一种野生红芝的抗病品种选育方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及灵芝育种领域，尤其设及一种野生红芝的抗病品种选育方法。
【背景技术】
[0002] 我国的灵芝母种多为由日本、韩国引进的品种，经多年的反复栽培，退化严重，人 工栽培的灵芝有效成分不足野生灵芝的1/3,灵芝多糖、=祗等主要有效成分不断缺失，且 抗病害抗高溫能力弱，造成产量及质量逐年下降。因此，W我国原产野生灵芝作为母种进行 抗病品种选育成为灵芝育种的当务之极。
【发明内容】
[0003] 为了解决上述技术问题，提供一种针对我国苏南地区原生的野生红芝抗病品种的 育种方法，本发明提供W下技术方案：
[0004] -种野生红芝的抗病品种选育方法，包括W下步骤：
[0005] S1、出发菌种培育:直接从正在生长的野生红芝营养体上提取幼嫩的体细胞诱发 愈伤组织，再逐渐培养成的菌丝体，选取洁白、健壮的菌丝作为出发菌种；
[0006] S2、将出发菌种接种于含有绿色木霉抱子的PDA培养基中，并在25°C恒溫箱中培 养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽培，筛选出菌丝生长情 况最好的两个菌株;选择抗病能力强的菌株作为变异原料；
[0007] S3、将上述两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.58-0.76伦/天的丫 射线照射10天，选择菌丝浓密程度高的菌株进行复壮培养，分离纯化出不同菌株，并分别将 不同菌株培养成菌丝，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为抗病新品种。采用丫射线照 射能够诱发菌丝变异，提高保护性酶活性，诱变得到抗病新品种，选择0.58-0.76伦/天运一 较高的福射剂量进行长期的福射处理是因为福射剂量小，菌丝吸收剂量小，不足W对菌丝 生长发育产生突变性的影响，而福射剂量过大则会对菌丝造成毁灭性的的影响，使新品种 选育无法完成。
[000引进一步的，步骤Sl中选择色泽亮丽、无病虫害、健壮的野生红芝进行体细胞提取。 选择优良的母种有利于将优质的遗传基因延续到新品种。
[0009] 进一步的，步骤S2中将出发菌种接种于含有绿色木霉抱子的PDA培养基中，并在 32-35°C的恒溫箱中培养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽 培，筛选出菌丝生长情况最好的两个菌株。灵芝病害主要分为侵染性病害和非侵染性病害， 绿色木霉为侵染性病害，溫度过高为非侵染性病害，同时将出发菌种置于两种病害同时发 生的环境，能够使得新品种的抗病能力更全面。而且，溫度越高，绿色木霉生长速度越快，能 够为出发菌种提供一个更为严苛的病害环境，使得新品种抗病能力更强，同时，将红芝置于 高溫下培养，能够使得新品种兼具抗高溫的能力，在溫室效应愈发显著的当代社会也显得 十分重要。
[0010] 进一步的，步骤S2中将出发菌种接种于含有绿色木霉抱子、青霉、拟青霉W及曲霉 抱子的PDA培养基中。灵芝侵染性病害中绿色木霉为发生频率和危害程度最高的，但是青 霉、拟青霉W及曲霉感染几率也较高，因此在培养基中同时加入运4中抱子能够使得新品种 具备多种侵染性病害的抵抗能力。
[0011] 进一步的，步骤S3中丫射线照射强度为0.60-0.65伦/天。此福射剂量下的菌丝突 变最为活跃，得到的红芝新品种抗病能力强。
[0012] 本发明的有益效果在于：采用本方法培育的野生红芝新品种抗病害能力强且全 面，同时能够保留野生红芝的优良性状，产量高、有效成分高。
【具体实施方式】 [001引实施例1、
[0014] -种野生红芝的抗病品种选育方法，包括W下步骤：
[0015] S1、出发菌种培育:直接从正在生长的野生红芝营养体上提取幼嫩的体细胞诱发 愈伤组织，再逐渐培养成的菌丝体，选取洁白、健壮的菌丝作为出发菌种;本实施例中选择 色泽亮丽、无病虫害、健壮的野生红芝进行体细胞提取；
[0016] S2、将出发菌种接种于含有绿色木霉抱子的PDA培养基中，将此培养基命名为Al, 并在25°C恒溫箱中培养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽 培，筛选出菌丝生长情况最好的两个菌株；
[0017] S3、将上述两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.62伦/天的丫射线照 射10天，选择菌丝浓密程度高的菌株进行复壮培养，分离纯化出不同菌株，并分别将不同菌 株培养成菌丝，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为抗病新品种甜-1。
[001引实施例2、
[0019] -种野生红芝的抗病品种选育方法，包括W下步骤：
[0020] S1、出发菌种培育:直接从正在生长的野生红芝营养体上提取幼嫩的体细胞诱发 愈伤组织，再逐渐培养成的菌丝体，选取洁白、健壮的菌丝作为出发菌种;本实施例中选择 色泽亮丽、无病虫害、健壮的野生红芝进行体细胞提取；
[0021] S2、将出发菌种接种于含有绿色木霉抱子的PDA培养基中，并在33°C恒溫箱中培 养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽培，筛选出菌丝生长情 况最好的两个菌株；
[0022] S3、将上述两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.62伦/天的丫射线照 射10天，选择菌丝浓密程度高的菌株进行复壮培养，分离纯化出不同菌株，并分别将不同菌 株培养成菌丝，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为抗病新品种甜-2。
[0023] 实施例3、
[0024] -种野生红芝的抗病品种选育方法，包括W下步骤：
[0025] S1、出发菌种培育：直接从正在生长的野生红芝营养体上提取幼嫩的体细胞诱发 愈伤组织，再逐渐培养成的菌丝体，选取洁白、健壮的菌丝作为出发菌种;本实施例中选择 色泽亮丽、无病虫害、健壮的野生红芝进行体细胞提取；
[0026] S2、将出发菌种接种于含有绿色木霉抱子、青霉、拟青霉W及曲霉抱子的PDA培养 基中，将此培养基命名为A2,并在25°C恒溫箱中培养，选取生长健壮的子实体进行组织分 离，并对分离菌株进行小试栽培，筛选出菌丝生长情况最好的两个菌株；
[0027] S3、将上述两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.62伦/天的丫射线照 射10天，选择菌丝浓密程度高的菌株进行复壮培养，分离纯化出不同菌株，并分别将不同菌 株培养成菌丝，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为抗病新品种甜-3。
[0028] 实施例4、
[0029] -种野生红芝的抗病品种选育方法，包括W下步骤：
[0030] S1、出发菌种培育:直接从正在生长的野生红芝营养体上提取幼嫩的体细胞诱发 愈伤组织，再逐渐培养成的菌丝体，选取洁白、健壮的菌丝作为出发菌种;本实施例中选择 色泽亮丽、无病虫害、健壮的野生红芝进行体细胞提取；
[0031] S2、将出发菌种接种于含有绿色木霉抱子的PDA培养基中，并在25°C恒溫箱中培 养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽培，筛选出菌丝生长情 况最好的两个菌株；
[0032] S3、将上述两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.76伦/天的丫射线照 射10天，选择菌丝浓密程度高的菌株进行复壮培养，分离纯化出不同菌株，并分别将不同菌 株培养成菌丝，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为抗病新品种甜-4。
[0033] 分别将上述实施例的新品种进行含有绿色木霉、青霉、曲霉等多种杂菌的防效试 验，并分别检测4种子实体中的有效成分含量，检测数据如下：
[0035] 分析上表可知，
[0036] (1)、在出发菌种培养基中加入多种杂菌后，培育出的新品种甜-3对绿色木霉及其 他杂菌均有较高的防效，而培养基中未加入其他杂菌的新品种甜-1、SH-2、SH-4对绿色木霉 防效高，对其他杂菌防效一般，但仍优于现有品种。
[0037] (2)、福射剂量为0.62伦/天的甜-1、甜-2、SH-3的综合抗病能力W及有效成分含量 均高于甜-4。
[0038] (3)、出发菌种培养溫度为33°C的甜-2,相比溫度为25°C的細-1、細-3W及甜-4抗 绿色木霉能力更强，有效成分含量更高。
【主权项】
1. 一种野生红芝的抗病品种选育方法，其特征在于，包括以下步骤： 51、 出发菌种培育：直接从正在生长的野生红芝营养体上提取幼嫩的体细胞诱发愈伤 组织，再逐渐培养成的菌丝体，选取洁白、健壮的菌丝体作为出发菌种； 52、 将出发菌种接种于含有绿色木霉孢子的PDA培养基中，并在25°C恒温箱中培养，选 取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽培，筛选出菌丝生长情况最 好的两个菌株； 53、 将上述两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.58-0.76伦/天的γ射线 照射10天，选择菌丝浓密程度高的菌株进行复壮培养，分离纯化出不同菌株，并分别将不同 菌株培养成菌丝，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为抗病新品种。2. 如权利要求1所述的一种野生红芝的抗病品种选育方法，其特征在于:步骤S1中选择 色泽亮丽、无病虫害、健壮的野生红芝进行体细胞提取。3. 如权利要求1所述的一种野生红芝的抗病品种选育方法，其特征在于:步骤S2中将出 发菌种接种于含有绿色木霉孢子的PDA培养基中，并在32-35°C的恒温箱中培养，选取生长 健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽培，筛选出菌丝生长情况最好的两 个菌株。4. 如权利要求1所述的一种野生红芝的抗病品种选育方法，其特征在于:步骤S2中将出 发菌种接种于含有绿色木霉孢子、青霉、拟青霉以及曲霉孢子的PDA培养基中。5. 如权利要求1所述的一种野生红芝的抗病品种选育方法，其特征在于:步骤33中γ射 线照射强度为0.60-0.65伦/天。
【专利摘要】本发明涉及一种野生红芝的抗病品种选育方法，出发菌种为以野生红芝营养体细胞诱发愈伤组织后培养成的菌丝体，将出发菌种接种于含有绿色木霉孢子的PDA培养基中，并在25℃恒温箱中培养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽培，筛选出最好的两个菌株，并将两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.58-0.76伦/天的γ射线照射10天，选择菌丝浓密程度更高的菌株进行复壮培养，并分离纯化出不同菌株，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为抗病新品种。本发明选育出的红芝品种对绿色木霉菌的抗性强，能防止由于绿色木霉菌引起的红芝产量及质量差的问题。
【IPC分类】A01H1/06, A01H15/00
【公开号】CN105494088
【申请号】CN201510965063
【发明人】李谊忠, 王承宏
【申请人】镇江盛弘景观植物有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月21日