苷酶，并在45°C下恒温5h，然后进行 水蒸气蒸馏，通过冷凝器收集馏出液，馏出液置于4°C下冷却分层，上层即为白千层精油。
[0084] (2)将步骤（1)中的竹叶提取物、茶叶提取物和甘草提取物进行混合，再加入柠檬 精油和白千层精油，充分混匀至精油完全吸收，即得到天然防腐剂。
[0085] 下面对本发明所得天然防腐剂的效果进行研宄分析：
[0086] 1、本发明提供的天然防腐剂的抑菌试验
[0087] 采用牛津杯法测定本发明防腐剂的抑菌活性，具体试验过程如下：
[0088] 1. 1试验方法
[0089] 设置对比例：
[0090] 对比例1 :天然防腐剂仅使用竹叶提取物为原料；
[0091] 对比例2:天然防腐剂仅使用茶叶提取物为原料；
[0092] 对比例3:天然防腐剂仅使用甘草提取物为原料；
[0093] 对比例4:天然防腐剂仅使用柠檬精油为原料；
[0094] 对比例5:天然防腐剂仅使用白千层精油为原料；
[0095] 对比例6 :防腐剂仅使用市购苯甲酸钠为原料；。
[0096] 用无菌水将各对比例稀释成质量分数4. 000 %、2. 000 %、1. 000 %、0. 500 %、 0. 250%和0. 125%的各种防腐剂溶液；本发明所得天然防腐剂用无菌水稀释成质量分数 4. 000%、2. 000%、L 000%、0? 500%、0? 250%和 0? 125%的天然防腐剂溶液。
[0097] 以金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、黄曲霉、黑曲霉 为受试菌株，用无菌水将上述细菌细胞和真菌孢子分别稀释成0D660>0. 5的细胞悬液。配 制LB培养基和PDA培养基，121 °C灭菌20min，倒平板（平板直径为90mm)，至冷却凝固，备 用。取100 y L上述细菌细胞悬液分别均匀地涂布在制备好的LB培养基平板上，而真菌孢 子悬液分别均匀地涂布在制备好的PDA培养基平板上，在涂好菌的平板中央放置一个牛津 杯，分别将上述不同浓度的防腐剂溶液和它们的组合物200 y L加入牛津杯中，各处理均设 3个重复。将涂有细菌细胞悬液并加防腐剂的LB平板至于37°C恒温培养，24h后测量抑菌 圈大小；而涂有真菌孢子悬液并加防腐剂的PDA平板至于28°C恒温培养，48h后测量抑菌圈 大小。
[0098] 1. 2评价方法
[0099] 抑菌直径多10mm为有效，抑菌直径< 10mm为无效。
[0100] 1.3试验结果
[0101] 不同试验例对受试菌株的抑菌圈大小见表1。
[0102]表1对比例和本发明对供试菌的抑菌圈直径（mm)
[0103]
[0104]
[0105] 表1显示，对比例1~5对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、痢 疾杆菌、黄曲霉、黑曲霉有不同程度的抑制作用，各植物提取物单独使用时抑菌效果较对比 例6小，但是本发明的天然防腐剂抑菌效果强于苯甲酸钠，说明天然植物提取物混合组成 的组合物可用作防腐剂。由于本发明的天然防腐剂属纯天然植物提取，绿色、环保、安全，可 用作食品级防腐剂。
[0106] 根据评价方法，抑菌直径多10mm为有效，那么上述的食品级防腐剂浓度为 0. 250%时对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌有很好的抑制作用，浓度为 0. 500%时对大肠杆菌、黄曲霉和黑曲霉有很好的抑制作用。
【主权项】
1. 一种天然防腐剂，其特征在于由下列质量百分比的组分组成：竹叶提取物40~ 58%、茶叶提取物20~30%、甘草提取物20~30%、柠檬精油0. 1~1%、白千层精油 0. 1~1%，以上各组分的总和为100%。2. 根据权利要求1所述的天然防腐剂，其特征在于：所述竹叶提取物经过下列步骤制 得： ① 将竹叶干燥、粉碎至20~40目，再用蒸馏水以固液比kg/L计为1:10~50进行浸 泡20~30min，得到竹叶浸泡物；加入竹叶浸泡物总体积0. 1~0. 5%的生物酶，再用柠檬 酸调pH值至4~5,然后于50~80°C下加热2~3h，再过滤得到滤液和滤澄； ② 所得滤渣重复步骤①的操作3~5次，合并滤液，将滤液浓缩至稠膏状，再在60~ 80°C下烘干，即得到竹叶提取物。3. 根据权利要求2所述的天然防腐剂，其特征在于：所述生物酶为纤维素酶和中性蛋 白酶，纤维素酶和中性蛋白酶为任意比例加入。4. 根据权利要求1所述的天然防腐剂，其特征在于：所述茶叶提取物经过下列步骤制 得： 将茶叶粉碎至20~40目，再用蒸馏水以固液比kg/L计为1:10~50进行浸泡20~ 30min，然后煎煮2h并过滤，重复浸泡和煎煮操作3~5次，合并滤液，将滤液经减压浓缩至 稠膏状，再在60~80°C下烘干，即得到茶叶提取物。5. 根据权利要求1所述的天然防腐剂，其特征在于：所述甘草提取物经过下列步骤制 得： 将甘草干燥、粉碎至20~40目，再用蒸馏水以固液比kg/L计为1:10~50进行浸泡 20~30min，然后煎煮2h并过滤，重复浸泡和煎煮操作3~5次，合并滤液，将滤液经减压 浓缩至稠膏状，再在60~80°C下烘干，即得到甘草提取物。6. 根据权利要求1所述的天然防腐剂，其特征在于：所述柠檬精油经过下列步骤制 得： 在阴干的柠檬片中加入柠檬片重量10~50倍的蒸馏水进行浸泡20~30min，得到柠 檬片浸泡物，再加入梓檬片浸泡物总体积〇. 5~1%的纤维素酶，并在40~50°C下恒温3~ 5h，然后进行水蒸气蒸馏，通过冷凝器收集馏出液，馏出液置于3~4°C下冷却分层，上层即 为柠檬精油。7. 根据权利要求1所述的天然防腐剂，其特征在于：所述白千层精油经过下列步骤制 得： 在阴干的白千层中加入白千层重量10~50倍的蒸馏水进行浸泡20~30min，得到白 千层浸泡物，再加入白千层浸泡物总体积〇. 5~1%的纤维素酶，并在40~50°C下恒温3~ 5h，然后进行水蒸气蒸馏，通过冷凝器收集馏出液，馏出液置于3~4°C下冷却分层，上层即 为白千层精油。8.根据权利要求6或7所述的天然防腐剂，其特征在于：所述纤维素酶为e-葡萄糖 苷酶。9. 一种天然防腐剂的制备方法，其特征在于经过下列各步骤： (1)按下列质量百分比的组分备料：竹叶提取物40~58%、茶叶提取物20~30%、 甘草提取物20~30%、柠檬精油0. 1~1%、白千层精油0. 1~1%，以上各组分的总和为 100% ； (2)将步骤（1)中的竹叶提取物、茶叶提取物和甘草提取物进行混合，再加入柠檬精油 和白千层精油，充分混匀至精油完全吸收，即得到天然防腐剂。10.权利要求1~7任意一种所述天然防腐剂在食品、医药、化工、卫生用品、日用品、化 妆品中的应用，具体是按产品质量的0. 05~3%进行添加。
【专利摘要】本发明公开一种天然防腐剂制备方法及其应用。由下列质量百分比的组分组成：竹叶提取物40～58％、茶叶提取物20～30％、甘草提取物20～30％、柠檬精油0.1～1％、白千层精油0.1～1％，以上各组分的总和为100%。将竹叶提取物、茶叶提取物和甘草提取物进行混合，再加入柠檬精油和白千层精油，充分混匀至精油完全吸收，即得到天然防腐剂。该天然防腐剂可应用于食品、医药、化工、卫生用品、日用品、化妆品中，具体是按产品质量的0.05～3%进行添加。该防腐剂增强抑菌效果，扩大抗菌谱，还具有抗病毒、预防感冒、清咽利喉的作用，使该防腐剂不仅仅作为食品添加剂使用，还有一定的药理保健作用。
【IPC分类】A61P29/00, A61P11/04, A01P1/00, A01P3/00, A23C3/08, A61P31/12, A61K8/97, A61K36/899, A61P17/00, A23L3/3472, A61Q11/00, A01N65/44, A61Q19/10
【公开号】CN104938544
【申请号】CN201510353891
【发明人】陈琳仁
【申请人】陈琳仁
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月24日