专利名称：梳状药敏试条的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及临床微生物实验室的一种检验用品， 尤其是涉及用于抗菌药物敏感性试验的纸片扩散法的药敏纸片的改 进。
技术背景目前公知的用于抗菌药物敏感性试验的纸片扩散法的 药敏纸片是由抗菌药物附着体、标识字和抗菌药物构成。抗菌药物附 着体是一个直径为6. 35腿的圆形药敏专用吸水纸片，每片的吸水量约 为20yL。抗菌药物附着体上吸附有一定量的抗菌药物，同时上面印有 该抗菌药物的英文缩写。它是由kirby和Bauer两人所创建，故纸片扩 散法又称为K-B法。使用纸片扩散法做抗菌药物敏感性试验时是将含 有定量抗菌药物的纸片(药敏纸片)贴在涂有待检细菌的 Mueller-Hinton琼脂培养基(以下简称为琼脂培养基)上,抗菌药物在 琼脂培养基上向四周自由扩散，抗菌药物在琼脂培养基内的浓度由药 敏纸片边缘向外逐渐递减,使药敏纸片周围的敏感细菌在一定距离内 生长抑制，形成抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定抗菌药物的敏 感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系，即抑 菌圈愈大，MIC愈小。经测量抑菌圈的直径并依照判断标准来判定待检 细菌对被测抗菌药物的敏感程度。其优点是方法简单易行，抗菌药物选 择灵活，可在不同基层微生物实验室使用，判定结果易被临床医师接受, 是目前药敏试验中最成熟的方法之一。但影响这种判定结果的因素也 很多如琼脂培养基的厚度、酸碱度、琼脂培养基中的琼脂的含量、药 敏纸片的含药量、被检菌的接种量及被检细菌繁殖速度不同、培养温度的高低及抗菌药物在琼脂培养基内扩散的速度的不同等都可直接影 响药敏纸片周围琼脂培养基中抗菌药物浓度的分布梯度，进而影响抑 菌圈直径的大小。因此，依照判断标准，按抑菌圈直径的大小只能对抗 菌药物作敏感、中介、耐药三种试验报告，属定性试验，而不能准确推
断最低抑菌浓度(MIC)的数值。所以纸片扩散法药敏试验只适用于普通 快速生长细菌的药敏试验,对缓慢生长的细菌、苛养菌、厌氧菌、真菌 等利用这种方法的药敏试验仍有许多技术障碍没能解决。同时有些细 菌的纸片扩散法的判断标准尚未建立，还有些在琼脂培养基中扩散速 度较小的抗菌药物采用的纸片扩散法试验结果也不可靠(如多粘菌素 B或E)。药敏纸片在生产过程中每片的含药量很难控制。因此，纸片
扩散法远不能满足临床微生物实验室的要求。
发明内容本实用新型的目的是提供一种薄长条形梳状抗菌药物
敏感性检测试条(以下简称梳状药敏试条)，可有效避免纸片扩散法的 种种干扰因素，适用于生长快速或缓慢的细菌、苛养菌、厌氧菌、真菌 等等各种细菌的药敏试验，并可方便地检测出某种抗菌药物对被检菌 的最低抑菌浓度(MIC)。本梳状药敏试条有7个梳齿，在梳齿的上部印 上用于判读最低抑菌浓度(MIC)的13列呈2倍递减的数字，抗菌药物通 过具有粘附作用的缓释剂附着梳齿下部的两面上，每个梳齿附着的抗 菌药物量依梳齿上方的数字大小按4倍比率逐次递减。做药敏试验时 将梳状药敏试条的梳齿垂直插入涂有待检细菌的琼脂培养基内，最大 药量附着端的梳齿紧靠培养皿的边缘，另一端指向培养皿中心，这样就 可以实现本技术(设计)要求1、 把纸片扩散法的由1点扩散变为按直线排列的7点扩散，这7
个扩散点按抗菌药物量由大到小的顺序排列。这样就会在某一扩散点周围 形成最小抑菌区。这种小抑菌区的大小与最低抑菌浓度(MIC)的数值有较大
的负相关关系，使最低抑菌浓度(MIC)数值的准确性大为提高。
2、 可以在梳状药敏试条附近的琼脂培养基内形成连续相对稳定的 抗菌药物浓度梯度。因其梳齿相距较近，所附着的抗菌药物的量自梳状药 敏试条的一端以4倍比率向另一端递减。即相邻梳齿所附着抗菌药物量相 差4倍。做药敏试验时，附着大药量梳齿附近琼脂培养基内的抗菌药物浓度 较高，会对相邻附着小药量梳齿附近琼脂培养基内的低抗菌药物浓度区进 行扩散补充，可以大大减慢相邻附着小药量梳齿附近琼脂培养基中的抗菌 药物浓度因扩散所致的下降，保持该齿附近培养基中的抗菌药物浓度的相 对稳定。这种相邻梳齿附近琼脂培养基内的抗菌药物由高浓度区向低浓度 区逐次扩散补充，会使在整个梳状药敏试条附近的琼脂培养基内的抗菌药 物呈连续的相对稳定的浓度梯度分布，从而消除因细菌的繁殖速率的不同、 培养时间的长短、药物扩散速度的差异、培养基PH值的变化及琼脂含量的 多少对抑菌区大小的影响。
3、 附着最大量抗菌药物的梳齿上的药物扩散形式为半约束方式。做 药敏试验时，由于附着最大量抗菌药物的梳齿紧靠培养皿边缘，附着在这 一梳齿上的抗菌药物只能向有琼脂培养基的方向扩散，呈半约束方式，其 药物浓度下降速度减慢。这种扩散方式使本齿附近琼脂培养基中的抗菌药 物浓度相对稳定。4、 采用药物缓释技术。这一技术可减慢每个梳齿上附着抗菌药物的 释放速度，延长了抗菌药物释放时间，使抗菌药物在琼脂培养基中的浓度 梯度更为稳定，以消除因细菌生长速度不同对抑菌区大小的影响。
5、 可直接读取最低抑菌浓度(MIC)数值。因采取多点抗菌药物的缓 释扩散，在梳状药敏试条附近的琼脂培养基内连续分布有按一定间距呈2 倍递减药物浓度梯度，可在琼脂培养基的表面形成较为固定的抑菌区。在 梳状药敏试条上从最大药量附着端到最小药量附着端依次印上与琼脂培养 基内的药物浓度梯度相符合的由大到小呈2倍递减的数字。这样抑菌区完 全包含梳状药敏试条上的最小数段的数字即为最低抑菌浓度(MIC)数 值，其浓度范围覆盖13个对倍稀释浓度。
6、 采取垂直插入琼脂培养基中的放置方法。由于梳状药敏试条的厚 度为0. 175腿左右，釆用垂直插入琼脂培养基中的放置方法，不会挤出琼脂 培养基中的水份,在培养皿翻转时也不会脱落，并能把药敏纸片的表面渗入 扩散变为内部扩散。这种放置方法，减少了梳状药敏试条在琼脂培养基 上的占有面，在直径为90mm培养皿内最多可放6条梳状药敏试条。
以上技术方法的釆用，可实现本设计目的。
本实用新型的技术方案 一种梳状药敏试条，由薄塑料片材做成 梳子形状的抗菌药物附着体，厚度约为0.175mm，有7个梳齿，全长 为39mm，全宽为10mm(其中梳齿高、梳齿上方高各为5隱，梳齿宽、梳 齿间隙宽各为3mm)。在梳齿上方的一面印有13列呈2倍递减的数字， 其中7列数字与7个梳齿上下对齐，其余6列数字与齿间隙上下对齐, 这样梳齿上方的数字呈4倍递减。另一面印有抗菌药物的英文名称缩 写和最低抑菌浓度(MIC)单位。抗菌药物通过缓释粘附剂附着在梳状药敏试条的梳齿下部的两面上，附着在梳齿下部的抗菌药物量由大至
小呈4倍比率递减，其递减方向应与梳齿上方的数字递减方向一致， 同一梳齿的两面附着抗菌药物量相同。做抗菌药物敏感性试验时，将 梳状药敏试条的梳齿部分垂直插入表面涂有被检菌的琼脂培养基内， 印有大数一端(即最大药量附着端)紧靠培养皿边缘，印有小数一端(即 小药量附着端)指向培养皿中心，即把呈4倍比率递减的不同量抗菌药 物按一定的间隔距离直接带进琼脂培养基内部，经过一定时间缓释扩 散后就在琼脂培养基内形成较为稳定的呈连续对数递减的抗菌药物浓 度分布，并在琼脂培养基表面形成扇形抑菌区。该扇形抑菌区顶点部 位完全包含梳状药敏试条上的最小数段的数字即为最低抑菌浓度 (MIC)的数值，从而方便地检测出某种抗菌药物对被检菌的最低抑菌 浓度(MIC)。 有效效果
1、 本实用新型釆用梳状设计，由薄塑料片材制作，按7个梳齿 分别点加抗菌药物，生产工艺简单，加药量准确、易控。抗菌药物加 入适量的缓释粘附剂后附着在梳齿下部，不易吸潮且与空气接触面积 较小，使其贮存时更稳定。
2、 用梳状药敏试条做试验时，垂直插入的放置方式可减少梳状 药敏试条在琼脂培养基上的占有面，增大抑菌区的观察区域，且便于放 置。并把药敏纸片的表面渗入扩散变为内部扩散。形成的扇形抑菌区有利 于最低抑菌浓度数值读取。在直径90mm的培养皿内可放置5-6条梳状 药敏试条。使用同药敏纸片一样简单。3、用梳状药敏试条做试验时可直接读出某一抗菌药物对被检 细菌的最低抑菌浓度(MIC)数值,并适用于不同生长速度的细菌、苛养 菌、厌氧菌及真菌的药敏试验。
图l是本实用新型印有数字标识面，即最低抑菌浓度(MIC)数字， 该梳状药敏试条的厚度约为0. 175mm。
图2是本实用新型印有抗菌药物英文縮写面及最低抑菌浓度(MIC) 的单位面。
附图中
1、 最低抑菌浓度(MIC)的标识数。
2、 梳齿。 ，
3、 点样斑点。
4、 XXX为某种抗菌药物英文名称的缩写。
5、 最低抑菌浓度(MIC)的单位。
具体实施方式
1、 把双面印有标识的薄塑料片材制成如附图所示抗菌药物附着体。
2、 对梳状的抗菌药物附着体进行消毒。
3、 用蒸馏水或特定溶媒溶解抗菌药物制成抗菌药物贮存液。将抗 菌药物贮存液用2. Og/dL可溶性淀粉水溶液直接稀释成最高浓度应用 液，然后用2. Og/dL可溶性淀粉水溶液连续6次4倍比稀释，即吸前液l份，加2. 0g/dL可溶性淀粉水溶液3份，这样就配成抗菌药物浓 度由高至低，每次递减4倍的7个抗菌药物应用液。
4、 加样时，用微量进样器分别将配制好的7个不同浓度由高至低
的抗菌药物应用液，按梳齿上方所印数字，依照顺序分别加在相应的 7个梳齿下部。每齿下部一面加应用液lnL,另一面加样量同上。晾干。
5、 抗菌药物应用液浓度的确定(标定)。
先用琼脂稀释法准确测定该抗菌药物对被选细菌的最低抑菌浓度 (MIC)的数值，再用这一被选细菌校测该抗菌药物的梳状药敏试条，调 整抗菌药物应用液的浓度，直至用梳状药敏试条检测这一被选细菌的 最低抑菌浓度(MIC)值与琼脂稀释法所测的最低抑菌浓度(MIC)值相同为止。
权利要求1、一种梳状药敏试条由抗菌药物附着体，标识字，抗菌药物构成。其特征在于抗菌药物附着体为梳子形状，抗菌药物通过缓释粘附剂附着于梳状抗菌药物附着体梳齿的下部，标识字印在梳齿的上方。
2、 根据权利要求1所述的一种梳状药敏试条，其特征在于梳状抗菌药 物附着体有7个梳齿，全长为39mm，全宽为10mm。其中梳齿高、梳 齿上方高各为5mm,梳齿宽、梳齿间隙宽各为3mm。
3、 根据权利要求1所述的一种梳状药敏试条，其特征在于梳状抗菌药 物附着体由薄塑料片材制成。厚度约为0.175mm.
4、 根据权利要求1所述的一种梳状药敏试条，其特征在于梳状抗菌药 物附着体的梳齿的上方， 一面印有抗齒药物的英文缩写及最低抑菌浓 度(MIC)单位，另一面印有13列呈2倍递减用于判读最低抑菌难度 (MIC)的数字，其中7列数字与7个梳齿上下对齐，其余6列数字与梳 齿间隙上下对齐，梳齿上方的数字呈4倍递减。
5、 根据权利要求1所述的一种梳状药敏试条，其特征在于梳状抗菌药 物附着体的同 一个梳齿的两侧附着抗菌药物的量相同，各梳齿附着抗 菌药物的总量自印在梳状药敏试条上的大数字的一端向小数字的另一 端呈4倍递减。
6、 根据权利要求1所述的一种梳状药敏试条，其特征在于抗菌药物通 过可溶性淀粉附着于梳状药物附着体梳齿下部。
专利摘要一种用于检测某一抗菌药物对被检菌最低抑菌浓度(MIC)的梳状药敏试条。其特征是通过缓释粘附剂将不同量的抗菌药物由大至小粘附在梳齿下部，上部印有13列呈2倍递减的用于判读MIC的数字。使用时，将该试条的梳齿部分垂直插入表面涂有被检菌的琼脂培养基内，其最大数一端紧靠培养皿边缘，另一端指向培养皿中心。抗菌药物经过一段时间缓释扩散后，在琼脂培养基内形成连续分布的浓度梯度，并在其表面形成扇形抑菌区。此抑菌区包含该试条上最小数段的数即为MIC的数值。其浓度范围覆盖13个对倍稀释浓度。该试条能避免纸片扩散法的种种干扰因素，可适用于不同生长速度的细菌、苛养菌、厌氧菌及真菌的药敏试验。操作方法同纸片扩散法一样简易。
文档编号C12Q1/18GK201309942SQ20082021018
公开日2009年9月16日 申请日期2008年11月21日 优先权日2008年11月21日
发明者升 王 申请人:升 王