专利名称：一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途的制作方法
技术领域：
发明涉及一种培养基及其用途，更具体地说涉及一种杂交瘤细胞扩增培养基 及其用途。属于生物制品领域。
背景技术：
细胞培养基是生物制品领域中常用的物质，在细菌和细胞培养中十分必要。 目前培养杂交瘤细胞的培养基的缺点是目前，动物血清作为哺乳动物细胞培养 基的关键成分被广泛应用，以牛血清为主。但是动物血清缺点是价格昂贵，成 分不明确，产品批间差异大，含有细胞生长抑制成分，且更为严重的是可能含有 细菌、病毒等，导致潜在生物性污染
发明内容
要解决的问题
本发明的目的，是提供一种杂交瘤细胞(HYBRIDOMA细胞)扩增培养基及其 用途。
技术方案
一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途，其中，包括基本培养基，还 包括核苷酸和激素。
上述的基本培养基包括氨基酸、维生素、无机盐、其他营养物质。 上述的基本培养基包括的组份及含量为 氨基酸的组成及重量份如下
成份 Mg/L L-丙氨酸 5-35 L-精氨酸盐酸盐 50- 450一水L-门冬酰胺
L-天冬氨酸
L-胱氨酸盐酸盐
一水L-半胱氨酸盐酸盐
L-谷氨酸
L-谷氨酰胺
谷氨酸
一水L-组氨酸盐酸盐
L-羟脯氨酸
L-异亮氨酸
L-亮氨酸
L-赖氨酸盐酸盐
L-甲硫氨酸
L-苯丙氨酸
L-脯氨酸
L-丝氨酸
L-苏氨酸
L-色氨酸
L-酪氨酸
L-缬氨酸
维生素的组成及重量份如下
成份
抗坏血酸钠 D-生物素 维生素D2 氯化胆碱
3. 5-25 13-45 5. 3-45 3. 2-25 25-120 68-500 12-65 8-65
2. 5-8. 0 12-50 15-85 30-150 5-35 5-45 25-89 10-45 10-45
3. 5-15 12-65 5—36
Mg/L
0. 01-0. 65 0. 001—0. 08 0. 01-0. 5 3. 6—16
叶酸0. 1-3. 5
肌醇12-35
烟酰胺0. 01-0. 5
烟酸0. 001-0. 25
p-对氨基苯曱酸0. 007-0. 6
D-泛酸4丐0. 06-0. 98
盐酸吡。多醛0. 01-0. 65
盐酸吡p多辛0. 01-0. 75
维生素A0. 01-0. 65
核黄素0. 005—0. 5
维生素E0. 001-0. 03
维生素B,盐酸盐0. 05_1. 2
维生素B120. 2-2. 6
无才几盐的组成及重量份如下
成份Mg/L
偏钒酸铵0. 0000001-0. 002
氯化钙50-200
五水》克酸铜0. 00001-0. 02
竭酸铁0. 002-3
七水》克酸纟失0. 05-4
氯化镁10-80
硫酸镁20-150
石危酸锰0. 00001-0. 05
氯化钾150-600
碳酸氬钠2000- 8000
氯化钠4000-10000 磷酸氢二钠50-150
七水》克酸锌0. 02-5
其他营养物质的组成及重量份如下成份Mg/L
腺噪呤硫酸盐3. 5-12. 3
三磷酸腺苷0. 12-1. 6
胆固醇0. 05-0. 4
2-脱氧-D-核糖0. 06-0. 78
D-核糖0. 06-0. 78
D-葡萄糖1500-5600
谷胱甘肽(还原型)0. 01-0. 065
鸟噤呤盐酸盐0. 052-0. 65
羟脯氨酸钠0. 65-4. 5
亚油酸0. 009-0. 3
消旋硫辛酸0. 05-0. 65
酚红4. 5-25
腐胺0. 65-3. 6
丙酮酸钠50-350
乙醇胺0. 008-0. 25
半乳糖0. 002-0. 6
2巯基乙醇0. 008-0. 35
胸腺嗜啶0. 06—0. 8
上述的基本培养基包括的组份及含量为 氨基酸的组成及重量份如下
成份 Mg/L L-丙氨酸19. 662
L-精氨酸盐酸盐162.98
一水L-门冬酰胺8. 7
L-天冬氨酸24. 94
L-胱氨酸盐酸盐20. 358
一水L-半胱氨酸盐酸盐15. 08
L-谷氨酸52. 026
L-谷氨酰胺232
谷氨酸33. 35
一水L-组氨酸盐酸盐24. 94
L-羟脯氨酸5. 8
L-异亮氨酸25. 52
L-亮氨酸42. 34
L-赖氨酸盐酸盐61. 77
L-曱硫氨酸11. 31
L-苯丙氨酸17. 4
L-脯氨酸43. 21
L-丝氨酸20. 59
L-苏氨酸24. 36
L-色氨酸6. 96
L-酪氨酸38.164
L-缬氨酸21. 286
维生素的组成及重量份如下
成份Mg/L
抗坏血酸钠 0. 061828
D-生物素 0. 00986
维生素D20. 058
氯化胆碱8. 41
叶酸0. 7598
肌醇20. 909
烟酰胺0. 0377
烟酸0. 0145
P-对氨基苯曱酸0. 029
D-泛酸4丐0. 2958
盐酸吡口多醛0. 0435
盐酸吡喷辛0. 0493
维生素A0. 0812
核黄素0. 029
维生素E0. 0058
维生素B1盐酸盐0. 1798
维生素B120. 812
无4几盐的組成及重量份如下
成份Mg/L
偏钒酸铵0. 0013572
氯化4丐135.256
五水-琉酸铜0. 00145
竭酸铁0. 4176
七水硫酸铁0. 4814
氯化镁33. 1876
硫酸镁56. 84
硫酸锰0. 00017516
氯化郜361. 688
石友酸氢钠 4278. 08
氯化钠6200
磷酸氬二钠82. 36
七水好u酸4争0. 4988
其他营养物质的组成及重量份如下成份Mg/L
腺噪呤硫酸盐5. 8
三磷酸腺苦0. 58
胆固醇0. 116
2-脱氧-D-核糖0. 29
D-核糖0. 29
D-葡萄糖3480
谷胱甘肽(还原型)0. 029
鸟。票呤盐酸盐0. 174
羟脯氨酸钠2. 9986
亚油酸0. 0464
消旋硫辛酸0. 1218
酚红12. 296
腐胺1.96098
丙酮酸钠191. 4
乙醇胺0. 0232
半乳糖0. 06
2巯基乙醇0. 0232
胸腺嗜啶0. 174
上述的核苷和激素包括的组份及含量为:
成份Mg/L
腺苷2. 5-8. 5
尿嘧啶2. 5-8. 5
胞苷2. 5-8. 5
鸟。票呤2. 5-8. 6
胰岛素3. 5-8. 9
地塞米松0. 07-0. 75
氢化可的松0. 006-0. 5
前列腺素El0. 007-0. 21
三碘曱状腺原氨酸0. 000006—0. 0001
上述的核苷和激素包括的组份及含量为:
成份Mg/L
腺苷4. 06
尿嘧啶4. 06
胞苷4. 06
鸟嘌呤4. 06
胰岛素5. 8
地塞米松0. 232
氩化可的松0. 01856
前列腺素El0. 029
三碘曱状腺原氨酸0. 00003828
上述的培养基在培养杂交瘤细胞培养过程中的用途。
上述的杂交瘤细胞扩增无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，杂
交瘤细胞不需要适应过程；上述的培养基使用条件为温度37。C, 0)2浓度5°/。， 相对湿度>95%;优选的培养基使用条件为温度37'C, (^02浓度5%，相对湿度〉98%。
本发明产品的优点是本发明的杂交瘤细胞无血清培养基，不含任何动物血
清，以氨基酸，维生素，无机盐，糖类，脂肪酸和核苷酸和激素组成。
本发明组分均可人工合成，均为结构明确的化学物质，使本培养基产品具有 极高的一致性和稳定性。转铁蛋白和胰岛素，无论动物源性提取纯化来源或经重 组蛋白技术人工合成获得，都价格昂贵，用以上组分替代后，培养基成本显著降 低。另外，因本培养基不含蛋白质组分，使得应用本培养基培养的CHO细胞进行 重组蛋白生产时，其下游纯化工作极大简化，节约成本，利于提高重组蛋白的纯 度。
此杂交瘤细胞无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，杂交瘤细胞 不需要适应过程。
图1为无血清培养基杂交瘤细胞扩增培养基实施例1的培养曲线；
图2为无血清培养基杂交瘤细胞扩增培养基实施例2的培养曲线。
具体实施例方式
实施例1
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及 含量为
氨基酸的组成及重量份如下
成份 Mg/L
L-丙氨酸 35
L-精氨酸盐酸盐 450
一水L-门冬酰胺 25
L-天冬氨酸 45
L-胱氨酸盐酸盐 45
一水L-半胱氨酸盐酸盐 25
L-谷氨酸 120
L-谷氨酰胺 500
谷氨酸65 一水L-组氨酸盐酸盐65
L-轻脯氨酸8. 0
L-异亮氨酸50
L-亮氨酸85
L-赖氨酸盐酸盐150
L-曱硫氨酸35
L-苯丙氨酸45
L-脯氨酸89
L-丝氨酸45
L-苏氨酸45
L-色氨酸15
L-酪氨酸65
L-缬氨酸36
维生素的组成及重量份如下
成份Mg/L
抗坏血酸钠0. 65
D-生物素0. 08
维生素D20. 5
氯化胆碱16
叶酸3. 5
肌醇35
烟酰胺0. 5
烟酸0. 25
P-对氨基苯曱酸0. 6
D-泛酸钓0. 98
盐酸吡"多醛0. 65 盐酸吡喷辛0. 75
维生素A0. 65
核黄素0. 5
维生素E0. 03
维生素B1盐酸盐1. 2
维生素B122. 6
无机盐的组成及重量份如下
成份Mg/L
偏钒酸铵0. 002
氯化4丐200
五水硫酸铜0. 02
硝酸铁3
七水硫酸铁4
氯化镁80
硫酸镁150
硫酸锰0. 05
氯化钾600
碳酸氢钠8000
氯化钠10000
磷酸氢二钠150
七水;克酸锌5
其他营养物质的组成及重量份如下成份Mg/L
腺噪呤硫酸盐12. 3
三磷酸腺苦1. 6 胆固醇0. 4
2-脱氧-D-核糖0. 78
D-核糖0. 78
D-葡萄糖5600
谷胱甘肽(还原型)0. 065
鸟嘌呤盐酸盐0. 65
鞋脯氨酸钠4. 5
亚油酸0. 3
消旋硫辛酸0. 65
酚红25
腐胺3. 6
丙酮酸钠350
乙醇胺0. 25
半乳糖0. 6
2琉基乙醇0. 35
胸腺嘧咬0. 8。
核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 8. 5
尿嗜啶 8. 5
胞苷 8. 5
鸟噤呤 8. 6
胰岛素 8. 9
地塞米爭〉 0. 75
氢化可的松 0. 5
前列腺素El 0.21
三碘曱状腺原氨酸 0.0001。
实施例2
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及 含量为
氨基酸的组成及重量份如下
成份Mg/L
L-丙氨酸5
L-精氨酸盐酸盐50
一水L-门冬酰胺3. 5
L-天冬氨酸13
L-胱氨酸盐酸盐5. 3
一水L-半胱氨酸盐酸盐3. 2
L-谷氨酸25
L-谷氨酰胺68
谷氨酸12
一水L-组氨酸盐酸盐8
L-羟脯氨酸2. 5
L-异亮氨酸12
L-亮氨酸15
L-赖氨酸盐酸盐30
L-曱硫氨酸5
L-苯丙氨酸5
L-脯氨酸25
L-丝氨酸10
L-苏氨酸10
L-色氨酸3. 5
L-酪氨酸12 L-缬氨酸 5
维生素的组成及重量份如下
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0. 01
D-生物素 0. 001
维生素D2 0.01
氯化胆碱 3. 6
叶酸 0. 1
肌醇 12
烟酰胺 0. 01
烟酸 0. 001
P-对氨基苯甲酸 0.007
D-泛酸4丐 0. 06
盐酸吡喷醛 0. 01
盐酸吡。多辛 0. 01
维生素A 0. 01
核黄素 0. 005
维生素E 0. 001
维生素Bl盐酸盐 0. 05
维生素B12 0.2
无机盐的组成及重量份如下
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0. 0000001
氯化钩 50
五水碌L酸铜 G. 00001
硝酸铁0. 002
七水硫酸铁0. 05
氯化镁10
硫酸镁20
硫酸锰0. 00001
氯化钾150
碳酸氢钠2000
氯化钠4000
磷酸氢二钠50
七水辟u酸4争0. 02
其他营养物质的组成及重量份如下成份Mg/L
腺。票呤碌u酸盐3. 5
三磷酸腺苷0. 12
胆固醇0. 05
2-脱氧-D-核糖0. 06
D-核糖0. 06
D-葡萄糖1500
谷胱甘肽(还原型)0. 01
鸟噤呤盐酸盐0. 052
轻脯氨酸钠0. 65
亚油酸0. 009
消旋硫辛酸0. 05
酚红4. 5
腐胺0. 65
丙酮酸钠50
乙醇胺 0.008
半乳糖 G. 002
2巯基乙醇 0.008
胸腺嘧啶 Q. 06。
核苷和激素包括的组份及含量为
成份 Mg/L
腺芬 2. 5
尿嗜咬 2. 5
胞苦 2. 5
鸟噤呤 2. 5
胰岛素 3. 5
地塞米+〉 0. 07
氢化可的松 0. 006
前列腺素E1 0.007
三硖曱状腺原氨酸 0.000006。
实施例3
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及 含量为
氨基酸的组成及重量份如下
成份
L-丙氨酸 L-精氨酸盐酸盐 一水L-门冬酰胺 L-天冬氨酸 L-胱氨酸盐酸盐
25
Mg/L
19. 662 162.98 8. 7 24. 94
20. 358
一水L-半胱氨酸盐酸盐15. 08
L-谷氨酸52.026
L-谷氨酰胺232
谷氨酸33. 35
一水L-组氨酸盐酸盐24. 94
L-羟脯氨酸5. 8
L-异亮氨酸25. 52
L-亮氨酸42. 34
L-赖氨酸盐酸盐61. 77
L-曱硫氨酸11. 31
L-苯丙氨酸17. 4
L-脯氨酸43. 21
L-丝氨酸20. 59
L-苏氨酸24. 36
L-色氨酸6. 96
L-酪氨酸38. 164
L-缬氨酸21.286
维生素的组成及重量份如下
成份Mg/L
抗坏血酸钠0. 061828
D-生物素0. 00986
维生素D20. 058
氯化胆碱8. 41
叶酸0. 7598
肌醇20. 909
烟酰胺0. 0377
烟酸0. 0145
p-对氨基苯曱酸0. 029
D-泛酸钩0. 2958
盐酸吡喷醛0. 0435
盐酸吡。多辛0. 0493
维生素A0. 0812
核黄素0. 029
维生素E0. 0058
维生素B1盐酸盐0. 1798
维生素B120. 812
无机盐的组成及重量份如下
成份Mg/L
偏钒酸铵0. 0013572
氯化钙135. 256
五水碌u酸铜0. 00145
硝酸铁0. 4176
七水硫酸铁0. 4814
氯化镁33. 1876
硫酸镁56. 84
硫酸锰0. 00017516
氯化钾361. 688
碳酸氢钠4278.08
氯化钠6200
磷酸氢二钠82. 36
七水硫酸锌0. 4988
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份Mg/L
腺噤呤硫酸盐5. 8
三磷酸腺芬0. 58
胆固醇0. 116
2-脱氧-D-核糖0. 29
D-核糖0. 29
D-葡萄糖3480
谷胱甘肽(还原型)0. 029
鸟。票呤盐酸盐0. 174
羟脯氨酸钠2. 9986
亚油酸0. 0464
消旋硫辛酸0. 1218
酚红12. 296
腐胺1.96098
丙酮酸钠191. 4
乙醇胺0. 0232
半乳糖0. 06
2巯基乙醇0. 0232
胸腺嘧咬0. 174。
核苷和激素包括的组份及含量为
成份 Mg/L
腺苷 4. 06
尿。密咬 4. 06
胞苷 4. 06鸟噤呤 4. 06
胰岛素 5. 8
地塞米松 0.232
氲化可的爭> 0. 01856
前列腺素El 0. 029
三石典曱状腺原氨酸 0. 00003828。
实施例4
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及 含量为
氨基酸的组成及重量份如下
成份Mg/L
L-丙氨酸5
L-精氨酸盐酸盐450
一水L-门冬酰胺3. 5
L-天冬氨酸45
L-胱氨酸盐酸盐5. 3
一水L-半胱氨酸盐酸盐25
L-谷氨酸25
L-谷氨酰胺500
谷氨酸12
一水L-组氨酸盐酸盐8
L-羟脯氨酸8. 0
L-异亮氨酸12
L-亮氨酸15
L-赖氨酸盐酸盐150
L-甲硫氨酸35
L-苯丙氨酸5
L-脯氨酸89
L-丝氨酸10
L-苏氨酸10
L-色氨酸15
L-酪氨酸12
L-缬氨酸36
维生素的组成及重量份如下
成份Mg/L
抗坏血酸钠0. 01
D-生物素0. 08
维生素D20. 01
氯化胆碱3. 6
叶酸0. 1
肌醇35
烟酰胺0. 01
烟酸0. 001
P-对氨基苯曱酸0. 6
D-泛酸4丐0. 98
盐酸吡。多醛0. 01
盐酸吡喷辛0. 75
维生素A0. 01
核黄素0. 5
维生素E0. 001
维生素B1盐酸盐1. 2
维生素B122. 6
无机盐的组成及重量份如下:
成份Mg/L
偏钒酸铵0. 00000
氯化钓200
五水辟L酸铜0. 00001
硝酸铁0. 002
七水硫酸铁4
氯化镁10
硫酸镁20
硫酸锰0. 05
氯化钾600
碳酸氩钠2000
氯化钠10000
磷酸氩二钠50
七水硫酸锌0. 02
其他营养物质的组成及重量份如下成份Mg/L
腺噤呤硫酸盐12. 3
三磷酸腺香0. 12
胆固醇0. 4
2-脱氧-D-核糖0. 06
D-核糖0. 78
D-葡萄糖5600
谷胱甘肽(还原型)0. 01
鸟噤呤盐酸盐0. 65
轻脯氨酸钠0. 65
亚油酸0. 3
消旋硫辛酸0. 05
酚红25
腐胺0. 65
丙酮酸4内350
乙醇胺0. 008
半乳糖0. 6
2巯基乙醇0. 008
胸腺嘧啶0. 8。
核普和激素包括的組份及含量为:
成份Mg/L
腺苷2. 5
尿嘧啶8. 5
胞苷2. 5
鸟嘌呤8. 6
胰岛素3. 5
地塞米松0. 75
氢化可的松0. 5
前列腺素El0. 007
三碘曱状腺原氨酸0. 000006。
实施例5
培养基由基本培养基、核脊和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及 含量为
氨基酸的组成及重量份如下
成份Mg/L
L-丙氨酸5
L-精氨酸盐酸盐50
一水L-门冬酰胺25
L-天冬氨酸45
L-胱氨酸盐酸盐5. 3
一水L-半胱氨酸盐酸盐25
L-谷氨酸25
L-谷氨酰胺68
谷氨酸65
一水L-组氨酸盐酸盐65
L-羟脯氨酸8. 0
L-异亮氨酸12
L-亮氨酸15
L-赖氨酸盐酸盐30
L-曱硫氨酸35
L-苯丙氨酸5
L-脯氨酸89
L-丝氨酸45
L-苏氨酸10
L-色氨酸3. 5
L-酪氨酸65
L-缬氨酸5
维生素的组成及重量份如下
成份 Mg/L 抗坏血酸钠 0. 01
D-生物素0. 001
维生素D20. 5
氯化胆碱16
叶酸0. 1
肌醇12
烟酰胺0. 01
烟酸0. 001
P-对氨基苯甲酸0. 6
D-泛酸钙0. 06
盐酸吡喷醛0. 65
盐酸吡喷辛0. 01
维生素A0. 65
核黄素0. 005
维生素E0. 03
维生素B1盐酸盐0. 05
维生素B120. 2
无才几盐的组成及重量份如下
成份Mg/L
偏钒酸铵0. 0000001
氯化钩50
五水碌u酸铜0. 02
硝酸铁3
七水硫酸铁4
氯化镁10
硫酸镁20
硫酸锰0. 04 氯化钾 150
碳酸氢钠 6000
氯化钠 10000
磷酸氢二钠 50
七水碌b酸锌 0. 02
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份Mg/L
腺喋呤硫酸盐3. 5
三磷酸腺芬1. 6
胆固醇0. 4
2-脱氧-D-核糖0. 78
D-核糖0. 06
D-葡萄糖5600
谷胱甘肽(还原型)0. 01
鸟嘌呤盐酸盐0. 65
羟脯氨酸钠4. 5
亚油酸0. 3
消旋硫辛酸0. 09
酚红25
腐胺0. 65
丙酮酸钠350
乙醇胺0. 008
半乳糖0. 002
2巯基乙醇0. 35
胸腺嘧咬0. 06。
核苷和激素包括的组份及含量为:
成份Mg/L
腺苷8. 5
尿嗜啶2. 5
胞苷8. 5
鸟噤呤2. 5
胰岛素8. 9
地塞米松0. 07
氢化可的松0. 006
前列腺素El0. 21
三碘曱状腺原氨酸0.0001。
权利要求
1.一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途，其特征在于包括基本培养基，还包括核苷酸和激素。
2. 如权利要求1所述的培养基，其特征在于其中所述的基本培养基包括氨 基酸、维生素、无机盐、其他营养物质。
3. 如权利要求2所述的培养基，其特征在于其中所述的基本培养基包括的组 份及含量为氨基酸的组成及重量份如下成份Mg/LL-丙氨酸5-35L-精氨酸盐酸盐50- 450一水L-门冬酰胺3. 5-25L-天冬氨酸13-45L-胱氨酸盐酸盐5. 3-45一水L-半胱氨酸盐酸盐3. 2-25L-谷氨酸25-120L-谷氨酰胺68-500谷氨酸12-65一水L-组氨酸盐酸盐8-65L-羟脯氨酸2. 5-8. 0L-异亮氨酸12-50L-亮氨酸15-85L-赖氨酸盐酸盐30-150L-甲硫氨酸5-35L-苯丙氨酸5-45L-脯氨酸25—89L-丝氨酸 L-苏氨酸 L-色氨酸 L-酪氨酸 L-缬氨酸维生素的组成及重量份如下成份抗坏血酸钠 D-生物素 维生素D2 氯化胆碱 叶酸 肌醇 烟酰胺 烟酸P-对氨基苯曱酸 D-泛酸钓 盐酸吡p多醛盐酸吡喷辛 维生素A 核黄素维生素E维生素Bt盐酸盐 维生素B12无机盐的组成及重量份如下:10-45 10-45 3. 5-15 12-65 5-36Mg/L0. 01-0. 65 0. 001-0. 08 0. 01-0. 5 3. 6-16 0. 1-3. 5 12-35 0. 01-0. 5 0. 001-0. 25 0. 007-0. 6 0. 06-0. 98 0. Ol-O. 65 0. 01-0. 75 0. 01-0. 65 0. 005—0. 5 0. 001-0. 03 0. 05-1. 2 0. 2-2. 6成份Mg/L偏钒酸铵0. 0000001-0. 002氯化4丐50-200五水》克酸铜0. 00001-0. 02硝酸铁0. 002-3七水硫酸铁0. 05-4氯化镁10-80硫酸镁20-150硫酸锰0. 00001-0. 05氯化钾150-600碳酸氢钠2000- 8000氯化钠4000-10000磷酸氢二钠50-150七水》克酸锌0. 02-5其他营养物质的组成及重量份如下成份Mg/L腺。票呤硫酸盐3. 5-12. 3三磷酸腺苦0. 12-1. 6胆固醇0. 05-0. 42-脱氧-D-核糖0. 06-0. 78D-核糖0. 06-0. 78D-葡萄糖1500-5600谷胱甘肽(还原型)0. 01-0. 065鸟噪呤盐酸盐0. 052-0. 65羟脯氨酸钠0. 65-4. 5亚油酸0. 009—0. 3消旋硫辛酸0. 05-0. 65酚红4. 5-25腐胺0. 65-3. 6丙酮酸钠50-350乙醇胺0. 008—0. 25半乳糖0. 002-0. 62巯基乙醇0. 008-0. 35胸腺嘧啶0. 06—0. 8。
4.如权利要求3所述的培养基，其特征在于其中所述的基本培养基包括的组 份及含量为氨基酸的组成及重量份如下成份Mg/LL-丙氨酸19. 662L-精氨酸盐酸盐162. 98一水L-门冬酰胺8. 7L-天冬氨酸24. 94L-胱氨酸盐酸盐20. 358一水L-半胱氨酸盐酸盐15. 08L-谷氨酸52. 026L-谷氨酰胺232谷氨酸33. 35一水L-组氨酸盐酸盐24. 94L-羟脯氨酸5. 8L-异亮氨酸25. 52L-亮氨酸42. 34L-赖氨酸盐酸盐61. 77L-曱硫氨酸11. 31L-苯丙氨酸17. 4L-脯氨酸43. 21L-丝氨酸20. 59L-苏氨酸24. 36L-色氨酸6. 96L-酪氨酸38. 164L-缬氨酸21. 286维生素的组成及重量份如下成份Mg/L抗坏血酸钠0. 061828D-生物素0. 00986维生素D20. 058氯化胆碱8. 41叶酸0. 7598肌醇20. 909烟酰胺0. 0377烟酸0. 0145P-对氨基苯甲酸0. 029D-泛酸钙0. 2958盐酸吡。多醛0. 0435盐酸吡。多辛0. 0493维生素A0. 0812核黄素0. 029维生素E0. 0058维生素B1盐酸盐0. 1798维生素B120. 812无机盐的组成及重量份如下:成份Mg/L偏钒酸铵0. 0013572氯化4丐135. 256五水》危酸铜0. 00145硝酸铁0. 4176七水硫酸铁0. 4814氯化镁33. 1876硫酸镁56. 84硫酸锰0.00017516氯化钾361.688碳酸氢钠4278. 08氯化钠6200磷酸氢二钠82. 36七水硫酸锌0. 4988其他营养物质的组成及重量份如下成份Mg/L腺。票呤硫酸盐5. 8三磷酸腺苷0. 58胆固醇0. 1162-脱氧-D-核糖0. 29D-核糖0. 29D-葡萄糖3480谷胱甘肽(还原型)0. 029鸟噪呤盐酸盐0. 174 羟脯氨酸钠亚油酸消旋硫辛酸酚红腐胺丙酮酸钠乙醇胺半乳糖2巯基乙醇胸腺嗜咬2. 9986 0. 04640. 1218 12. 2961. 96098 191. 40. 0232 0. 06 0. 0232 0. 174。
5.如权利要求1所述的培养基，其特征在于所述的核苦和激素包括的组份及 含量为Mg/L 2. 5-8. 5 2. 5-8. 5 2. 5-8. 52. 5-8. 63. 5-8. 9 0. 07-0. 75 0. 006-0. 5 0. 007-0. 21 0. 000006-0. 0001。成份腺苷尿嘧啶胞苷鸟噤呤胰岛素地塞米松氢化可的松前列腺素El三碘曱状腺原氨酸
6.如权利要求5所述的培养基，其特征在于所述的核苦和激素包括的组份及 含量为成份 Mg/L 腺脊 4. 06 尿嘧咬 4. 06胞苷 4. 06鸟噤呤 4. 06胰岛素 5. 8地塞米+/> 0.232氢化可的松 0. 01856前列腺素E1 0.029三硪曱状腺原氨酸 0. 00003828。
7. 如权利要求1-6中任意一项所述的培养基在培养杂交瘤细胞中的用途。
8. 如权利要求7所述的用途，其特征在于所述的杂交瘤细胞扩增无血清培养 基，可以直接替换含血清常规培养基，杂交瘤细胞不需要适应过程。
9. 如权利要求8所述的用途，其特征在于所述的培养基使用条件为温度37 。C, 0)2浓度5°/ ,相对湿度>95%。
10. 如权利要求8所述的用途，其特征在于所述的培养基使用条件为温度37 。C， 0)2浓度5°/ ，相对湿度>98%。
全文摘要
本发明涉及一种培养基及其用途，更具体地说涉及一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途。属于生物制品领域。本发明的一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途，其中，包括基本培养基，还包括核苷酸和激素。此杂交瘤细胞无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，杂交瘤细胞不需要适应过程。
文档编号C12N5/12GK101195817SQ20071030706
公开日2008年6月11日 申请日期2007年12月28日 优先权日2007年12月28日
发明者唐贺文, 黄宗堂 申请人:天津百若克医药生物技术有限责任公司