀作用，二者协同作用可以渗透入病原菌体内，阻挠病原菌的基因转录，破坏乙酰辅酶a的生成机制，降低乙酰辅酶a的分泌与活性，并进一步降低病原菌三羧酸循环的发生效率，抑制病原菌制造能量，从而灭杀病原菌，在对杀菌剂增效的同时还参与对病原菌的灭杀，大幅度提高杀菌剂的杀菌效果。
实施例3：
一种杀菌增效剂，为黄原胶、茶皂素与西芹根提物的混合物，具体为重量比为10:3:5的黄原胶、茶皂素与西芹根提物的混合物；杀菌增效剂可在对杀菌剂增效的同时参与对病原菌的灭杀，大幅度提高杀菌剂的杀菌效果，是一种制备简单、效果显著的杀菌增效剂。
一种杀菌增效剂，其制备方法为：将黄原胶完全溶解于6倍量65％的酒精中，暗光、1℃温度下，再依次将茶皂素、西芹根提物溶解于黄原胶的酒精溶液中，搅拌至完全溶解即得杀菌增效剂；黄原胶、茶皂素与西芹根提物复配杀菌增效剂对取代苯类杀菌剂如甲基托布津、百菌清、敌克松、五氯硝基苯等与唑类杀菌剂如粉锈宁、多菌灵、恶霉灵、苯菌灵、噻菌灵等具有较强的增效增益作用，黄原胶与酒精溶液不仅可以明显降低药液的表面张力，利于药液在叶片上的润湿和展开，而且二者配合能增强药液的均一性，使药液均匀的粘附在植物表面耐雨水冲刷，从而提高药效、延长时效；茶皂素与西芹根提物可以扩大植物表面气孔的张开尺寸，从而有利于药液的渗入，同时，渗入植物组织的茶皂素与西芹根提物还对部分致病菌如枯萎病病原菌产生灭杀作用，二者协同作用可以渗透入病原菌体内，阻挠病原菌的基因转录，破坏乙酰辅酶a的生成机制，降低乙酰辅酶a的分泌与活性，并进一步降低病原菌三羧酸循环的发生效率，抑制病原菌制造能量，从而灭杀病原菌，在对杀菌剂增效的同时还参与对病原菌的灭杀，大幅度提高杀菌剂的杀菌效果。
本实施例中茶皂素的提取方法为：将油茶饼粕粉碎过80目筛，使用石油醚作为浸提溶剂，在提取温度58℃、料液比1g:9ml的条件下脱脂8h，得到已去除残油的油茶饼粕；称取脱脂饼粕干燥后粉碎，置于容器中，按1g:7ml料液比，加入重量比为10.5:100的四氢呋喃与乙醇溶液的混合液，其中四氢呋喃中预先溶解有0.52‰的(r)-(+)-甲基对甲苯基亚砜，乙醇溶液的质量分数为68％，在60℃水浴下回流100min，趁热过滤，将滤液进行真空浓缩，然后加入丙酮沉淀出茶皂素，过滤并收集沉淀，干燥即得茶皂素；使用本方法提取茶皂素，茶皂素的得率可达15.5％，低浓度的乙醇会使得浸提液浓缩十分困难，气泡现象严重，随着乙醇浓度的逐渐增加，蛋白质、果胶等物质会加快凝固，从而导致茶皂素提取得率减少，而在乙醇溶液中加入特定配比的四氢呋喃与(r)-(+)-甲基对甲苯基亚砜则可以大大提高茶皂素的得率，二者在特定配比的情况下具有增益作用，该作用可以防止变性蛋白质、果胶等集合体对茶皂素的吸附，增强乙醇溶液对茶皂素的溶解性能，从而可以大大降低随变性蛋白质、果胶等凝胶团而析出的茶皂素的含量，并最终提高茶皂素的得率与纯度；茶皂素是一种性能优良的非离子表面活性剂，具有较强的发泡、乳化、分散、湿润等作用，并具有抗菌、消炎、镇痛、抗癌等生理活性，可用来制造各类洗涤剂、化妆品、泡沫剂、防腐剂、乳化剂、杀虫剂及其它药剂。
本实施例中西芹根提物的提取方法为：在西芹10叶期，随机选取西芹，取鲜根洗净，剪成长度为0.8cm的小段后按照1g:4ml的量浸泡入无水乙醇，常温下振荡20h，然后以细纱布过滤除残渣，再以无菌过滤器滤去真菌即得母液；以无水乙醇为洗脱液利用硅胶柱层析法对浸提液母液进行分离，固定相选用硅胶，硅胶粒径为120μm，层析并干燥层析产物得西芹根提物；西芹根提物可以抑制枯萎病病原菌所分泌的细胞壁降解酶的活性，从而降低了病原菌分解细胞壁的能力，西芹根提物还可以打破枯萎病病原菌内部保护酶系统原有的平衡状态，使其对活性氧的清除能力降低，导致自由基清除系统出现障碍，h2o2大量积累，破坏了菌体细胞膜，使病原体受到损伤和破坏，大大降低枯萎病病原菌的致病能力。
本实施例提取西芹根提物过程中，无水乙醇中含有0.6％的2-氨基-5-氟吡啶与0.12‰的(-)-金雀花碱；提取西芹根提物过程中，微量且特殊配比的2-氨基-5-氟吡啶与(-)-金雀花碱能有效的破坏西芹根际细胞的细胞壁，可以使西芹根际细胞细胞壁的蛋白质发生交联降解，从而破坏细胞壁，使细胞内容物溶出，大大增加内容物中有效抑菌物质的提取速率，同时还可以缩短提取时间，降低提取功耗，提高有效抑菌物质的含量与纯度，从而增强增效剂的抑菌效果与增效作用。
本发明操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。