专利名称：一种人胚肾293细胞扩增无蛋白培养基的制作方法
一种人胚肾293细胞扩增无蛋白培养基技术领域发明涉及一种培养基，更具体地说涉及一种人胚肾293细胞扩增培养基。属 于生物制品领域。
背景技术：
细胞培养基是生物制品领域中常用的物质，在细菌和细胞培养中十分必要。 人胚肾293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系。目前培养人胚肾293细 胞的培养基的缺点是目前，动物血清作为哺乳动物细胞培养基的关键成分被广 泛应用，以牛血清为主。但是动物血清缺点是价格昂贵，成分不明确，产品批 间差异大，含有细胞生长抑制成分，且更为严重的是可能含有细菌、病毒等，导 致潜在生物性污染。发明内容要解决的问题本发明的目的，是提供一种人胚肾293细胞扩增培养基及其用途。技术方案本发明的一种人胚肾293细胞扩增无蛋白培养基，其中，包括基本培养基, 还包括磷脂酰胆碱和微量元素。上述的基本培养基包括的组份及含量为成份 Mg/L甘氨酸 30-120L-丙氨酸 5-50L-精氨酸 100-800一水L-门冬酰胺3-60L-天冬氨酸5-80一水L-半胱氨酸盐酸盐10-120L-胱胺酸二盐酸盐10-120L-谷氨酸10-100L-谷氨酰胺200-3000一水L-组氨酸盐酸盐3-50L-羟脯氨酸5-50L-异亮氨酸30-150L-亮氨酸30-300L-赖氨酸5-50L-甲硫氨酸10-100L-苯丙氨酸2-50L-脯氨酸5-100L-丝氨酸10-300L-苏氨酸10-150L-色氨酸10-150L-酪氨酸钠盐50-500L-缬氨酸5-50L-鸟氨酸盐酸盐50-400L-瓜氨酸40-350D-生物素0. 001-0. 8氯化胆碱0. 1-3D-泛酸0. 001-0. 8叶酸0. 001-0. 8肌醇0. 001-0. 2烟酰胺0. 001-0. 5P-氨基苯甲酸0. 02-2盐酸吡。多醛 盐酸吡。多辛盐酸盐核黄素硫胺素盐酸盐 维生素Bu 消旋生育酚醋酸酯 烟酸维生素A醋酸鈣化醇腺噪呤胆固醇一水柠檬酸2-脱氧-D-核糖二水氯化钙六水氯化镁七水硫酸镁氯化钾氯化钠碳酸氢钠葡萄糖酚红钠丙酮酸钠黄嚯呤 亚油酸 DL-硫辛酸 腐胺谷胱甘肽 胸苷0. Ol-l 0. 01-2 0. 001-0. 3 0. 001-0. 4 0. 02-0. 6 0. 01-0. 2 0. 001-0. 5 0. 001-0. 6 0. 001-0. 1 0. 01-1 0. 01-0. 2 0. 0001-0. 01 3. 5-15 0. 5-6. 5 0. 5-7 6. 5-25 0. 8-4. 5 2500-10000 500-4500 1500-6000 0. 8-25 45-250 0. 9-15 0. 01-0. 8 0, 1-6. 0 0. 01-1. 2 0. 01-0. 98 0. 2—3. 0MES ( 2- (N-吗啉)乙碌酸)1500-6500D-核糖0. 05-3. 0乙二胺四乙酸钠1. 5-15鸟噤呤盐酸盐0. 01-0. 9草酸乙酸0. 5-15胆固醇0. 001-0. 08亚硝基铁氰化钠0. 5-15牛磺酸10. 0-45聚山梨酯80 (即Tween 80,Sigma—Aldrich 司，货号 P1754 )七水硫酸亚铁九水竭酸亚铁七水碌b酸锌磷酸氢二钠0. 5-6. 5 0. 5-3. 5 0. 1-0. 85 0. 5-3. 545—300上述的优选的组分和含量为成份 Mg/L甘氨酸 65L-丙氨酸 20L-精氨酸 300一水L-门冬酰胺 15L-天冬氨酸 20一水L-半胱氨酸盐酸盐 5 0L-胱胺酸二盐酸盐 50L-谷氨酸 40L-谷氨酰胺 1000一水L-组氨酸盐酸盐 15L-羟脯氨酸20L-异亮氨酸52L-亮氨酸72. 5L-赖氨酸15L-曱硫氨酸32L-苯丙氨酸11. 5L-脯氨酸30L-丝氨酸66L-苏氨酸40L-色氨酸42L-酪氨酸钠盐95L-缬氨酸16L-鸟氨酸盐酸盐104L-瓜氨酸94D-生物素0. 01氯化胆碱0. 5D-泛酸0. 01叶酸0. 01肌醇0. 05烟酰胺0. 025P-氨基苯甲酸0. 05盐酸吡p多醛0. 025盐酸吡喷辛盐酸盐0. 025核黄素0. 01硫胺素盐酸盐0. 01维生素B120. 1消旋生育酚醋酸酯0. 05烟酸0. 01维生素A醋酸0. 014丐化醇0. 025腺噪呤0. 1胆固醇0. 09一水柠檬酸0. 00352-脱氧-D-核糖8. 98二水氯化4丐2. 24六水氯化镁2. 65七水硫酸镁12. 6氯化钾2. 02氯化钠6900碳酸氢钠2250葡萄糖3000酚红钠7. 3776丙酮酸钠98. 6黄噪呤4. 756亚油酸0. 09744DL-硫辛酸0. 754腐胺0. 09338谷胱甘肽0. 0348胸香0. 87MES ( 2- (N-吗啉)乙磺酸)3654D-核糖0. 232乙二胺四乙酸钠4. 872鸟。票呤盐酸盐0. 116草酸乙酸3. 48胆固醇0. 00464亚硝基铁氰化钠3. 48牛磺酸23. 2聚山梨酯80 (即Tween 80，Sigma-Aldrich 司，货号P1754 ) 2. 9七水石危酸亚4失 1. 2504九水竭酸亚铁 0. 3126七水硫酸锌 1.563磷酸氲二钠 125上述的磷脂酰胆碱包括的组份及含量为 成份 Mg/L二亚油酰碌脂酰胆石威(Dili画y卜phosphatidylcholin) 0. 5-3. 5二石更脂酰石岸脂酰月旦石咸(Distearoyl-phosphatidylcholin) 0.1-1.8上述的磷脂酰胆碱包括的组份及含量为成份 Mg/L二亚油酰石岸脂酰月旦石成(Dilineoy1-phosphatidylchoiin) 1.2504二石更脂酰石岸脂酰月旦》威(Distearoy卜phosphatidylcholin) 0.9378上述的^L量元素包括的组份及含量为:成份Mg/L五水》克酸铜0. 001-0. 08五水亚A西酸钠0. 001-0. 05氟化钠0. 001—0. 08九水亚；西酸钠0. 001—0. 5六水氯化钴0. 001-0. 045二水氯化钡0. 001-0. 08氯化锂0. 0031-0. 015二水钼酸钠0. 00001—0. 0007偏钒酸铵0. 0001—0. 006氯化镍0. 000008-0. 0002硝酸镍0. 00002-0. 002氯化铷0. 000003-0. 0005氯化亚锡0. 0006-0. 03二氧化钛0. 001—0. 0085氯化银0. 000001-0. 00009六水三氯化铝0. 0005-0. 035硫酸铬钾0. 0006-0. 036氧化锗0. 0001-0. 0096溴化钾0. 00001-0. 00025硤化钟0. 00006-0. 0032氯化锰0. 00006—0. 003上述的微量元素包括的组份及含量为:成份Mg/L五水碌L酸铜0.007815五水亚A西酸钠0.007127氟化钠0.009378九水亚A6酸钠0.012504六水氯化钴0.003126二水氯化钡0.00719氯化锂0.007815二水钼酸钠0.000156偏钒酸铵0.000625氯化镍0.000016硝酸镍0.000313氯化铷0.000013氯化亚锡0. 002188二氧化钛0. 002501氯化银0. 000009六水三氯4匕铝0. 002501硫酸铬钾0. 002188氧化锗0. 000938溴化钾0. 000078碟化钾0. 00025氯化锰0. 00025上述的培养基具有在培养人胚肾293细胞中的用途，所述的培养基，可以 直接替换含血清常规培养基，人胚肾293细胞不需要适应过程。培养基使用的条件如下培养条件温度37'C, (:02浓度5°/。，相对湿度〉95%。发明产品的优点此人胚肾293细胞无蛋白培养基，不含任何动物血清，不含蛋白质，以氨 基酸，维生素，无机盐，糖类，磷脂酰胆碱和微量元素组成。此人胚肾293细胞 无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，人胚肾293细胞不需要适应过 程。
图1为无血清培养基人胚肾293细胞扩增培养基实施例5的培养图； 图2为无血清培养基人胚肾293细胞扩增培养基实施例4的培养图.具体实施方式
以下的实施例在于解释说明书中的内容，为内容的具体实施方式
，并不意在 限制发明的保护范围。实施例1培养基由基本培养基、磷脂酰胆碱和微量元素组成，其中，基本培养基的 组成和成份如下成份 Mg/L甘氨酸65L-丙氨酸20L-精氨酸300一水L-门冬酰胺15L-天冬氨酸20一水L-半胱氨酸盐酸盐50L-胱胺酸二盐酸盐50L-谷氨酸40L-谷氨酰胺1000一水L-组氨酸盐酸盐15L-羟脯氨酸20L-异亮氨酸52L-亮氨酸72. 5L-赖氨酸15L-甲硫氨酸32L-苯丙氨酸11. 5L-脯氨酸30L-丝氨酸66L-苏氨酸40L-色氨酸42L-酪氨酸钠盐95L-缬氨酸16L-鸟氨酸盐酸盐104L-瓜氨酸94D-生物素0. 01氯化胆石成0. 5D-泛酸0. 01叶酸0. 01肌醇0. 05烟酰胺0. 025p-氨基苯曱酸0. 05盐酸吡喷醛0. 025盐酸吡喷辛盐酸盐0. 025核黄素0. 01硫胺素盐酸盐0. 01维生素B120. 1消旋生育酚醋酸酯0. 05烟酸0. 01维生素A醋酸0. 01钙化醇0. 025腺。票呤0. 1胆固醇0. 09一水柠檬酸0. 00352-脱氧-D-核糖8. 98二水氯化钙2. 24六水氯化镁2. 65七水硫酸镁12. 6氯化钾2. 02氯化钠6900碳酸氪钠2250葡萄糖3000酚红钠7. 3776丙酮酸钠98. 6黄噤呤4. 756亚油酸0. 09744DL-硫辛酸0. 754腐胺 0. 09338谷胱甘肽 Q. 0348胸芬 0.87MES ( 2- (N-吗啉)乙磺酸) 3654D-核糖 Q. 232乙二胺四乙酸钠 4.872鸟。票呤盐酸盐 0.116草酸乙酸 3.48胆固醇 0.00464亚竭基铁氰化钠 3. 48牛磺酸 23.2聚山梨酯80 (即Tween 80, Sigma-Aldrich公司，货号P1754 ) 2. 9七水好u酸亚铁 1. 2504九水硝酸亚铁 0. 3126七水硫酸锌 1.563磷酸氢二钠 125磷脂酰胆碱包括的组份及含量为成份 Mg/L 二亚油酰石寿脂酰月旦石成(Dilineoyl-phosphatidylcholin) 1.2504 二硬脂酰磷脂酰胆碱(Distearoy卜phosphatidylcholin) 0.9378微量元素包括的组份及含量为成份五水》危酸铜五水亚A西酸钠氟化钠Mg/L 0. 007815 0. 007127 0. 009378九水亚A西酸钠0. 012504六水氯化钴0. 003126二水氯化钡0. 00719氯化锂0. 007815二水钼酸钠0. 000156偏钒酸铵0. 000625氯化镍0. 000016硝酸镍0. 000313氯化铷0. 000013氯化亚锡0. 002188二氧化钛0. 002501氯化银0. 000009六水三氯化铝0. 002501硫酸铬钾0. 002188氧化锗0. 000938溴化钾0. 000078碘化钟0. 00025氯化锰0. 00025实施例2培养基由基本培养基、磷脂酰胆碱和微量元素组成，其中，基本培养基的 组成和成^f分如下成份 Mg/L甘氨酸 30L-丙氨酸 50L-精氨酸 100一水L-门冬酰胺 60L-天冬氨酸 5一水L-半胱氨酸盐酸盐120L-胱胺酸二盐酸盐10L-谷氨酸100L-谷氨酰胺200一水L-组氨酸盐酸盐50L-羟脯氨酸5L-异亮氨酸150L-亮氨酸30L-赖氨酸50L-曱硫氨酸10L-苯丙氨酸50L-脯氨酸5L-丝氨酸300L-苏氨酸10L-色氨酸150L-酪氨酸钠盐50L-缬氨酸50L-鸟氨酸盐酸盐50L-瓜氨酸350D-生物素0. 001氯化胆石威3D-泛酸0. 001叶酸0. 8肌醇0. 001烟酰胺0. 5P-氨基苯甲酸0. 02盐酸吡。多醛1盐酸吡。多辛盐酸盐0. 01核黄素0. 3硫胺素盐酸盐0. 001维生素B120. 6消旋生育酚醋酸酯0. 01烟酸0. 5维生素A醋酸0. 001钓化醇0. 1腺噪呤0. 01胆固醇0. 2一水柠檬酸0. 00012-脱氧-D-核糖15二水氯化4丐0. 5六水氯化4美7七水硫酸镁6. 5氯化钾4. 5氯化钠2500碳酸氳钠4500葡萄糖1500酚红钠25丙酮酸钠45黄嘌呤15亚油酸0. 01DL-硫辛酸6. 0腐胺0. 01谷胱甘肽0. 98胸苷0. 2MES ( 2- (N-吗啉)乙磺酸)6500D-核糖0. 05乙二胺四乙酸钠 15鸟喋呤盐酸盐 0. 01草酸乙酸 15胆固醇 0.001亚硝基铁氰化钠 15牛磺酸 10聚山梨酯80 (即Tween 80, Sigma-Aldrich 7>司，货号P1754 ) 6. 5七水At酸亚4失 0. 5九水竭酸亚铁 0. 85七水硫酸锌 0.5磷酸氢二钠 300磷脂酰胆碱包括的组份及含量为成份 Mg/L 二亚油酰磷脂酰胆碱(Dilineoy卜phosphatidylcholin) 0.5 二硬脂酰磷脂酰胆碱(Distearoyl-phosphatidylcholin) 1.8微量元素包括的组份及含量为成份Mg/L五水;克酸铜0. 001五水亚硒酸钠0. 05氟化钠0. 001九水亚A西酸钠0. 5六水氯化钴0. 001二水氯化钡0. 08氯化锂0. 0031二水钼酸钠0. 0007偏钒酸铵0.0001氯化镍0.0002竭酸镍0.00002氯化铷0.0005氯化亚锡0.0006二氧化钛0.0085氯化银0.000001六水三氯化铝0.035硫酸铬钾0.0006氧化锗0.0096溴化钾0.00001珙化钟0.0032氯化锰0.00006实施例3培养基由基本培养基、磷脂酰胆碱和微量元素组成，其中，基本培养基的 组成和成份如下成份Mg/L甘氨酸120L-丙氨酸5L-精氨酸800一水l-n冬酰胺3L-天冬氨酸80一水L-半胱氨酸盐酸盐10L-胱胺酸二盐酸盐120L-谷氨酸10L-谷氨酰胺3000一水L-组氨酸盐酸盐3L-羟脯氨酸50L-异亮氨酸30L-亮氨酸300L-赖氨酸5L-曱硫氨酸100L-笨丙氨酸2L-脯氨酸100L-丝氨酸10L-苏氨酸150L-色氨酸10L-酪氨酸钠盐500L-缬氨酸5L-鸟氨酸盐酸盐400L-瓜氨酸40D-生物素0, 8氯化胆石成0. 1D-泛酸0. 8叶酸0. 001肌醇0. 2烟酰胺0, 001P-氨基苯曱酸2盐酸吡喷醛0. 01盐酸吡喷辛盐酸盐2核黄素0. 001硫胺素盐酸盐0. 4维生素B120. 02消旋生育酚醋酸酯0. 2烟酸0. 001维生素A醋酸0. 6钓化醇0. 001腺噤呤1胆固醇0. 01一水柠檬酸0. 012-脱氧-D-核糖3. 5二水氯化钙6. 5六水氯化镁0. 5七水硫酸镁25氯化钾0. 8氯化钠10000碳酸氢钠500葡萄糖6000酚红钠0. 8丙酮酸钠250黄噪呤0. 9亚油酸0. 8DL-硫辛酸0. 1腐胺1. 2谷胱甘肽0. 01胸脊3. 0MES ( 2- (N-吗啉)乙磺酸)1500D-核糖3. 0乙二胺四乙酸钠1. 5鸟嘌呤盐酸盐0. 9草酸乙酸0. 5胆固醇0. 08亚硝基铁氰化钠0. 5牛磺酸45聚山梨酯80 (即Tween 80, Sigma-Aldrich 司，货号 P1754 ) 0. 5七水硫酸亚铁 3.5九水硝酸亚4失 0. 1七水石克酸锌 3. 5磷酸氢二钠 45磷脂酰胆碱包括的组份及含量为成份 Mg/L 二亚油酰石舞脂酰胆石咸(Dilineoy卜phosphatidylcholin) 3.5 二硬脂酰磷脂酰胆碱(Distearoyl-phosphatidylcholin) 0.1微量元素包括的组份及含量为成份Mg/L五水;克酸铜0. 08五水亚A西酸钠0. 001氟化钠0. 08九水亚A西酸钠0. 001六水氯化钴0. 045二水氯化钡0. 001氯化锂0. 015二水钼酸钠0. 00001偏钒酸铵0. 006氯化镍0. 000008硝酸镍0. 002氯化铷0. 000003氯化亚锡0. 03二氧化钛0.001氯化银0.00009六水三氯化铝0.0005硫酸铬钾0.036氧化锗0.0001溴化钾0.00025硪化钟0.00006氯化锰0.0033实施例4培养基由基本培养基、磷脂酰胆碱和微量元素组成，其中，基本培养基的 组成和成^f分如下 、成份Mg/L甘氨酸30L-丙氨酸5L-精氨酸100一水L-门冬酰胺3L-天冬氨酸5一水L-半胱氨酸盐酸盐10L-胱胺酸二盐酸盐10L-谷氨酸10L-谷氨酰胺200一水L-组氨酸盐酸盐3L-幾脯氨酸5L-异亮氨酸30L-亮氨酸30L-赖氨酸5L-曱硫氨酸10L-苯丙氨酸2L-脯氨酸5L-丝氨酸10L-苏氨酸10L-色氨酸10L-酪氨酸钠盐50L-缬氨酸5L-鸟氨酸盐酸盐50L-瓜氨酸40 'D-生物素0. 001氯化胆碱0. 1D-泛酸0. 001叶酸0. 001肌醇0. 001烟酰胺0. 001P-氨基苯曱酸0. 02盐酸吡。多醛0. 01盐酸吡。多辛盐酸盐0. 01核黄素0. 001〃琉胺素盐酸盐0. 001维生素B120. 02消旋生育酚醋酸酯0. 01烟酸0. 001维生素A醋酸0. 001钓化醇0. 001腺噪呤0. 01胆固醇0. 01一水柠檬酸0. 00012-脱氧-D-核糖3. 5二水氯化4丐0. 5六水氯化镁0. 5七水》克酸4美6. 5氯化钾0. 8氯化钠2500碳酸氢钠500葡萄糖1500酚红钠0. 8丙酮酸钠45黄噪呤0. 9亚油酸0. 01DL-碌u辛酸0. 1腐胺0. 01谷胱甘肽0. 01胸苦0. 2MES ( 2- (N-吗啉)乙磺酸)1500D-核糖0. 05乙二胺四乙酸钠1. 5鸟噤呤盐酸盐0. 01草酸乙酸0. 5胆固醇0. 001亚硝基铁氰化钠0. 5牛磺酸10. 0聚山梨酯80 (即 Sigma-Aldrich 公 P1754 )丁W6611 司，80, 货号0. 5七水硫酸亚铁 0. 5九水硝酸亚铁 0. 1七水碌u酸锌 0. 5磷酸氢二钠 45磷脂酰胆碱包括的组份及含量为成份 Mg/L 二亚油酰磷脂酰胆碱(Dilineoyl-phosphatidylcholin) 0.5 二硬脂酰确脂酰胆碱(Distearoy卜phosphatidylcholin) 0.1微量元素包括的组份及含量为成份Mg/L五水硫酸铜0. 001五水亚》西酸钠0. 001氟化钠0. 001九水亚》西酸钠0. 001六水氯化钴0. 001二水氯化钡0. 001氯化锂0. 0031二水钼酸钠0. 00001偏钒酸铵0. 0001氯化镍0. 000008滩酸镍0. 00002氯化铷0. 000003氯化亚锡0. 0006二氧化钛0. 001氯化银0. 000001六水三氯化铝0. 0005硫酸铬钾氧化锗溴化钾石典化钟氯化锰0. 0006 0. 0001 0. 00001 0. 00006 0. 00006实施例5培养基由基本培养基、磷脂酰胆碱和微量元素组成，其中，基本培养基的 组成和成Y分如下成份甘氨酸L-丙氨酸L-精氨酸一水L-门冬酰胺L-天冬氨酸一水L-半胱氨酸盐酸盐L-胱胺酸二盐酸盐L-谷氨酸L-谷氨酰胺一水L-组氨酸盐酸盐L-羟脯氨酸L-异亮氨酸L-亮氨酸L-赖氨酸L-甲硫氨酸L-苯丙氨酸L-脯氨酸L-丝氨酸Mg/L120508006080120120100300050501503005010050100300L-苏氨酸150L-色氨酸150L-酪氨酸钠盐500L-缬氨酸50L-鸟氨酸盐酸盐400L-瓜氨酸350D-生物素0. 8氯化胆碱3D-泛酸0. 8叶酸0. 8肌醇0. 2烟酰胺0. 5P-氨基苯曱酸2盐酸吡喷醛1盐酸吡喷辛盐酸盐2核黄素0. 3碌u胺素盐酸盐0. 4维生素B120. 6消旋生育酚醋酸酯0. 2烟酸0. 5维生素A醋酸0. 6钩化醇0. 1腺噤呤1胆固醇0. 2一水柠檬酸0. 012-脱氧-D-核糖15二水氯化钙6. 5六水氯化镁7七水硫酸镁 25氯化钾 4. 5氯化钠 10000碳酸氢钠 4500葡萄糖 6000酚红钠 25丙酮酸钠 250黄噪呤 15亚油酸 0. 8DL-硫辛酸 6. 0腐胺 1. 2谷胱甘肽 0. 98胸苷 3. 0MES ( 2- (N-吗啉)乙磺酸) 6500D-核糖 3. 0乙二胺四乙酸钠 15鸟噪呤盐酸盐 0. 9草酸乙酸 15胆固醇 0.08亚硝基铁氰化钠 15牛磺酸 45聚山梨酯80 (即Tween 80 , Sigma-Aldrich >司，货号P1754 ) 6.5七水石克酸亚4失 3.5九水硝酸亚4失 0. 85七水^琉酸锌 3. 5磷酸氢二钠 300磷脂酰胆碱包括的组份及含量为成份 Mg/L二亚油酰石粦脂酰胆碱(Dilineoy卜phosphatidylcholin) 3.5二石更脂酰石寿脂酰月旦i威(Distearoyl-phosphatidylcholin) 1.8微量元素包括的组份及含量为成份Mg/L五水辟u酸铜0. 08五水亚硒酸钠0. 05氟化钠0. 08九水亚i西酸钠0. 5六水氯化钴0. 045二水氯化钡0. 08氯化锂0. 015二水钼酸钠0. 0007偏钒酸铵0. 006氯化镍0. 0002硝酸镍0. 002氯化铷0. 0005氯化亚锡0. 03二氧化钛0. 0085氯化银0. 00009六水三氯化铝0. 035硫酸铬钟0. 036氧化锗0. 0096溴化钾0. 00025碟化钟0. 0032氯化锰0. 003权利要求
1.一种人胚肾293细胞扩增无蛋白培养基，其特征在于包括基本培养基，还包括磷脂酰胆碱和微量元素。
2. 如权利要求1所述的培养基，其特征在于其中所述的基本培养基包括的组 份及含量为成份Mg/L甘氨酸30-120L-丙氨酸5-50L-精氨酸100-800一水L-门冬酰胺3-60L-天冬氨酸5-80一水L-半胱氨酸盐酸盐10-120L-胱胺酸二盐酸盐10-120L-谷氨酸10-100L-谷氨酰胺200-3000一水L-组氨酸盐酸盐3-50L-羟脯氨酸5-50L-异亮氨酸30-150L-亮氨酸30-300L-赖氨酸5-50L-甲硫氨酸10-100L-苯丙氨酸2-50L-脯氨酸5-100L-丝氨酸10-300L-苏氨酸10-150L-色氨酸10—150L-酪氨酸钠盐L-缬氨酸L-鸟氨酸盐酸盐L-瓜氨酸D-生物素氯化胆碱D-泛酸叶酸肌醇烟酰胺P-氨基苯甲酸 盐酸吡喷酸 盐酸吡喷辛盐酸盐 核黄素好u胺素盐酸盐维生素B12消旋生育酚醋酸酯烟酸维生素A醋酸4丐化醇腺噤呤胆固醇一水种檬酸2-脱氧-D-核糖二水氯化钙六水氯化镁七水硫酸镁氯化钾50-500 5-50 50-400 40-350 0. 001-0. 8 0. 1-3 0. 001-0. 8 0. 001-0. 8 0. 001-0. 2 0. 001—0. 5 0. 02-2 0. Ol-l 0. 01-2 0. 001-0. 3 0. 001-0. 4 0. 02-0. 6 0. 01-0. 2 0. 001-0. 5 0. 001-0. 6 0. 001-0. 1 0. 01-1 0. 01-0. 2 0. 0001—0. 01 3. 5-15 0. 5-6. 5 0. 5-7 6. 5-25 0. 8-4. 5氯化钠 25GG-10000碳酸氢钠 500-45 00葡萄糖 1500-6000酚红钠 G, 8-25丙酮酸钠 45-250黄噪呤 0. 9-15亚油酸 0. 01-0. 8DL-硫辛酸 G. 1-6. 0腐胺 0.01-1.2谷胱甘肽 0. 01-0. 98胸脊 0.2-10MES ( 2-(N-吗啉)乙碌酸) 1500-6500D-核糖 0. 05-3. 0乙二胺四乙酸钠 1.5-15鸟嘌呤盐酸盐 0.01-0.9草酸乙酸 0.5-15胆固醇 0.001-0.08亚硝基铁氰化钠 0.5-15牛碌酸 10.0-45聚山梨酯80 (即Tween 80,Sigma-Aldrich 7>司，货号P1754 ) 0. 5-6. 5七水硫酸亚铁 0.5-3.5九水竭酸亚铁 0. 1-0. 85七水石克酸锌 0. 5-3. 5磷酸氢二钠 45-300。
3.如权利要求2所述的培养基，其特征在于优选的组分和含量为成份Mg/L甘氨酸65L-丙氨酸20300一水L-门冬酰胺15L-天冬氨酸20一水L-半胱氨酸盐酸盐50L-胱胺酸二盐酸盐50L-谷氨酸40L-谷氨酰胺1000一水L-组氨酸盐酸盐15L-羟脯氨酸20L-异亮氨酸52L-亮氨酸72. 5L-赖氨酸15L-甲硫氨酸32L-苯丙氨酸11. 5L-脯氨酸30L-丝氨酸66L-苏氨酸40L-色氨酸42L-酪氨酸钠盐95L-缬氨酸16L-鸟氨酸盐酸盐104L-瓜氨酸94D-生物素0. 01氯化胆碱0. 5D-泛酸0. 01叶酸0. 01肌醇0. 05烟酰胺0. 025p-氨基苯曱酸0. 05盐酸吡n多酪0. 025盐酸吡。多辛盐酸盐0. 025核黄素0. 01硫胺素盐酸盐0. 01维生素B120. 1消旋生育酚醋酸酯0. 05烟酸0. 01维生素A醋酸0. 014丐化醇0. 025腺噤呤0. 1胆固醇0. 09一水杵檬酸0. 00352-脱氧-D-核糖8. 98二水氯化4丐2. 24六水氯化4美2. 65七水硫酸镁12. 6氯化钾2. 02氯化钠6900碳酸氬钠2250葡萄糖3000酚红钠7. 3776丙酮酸钠98. 6黄。票呤4. 756亚油酸0. 09744DL-硫辛酸0. 754腐胺0. 09338谷胱甘肽0. 0348胸苷0. 87MES ( 2- (N-吗啉)乙磺酸)3654D-核糖0. 232乙二胺四乙酸钠4. 872鸟。票呤盐酸盐0. 116草酸乙酸3. 48胆固醇0. 00464亚硝基铁氰化钠3. 48牛磺酸23. 2聚山梨酯80 (即Tween Sigma-Aldrich 公司 ， P1754 )80, 货号2. 9七水》危酸亚4失1. 2504九水硝酸亚铁0. 3126七水;危酸4辛1. 563磷酸氢二钠125。
4. 如权利要求1所述的培养基，其特征在于所述的磷脂酰胆碱包括的组份及 含量为成份 Mg/L 二亚油酰磷脂酰胆石咸(Dilineoyl-phosphatidylcholin) 0. 5-3. 5 二石更脂酰石粦脂酰胆碱(Distearoy1-phosphatidylcholin)0. 1-1. 8。
5. 如权利要求4所述的培养基，其特征在于所述的磷脂酰胆44包括的组份及 含量为成份 Mg/L二亚油酰石岸脂酰月旦i威(Dilineoyl-phosphatidylcholin) 1.2504 二石更脂酰石粦脂酰月旦i咸(Distearoyl-phosphatidylcholin) 0.9378。
6.如权利要求1所述的培养基，其特征在于所述的微量元素包括的组份及含 量为成份Mg/L五水》危酸铜0. 001-0. 08五水亚A西酸钠0. 001-0. 05氟化钠0. 001-0. 08九水亚》西酸钠0. 001-0. 5六水氯化钴0. 001-0. 045二水氯化钡0. 001-0. 08氯化锂0. 0031-0. 015二水钼酸钠0. 00001-0. 0007偏钒酸铵0. 0001-0. 006氯化镍0. 000008-0. 0002硝酸镍0. 00002-0. 002氯化铷0. 000003-0. 0005氯化亚锡0. 0006-0. 03二氧化钛0. 001-0. 0085氯化银0. 000001-0. 00009六水三氯化铝0. 0005-0. 035硫酸铬钾0. 0006-0. 036氧化锗0. 0001-0. 0096溴化钾0. 00001-0. 00025碘化钟0. 00006-0. 0032氯化锰0. 00006-0. 0033。
7.如权利要求6所述的培养基，其特征在于所述的微量元素包括的组份及含 量为成份Mg/L五水》危酸铜0. 007815五水亚A西酸钠0. 007127氟化钠0. 009378九水亚A西酸钠0. 012504六水氯化钴0. 003126二水氯化钡0. 00719氯化锂0. 007815二水钼酸钠0. 000156偏钒酸铵0. 000625氯化镍0. 000016硝酸镍0. 000313氯化铷0. 000013氯化亚锡0. 002188二氧化钛0. 002501氯化银0. 000009六水三氯化铝0. 002501硫酸铬钾0. 002188氧化锗0. 000938澳化钾0. 000078碘化钟0. 00025氯化锰0. 00025。
8. 如权利要求1-7中任意一项所述的培养基在培养人胚肾293细胞中的用途。
9. 如权利要求8所述的用途，其特征在于所述的培养基，可以直接替换含血 清常规培养基，人胚肾293细胞不需要适应过程。
10. 如权利要求8或9所述的用途，其特征在于使用的条件如下培养条件 温度37。C, C02浓度5。/。，相对湿度〉95%。
全文摘要
本发明涉及一种培养基及其用途，更具体地说涉及一种人胚肾293细胞扩增培养基及其用途。属于生物制品领域。一种人胚肾293细胞扩增无蛋白培养基，其中，包括基本培养基，还包括磷脂酰胆碱和微量元素。此人胚肾293细胞无蛋白培养基，不含任何动物血清，不含蛋白质，以氨基酸，维生素，无机盐，糖类，磷脂酰胆碱和微量元素组成。此人胚肾293细胞无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，人胚肾293细胞不需要适应过程。
文档编号C12N5/08GK101220347SQ20071030706
公开日2008年7月16日 申请日期2007年12月28日 优先权日2007年12月28日
发明者唐贺文, 黄宗堂 申请人:天津百若克医药生物技术有限责任公司