专利名称：防治多种口腔疾病的天然营养剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种预防和治疗多种口腔疾病的天然营养剂，尤其涉及一种从酪旦白中制备酪旦白磷酸多肽钙和酪旦白-糖大分子肽钙，并配制成多种制剂形式，应用于预防和治疗多种口腔疾病的方法。
发明技术背景口腔疾病是人类常见的慢性疾病，发病率高，病程长而难以彻底治愈，龋齿是一种非常普遍的疾病，由于口腔内细菌，特别是变异链球菌积聚在牙齿表面形成菌落而致，目前主要采用氟化物来防治龋齿，但氟化物摄入过多容易引起中毒，因为龋齿多发生于儿童，其控制能力更差，更易造成氟化物中毒。牙龈炎和牙周病是口腔内菌群失调，格兰氏阴性杆菌过度繁殖，侵犯牙周和牙龈组织所致，目前主要采用抗菌素治疗，而抗菌素的应用可能进一步破坏口腔内菌群失调，长期服用也会有各种毒付作用。牙齿敏感是更常见的一种症状，牙龈在受到物理、化学、冷、热刺激时，出现疼痛反应，人群中约15％出现牙齿敏感现象，其机理可能是各种刺激穿过牙齿表面的小孔刺激牙髓神经，目前治疗牙齿敏感主要采用甲醛、硝酸银、甘油、氯化银、硝酸钾、氯化氟、柠檬酸钠、氢氧化钙等化合物封闭牙齿表面小孔来实现，但上述多数化合物有毒性，长期使用对人体不利。
多项动物实验和临床试验表明，酪旦白磷酸多肽与二价金属离子有较强的结合能力，对磷酸钙和羟磷灰石具有特殊的亲和力，能将钙、磷离子传导至牙齿羟磷灰石表面，使牙齿表面沉积一层磷酸钙保护层，并能渗透在牙齿中成为牙齿一部份，还能缓解牙根及牙龈酸度，抑制细菌生长，抑制牙齿去矿化，促进再矿化功能，使牙齿得以加固、修补，还具有促进氟化物在牙板表面结合的作用。
酪旦白-糖大分子肽具有与酪旦白磷酸多肽相似的作用外，还可以覆盖牙齿的羟磷灰石表面，防止细菌在牙齿表面的附着，并通过抑制致龋细胞的粘附来防治龋齿。
中国专利(申请号02109580.9)公布的技术中介绍了酪旦白磷酸多肽的生产工艺，但其制备方法中仅有水解过程，缺乏分离小分子多肽的程序，用这种方法制备的多肽分子大小不能很好控制，也未提及制备酪旦白-糖大分子肽，以及在防治口腔疾病的应用。
本发明所要解决的技术问题是，以酪旦白为原料制备酪旦白磷酸多肽和酪旦白-糖大分子多肽，并应用于防治口腔疾病。
发明内容
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案，其特征是，以酪旦白及其相关产品为原料，通过胰旦白酶和/或胰凝乳旦白酶进行旦白水解，以超滤设备分离、浓缩，制备酪旦白磷酸多肽钙和酪旦白-糖大分子肽钙，单独或联合应用制备适合口腔使用的剂型，应用于防治多种口腔疾病。
本发明的技术特征是，用作本发明制备天然营养剂的原料可以是酪旦白及其相关产品，包括酪旦白粉、工业干酪素、干酪酸钠、干酪酸钾、干酪磷酸铵、奶粉等干粉状原料，也可以采用新鲜牛奶或冷冻牛奶等液体原料。
本发明的技术特征是，如果采用液体状牛奶作为原材料，必须用离心方式脱脂，脱脂牛奶用酸剂，最好是盐酸调PH至4.6～4.8，并加热至30℃～50℃维持20～50分钟凝固酪旦白，用离心方式或用尼龙滤布过滤的方式收集酪旦白，用于进一步旦白水解程序。
本发明的技术特征是，如果以干酪酸盐，例如干酪酸钠、干酪酸钾为原料，应该加蒸馏水调配成3％的干酪酸盐溶液，每100升干酪酸盐溶液中加20ml凝乳酶(rennet)，在30℃～45℃温度下，维持40～60分钟，加酸剂调PH至4.6～4.8，加热至30℃～50℃维持20～40分钟，离心方式或过滤方式收集凝固的酪旦白，准备进一步进行旦白水解程序。
本发明的技术特征是，收集干酪酸盐溶液凝固析出酪旦白后的上清液，其中含有丰富的酪旦白-糖大分子肽，在上清液内加碱剂调PH至6.5～6.7，用离心机以每分钟1000～2000转/分的速度离心后用金属滤网滤除剩余的凝固的旦白质，在上清液内缓慢加入氯化钙，每升上清液中加入0.3～0.9克氯化钙，充分搅拌，维持温度在30℃～40℃持续2～3小时，用分子量为2,000～4,000D的超滤膜分离酪旦白-糖大分子肽钙，浓缩液干燥成粉，内含丰富的酪旦白-糖大分子肽钙。
本发明的技术特征是，收集凝集沉淀的酪旦白，将酪旦白按5～30％投料量溶解于50℃～85℃的蒸馏水中，加碱液调PH至7～9，均质工作压力8～15Mpa高压均质成糊状基料，按加酶量0.08％～1.5％，最好是0.4％～0.6％投入胰旦白酶，调PH值至3～6，在37℃～54℃温浴下维持2～8小时，水解酪旦白，酶解过程完成后，迅速加温至85℃保温10分钟灭活胰旦白酶，旦白水解液通过分子量为5,000～15,000D的超滤膜，分离未充分水解的大分子旦白，收集超滤上清液，按上清液容量的0.5～10％，最好是1～2％投入氯化钙(重量/容积百分比)，在30℃～40℃温度下充分搅拌2～5小时，用分子量为1,000～5,000D，最好是2,000～3,000D的超滤膜浓缩后，喷雾干燥或真空干燥成粉，内含丰富的酪旦白-磷酸多肽钙。
本发明的技术特征是，为了让旦白水解过程充分，并确保大多数旦白链断裂，一种改良的方式可以是，在旦白水解进行一小时后，持续用交错切面流体超滤装置，采用分子量为8,000～12,000D的超滤膜持续过滤分离，分子量小于超滤膜孔径的小分子多肽持续被收集，而分子量大于超滤膜孔径的未充分水解的旦白质分子又被重新送回旦白水解反应锅内继续水解，这种方法不仅使已经被水解的小分子多肽持续被收集，还能促进旦白和酶之间的交互反应接触，使旦白水解更彻底。
本发明的技术特征是，本发明方法制备的酪旦白磷酸多肽钙和酪旦白-糖大分子肽钙可以单独应用或联合应用，联合应用的方式可能产生更好的临床效果，主要应用于预防和治疗龋齿、牙龈炎、牙周病、牙齿敏感症等口腔疾病，也可以应用于日常生活中保护牙齿及口腔健康的口腔清洁剂，食品或营养品内。
本发明的技术特征是，本发明方法所制备的防治口腔疾病的营养剂可以制备成适合于口腔应用的剂型，包括但不限于，牙膏、漱口水、牙粉、牙贴膜、口香糖、锭丸、含片、咀嚼片、口服液等形式，也可以制备为干粉或浓缩液，作为食品添加剂或口腔清洁剂添加到口香糖、含片、漱口水、牙粉、牙膏、口服液中。
本发明的有益效果是，本发明方法制备的防治多种口腔疾病的营养剂属纯天然制剂，长期服用无任何毒付作用，而且同时具备多种生物活性和功能，能有效帮助防治多种口腔疾病。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明实施例制备酪旦白磷酸多肽钙和酪旦白-糖大分子肽钙以100公斤干酪酸钠为原料，用蒸馏水溶解调配3％的干酪酸钠溶液，加入凝乳酶20ml/100升溶液，调PH至6.8，升温至37℃维持50分钟，加入4N HCL调PH至4.6，加热至40℃维持20分钟，用离心机5000转/分的速度离心15分钟，沉淀凝集的酪旦白。
收集上清液，用2N的氢氧化钾调PH至6.6，以1000转/分速度离心后用200目金属滤网过滤，上清液内加入0.5克/升的氯化钙，用分子量为3,000D的超滤膜在交错切面流体超滤装置上分离过滤，并浓缩至起始容积20％，喷雾干燥成粉，获富含酪旦白-糖大分子肽钙的干粉。
在浓度为6.2％的酪旦白溶液内投入50℃的蒸馏水，加2N氢氧化钾调PH至8，均质工作压力为12Mpa，加酶量为4克/L(重量/容积百分比)，加入胰旦白酶(Sigma Pancretin ofbovin origin having an activity 4 NF)，反应锅内PH用2N的氢氧化钾维持在PH8左右，温度维持在37℃～40℃，持续6小时，在酶解开始后一小时，旦白水解液开始在交错切面流体超滤装置(超滤膜分子量为10,000D)和酶解反应锅之间反复循环，收集渗透超滤膜的小分子多肽，将大分子量的未水解旦白再送入反应锅内酶解，酶解过程结束，加温至90℃维持10分钟，灭活胰旦白酶，反应锅内旦白水解液经超滤装置(超滤膜分子量为10,000D)分离过滤，合并超滤上清液，加入氯化钙20％(重量/容积百分比)，充分搅拌反应2小时，用分子量为2,000D的超滤膜浓缩至起始容量的20％，喷雾干燥成干粉，获富含酪旦白-磷酸多肽钙的干粉。
权利要求
1.本发明涉及一种预防和治疗多种口腔疾病的天然营养剂，尤其涉及一种从酪旦白中制备酪旦白磷酸多肽钙和酪旦白-糖大分子肽钙，并配制成多种制剂形式，应用于预防和治疗多种口腔疾病的方法，其特征是，以酪旦白及其相关产品为原料，通过胰旦白酶和/或胰凝乳旦白酶进行旦白水解，以超滤设备分离、浓缩，制备酪旦白磷酸多肽钙和酪旦白-糖大分子肽钙，单独或联合应用制备适合口腔使用的剂型，应用于防治多种口腔疾病。
2.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，用作本发明制备天然营养剂的原料可以是酪旦白及其相关产品，包括酪旦白粉、工业干酪素、干酪酸钠、干酪酸钾、干酪磷酸铵、奶粉等干粉状原料，也可以采用新鲜牛奶或冷冻牛奶等液体原料。
3.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，如果采用液体状牛奶作为原材料，必须用离心方式脱脂，脱脂牛奶用酸剂，最好是盐酸调PH至4.6～4.8，并加热至30℃～50℃维持20～50分钟凝固酪旦白，用离心方式或用尼龙滤布过滤的方式收集酪旦白，用于进-步旦白水解程序。
4.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，如果以干酪酸盐，例如干酪酸钠、干酪酸钾为原料，应该加蒸馏水调配成3％的干酪酸盐溶液，每100升干酪酸盐溶液中加20ml凝乳酶(rennet)，在30℃～45℃温度下，维持40～60分钟，加酸剂调PH至4.6～4.8，加热至30℃～50℃维持20～40分钟，离心方式或过滤方式收集凝固的酪旦白，准备进一步进行旦白水解程序。
5.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，收集干酪酸盐溶液凝固析出酪旦白后的上清液，其中含有丰富的酪旦白-糖大分子肽，在上清液内加碱剂调PH至6.5～6.7，用离心机以每分钟1000～2000转/分的速度离心后用金属滤网滤除剩余的凝固的旦白质，在上清液内缓慢加入氯化钙，每升上清液中加入0.3～0.9克氯化钙，充分搅拌，维持温度在30℃～40℃持续2～3小时，用分子量为2,000～4,000D的超滤膜分离酪旦白-糖大分子肽钙，浓缩液干燥成粉，内含丰富的酪旦白-糖大分子肽钙。
6.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，收集凝集沉淀的酪旦白，将酪旦白按5～30％投料量溶解于50℃～85℃的蒸馏水中，加碱液调PH至7～9，均质工作压力8～15Mpa高压均质成糊状基料，按加酶量0.08％～1.5％，最好是0.4％～0.6％投入胰旦白酶，调PH值至3～6，在37℃～54℃温浴下维持2～8小时，水解酪旦白，酶解过程完成后，迅速加温至85℃保温10分钟灭活胰旦白酶，旦白水解液通过分子量为5,000～15,000D的超滤膜，分离未充分水解的大分子旦白，收集超滤上清液，按上清液容量的0.5～10％，最好是1～2％投入氯化钙(重量/容积百分比)，在30℃～40℃温度下充分搅拌2～5小时，用分子量为1,000～5,000D，最好是2,000～3,000D的超滤膜浓缩后，喷雾干燥或真空干燥成粉，内含丰富的酪旦白-磷酸多肽钙。
7.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，为了让旦白水解过程充分，并确保大多数旦白链断裂，一种改良的方式可以是，在旦白水解进行一小时后，持续用交错切面流体超滤装置，采用分子量为8,000～12,000D的超滤膜持续过滤分离，分子量小于超滤膜孔径的小分子多肽持续被收集，而分子量大于超滤膜孔径的未充分水解的旦白质分子又被重新送回旦白水解反应锅内继续水解，这种方法不仅使已经被水解的小分子多肽持续被收集，还能促进旦白和酶之间的交互反应接触，使旦白水解更彻底。
8.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法制备的酪旦白磷酸多肽钙和酪旦白-糖大分子肽钙可以单独应用或联合应用，联合应用的方式可能产生更好的临床效果，主要应用于预防和治疗龋齿、牙龈炎、牙周病、牙齿敏感症等口腔疾病，也可以应用于日常生活中保护牙齿及口腔健康的口腔清洁剂，食品或营养品内。
9.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法所制备的防治口腔疾病的营养剂可以制备成适合于口腔应用的剂型，包括但不限于，牙膏、漱口水、牙粉、牙贴膜、口香糖、锭丸、含片、咀嚼片、口服液等形式，也可以制备为干粉或浓缩液，作为食品添加剂或口腔清洁剂添加到口香糖、含片、漱口水、牙粉、牙膏、口服液中。
全文摘要
本发明涉及一种预防和治疗多种口腔疾病的天然营养剂，尤其涉及一种从酪蛋白中制备酪蛋白磷酸多肽钙和酪蛋白－糖大分子肽钙，并配制成多种制剂形式，应用于预防和治疗多种口腔疾病的方法，其特征是，以酪蛋白及其相关产品为原料，通过胰蛋白酶和/或胰凝乳蛋白酶进行蛋白水解，以超滤设备分离、浓缩，制备酪蛋白磷酸多肽钙和酪蛋白－糖大分子肽钙，单独或联合应用制备适合口腔使用的剂型，应用于防治多种口腔疾病。
文档编号C12P21/00GK1557470SQ20041001610
公开日2004年12月29日 申请日期2004年2月4日 优先权日2004年2月4日
发明者高春平 申请人:高春平