通过包括嵌入物分子的探针捕获目标dna和rna的制作方法

通过包括嵌入物分子的探针捕获目标dna和rna的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种通过包括一个或多个嵌入物分子的互补探针来特定捕获单链目标多核苷酸的技术。本发明方法进一步包括与互补探针相互作用之前去除单链目标多核苷酸中一种或多种类型的碱基。结果生成嵌入物分子可与之相互作用或插入其中的一个或多个脱碱基位点。
【专利说明】通过包括嵌入物分子的探针捕获目标DNA和RNA
【技术领域】
本发明涉及一种通过包括一个或多个嵌入物分子的互补探针进行的包括特异捕获单链目标多核苷酸的分子诊断技术，所述多核苷酸可以是由天然存在于的核苷酸制成，或者可以由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，如DNA和/或RNA。该方法进一步涉及，在目标多核苷酸与互补探针相互作用之前，从目标多核苷酸中除去一种或多种类型的碱基，所述多核苷酸可以是由天然存在的核苷酸制成，或者可以由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，如DNA和/或RNA。
【背景技术】
聚合酶链反应(PCR)是一种广泛运用于分子遗传和诊断的技术，可以分析任何短的DNA序列，即使样品中只含有低水平的DNA。PCR用于扩增分析用的DNA或RNA选定片段。
基于PCR的诊断有若干相关的限制。首先，由于PCR的高度灵敏性，存在于实验室环境中的非模板PCR(例如来自细菌，病毒和人类的DNA)污染表现为一个显著的问题。其次，罕见目标的扩增往往被量大目标的扩增所抑制。另外，DNA聚合酶也会引入错误。用于PCR的聚合酶通常缺乏3'至5'核酸外切酶活性，如Taq聚合酶。这种酶缺乏纠正误掺入的核苷酸的能力。
诊断和检测短核苷酸序列的已知方法的其他局限性是它们通常涉及至少一个纯化步骤以及它们的特异性不足以识别一个单独的碱基错配。
被称为嵌入物、嵌入分子或嵌入物分子的共价结合的疏水性结构，以前已被用于核酸的修饰。若干DNA嵌入物，包括:INA、TINA和AMANY以前已有报道[3，4，5]。芘(Pyrene)先前已与双链DNA中的一个脱碱基位点配对[6]。`
【发明内容】

本发明涉及一种从样品中捕获多核苷酸的方法，所述多核苷酸如单链目标多核苷酸，例如DNA或RNA，包括以下步骤:
i)从所述目标多核苷酸中去除一种或多种类型的碱基A、T、U、C或G、5-羟甲基脱氧胞苷(5-hydroxymethyl-dC)、5_甲基胞喃唳(m5C)、假尿苷(Ψ)、二氢尿苷(D)、肌苷(I)、
7-甲基鸟苷(M7G)、次黄嘌呤、黄嘌呤以及它们的2' -O-甲基衍生物和/或N-甲基衍生物，从而生成一个或多个脱碱基位点，和
?)用包括一个或多个嵌入物分子的互补探针捕获所述目标多核苷酸，所述一个或多个嵌入物分子被插入到多核苷酸探针的骨架结构中且与互补多核苷酸目标序列的脱碱基位点形态上相配；
其中所述目标多核苷酸可以是由天然存在的核苷酸制成，或者可以由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，因此所述目标多核苷酸可以由选自以下的核苷酸制成:RNA、a -L-RNA, β _D_RNA、2’ -R-RNA、DNA、锁核酸(LNA)、肽核酸(PNA)、吗啉寡聚体(PMO)、苏糖核酸(TNA)、甘油核酸(GNA)、寡核苷酸N3’ 一 P5’氨基磷酸酯、BNA, a -L-LNA、HNA、MNA、ANA、CAN、INA、CeNA, (2，-NH) -TNA, (3，-NH) -TNA, α -L-核糖-LNA、α -L-木-LNA、β -D-核糖-LNA、β -D-木-LNA、[3.2.1]-LNA、二环-DNA、6- 氨基-二环-DNA、5- 表-二环-DNA、a - 二环-DNA、三环-DNA、二环[4.3.0]-DNA、二环[3.2.1]-DNA、二环[4.3.0]氨酰-DNA、β -D-吡喃核糖基-ΝΑ(β -D-Ribopyranosyl-NA)、a -L-来苏糖基-NA、2’-0R-RNA、2’ -AE-RNA、及它们的结合物和修饰物。
本发明的一个优选实施方式涉及一种捕获单链目标多核苷酸的方法，包括以下步骤:(i)提供双链目标多核苷酸，其可以是由天然存在的核苷酸制成，或者可以由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，如DNA ；
(ii)通过去除所述双链目标多核苷酸如DNA中一种或多种类型的碱基，使所述双链目标多核苷酸如DNA不稳定，从而生成一个或多个脱碱基位点；
(iii)使所述不稳定的双链目标多核苷酸如DNA变性成单链目标多核苷酸如DNA，和
(iv)用互补多核苷酸探针如DNA探针捕获所述单链目标多核苷酸如DNA，所述互补多核苷酸探针包括插入到多核苷酸探针的骨架结构中且与互补多核苷酸目标序列的脱碱基位点形态上相配的一个或多个嵌入物分子。
在一个特定的实施方式中，本发明涉及一种从样品中捕获多核苷酸，如单链目标DNA或RNA的方法，包括以下步骤:
i)从所述目标多核苷酸，如DNA或RNA中除去一种或多种类型的碱基A、T、U、C或G，从而生成一个或多个脱碱基位点，和
ii)用包括一个或多个嵌入物分子的互补探针捕获所述目标多核苷酸，如DNA或RNA,所述嵌入物分子可插入到所述一个或多个脱碱基位点的一个或多个中。
在另一个特定的实施方式中，本发明涉及一种捕获单链目标DNA的方法，包括以下步
骤:
(i)提供双链目标DNA
(ii)通过去除所述双链目标DNA的一种或多种类型的碱基A、T、U、C或G使所述双链目标DNA不稳定从而生成一个或多个脱碱基位点
(iii)使所述不稳定的双链目标DNA变性成单链目标DNA，和
(iv)用一个包括一个或多个嵌入物分子的互补DNA探针捕获所述单链目标DNA,所述一个或多个嵌入物分子可插入到一个或多个脱碱基位点中。
本发明进一步涉及多核苷酸探针，其可以是由天然存在的核苷酸制成，或者可以由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，所述探针包括两个或多个适于捕获单链目标多核苷酸的嵌入物分子，其中所述单链目标多核苷酸可以是由天然存在的核苷酸制成，或者可以由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，如DNA和/或RNA。
定义和缩写
术语“核碱基”或“碱基”是指一组氮基分子，是形成多核苷酸所必需的，因为它们为互补核苷酸链的氢键结合提供了必要的分子结构而且是形成稳定的多核苷酸分子的关键组成。核碱基的例子包括但不限于选自A、G、C、T、U、5-羟甲基脱氧胞苷、5-甲基胞嘧啶(m5C)、假尿苷(Ψ)、二氢尿苷⑶、肌苷(1)、7-甲基鸟苷(m7G)、次黄嘌呤、黄嘌呤及它们的2' -O-甲基衍生物和/或N-甲基衍生物。
这些碱基中:A:腺嘌呤。腺嘌呤与例如胸腺嘧啶形成碱基对。
T:胸腺嘧啶。胸腺嘧啶与例如腺嘌呤形成碱基对。
G:鸟嘌呤。鸟嘌呤与例如胞嘧啶形成碱基对。
C:胞嘧啶。胞嘧啶与例如鸟嘌呤形成碱基对。
U:尿嘧啶。尿嘧啶与例如腺嘌呤形成碱基对。
术语“多核苷酸序列“是指天然存在的或者自然界中未知的核苷酸序列。这些核苷酸的非限制性例子包括选自:RNA、a -L-RNA、β _D_RNA、2’ -R-RNA、DNA、LNA、PNA、PMO、TNA, GNA,寡核苷酸 N3’ 一 P5’ 氨基磷酸酯、BNA、a -L-LNA, HNA, MNA, ANA、CAN、ΙΝΑ、CeNA、(2，-NH)-TNA、(3，-NH)-TNA、α -L-核糖-LNA、α -L-木-LNA、β -D-核糖-LNA、β -D-木-LNA、[3.2.1]-LNA, 二环 _DNA、6_ 氨基-二环-DNA，5-表-二环-DNA、α - 二环-DNA、三环-DNA、二环[4.3.0]_DNA、二环[3.2.1]_DNA、二环[4.3.0]氨酰-DNA、β -D-批喃核糖基-NA、a-L-来苏糖基-NA、2’ -0R-RNA、2’ -AE-RNA、及它们的结合物和修饰物。
术语“天然存在的核苷酸”和“天然存在的核苷酸序列”是指由天然存在的核苷酸，如包括RNA (如a -L-RNA, β -D_RNA、2’ -R-RNA)和/或DNA组成的多核苷酸序列。
术语“自然界中未知的多核苷酸序列”是指自然界中未得知的多核苷酸序列，即，由天然存在的核苷酸的一种或多种类似物制成的多核苷酸。这些类似物的非限制性例子选自:LNA、PNA、PMO、TNA、GNA、寡核苷酸 N3’ 一 P5’ 氨基磷酸酯、BNA、a -L-LNA, HNA、MNA、ANA、CAN、INA、CeNA, (2，-NH)-TNA、(3，-NH)-TNA、a -L-核糖-LNA、a -L-木-LNA、β -D-核糖-LNA、β -D-木-LNA、[3.2.1]-LNA、及它们的结合物和修饰物。这些“自然界中未知的多核苷酸序列”可以是由自然界未知的核苷酸类似物作为唯一一种核苷酸组成，或者可以是天然存在的核苷酸部分和不存在于自然界中的核苷酸类似物的组合物。
术语“LNA”是指锁核酸，通常为不可接近的RNA而且是修饰过的RNA核苷酸。LNA核苷酸的核糖部分经额外的桥修饰过，所述额外的桥连接2'氧和4'碳。该桥将核糖“锁定”为3'-内(北)构象:
【权利要求】
1.一种从样品中捕获目标多核苷酸的方法，包括以下步骤: i)从目标多核苷酸中去除一种或多种类型的碱基A、T、U、C或G、5-羟甲基脱氧胞苷、5-甲基胞嘧啶(m5C)、假尿苷(Ψ)、二氢尿苷(D)、肌苷(I)、7-甲基鸟苷(M7G)、次黄嘌呤、黄嘌呤以及它们的2’ -O-甲基衍生物和/或N-甲基衍生物，从而生成一个或多个脱碱基位点，和 ?)用包括一个或多个嵌入物分子的互补探针捕获所述目标多核苷酸，所述嵌入物分子插入到多核苷酸探针的骨架结构中且所述一个或多个嵌入物分子与互补多核苷酸目标序列的一个或多个脱碱基位点形态上相配； 其中所述目标多核苷酸可是由天然存在的核苷酸制成，或者可由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，因此所述目标多核苷酸可由选自以下的核苷酸制成:RNA、a -L-RNA, i3-D-RNA、2’ -R-RNA, DNA、锁核酸、肽核酸、吗啉寡聚体，苏糖核酸、甘油核酸、寡核苷酸 N3’ 一 P5’ 氨基磷酸酯、BNA、a _L_LNA、HNA、MNA、ANA、CAN、INA、CeNA、(2，-NH) -TNA,(3，-NH)-TNA、a -L-核糖-LNA、a-L-木-LNA、β -D-核糖-LNA、β -D-木-LNA、[3.2.1]-LNA、二环-DNA、6-氨基-二环-DNA, 5-表二环-DNA、α - 二环-DNA、三环-DNA、二环[4.3.0]-DNA、二环[3.2.1]_DNA、二环[4.3.0]氨酰DNA、β -D-吡喃核糖基-NA、a -L-来苏糖基-NA、2’ -0R-RNA、2’ -AE-RNA、及它们的结合物和修饰物。
2.根据权利要求1所述的方法，捕获单链目标DNA包括以下步骤: (i)提供双链目标多核苷酸，其可是由天然存在的核苷酸制成，或者可由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，如DNA ； (?)通过去除所述双链目标多核苷酸如DNA中一种或多种类型的碱基使所述双链目标多核苷酸如DNA不稳定，从而生成一个或多个脱碱基位点；` (iii)使所述不稳定的双链目标多核苷酸如DNA变性成单链目标多核苷酸如DNA，和 (iv)用互补多核苷酸探针如DNA探针捕获所述单链目标多核苷酸如DNA，所述互补多核苷酸探针包括一个或多个嵌入物分子，其插入到多核苷酸探针的骨架结构中且与互补多核苷酸目标序列的一个或多个脱碱基位点形态上相配。
3.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述互补探针由多核苷酸制成，所述多核苷酸可是由天然存在的核苷酸制成，或者可由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物，因此所述互补探针可由选自以下的核苷酸制成:RNA、α-L-RNA、β-D-RNA、2’ -R-RNA、DNA、锁核酸、肽核酸、吗啉寡聚体，苏糖核酸、甘油核酸、寡核苷酸N3’ 一 P5’氨基磷酸酯、BNA、a -L-LNA, HNA、MNA、ANA、CAN、INA、CeNA, (2，-NH) -TNA, (3，-NH) -TNA,a -L-核糖-LNA、a -L-木-LNA、β -D-核糖-LNA、β -D-木-LNA、[3.2.1] -LNA、二环-DNA、6-氨基-二环-DNA,5-表二环-DNA、α - 二环-DNA、三环-DNA、二环[4.3.0] -DNA、二环[3.2.1] -DNA、二环[4.3.0]氨酰 DNA、β -D-吡喃核糖基-NA、a -L-来苏糖基-NA、2’ -0R-RNA、2’ -AE-RNA、及它们的结合物和修饰物。
4.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述方法进一步包括一个或多个洗涤步骤以去除未结合的核苷酸材料，所述核苷酸材料可是由天然存在的核苷酸制成，或者可由自然界中未知的核苷酸制成，或它们的任何混合物。
5.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述方法进一步包括将双链目标多核苷酸中的一种或多种类型的碱基转换成另一化学实体。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述方法进一步包括通过去除所述双链目标多核苷酸中的一个或多个化学实体使所述双链目标多核苷酸不稳定。
7.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述方法进一步包括目标多核苷酸中的一个或多个C转换成一个或多个U。
8.根据权利要求7所述的方法，其中通过亚硫酸氢盐处理使目标多核苷酸中的一个或多个C转换成一个或多个U。
9.根据任一前述权利要求所述的方法，其中从所述双链目标多核苷酸和/或单链多核苷酸中去除A。
10.根据任一前述权利要求所述的方法，其中从所述双链目标多核苷酸和/或单链多核苷酸中去除T。
11.根据任一前述权利要求所述的方法，其中从所述双链目标多核苷酸和/或单链多核苷酸中去除C。
12.根据任一前述权利要求所述的方法，其中从所述双链目标多核苷酸和/或单链多核苷酸中去除G。
13.根据任一前述权利要求所述的方法，其中从所述双链目标多核苷酸和/或单链多核苷酸中去除U。
14.根据任一前述权利要求9-13所述的方法，其中通过一种或多种酶和/或物理应力和/或温度变化来去除碱基。
15.根据权利要求13所述的方法，其中通过使用尿嘧啶脱氢酶来去除U。
16.根据权利要求9所述的方法，其中通过调节pH值来去除A。
17.根据任一前述权利要求所述的方法，其中从目标多核苷酸中去除1、2或3种类型的喊基。
18.根据任一前述权利要求所述的方法，其中从目标多核苷酸中去除的碱基总数为选自 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20 和大于 20 个碱基。
19.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述互补探针包括一个或多个嵌入物分子。
20.根据权利要求19所述的方法，其中嵌入物分子的总数可选自1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20 和大于 20 个嵌入物分子。
21.根据任一前述权利要求所述的方法，其中嵌入物分子插入到目标DNA和/或RNA中10%-100% 的脱碱基位点，如 10%-20%、例如 20%-30%、如 30%_40%、例如 40%_50%、如 50%_60%、例如60%-70%、如70%-80%、例如80%-90%、如90%_100%或者它们的任何结合。
22.根据任一前述权利要求所述的方法，其中嵌入物分子插入到目标DNA和/或RNA中10%以上的脱碱基位点，如20%以上，例如30%以上，如40%以上，例如50%以上，如60%以上，例如70%以上，如80%以上，例如90%以上，如95%以上，例如100%ο
23.根据权利要求21和22所述的方法，其中嵌入物分子插入的结果增加了由目标多核苷酸与互补探针组成的多核苷酸双链的熔化温度。
24.根据任一前述权利要求所述的方法，其中嵌入物分子的数量与互补探针的碱基总数之间的比例为 1:50-1:2，如 1:50-1:40、例如 1:40-1:30、如 1:30—1:20、例如 1:20-1:10、如1:10-1:5、例如1:5-1:2，或这些间隔的任何结合。
25.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述一个或多个嵌入物分子选自:TINA、INA、邻-TINA、对-TINA 和 AMANY。
26.根据任一前述权利要求所述的方法，其中嵌入物分子的面积为20-400A之间，如 20-40 A、例如 40-60 A、如 60-80 人、例如 80-100 A、如 100-120 A、例如120-140 A、如 140-160 A、例如 160-180 A、如 180-200 A、例 ^li 200-220 A、如220-240 A、例如 240-260 A、如 260-280 A、例如 280-300 A、如 300-320 人、例如320-340 A、如340-360 A、例如360-380 A、如380-400 A、或这些间隔的任何结合。
27.根据任一前述权利要求所述的方法，其中互补探针包括一种或多种类型的嵌入物分子，如2、3、4、5或大于5个不同类型的嵌入物分子。
28.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述互补探针连接支撑物。
29.根据权利要求28所述的方法，其中所述支撑物为选自聚醚醚酮(PEEK)、PP(聚丙烯)、PE(聚乙烯)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚氯乙烯(PVC)、聚酰胺/尼龙(PA)、聚碳酸脂(PC)、环烯烃共聚物(COC)、滤纸、棉、纤维素、聚(4-乙烯基苄基氯)(PVBC)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚苯乙烯(PS)、Toyopearl?水凝胶、聚酰亚胺(PI)、1，2-聚丁二烯(PB)、液体娃橡胶(Liquid silicon rubber)、聚二甲基硅氧烷(PDMS)、含氟聚合物和共聚物(例如聚(四氟乙烯)(PTFE)、全氟乙烯丙烯共聚物(FEP)、四氟乙烯(ETFE))、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、纳米多孔材料、膜、介孔蜂窝泡沫(MCF)和单壁或多壁碳纳米管(SWCNT、MWCNT)、颗粒物质、珠子、磁珠、非磁珠、聚苯乙烯珠子、磁性聚苯乙烯珠子、Sepharose珠子、聚丙烯酰胺葡聚糖珠子、聚苯乙烯珠子、琼脂糖珠子、多糖珠子和聚碳酸酯珠子。
30.根据权利要求29所述的方法，其中所述支撑物是固体支撑物。
31.根据权利要求30所述的方法，其中所述固体支撑物为选自微量滴定板或其他板格式、试剂管、载玻片和其他用于阵`列或微阵列分析的支撑物，微流控室或设备的管道或通道和Biacore芯片。
32.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述方法进一步包括使用包括一个或多个标签的互补检测探针。
33.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述互补探针包括一个或多个标签。
34.根据任一权利要求32-33所述的方法,其中所述一个或多个标签选自:生物素、突光素标签、5-(和6)羧基荧光素、5-或6-羧基荧光素、6-(荧光素)-5-(和6)-羧酰胺己酸、异硫氰酸荧光素氰酸(FITC)、罗丹明、四甲基罗丹明、染料、Cy2、Cy3、和Cy5、PerCP、藻胆蛋白、R-藻红蛋白(RPE)、异藻红蛋白(APC)、德克萨斯(Texas)红、Princeston Red、绿色荧光蛋白(GFP)及它们的类似物、R-藻红蛋白(RPE)或异藻红蛋白(APC)的共缀物、基于半导体纳米晶体(像量子点和Qdot?纳米晶体)的无机荧光标签、基于镧系元素如Eu3+和Sm3+的时间分辨荧光标签、半抗原、DNP、地高辛、酶标签、辣根过氧化物酶(HRP)、磷酸酶(AP)、β -半乳糖苷酶(GAL)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、β -N-乙酰氨葡萄糖苷酶、β -葡萄糖醛酸酶、黄嘌呤氧化酶、蔗糖酶、萤火虫荧光素酶和葡萄糖氧化酶(GO)、夜光标签、鲁米诺、异鲁米诺、吖啶酯、1，2-二氧环乙烷、吡啶哒嗪、放射性标签、同位素碘、同位素钴、同位素硒、同位素氚和同位素磷。
35.根据权利要求34所述的方法，其中通过用链霉亲和素-R-藻红蛋白检测生物素。
36.根据权利要求34所述的方法，其中所述方法进一步包括加入检测探针之前和/或之后的洗涤步骤。
37.根据任一权利要求34-36所述的方法，其中所述互补检测探针包括一个或多个嵌入物分子。
38.根据权利要求37所述的方法，其中嵌入物分子的总数为选自1，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20以及大于20的不同或相同的嵌入物分子。
39.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述目标多核苷酸来自人类、动物、细菌、病毒、真菌、朊病毒、原生动物和/或植物。
40.根据任一前述权利要求所述的方法，其中目标多核苷酸分离自人或动物身体。
41.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述目标多核苷酸分离自人、动物、鸟类、昆虫、植物、藻类、真菌、酵母、病毒、细菌和噬菌体、多细胞和单细胞有机体。
42.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述目标多核苷酸分离自粪便、血液、精液、脑脊液(CSF)、痰、阴道液、尿液、唾液、毛发、其他体液、组织样品、整个器官、汗、泪、皮肤细胞、毛发、骨骼、牙齿或自来个人物品(如牙刷、剃须刀等)或从样品(如精子或活检组织或液体)的适当液体或组织、或人类或动物的其他子结构。
43.根据任一前述权利要求所述的方法，其中被捕获的不同的目标多核苷酸序列总数为选自 1、2-5、5-10、10-15、15-20、20-25、25-30、30-35、35-40、40-45、45-50、50-55、55-60、60-65、65-70、70-75、75-80、80-85、85-90、95-100、100-150、150-200、200-300、300-500、500-1000以及大于1000的不同目标多核苷酸序列，或这些间隔的任何结合。
44.一种诊断一种或多种疾病的方法，包括使用根据任一权利要求1-43所述的方法。
45.根据权利要求44所述的方法，其中所述诊断包括从受试个体的基因组中检测目标多核苷酸。
46.根据任一权利要求44-45所述的方法，其中诊断包括检测不是来自受试个体基因组的目标多核苷酸。
47.根据任一权利要求44-46所述的方法，其中诊断包括检测来自细菌、病毒、真菌、朊病毒、原生动物和/或植物的目标多核苷酸。
48.根据任一权利要求44-47所述的方法，其中待诊断的疾病为一种或多种遗传，即遗传性疾病，如选自:CADASIL综合征、迟发性多发性羧化酶缺乏症、家族性小脑视网膜血管瘤病、克罗恩氏病、苯丙氨酸羟化酶缺乏症、法布里病、遗传性粪卟啉病、色素失禁症、头小畸型、多囊肾病、PHF8基因突变引起的Siderius X-链锁智力低下综合征和软骨发育不全的一种或多种疾病。
49.根据任一权利要求44-47所述的方法，其中待诊断的疾病为一种或多种疾病，如遗传性疾病，癌症和传染性疾病，头痛和本发明方法可能是有效的其他疾病。
50.根据任一权利要求44-47和49所述的方法，其中待诊断的疾病是癌症。
51.根据权利要求50所述的方法，其中所述癌症的特征在于一个或多个基因或编码选自
52.根据权利要求50所述的方法，其中所述癌症的特征在于一个或多个肿瘤抗原选自:α -辅肌动蛋白 4、ARTCU BCR-ABL 融合蛋白(b3a2)、B-RAF、CASP-5、CASP-8、β -连环蛋白、Cdc27、CDK4、CDKN2A、COA-U dek-can 融合蛋白、EFTUD2、延伸因子 2、ETV6-AML1融合蛋白、FLT3-1TD、FNl、GPNMB, LDLR-岩藻糖转移酶 AS 融合蛋白，HLA_A2d、HLA-Alld,hsp70-2、KIAA0205、MART2、MEl、MUM-1f, MUM-2, MUM-3, neo-PAP、肌球蛋白 1、NFYC, OGT,OS-9、P53、pml-RARalpha 融合蛋白、PRDX5、PTPRK、K_ras、N_ras、RBAF600、SIRT2、SNRPDUSYT-SSXl 或-SSX2 融合蛋白、磷酸丙糖异构酶、BAGE-U GAGE-1,2,8, GAGE-3, 4, 5,6,7,GnTVf、HERV-K-MEL、KK-LC-U KM-HN-U LAGE-1、MAGE-AU MAGE-A2、MAGE-A3、MAGE-A4、MAGE-A6、MAGE-A9、MAGE-AlO, MAGE-Al2, MAGE-C2、mucink、NA-88, NY-ES0-1/LAGE-2、SAGE、Sp 17、SSX-2、SSX-4、TRAG-3、和 TRP2_INT2g。
53.根据权利要求50所述的方法，其中所述癌症的特征在于一个或多个基因或选自RASSF2和SFRP2的基因发生一个或多个突变。
54.根据权利要求50所述 的方法，其中所述癌症的特征在于一个或多个基因或选自TFPI2、NDRG4、GATA4或GATA5的基因发生一个或多个突变。
55.根据权利要求44所述的方法，其中所述诊断包括胎儿疾病的诊断。
56.根据任一权利要求1-43所述的方法在个性化医疗中的用途。
57.一种目标RNA定量的方法，包括使用根据任一权利要求1-43所述的方法。
58.—种检测一个或多个目标多核苷酸的方法，包括使用根据任一权利要求1-43所述的方法。
59.根据权利要求58所述的方法，其中所述样品是饲料、土壤、食品或饮用水。
60.根据任一权利要求57-59所述的方法，其中目标DNA和/或RNA是来自人类、动物、细菌、病毒、真菌、朊病毒、原生动物和/或植物。
61.根据权利要求39和60所述的方法，其中所述细菌选自:金黄醋杆菌、不动杆菌属、鲍氏不动杆菌、乙酸钙不动杆菌、约氏不动杆菌、琼氏不动杆菌、鲁氏不动杆菌、抗辐射不动杆菌、败血症不动杆菌、申氏不动杆菌、邬氏不动杆菌；放线菌属:牛型放线菌、鲍氏放线菌、狗阴道放线菌、卡底弗放线菌)、小狗放线菌、狗阴道放线菌、牙放线菌、齿垢放线菌、欧洲放线菌、芬氏放线菌、乔氏放线菌、戈氏放线菌、葛氏放线菌、香港海_放线菌、受损大麦放线菌、豪氏放线菌、腐质生放线菌、猪阴道放线菌、衣氏放线菌、海哺乳动物放线菌、迈氏放线菌、 内氏放线菌、居鼻放线菌、纽氏放线菌、龋齿放线菌、口腔放线菌、齿根放线菌、瑞丁放线菌、斯氏放线菌、链霉素放线菌、猪胰腺炎放线菌、猪放线菌、图列茨放线菌、泌尿生殖器放线菌、牛颚放线菌、黏放线菌；放线杆菌属:伴放线凝聚杆菌、关节炎放线杆菌、荚膜放线杆菌、栖海豚放线杆菌、马驹放线杆菌、人放线杆菌、吲哚放线杆菌、李氏放线杆菌、小放线杆菌、小鼠放线杆菌、大叶性肺炎放线杆菌、小猪放线杆菌、罗氏放线杆菌、苏格兰放线杆菌、种子放线杆菌、产琥珀酸放线杆菌、猪放线杆菌、脲放线杆菌；气单胞菌属:异常嗜糖气单胞菌、兽气单胞菌、软壁气单胞菌、鳗鱼气单胞菌、肠产泥气单胞菌、嗜矿泉气单胞菌、嗜水气单胞菌、小鱼气单胞菌、简氏气单胞菌、中间气单胞菌、软体动物气单胞菌、疱氏气单胞菌、斑点气单胞菌、杀鲑气单胞菌、舒氏气单胞菌、夏氏气单胞菌、猴气单胞菌、温和气单胞菌、维罗纳气单胞菌；猫阿菲波菌、农杆菌:放射形农杆菌、发根农杆菌、悬钩子农杆菌、根癌农杆菌；土壤单胞菌属、产碱菌属:水生产碱菌、真氧产碱菌、粪产碱菌、广泛产碱菌、木糖氧化产碱菌；另类希瓦氏菌属、交替球菌属、人粒细胞无形体、边缘无形体、Aquamonas菌属、溶血隐秘杆菌、Aranicola菌属、杀雄菌属、Azotivirga菌属、棕色固氮菌、褐色球形固氮菌、细菌性痢疾(志贺氏细菌性痢疾)、芽孢杆菌属:牛种芽孢杆菌(布氏杆菌生物型流产)、炭疽芽孢杆菌(炭疽热)、短芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、凝固芽孢杆菌、梭形芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、葷状芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌；拟杆菌属:福赛斯拟杆菌(福赛斯坦纳菌)、产酸拟杆菌、吉氏拟杆菌(重新分类为Parabacteroides distasonis)、狗齿銀B卜啉单胞菌、纤细弯曲杆菌、脆弱拟杆菌、口腔拟杆菌、卵形拟杆菌、腐败拟杆菌、化脓拟杆菌、粪便拟杆菌、猪拟杆菌、隐蔽拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌；巴尔通体属:阿尔萨斯巴尔通体、杆状巴尔通体、birtlesii巴尔通体、牛巴尔通体、狗巴尔通体、克氏巴尔通体、多氏巴尔通体、伊氏巴尔通体、格氏巴尔通体、汉氏巴尔通体(猫抓热)、科氏巴尔通体、鼠巴尔通体、跳鼠巴尔通体、五日热巴尔通体、rochalimae巴尔通体、schoenbuchii巴尔通体、廳巴尔通体、泰勒氏巴尔通体、部落巴尔通体、文氏巴尔通体阿如波亚种、文氏巴尔通体伯氏亚种、文氏巴尔通体文氏亚种、巴尔通体；卡介苗(BCG)、动物溃疡伯杰氏菌(兽伤威克菌)、两歧双歧杆菌、芽生杆菌属、Blochmannia菌属、博德特氏菌属:ansorpii’博得特氏菌、鸟博得特氏菌、支气管炎博得特氏菌、欣氏博德特氏菌、霍氏博得特氏菌、霍氏博德特氏菌、副百日咳博德特氏菌(百日咳)、Petrii博德特氏菌、创口博德特氏菌；疏螺旋体属、布氏疏螺旋体、阿氏疏螺旋体、鹅疏螺旋体、嘎氏疏螺旋体、瓦莱疏螺旋体、赫氏蜱疏螺旋体、扁虱疏螺旋体、回归热疏螺旋体；包西氏菌属、慢生根瘤菌属、Brenneria菌属、布鲁氏菌属:牛种布鲁氏菌、犬种布鲁氏菌、马尔它布鲁氏菌、木鼠布鲁氏菌、羊布鲁氏菌、猪布鲁氏菌、鳍脚布鲁氏菌；巴克纳氏菌属、布戴约维采菌属、伯克氏菌属:洋葱伯克氏菌(洋葱假单胞菌)、鼻疽伯克氏菌(鼻疽假单胞菌/鼻疽放线杆菌)、类鼻疽伯克氏菌(类鼻疽假单胞菌)；布丘氏菌属、肉芽肿鞘杆菌、弯曲杆菌属:大肠弯曲杆菌、简明弯曲杆菌、曲形弯曲杆菌、粪弯曲杆菌、纤细弯曲杆菌、瑞士弯曲杆菌、空肠弯曲杆菌、豚肠弯曲杆菌、黑岛弯曲杆菌、空肠弯曲杆囷、Ianienae弯曲杆囷、C红嘴E鸟弯曲杆囷、粘I旲弯曲杆囷、直肠弯曲杆囷、昭和弯曲杆菌、唾液弯曲杆菌、乌普萨拉弯曲杆菌；狗咬二氧化碳噬纤维菌(生长缓慢的发酵罐2型)、棒状杆菌属、人形棒状杆菌、西地西菌属、衣原体属:砂眼衣原体(性病淋巴肉芽肿)、muridarum衣原体、猪衣原体；衣原体属:肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体(鹦鹉热)、刚果嗜衣.原体、流产衣原体、猫衣原体、豚鼠衣原体；梓檬酸杆菌属:非丙二酸柠檬酸杆菌、布氏朽1檬酸杆菌、法氏柠檬酸杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、吉氏柠檬酸杆菌、中间柠檬酸杆菌、差别柠檬酸杆菌又称差别柠檬酸杆菌、莫氏柠檬酸杆菌、腐蚀柠檬酸杆菌、塞氏柠檬酸杆菌、魏氏朽1檬酸杆菌、杨氏柠檬酸杆菌；梭菌属:肉毒杆菌、艰难梭菌、诺氏梭菌、败血梭菌、破伤风梭菌(破伤风)、韦氏梭菌(产荚膜梭菌)；棒杆菌属:白喉棒杆菌(白喉)、无枝菌酸棒杆菌、水生棒杆菌、牛棒杆菌、马红球菌、微黄棒杆菌、谷氨酸棒杆菌、溶血隐秘棒杆菌、杰氏棒杆菌(JK小组棒杆菌)、极小棒杆菌(红癣)、小棒杆菌(又称为疮疱棒杆菌)、假白喉棒杆菌(又称为霍氏棒杆菌)、啮齿类假结核棒杆菌(又称为绵羊棒杆菌)、化脓棒杆菌、解脲棒杆菌(D2小组棒杆菌)、兔肾棒杆菌、纹带棒杆菌、纤细棒杆菌(胶群藻色菌毛菌病、腋脉毛发菌病)、溃疡棒杆菌、干燥棒杆菌；伯氏立克次氏体(Q热病原体)、克洛诺菌属:阪崎克洛诺菌、丙二酸年轻泰坦杆菌属、苏黎世年轻泰坦杆菌属、莫氏年轻泰坦杆菌属(Cronobactermuytjensii)、都柏林年轻泰坦杆菌属(Cronobacter dublinensis );代尔夫特食酸菌(食酸假单胞菌)、迪基氏菌属、爱德华氏菌属、啮蚀艾肯菌、肠杆菌属:产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、阪崎肠杆菌；肠球菌属:鸟肠球菌、耐久肠球菌、粪肠球菌(粪链球菌/D组链球菌)、屎肠球菌、孤立肠球菌、鹑鸡肠球菌、病臭肠球菌；恰菲埃里希氏菌、猪肝毒杆菌、欧文氏菌属、埃希氏菌属:非脱羧埃希氏菌、albertii埃希氏菌、蟑螂埃希氏菌、大肠杆菌、弗洛森埃希氏菌、赫氏埃希氏菌、伤口埃希氏菌；爱文氏菌属、黄杆菌属:水生黄杆菌、嗜鳍黄杆菌、黄杆菌、内海黄杆菌、关德瓦纳黄杆菌、黄囊黄杆菌、约氏黄杆菌、噬果胶黄杆菌、嗜冷黄杆菌、嗜糖黄杆菌、需盐黄杆菌、大菱鲆金黄杆菌、琥珀酸黄杆菌；土拉热弗朗西丝氏菌(土拉菌病)、新凶手弗朗西丝氏菌、蜃楼弗朗西丝氏菌、梭杆菌属:坏死弗朗西丝氏菌(勒米埃综合症/坏疽热死杆菌)、具核梭杆菌、多态梭杆菌、偏磷酸四环素梭杆菌、死亡梭杆菌、可变梭杆菌；阴道加德纳氏菌、溶血奈氏球菌、麻疹孪生球菌麻疹微球菌、Grimontella菌属、嗜血菌属:埃及流感嗜血菌(埃及嗜血菌)、嗜沫嗜血菌、鸟巴斯德嗜血菌、杜氏嗜血菌(软下疳)、猫嗜血菌、溶血嗜血菌、流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌、副兔嗜血菌、副溶血嗜血菌、副流感嗜血菌、副嗜沫嗜血菌(副嗜沫嗜血菌)、百日咳嗜血菌、pittmaniae嗜血菌、睡眠嗜血菌、阴道嗜血菌；哈夫尼菌属、蜂房哈夫尼菌、螺杆菌属:猎豹螺杆菌、鹅螺杆菌、金仓鼠螺杆菌、胆汁螺杆菌、毕氏螺杆菌、加拿大鹅螺杆菌、加拿大螺杆菌、犬螺杆菌、胆囊螺杆菌、同性恋螺杆菌、胃螺杆菌、猫螺杆菌、芬纳尔螺杆菌、蛇形螺杆菌、海尔曼螺杆菌(人型Gastrospirillum)、螺杆菌、肝螺杆菌、幽门螺杆菌旱獭属、小家鼠螺杆菌、鼬鼠螺杆菌、帕美特螺杆菌、胃肠炎螺杆菌、幽门螺杆菌(胃溃疡)、芜菁幽门螺杆菌、啮齿幽门螺杆菌、扎氏螺杆菌、频齿螺杆菌、typhlonius幽门螺杆菌、winghamensis幽门螺杆菌；人粒细胞埃立克体病(嗜吞曬细胞无形体/人粒细胞埃立克体)、人类monocytotropic埃立克体病(单核细胞埃立克体病/查菲埃立克体)、克雷伯菌属:肉芽肿克雷伯氏菌(肉芽肿肉芽肿荚膜杆囷)、活动克雷伯氏囷、解鸟氣Ife克雷伯氏囷、广Ife克雷伯氏囷、臭鼻克雷伯氏囷、植生克雷伯氏囷、肺炎克雷伯氏囷、鼻硬结肺炎克雷伯氏囷、新加波克雷伯氏囷、土生克雷伯氏囷、植生克雷伯氏菌、Klebsiella variicola ;金氏金氏菌、克吕沃尔氏菌属、乳酸杆菌属):耐.酸乳杆菌、acidifarinae乳杆菌、马里乳杆菌、嗜酸乳杆菌(德得来因杆菌)、敏捷乳杆菌、食品乳杆菌、消化乳杆菌、溶淀粉乳杆菌、嗜淀粉乳杆菌、嗜淀粉乳杆菌、食淀粉乳杆菌、动物乳杆菌、安德里乳杆菌、apodemi乳杆菌、鸟乳杆菌、双发酵乳杆菌、短乳杆菌、布氏乳杆菌、乳杆菌病、干酪乳杆菌、链状乳杆菌、ceti乳杆菌、人型乳杆菌、丘状菌落乳杆菌、堆肥化处理乳酸菌、弧形乳杆菌、棒状乳杆菌、卷状乳杆菌、面包乳杆菌、弯曲乳杆菌、德氏乳酸杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、德氏乳杆菌球菌亚种、diolivorans乳杆菌、小马乳杆菌、马乳杆菌、farraginis乳杆菌、香肠乳杆菌、发酵性乳杆菌、fornicali乳杆菌、食果糖乳杆菌、frument乳杆菌、果糖乳杆菌、鸡乳杆菌、戈氏乳杆菌、胃乳杆菌、ghanensis乳杆菌、草乳杆菌、hammesii乳杆菌、哈氏乳杆菌、harbinensis乳杆菌、hayakitensis乳杆菌、瑞士乳杆菌、希氏乳杆菌、同型腐酒乳杆菌、惰性乳杆菌、ingluviei乳杆菌、肠乳杆菌、詹氏乳杆菌、约氏乳杆菌、kalixensis乳杆菌、马乳酒样乳杆菌、高加索酸奶乳杆菌、韩泡菜乳杆菌、kitasatonis乳杆菌、kunkeei乳杆菌、德氏乳杆菌亚种、林氏乳杆菌、坏发酵乳杆菌、马里乳杆菌、manihotivorans乳杆菌、mindensis乳杆菌、粘膜乳杆菌、鼠乳杆菌、nagelii乳杆菌、namurensis乳杆菌、nantensis乳杆菌、少发酵乳杆菌、口乳杆菌、面包乳杆菌、pantheris乳杆菌、parabrevis乳杆菌、类布氏乳杆菌、paracoIIinoides乳杆菌、parafarraginis乳杆菌、类高加索酸奶乳杆菌、paralimentarius乳杆菌、植物乳杆菌、戍糖乳杆菌、腐卵乳杆菌、植物乳杆菌、鹦鹉热乳杆菌、凝乳酶乳酸杆菌、路氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、裂乳杆菌、罗氏乳杆菌、rossiae乳杆菌、瘤胃乳杆菌、saerimner乳杆菌、清酒乳杆菌、唾液乳杆菌、sanfranciscensis乳杆菌、satsumensis乳杆菌、旧金山乳杆菌、沙氏乳杆菌、siliginis乳杆菌、spicher乳杆菌、猪双曰乳杆菌、泰国乳杆菌、ultunensis乳杆菌、牛痘乳杆菌、阴道乳杆菌、versmoldensis乳杆菌、嗜葡萄酒乳杆菌、犊乳杆菌、玉米乳杆菌、zymae乳杆菌；勒克氏菌属、军团菌属:阿德莱德军团菌、茴芹军团菌、贝尔亚德军团菌、伯明翰军团菌、博氏军团菌、布吕嫩军团菌、釜山军团菌、彻氏军团菌、辛辛那提军团菌、军团菌、德氏军团菌、德罗氏军团菌、艾斯特军团菌、费氏军团菌、fallonii军团菌、菲氏军团菌、吉斯特军团菌、军团菌基因组种、戈拉提阿纳军团菌、gresilensis军团菌、哈氏军团菌、填土军团菌、以色列军团菌、詹姆斯敦军团菌、Candidatus Legionella jeoni1、约旦军团菌、兰斯格军团菌、伦敦军团菌、长滩军团菌、溶解军团菌、梅氏塔特洛克氏菌、麦氏军团菌、摩拉维采军团菌、水手军团菌、橡树岭军团菌、巴黎军团菌、侵肺军团菌、考特拉军团菌、昆里万军团菌、军团菌、红光军团菌、赫伦荒原军团菌、卫生十字军团菌、沙氏军团菌、斯皮里特湖军团菌、施氏军团菌、军团菌、图森军团菌、沃氏军团菌、瓦氏军团菌、沃斯利军团菌、薮内军团菌；勒米诺氏菌属、钩端螺旋体属:问号钩端螺旋体、科氏钩端螺旋体、类黄疸性钩端螺旋体、亚历山大钩端螺旋体、韦氏钩端螺旋体、钩端螺旋体基因组种1、博氏钩端螺旋体、圣地罗斯钩端螺旋体、稻田钩端螺旋体、芬氏钩端螺旋体、布鲁姆钩端螺旋体、Iicerasiae钩端螺旋体、双曲钩端螺旋体、迈耶钩端螺旋体、钩端螺旋体、钩端螺旋体基因组种3、钩端螺旋体基因组种4、钩端螺旋体基因组种5 ;瘤型麻风(Danielsse-Boeck病)、钩端螺旋体、钩端螺旋体、细螺旋体病(韦尔病/出血性黄疸钩端螺旋体/黄疸出血群赖型钩端螺旋体)、纤毛菌属、无色藻菌属:肉色无色藻菌、柠檬无色藻菌、榴莲无色藻菌，谲诈无色藻菌、无花果无色藻菌)、果糖无色藻菌、garlicum无色藻菌、酸败气无色藻菌)、硬无色藻菌、银海无色藻菌、韩泡菜无色藻菌、乳无色藻菌、肠膜无色藻菌、假无色藻菌、假肠膜无色藻菌；利斯特氏菌属:格氏利斯特氏菌)、无害利斯特氏菌、伊氏利斯特氏菌、单核细胞增生利斯特氏菌(李斯特菌病)、斯氏利斯特氏菌、威氏利斯特氏菌；extroquens甲烧杆菌、多形微杆菌、微球菌属:蝰蛇微球菌、黄色微球菌、藤黄微球菌、里拉微球菌、粘膜微球菌、玫瑰色微球菌、栖息微球菌；动弯杆菌属、米勒氏菌属、摩根氏菌属、莫拉氏菌属:亚特兰大莫拉氏菌、boevrei (莫拉氏菌、牛莫拉氏菌、犬莫拉氏菌、山羊莫拉氏菌、粘膜炎莫拉氏菌(粘膜炎布兰汉球菌)、豚鼠莫拉氏菌、兔莫拉氏菌、小马莫拉氏菌、腔隙莫拉氏菌、林氏莫拉氏菌、不液化莫拉氏菌、椭圆莫拉氏菌、奥斯陆莫拉氏菌、解糖莫拉氏菌；摩氏摩根莫拉氏菌、分枝杆菌属:脓肿分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田野分枝杆菌、爱知分枝杆菌、蜂房分枝杆菌、临床病例所分枝杆菌、亚洲分枝杆菌、aubagnense分枝杆菌、金色分枝杆菌、南非分枝杆菌、贪食分枝杆菌(巴蒂病/温德米尔夫人综合征)、鸟分枝杆菌副结核亚种在人类克罗恩病和绵羊副结核病中存在、鸟分枝杆菌森林土壤亚种、鸟分枝杆菌人猪亚种、哥伦比亚分枝杆菌、波氏分枝杆菌、波西米亚高地分枝杆菌、博氏分枝杆菌、波特尼亚分枝杆菌、牛分枝杆菌(牛结核病)、德氏分枝杆菌、brisbanense分枝杆菌、冬天分枝杆菌、加那利群岛分枝杆菌、山羊分枝杆菌、隐蔽分枝杆菌、龟分枝杆菌、嵌合体的分枝杆菌、干田分枝杆菌、氯酹红分枝杆菌、楚布分枝杆菌、出众分枝杆菌、汇合分枝杆菌、可见分枝杆菌、库氏分枝杆菌、美容品分枝杆菌、迪氏分枝杆菌、安科纳分枝杆菌、杜氏分枝杆菌、象分枝杆菌、诡诈分枝杆菌、产鼻疽分枝杆菌、微黄分枝杆菌、佛罗伦萨分枝杆菌、食荧蒽分枝杆菌、偶发分枝杆菌、偶发分枝杆菌解乙酰氨亚种、腓特烈斯堡分枝杆菌、加地斯分枝杆菌、胃分枝杆菌、日内瓦分枝杆菌、浅黄分枝杆菌、古地分枝杆菌、戈登分枝杆菌戈氏分枝杆菌、嗜血分枝杆菌、黑森分枝杆菌、柏林半岛分枝杆菌、海德尔贝格分枝杆菌、爱尔兰分枝杆菌、霍氏分枝杆菌、荷尔斯泰因分枝杆菌、休斯顿分枝杆菌、immunogenum分枝杆菌、中庸分枝杆菌、中间分枝杆菌、胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、科莫斯分枝杆菌、库比尔分枝杆菌、熊本分枝杆菌、拉克丝分枝杆菌、慢生黄分枝杆菌、引起麻疯病或者汉森病/麻风的麻疯分枝杆菌、鼠麻疯分枝杆菌、马达加斯加分枝杆菌、马德里分枝杆菌、玛尔摩分枝杆菌、瘰病分枝杆菌(鱼缸肉芽肿)、马赛分枝杆菌、田鼠分枝杆菌、莫娜分枝杆菌、montefiorense分枝杆菌、莫里奥卡分枝杆菌、产粘液分枝杆菌、壁分枝杆菌内布拉斯加分枝杆菌、新金色分枝杆菌、新奥尔良分枝杆菌、无色分枝杆菌、新城分枝杆菌、奥布分枝杆菌、沼泽分枝杆菌、副偶然分枝杆菌、副瘰疬分枝杆菌、帕尔门塞分枝杆菌、外来分枝杆菌、草分枝杆菌、弗卡分枝杆菌、鳍脚亚目动物分枝杆菌、猪分枝杆菌、多孔分枝杆菌、假分枝杆菌、灰尘分枝杆菌、耐寒分枝杆菌、食花分枝杆菌、罗德岛分枝杆菌、saskatchewanense分枝杆菌、瘰病分枝杆菌、塞内加尔分枝杆菌、首尔分枝杆菌、败血分枝杆菌、石氏分枝杆菌、石氏分枝杆菌、猴分枝杆菌、包皮垢分枝杆菌、泥炭藓分枝杆菌、苏加分枝杆菌、土分枝杆菌、`抗热分枝杆菌、东海分枝杆菌、三联结核分枝杆菌、次要分枝杆菌、结核分枝杆菌(主要引起人类结核病)、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌、卡内蒂分枝杆菌、山羊分枝杆菌、鳍脚亚目动物’分枝杆菌、托斯卡纳分枝杆菌、溃疡分枝杆菌(引起拜恩斯代尔溃瘍/布路里溃瘍)、母牛分枝杆菌、vanbaalenii分枝杆菌、沃氏分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌；枝原体属:发酵枝原体、生殖道枝原体、人型枝原体、穿透枝原体、海豹脑枝原体、肺炎枝原体、钩端螺旋体病(七日热/七日热钩端螺旋体病)、奈瑟氏菌属:淋病奈瑟氏球囷(淋囷/淋病)、脑I旲炎奈瑟氏囷(脑I旲炎球囷)、干媒奈瑟氏囷、灰色奈瑟氏囷、延长奈瑟氏菌、浅黄奈瑟氏菌、乳糖奈瑟氏菌、粘液奈瑟氏菌、多糖奈瑟氏菌、微黄奈瑟氏菌；硝化杆菌属、诺卡氏菌属:星形诺卡氏菌、巴西诺卡氏菌、豚鼠诺卡氏菌；坏疽性口炎(口腔坏疽性溃疡/坏疽性口炎)、胖杆菌属、寡养菌属、恙虫病(恙虫病)、产甲酸草酸杆菌、泛菌属:成团泛菌、菠萝泛菌、柠檬泛菌、分散泛菌、斑点泛菌、斯氏泛菌、土壤泛菌；巴斯德氏菌属:产气巴斯德氏菌、鸭巴斯德氏菌、鸟巴斯德氏菌、贝氏巴斯德氏菌、马巴斯德氏菌、犬巴斯德氏菌、达可马巴斯德氏菌、杀鸡巴斯德氏菌、鸡巴斯德氏菌、肉芽肿巴斯德氏菌、Iangaaensi s巴斯德氏菌、淋巴管炎巴斯德氏菌、麦氏巴斯德氏菌、多杀巴斯德氏菌、侵肺巴斯德氏菌、斯凯岛巴斯德氏菌、口巴斯德氏菌、龟巴斯德氏菌、海藻巴斯德氏菌、土拉热弗朗西斯菌、脲巴斯德氏菌、飞禽巴斯德氏菌；片球菌属:乳酸片球菌、酒窖片球菌、克氏片球菌、有害片球菌、糊精片球菌、耐乙酸片球菌、意外片球菌、小片球菌、戊糖片球菌、斯氏片球菌；消化链球菌属:厌氧消化链球菌、不解糖消化链球菌、海氏消化链球菌、氢消化链球菌、产吲哚消化链球菌、艾氏消化链球菌、人眼消化链球菌、解乳消化链球菌、大消化链球菌、微小消化链球菌、奥克塔维厄斯消化链球菌、普氏消化链球菌、四联消化链球菌、阴道消化链球菌；光杆状菌属、Photorhizobium菌属、类志贺毗邻单胞菌、牙龈卟啉单胞菌、布拉格菌属、普雷沃、痤疮丙酸杆菌属:痤疮丙酸杆菌、丙酸丙酸杆菌；变形杆菌属:奇异变形杆菌、摩根氏变形杆菌、羽状变形菌、雷特格氏变形杆菌、普通变形杆菌；普罗威登斯菌属:弗氏普罗威登斯菌、斯氏普罗威登斯菌；假单胞菌属:铜绿假单胞菌、产碱假单胞菌、病鳝假单胞菌、阿根廷假单胞菌、烂泥假单胞菌、香茅醇假单胞菌、变绿假单胞菌、门多萨假单胞菌、硝基还原假单胞菌、食油假单胞菌、类产碱假单胞菌，食树脂假单胞菌、稻草假单胞菌、桔黄假单胞菌、致金色假单胞菌、绿针假单胞菌、莓实假单胞菌、隆德假单胞菌、腐臭假单胞菌、南极洲假单胞菌、产氮假单胞菌、油菜假单胞菌、布氏假单胞菌、松柏假单胞菌、皱纹假单胞菌、荧光假单胞菌、盖氏假单胞菌、黎巴嫩假单胞菌、孟氏假单胞菌、边缘假单胞菌、地中海假单胞菌、子午线假单胞菌、米氏假单胞菌、霉味假单胞菌、侧柏假单胞菌、人参假单胞菌、proteolytica假单胞菌、罗氏假单胞菌、类黄假单胞菌、thivervalensis假单胞菌、蘑燕褐斑病假单胞菌、韦龙氏假单胞菌、脱氮假单胞菌、百日咳假单胞菌、cremoricolorata假单胞菌、黄褐假单胞菌、蒙氏假单胞菌、摩氏假单胞菌、稻皮假单胞菌、副黄假单胞菌、plecoglossicida假单胞菌、恶臭假单胞菌、巴利阿里假单胞菌、浅黄金色单胞菌、施氏假单胞菌、扁桃假单胞菌、榛色假单胞菌、番木瓜假单胞菌、菊苣假单胞菌、晕斑假单胞菌绛红变种、天仙果假单胞菌、苦揀假单胞菌、萨氏假单胞菌、丁香假单胞菌、绿黄假单胞菌、假单胞菌、嗜酸假单胞菌、伞菌假单胞菌、假单胞菌、解碱假单胞菌、淀粉皮假单胞菌、铁角蕨假单胞菌、固氮假单胞菌、大麻假单胞菌、coenobios假单胞菌、结冰假单胞菌、康氏假单胞菌、克洛斯韦假单胞菌、delhiensis假单胞菌、外囊假单胞菌、远东假单胞菌、frederiksbergensis假单胞菌、褐鞘假单胞菌、石花菜假单胞菌、勒米诺菌假单胞菌、籼稻假单胞菌、jessenii假单胞菌、晋州假单胞菌、基尔假单胞菌、克氏假单胞菌、韩国假单胞菌、利尼假单胞菌、藤黄假单胞菌、摩拉维亚假单胞菌、耳炎假单胞菌、海绵假单胞菌、帕勒隆尼假单胞菌、罂粟假单胞菌、贝利假单胞菌、腐卵假单胞菌、草假单胞菌、浦项假单胞菌、psychrophila假单胞菌、耐寒假单胞菌、拉梭假单胞菌、食爬虫假单胞菌、resiniphila假单胞菌、rhizosphaerae假单胞菌、浅红假单胞菌、salomonii假单胞菌、segitis假单胞菌、环腐假单胞菌、猿猴假单胞菌、猪假单胞菌、耐热假单胞菌、山黄麻假单胞菌、平凡假单胞菌、turbinellae假单胞菌、tuticorinensis假单胞菌、阴城假单胞菌、温哥华假单胞菌、弗村假单胞菌、xanthomarina假单胞菌；拉恩氏菌属、罗尔斯通氏菌属:巴塞尔罗尔斯通氏菌、肯潘罗尔斯通氏菌、富养罗尔斯通氏菌、gilardii罗尔斯通氏菌、诡谲罗尔斯通氏菌、甘露醇罗尔斯通氏菌metalIidurans、罗尔斯通氏菌、少见罗尔斯通氏菌、皮氏罗尔斯通氏菌、respiraculi罗尔斯通氏菌、爺科罗尔斯通氏菌、罗尔斯通氏菌、黄山松罗尔斯通氏菌；拉乌尔菌属、Rhodoblastus菌属、红假单胞菌属、鼻硬结病、放射型土壤杆菌、小马红球菌、立克次氏体属:非洲立克次氏体、螨立克次氏体、澳大利亚立克次氏体、斑疹热立克次氏体、猫立克次氏体、日本立克次氏体、莫塞尔立克次氏体、普氏立克次氏体(斑疹伤寒)、立氏立克次氏体、西伯利亚立克次氏体、斑疹立克次氏体、康氏立克次氏体、非洲立克次氏体、鹦鹉热宫川氏体、五日热立克次氏体、立氏立克次氏体、trachomae立克次氏体；龋齿罗氏菌、沙门氏菌属:猪霍乱沙门氏菌亚利桑那亚种、邦戈尔沙门氏菌、肠沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌(伤寒症)、鼠伤寒沙门氏菌、萨拉姆沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌亚利桑那亚种、S双亚利桑那肠沙门氏菌，豪顿沙门氏菌、籼型沙门氏菌；Sams0nia菌属、沙雷氏菌属:嗜虫沙雷氏菌、无花果沙雷氏菌、居泉沙雷氏菌、格氏沙雷氏菌液化沙雷氏菌、粘质沙雷氏菌、气味沙雷氏菌、普城沙雷氏菌、变形斑沙雷氏菌、quinivorans沙雷氏菌、深门沙雷氏菌、解脲沙雷氏菌；腐败希尔氏菌、鲍氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌、福氏志贺氏菌、宋内氏志贺氏菌、Sodalis菌属、螺菌属:小螺菌鼠咬热、葡萄球菌属:金黄色葡萄球菌、耳葡萄球菌、头状葡萄球菌、山羊葡萄球菌、科氏葡萄球菌、表皮葡萄球菌、猫葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、中间葡萄球菌、路邓葡萄球菌、葡萄球菌、腐生葡萄球菌，施氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、小牛葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌；窄食单胞菌属:嗜酸窄食单胞菌、独岛窄食单胞菌、韩国窄食单胞菌、嗜麦芽糖窄食单胞菌、亚硝酸盐还原窄食单胞菌、rhizophila窄食单胞菌；链杆菌属:念珠状链杆菌(链杆菌鼠咬热)；链球菌属:A族链球菌、B族链球菌、无乳链球菌、好气链球菌、鸟链球菌、牛链球菌(犬链球菌、大鼠链球菌、粪链球菌、屎链球菌、野生链球菌、鸡链球菌，乳链球菌、米氏链球菌、温和链球菌、缓症链球菌、变异链球菌、口腔链球菌、泛口腔链球菌、肺炎链球菌、酿脓链球菌、拉蒂链球菌、唾液链球菌、血链球菌、表兄链球菌、副血链球菌、猪链球菌，唾液链球菌嗜热亚种、前庭链球菌、绿色链球菌、乳房链球菌、兽瘟链球菌；塔特姆菌属、特拉布斯氏菌属、梅毒螺旋体属:品他病梅毒螺旋体(平塔)、齿垢密螺旋体、地方性梅毒螺旋体(非性病梅毒)、梅毒密螺旋体(梅毒)、雅司螺旋体(雅司病)；惠普尔密螺旋体(惠普尔病)、结核样型麻风病、解脲脲原体、韦荣球菌属、弧菌属:产气气弧菌、河口弧菌、食琼脂弧菌、易北河弧菌、解藻朊酸弧菌、巴西弧菌、卡尔维湾弧菌、坎氏弧菌、沙氏弧菌、霍乱弧菌(霍乱)、辛辛那提弧菌，逗号弧菌、溶珊瑚弧菌、大牡蛎弧菌、食环弧菌、魔鬼弧菌、双养氧弧菌、吉雄弧菌、费氏弧菌、河流弧菌、富通弧菌、弗氏弧菌、gall`icus弧菌、产气弧菌、长牡蛎弧菌、鲍鱼肠弧菌、哈氏弧菌、肝弧菌、西班牙弧菌、ichthyoenter1、夏威夷海神弧菌，缓慢弧菌、Iitoralis弧菌、火神弧菌、地中海弧菌、梅氏弧菌、最小弧菌、贻贝弧菌、需钠弧菌、纳瓦拉弧菌、新生儿弧菌、海王弧菌、海蛹弧菌、黑美人弧菌、病海鱼弧菌、东方弧菌、pacinii弧菌、副溶血弧菌、杀扇贝弧菌、杀对虾弧菌、波氏弧菌、ponticus、解蛋白弧菌、轮虫弧菌、曲霉弧菌、留萌弧菌、杀鲑弧菌、大菱鲆弧菌、灿烂弧菌、幸存弧菌、蛤弧菌、塔斯曼尼亚弧菌、塔氏弧菌、创伤弧菌、弧菌、弧菌；产靛福格斯氏菌、威格尔斯沃思氏菌属、沃尔巴克氏体属、致病杆菌属、小肠结肠炎耶尔森氏菌、鼠疫耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、和约克氏菌属。
62.根据权利要求39和60所述的方法，其中所述病毒选自:阿伯尔森鼠白血病病毒、急性喉气管支气管炎病毒、阿德莱德河病毒、腺相关病毒组、腺病毒、非洲马瘟病毒、非洲猪瘟病毒、艾滋病病毒、水貂阿留申病毒、细小病毒、苜蓿花叶病毒、α-疱疹病毒亚科(包括HSV1、2和水痘)、α逆转录病毒属(禽白血病病毒、劳斯肉瘤病毒)、α病毒属、alkhurma病毒、ALV相关病毒、Amapari病毒、安第斯马铃薯斑驳病毒、口蹄疫、水生病毒(虫媒病毒、虫媒病毒、A组虫媒病毒、B组虫媒病毒、沙粒病毒组、阿根廷出血热病毒)、阿根廷出血热病毒、动脉炎病毒属、星状病毒、Ateline疱疫病毒组、Aujezky氏病病毒、灵气病毒、Ausduk病病毒、澳大利亚蝙蝠狂犬病病毒、禽腺病毒属、禽流红细胞增多症病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽白血病病毒、禽白血病病毒(ALV)、淋巴瘤禽流感病毒、禽成髓细胞瘤病毒、禽副粘病毒、禽肺炎病毒、禽网状内皮增生病病毒、鸟肉瘤病毒、禽流C型逆转录病毒组、禽嗜肝DNA病毒属、禽痘病毒属、B病毒(猴疱疫病毒I型)、B19病毒(B19virus)、细小病毒B型，19、Babanki病毒、狒狒疱疫病毒、细菌病毒、杆状病毒、大麦黄矮病毒、巴马森林病毒、菜豆荚斑驳病毒、豆四射花叶病毒、贝巴鲁病毒、贝里马病毒、β疱疹病毒亚属、β逆转录病毒属)、禽流感、双RNA病毒、比特勒病毒、BK病毒、黑小河运河病毒、蓝舌病病毒、玻利维亚出血热病毒、博马病病毒、羊边界病病 毒、博尔纳病毒、牛α疱疫病毒I型、牛α疱疫病毒2型、牛冠状病毒、牛流行热病毒、牛免疫缺陷病毒、牛白血病病毒、牛白血病病毒、牛乳头炎病毒、牛乳头瘤病毒、牛丘疹炎病毒、牛细小病毒、牛合胞病毒、牛C型肿瘤病毒、牛病毒性腹泻病毒、茧蜂病毒属、蚕豆斑驳病毒、蚕豆染色病毒、无芒雀麦花叶病毒、雀麦花叶病毒、越野车溪病毒、子弹形病毒组、布尼安维拉病毒、布尼病毒属、伯基特淋巴瘤病毒、布汪巴热、异质Bwattany病毒、CA病毒(臀部相关的病毒/副流感病毒2型)、杯状病毒、加利福尼亚脑炎病毒、骆驼痘病毒、金丝雀痘病毒、犬科动物疱疹病毒、犬冠状病毒、犬瘟热病毒、犬疱疫病毒、犬病毒、犬细小病毒、卡诺Delgadito病毒、毛状病毒、山羊关节炎病毒、山羊脑炎病毒)、山羊疱疫病毒、羊痘病毒、心脏病毒、香石竹潜伏病毒属、香石竹斑驳病毒属、胡萝卜斑驳病毒、决明子黄色斑病毒、花椰菜花叶病毒、花椰菜花叶病毒、豚鼠疱疹病毒I型、猴疱疹病毒I型、猴疱疹病毒2型、谷物黄矮病毒、钱迪普病毒、昌金努拉病毒、斑点叉尾鮰病毒、沙勒维尔病毒、水痘病毒、基孔肯雅病毒、黑猩猩疱疹病毒、脊椎动物痘病毒亚科、鲢鱼病毒、鲑鱼病毒、线形病毒、科卡尔病毒、银鲑鱼病毒、性交疹病毒、科罗拉多蜱热病毒、Colti病毒哥伦比亚SK病毒、鸭跖草黄斑驳病毒、普通感冒病毒、豇豆花叶病毒属、尖锐湿抚树木腐、Condylomata accuminata、先天性巨细胞病毒、臁疮传染性病毒、传染性脓疱皮炎病毒、冠状病毒、科里帕塔病毒、鼻炎病毒、豇豆褪绿斑驳病毒、豇豆花叶病毒、豇豆病毒、牛痘病毒、柯萨奇病毒、CPV(质型 多角体病毒)、蟋蟀麻痹病毒、克里米亚-刚果出血热病毒、哮吼相关病毒、Crypotovirus、黄瓜花叶病毒属、质型多角体病毒、巨细胞病毒(人巨细胞病毒或者人类疱疹病毒5型)、质型多角体病毒、质型弹状病毒属、鹿乳头瘤病毒、δ逆转录病毒属(人类T淋巴细胞病毒)、变形翼病毒DWV、登革热、浓核病毒、依赖病毒属、多理病毒、香石竹病毒属、diploma病毒、DNA病毒、多布拉瓦贝尔格莱德病毒、狗流感、果蚬肝炎病毒、鸭乙型肝炎病毒、鸭肝炎病毒I型、鸭肝炎病毒2型、轮状病毒、杜文黑基病毒、东部马脑炎病毒、东部马脑炎病毒、埃博拉病毒、类似埃博拉病毒、埃可病毒、埃可病毒10型、埃可病毒28型、埃可病毒9型、小鼠痘病毒、东方马脑脊髓炎病毒、东部马脑炎病毒、EIA病毒、马传染性贫血、脑心肌炎病毒(心肌炎)、贺胥病毒8型6、脑炎病毒、脑心肌炎病毒、内源性逆转录病毒、肠病毒、昆虫痘病毒亚科、昆虫痘病毒A型、痘病毒B型、痘病毒C型、酶增高病毒、流行性出血热病毒、流行性出血性疾病病毒、ε逆转录病毒、Epstein-Barr病毒(EBV ;人类疱疹病毒4型HHV-4)、马α疱疹病毒I型、马α疱疹病毒4型，马疱疹病毒2型、马流产病毒、马动脉炎病毒属、马脑病病毒、马传染性贫血病毒、马麻疫病毒、马鼻肺炎病毒、马鼻病毒、Eubenangu病毒、欧洲麋鹿乳头瘤病毒、欧洲猪瘟病毒、沼泽地病毒、埃亚契病毒)、蚕S.萎蔫病毒属、猫科动物疱疫病毒I型、猫杯状病毒、猫肉瘤病毒、猫科动物的疱疫病毒、猫免疫缺陷病毒、猫传染性腹膜炎病毒、猫白血病/肉瘤病毒、猫白血病病毒、猫泛白细胞减少症病毒、猫细小病毒、猫肉瘤病毒、猫科动物的合胞病毒、缩病毒、纤丝病毒、法兰德斯病毒、黄病毒、手足口病病毒、摩根堡病毒、四角汉坦病毒、禽腺病毒I型、鸡痘病毒、朋友病毒、真菌传棒状病毒、丙型疱疫病毒亚科、Y逆转录病毒属、GB病毒C型(GBV ;原庚型肝炎病毒)、双生病毒、德国麻疫病毒、盖塔病毒、长臂猿猿白血病病毒、绿猴病毒(马尔堡)、腺热病毒、山羊痘病毒、金体美鳊鱼病毒、枯叶蛾病毒、鹅细小病毒、颗粒体病毒、毛病毒、黄鼠乙肝病毒、A组虫媒病毒、瓜纳里托病毒、豚鼠巨细胞病毒、豚鼠型肝炎病毒、汉坦病毒、文蛤病毒、兔纤维瘤病毒、巨细胞病毒(人类巨细胞病毒)、辅助病毒、红细胞吸附病毒2型、日本血凝病毒、出血热病毒、亨德拉病毒、亨尼帕病毒、乙型肝炎样病毒、A型肝炎病毒、B型肝炎病毒、C型肝炎病毒、D型肝炎病毒(三角洲)、E型肝炎病毒、F型肝炎病毒、G型肝炎病毒、乙型肝炎病毒诺娜NONB，肝脑脊髓炎病毒3型、嗜肝病毒、苍鹭乙型肝炎病毒、B疱疫病毒、单纯疱疫病毒、单纯疱疫病毒I型、单纯疱疫病毒2型、疱疫病毒、带状疱疫、疱疫病毒6型、疱疫病毒7型、疱疫病毒8型、蛛猴疱疫病毒、人疱疫病毒、松鼠疱疫病毒、猪疱疫病毒、水痘疱疹病毒、高地J病毒、牙鲆弹状病毒、HIV-1 (HIV-1)、猪瘟病毒，大麦病毒、马流感、人类T细胞亲淋巴病毒I型、人类T细胞亲淋巴病毒II型、人腺病毒2型、人类α疱疹病毒I型、人α疱疹病毒2型、人类α疱疹病毒3型、人类B淋巴细胞病毒、人类β疱疹病毒5型、人类冠状病毒、人肠道病毒A型、人类肠道病毒B型、人类流感、人类泡沫病毒、人类Y疱疹病毒4型、人类Y疱疹病毒6型、人类A型肝炎病毒、人类疱疹病毒I组、人类疱疹病毒2组、人类疱疹病毒3组、人类疱疹病毒4组、人类疱疹病毒6型、人类疱疹病毒8型、人类免疫缺陷病毒(艾滋病)、人类免疫缺陷病毒I型、人类免疫缺陷病毒2型、人类偏肺病毒、人类乳头状瘤病毒、人T细胞白血病病毒、人类T细胞白血病病毒1、人类T细胞白血病病毒I1、人类T细胞白血病病毒II1、人类T细胞淋巴瘤病毒1、人类T细胞淋巴瘤病毒I1、人类T细胞白血病病毒I型、人类T细胞白血病病毒2型、人类T淋巴细胞病毒1、人类T淋巴细胞病毒I1、人类T淋巴细胞白血病病毒II1、姬蜂病毒属、等轴不稳定环斑病毒属、婴幼儿胃肠炎病毒、牛传染性鼻气管炎`病毒、传染性造血器官坏死病毒、传染性胰脏坏死病毒、流感病毒、流感病毒A型、流感病毒B型、流感病毒C型、流感病毒D、流感病毒PR8、昆虫虹彩病毒、昆虫病毒、干扰病毒、虹彩病毒、伊萨病毒、日本乙肝病毒、日本脑炎病毒、JC病毒、胡宁病毒、约翰逊草花叶病毒、卡波济氏肉瘤相关疱疫病毒、克麦罗沃病毒、基勒姆大鼠病毒、克拉马斯病毒、科隆各病毒、韩国出血热病毒、昆巴病毒、坎姆林格病毒，库京病毒、森林贾萨努尔疾病、kyzylagach病毒、克罗斯病毒(LaCrosse 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(SA15)、疫苗病毒、SA6病毒、全病毒、萨比亚病毒、萨维奥病毒、萨博病毒、萨博亚病毒、杂食尺蠖颗粒体病毒、囊状幼虫病毒、酿酒酵母病毒L-A、酿酒酵母病毒La、酿酒酵母病毒LBC，鹭山病毒、仙人掌病毒、松鼠猴疱疹病毒I型、松鼠猴疱疹病毒2型、非洲堇叶坏死病毒、saintabb头病毒、圣弗洛里斯病毒、萨哈林病毒、萨尔别哈病毒、萨兰加病毒、Salangapox病毒、塞尔哈巴德(虫媒)病毒、唾液腺病毒、鲑疱疹病毒I型、鲑鱼疱疹病毒2型、鲑病毒、接骨木脉清病毒、萨米亚辛西婭核型多角体病毒、萨米亚斑核型多角体病毒、萨米亚蚕核型多角体病毒、萨蒙斯仙人掌病毒、SanAngelo病毒、圣胡安病毒、圣米格尔海狮病毒、San Perlita病毒、砂鼠核包涵剂、白蛉热那不勒斯病毒、白蛉热西西里病毒、圣德吉姆巴病毒、桑戈病毒、圣罗莎病毒、圣塔伦病毒、圣图塞芜菁和性病毒，蓝宝石II病毒、札幌样病毒、无忧花属病毒、瓶子草病毒、SARS病毒、卫星病毒、萨苏伯里病毒、温州蜜柑萎缩病毒、萨图尼亚帕法尼葵病毒、天蚕蛾核型多角体病毒、索马里滋里夫病毒、锯齿草病毒、Sceliodes Cordalis核型多角体病毒、鹅掌环斑病毒)、双工草属颗粒体病毒、三化螟核型多角体病毒、松鼠疱疹病毒、松鼠疱疹病毒2型、棘翅夜蛾核型多角体病毒、球须刺蛾感染的核型多角体病毒、球须刺蛾属红螺核型多角体病毒、茶银尺蠖核型多角体病毒、旋幽夜蛾颗粒体病毒、幽夜蛾属核型多角体病毒、玄参斑驳病毒、SDAV(涎泪腺炎病毒)、海豹痘病毒、杉枯叶蛾核型多角体病毒、瘤蛾颗粒体病毒、塞勒塔病毒、核型多角体病毒、半齿舟蛾核型多角体病毒、槐蚜颗粒体病毒、森林脑炎病毒、塞纳马杜雷拉病毒、仙台病毒、SEN病毒D亚型、SEN病毒H亚型、汉城病毒、塞皮克病毒、塞拉多纳沃病毒、塞拉诺金色花叶病毒、芝麻黄色花叶病毒、蛀茎夜蛾核型多角体病毒、大螟蕨颗粒体病毒、大螟核型多角体病毒、蛀茎夜蛾颗粒体病毒，桑鲷病毒、葱潜隐病毒、沙门达病毒、鲨鱼河病毒、羊相关恶性卡他热、羊乳头瘤病毒、绵羊肺腺瘤相关疱疹病毒、绵羊痘病毒、希恩特群岛病毒、Shokwe病毒、舒普纤维瘤病毒、舒普乳头状瘤病毒、哈基病毒、暹罗眼镜蛇疱疫病毒、褐色鞍浓核病毒、思达金色花叶病毒(SiGMV)、思达金色的黄脉病毒(SiGYVV)、西格玛病 毒、Sikte水媒病毒、西尔维沃特病毒、Simbu病毒、猿猴腺病毒I型-27、猿猴病毒12型、猴肠道病毒1-18型、猴泡沫病毒、猴出血热病毒、猴A型肝炎病毒、猿人类免疫缺陷病毒、猴免疫缺陷病毒、猴副流感病毒、猴轮状病毒SA11、猿猴肉瘤病毒、猴T细胞淋巴性病毒、猴D型病毒I型、猴水痘疱疹病毒、猿肾病毒、猿猴病毒40、类单纯疱疹病毒属、带蚋浓核病毒、辛诺柏病毒、辛德毕斯病毒、Sintlem的洋葱潜伏病毒、西克斯冈市病毒、臭鼬痘病毒、天花病毒、鱼病毒、灰天蛾胞质型多角体病毒、苦苣苔草病毒、黑鱼杆状病毒、雪兔病毒、Snyder-Theilen猫肉瘤病毒、南方豆花叶病毒、Sofyn病毒、土传小麦花叶病毒、索科卢克病毒、龙心尖卷叶病毒、爺斑点病毒、soIanurn黄化病毒、索尔达多病毒、萨默维尔病毒4型、苦苣菜斑驳病毒、苣荬菜病毒、苣荬菜黄网病毒、高粱褪绿斑病毒、高粱花叶病毒、高粱病毒、索鲁鲁卡病毒，番荔枝黄斑病毒、南非西番莲病毒、南美出血热病毒、南非西番莲病毒、南江病毒、南方菜豆花叶病毒、南方马铃薯潜隐病毒、藜草花叶病毒、苦菜黄脉病毒、大S.褪绿斑驳病毒、大S.皱叶病毒、大S.矮缩病毒、大S.花叶病毒、SPAr2317病毒、长须卷蛾核型多角体病毒，麻雀痘病毒、互花米草斑驳病毒、有眼镜状斑纹的凯门鳄痘病毒、SPH114202病毒、Sphenicid疱疫病毒I型、女贞天蛾核型多角体病毒、蜘蛛猴疱疫病毒、人纹污灯蛾核型多角体病毒、桃小卷叶蛾核型多角体病毒、黄腹斑灯蛾核型多角体病毒、菠菜潜隐病毒、菠菜隐潜病毒、噬菌体1、噬菌体4、噬菌体AA、螺原体噬菌体C1/TS2、莎草夜蛾质型多角体病毒、甜菜夜蛾病毒、草地夜蛾病毒、夜蛾Iatifascia病毒、海灰翅夜蛾、灰翅夜蛾病毒、夜蛾ornithogalli病毒、斯庞德温尼病毒、春美潜伏病毒、鲤春病毒血症病毒、泡沫病毒(SFV、HFV)、南瓜曲叶病毒、南瓜花叶病毒、松鼠纤维瘤病毒、松鼠猴疱疫病毒、松鼠猴逆转录病毒、SR-1l病毒、斯里兰卡百香果斑驳病毒、斯里布尔病毒、SSVl病毒组、斯坦布斯头病毒、圣路易斯脑炎病毒、金黄色葡萄球菌噬菌体107、金黄色葡萄球菌噬菌体187、金黄色葡萄球菌噬菌体2848A、金黄色葡萄球菌噬菌体3A、金黄色葡萄球菌噬菌体44AHJD、金黄色葡萄球菌噬菌体77、金黄色葡萄球菌噬菌体B11-M15、金黄色葡萄球菌噬菌体特沃特、燕八哥痘病毒、补血草属病毒Y、P、STLV (猴T淋巴细胞病毒)I型、STLV (猴T-亲淋巴细胞病毒)II型、STLV (猴T淋巴细胞病毒)III型、丘疹性口炎病毒、斯特拉特福病毒、草莓皱缩病毒、草莓潜环斑病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒、链球菌曬菌体182、链球菌噬菌体2BV、链球菌噬菌体A25、链球菌噬菌体24、链球菌噬菌体PEl、链球菌噬菌体VD13、链球菌噬菌体FD8、链球菌噬菌体CP-1、链球菌噬菌体25、链球菌噬菌体H39、夜禽类泡疹病毒I型、鲈鱼病毒、鱼参神经坏死病毒、残尾猕猴病毒、颌下病毒、地下三叶草斑驳病毒、地下三叶草斑点病毒随体、地下三叶草红色叶病毒、地下三叶草特技病毒、甘蔗杆状病毒、甘蔗花叶病毒、甘蔗花叶病毒、甘蔗条纹病毒、猪α疱疹病毒I型、猪疱疹病毒2、猪痘病毒属、硫化病毒I型、星期日狭谷病毒、向日葵皱缩病毒、向日葵花叶病毒、向日葵四射花叶病毒、向日葵黄色斑病毒、向日葵黄色环斑病毒、太阳麻花叶病毒、沼泽热病毒、甜三叶草坏死花叶病毒、红薯病毒、甘薯褪绿斑病病毒、甘薯羽状斑驳病毒、甘薯内木栓病毒、Sweet甜马铃薯潜伏病毒、甘薯轻斑驳病毒、甘薯褐裂病毒、甘薯脉花叶病毒、红薯黄矮病毒、斯威特沃特枝病毒、猪巨细胞病毒、猪流感、猪不孕与呼吸综合征病毒、猪痘病毒、瑞士小鼠白血病病毒、刀豆失真花叶病毒、Synaxis jubararia核型多角体病毒(Synaxis jubararia NPV)、感恩祭 pallulata 核型多角体病毒(Synaxis pallulata NPV)、synetaeris tenuifemur 病毒、芹菜塞尔克塔核型多角体病毒、T4噬菌体，T7噬菌体、TAC病毒)、塔卡厄马病毒、塔卡里伯复合病毒、Tacaribe病毒、蝌蚪水肿病毒LT1-4、塔格特病毒、塔海娜病毒、Tai病毒、Taiassui病毒、塔玛纳蝙fe病毒、树番爺花叶病毒、坦姆狄病毒、Tamiami病毒、特纳河痘病毒、坦加病毒、坦琼-拉博克(虫媒)病毒、芋头杆状病毒、塔克尤马杆状DNA病毒、非洲大沙鼠属痘病毒、非洲大沙鼠属痘病毒、毛草花叶病毒、德黑兰病毒、Telfairia花叶病毒、直落森林病毒、滕贝病毒、登布苏病毒、坦奇病毒、滕索病毒、Tenvivirus、山毛豆症病毒、Termeil病毒、特特病毒、核型多角体病毒、核型多角体病毒、德州辣椒病毒、泰国病毒、欧洲松带蛾病毒、泰勒脑脊髓炎病毒、泰勒的病毒、野蚕核型多角体病毒、葡萄天蛾核型多角体病毒、热变形菌噬菌体1、热变形菌噬菌体2、热变形菌噬菌体3、热变形菌噬菌体4、Thiafora病毒、西米里病毒、蓟斑驳病毒、索戈托病毒、病毒、asigna剌蛾病毒、褐剌蛾核型多角体病毒、扁剌蛾颗粒体病毒、索塔帕拉亚姆病毒、核型多角体病毒、弄蝶细线核型多角体病毒、tibrogargan病毒、Ticera栗核型多角体病毒、蝶传脑炎病毒(TBEV)-欧洲和远东亚型、蒂拉穆克病毒、蒂利吉里病毒、蒂姆博病毒、Tilmboteua病毒、塔尔米罗病毒、蒂思霍尔麦病毒、织网衣蛾核型多角体病毒、负袋衣蛾核型多角体病毒、紫露草核型多角体病毒、松毒蛾核型多角体病毒、刁曼岛病毒、特拉科托尔潘病毒、烟草丛顶病毒、烟草蚀纹病毒、烟草曲叶病毒、绿烟温和花叶病毒、烟草花叶病毒、烟草花叶病毒随体、烟草斑点病毒、烟草坏死病毒、烟草坏死病毒随体、烟草坏死病毒小随体、烟草坏死矮病毒、烟草脆裂病毒、烟草环斑病毒、烟草线条病毒、烟草矮化病毒、烟草花叶病毒、烟草脉曲黄病毒、烟草脉斑驳病毒、.烟草萎蔫病毒、烟草黄矮病毒、烟草黄网病毒、烟草黄脉病毒、烟草花叶病毒、烟草脆裂病毒)、披膜病毒、Tomato apical stunt viroid、番爺不孕病毒、番爺黑环线虫传多角体病毒、番爺黑环病毒随体、番爺束顶病毒、番節丛矮病毒、番爺丛矮病毒随体、番爺金色花叶病毒、番爺皱叶病毒、番爺曲叶病毒、番爺卷叶病毒、番爺花叶病毒、番爺斑驳病毒、番爺淡黄化病毒、番茄雄性株类病毒、番茄伪曲项病毒、番茄环斑病毒、番茄斑萎病毒、番茄顶级坏死病毒、番爺叶脉黄化病毒、番爺黄矮病毒、番爺黄化曲叶病毒、番爺黄化花叶病毒、番爺黄顶病毒、番爺丛矮病毒属、同安区香草病毒、环曲病毒、扭矩特诺病毒、卷蛾核型多角体病毒、栎绿卷蛾核型多角体病毒、托斯卡纳病毒、番茄斑萎病毒、短须长体巨蚊核型多角体病毒、Trabala vishnou核型多角体病毒、紫露草/吊竹梅病毒、载体鸭脾坏死病毒、tranosema藻病毒、转化病毒、树駒腺病毒I型、树駒鼯疱疹病毒、蝽病毒、特里贝克病毒、不整叶蜂核型多角体病毒、青杨毛叶蜂核型多角体病毒、阴道毛滴虫病毒、粉纹夜蛾质型多角体病毒5型、粉纹夜蛾颗粒体病毒、粉纹夜蛾多角体病毒、粉纹夜蛾单核多角体病毒、甘兰尺蠖病毒、瓜萎斑驳病毒、小麦黄化斑点病毒、特里费塔图斯病毒、流动病毒、旱金莲病毒I型、旱金莲病毒2型、Trubanarnan病毒、特苏鲁斯病毒、图坎杜巴病毒、杜拉尔苹果花叶病毒、郁金香的断带病毒、郁金香碎色病毒、郁金香褪绿斑病毒、郁金香碎色病毒、郁金香病毒X、肿瘤病毒、树駒病毒、树駒鼯疱疹病毒、大菱鲆疱疹病毒、大菱鲆病毒、土耳其腺病毒1-3型、火鸡冠状病毒、火鸡疱疫病毒I型、火鸡鼻气管炎病毒、火鸡痘病毒、特洛克病毒、芜菁皱缩病毒、芜菁皱缩病毒随体、芜菁轻微黄化病毒、芜菁花叶病毒、芜菁丛簇病毒、芜菁黄花叶病毒、土耳其病毒、芜菁病毒、为勒尼病毒、C型逆转录病毒、D型肿瘤病毒、D型逆转录病毒群、瓦辛吉舒病病毒、乌干达病毒、Ugymyia蛆蝇核型多角体病毒、溃疡性疾病杆状病毒、块茎藜轻斑驳病毒、块茎藜花叶病毒、块茎藜病毒C型、乌马蒂拉病毒、安布勒病毒、乌纳病毒、乌波卢病毒、UR2肉瘤病毒、小垂中国蓝带蚊核型多角体病毒、乌尔巴努斯变形杆菌核型多角体病毒、尤鲁库里病毒、玉米黑粉菌病毒I型、玉米黑粉菌病毒4型、玉米黑粉菌病毒6型、乌苏图病毒、尤廷加病毒、乌蒂韦病毒、乌库涅米病毒群、牛痘病毒、韦略病毒、非洲石蒜花叶病毒、大西洋赤蛱蝶核型多角体病毒、小芒麻赤蚨蝶核型多角体病毒、Vanessa prorsa核型多角体病毒、香草花叶病毒、香草坏死病毒、水痘-带状疱疹病毒、水痘病毒属、天花病毒、重型天花病毒、天花病毒、瓦信义秀病病毒、韦洛尔病毒、天鹅绒烟草斑驳病毒、绒毛烟草斑驳病毒随体、委内瑞拉马脑炎病毒、委内瑞拉型马脑脊髓炎病毒、委内瑞拉出血热病毒、水泡性口炎病毒、水泡性病毒属、弧菌噬菌体06n-22p、弧菌噬菌体06n-58p、弧菌噬菌体4996、弧菌噬菌体A3A、弧菌噬菌体1、弧菌噬菌体11、弧菌噬菌体II1、弧菌噬菌体IV、弧菌噬菌体卡拉、弧菌噬菌体nt-Ι、弧菌噬菌体0XN-52P、弧菌噬菌体0XN-100P、弧菌噬菌体v6、弧菌噬菌体Vf 12、弧菌噬菌体Vf33、弧菌噬菌体VPl、弧菌噬菌体VPl1、弧菌噬菌体VP3、弧菌噬菌体VP5、弧菌噬菌体X29 (蚕豆潜隐病毒、豇豆花叶病毒、维琉斯克病毒、宾塞斯病毒、中提琴斑驳病毒、蝰蛇逆病毒、病毒性出血性败血症病毒、类肉瘤粒、绵羊脱髓鞘性脑白质炎梅迪病毒、绵羊脱髓鞘性脑白质炎病毒、沃安齐贾花叶病毒、沃安齐贾坏死花叶病毒、田鼠痘病毒、瓦德麦达尼病毒、沃洛尔病毒、角膜白斑表皮增生、海象杯状病毒、沃诺赖病毒、瓦里各病毒、西瓜褪绿矮病毒、西瓜卷曲的斑驳病毒、西瓜花叶病毒I型、西瓜花叶病毒2型、威德尔海的水性病毒、韦尔多纳病毒、韦塞尔斯布朗病毒、西尼罗病毒、西方马脑炎病毒、西方型马脑脊髓炎病毒、韦克斯福德病毒、沃达罗河病毒、美国小麦条纹花叶病毒、小麦褪绿斑病毒、小麦矮缩病毒、小麦丛矮病毒、小麦线条花叶病毒、小麦黄花叶病毒、小麦黄花叶病毒、白葡萄病毒、白三叶草潜隐病毒I型、白三叶草潜隐病毒2型、白三叶草潜隐病毒3型、白三叶草花叶病毒、White Iupinrnosaic病毒、野生黄瓜花叶病毒、野生马铃薯花叶病毒、角马疱疫病毒、悬钩子潜伏病毒、冬麦花叶病毒、俄罗斯的冬小麦花叶病毒、弄蝶病毒、斑鞘蝙蝠病毒、umbraculata蝙蝠病毒、隔蒴苘属花叶病毒、紫藤脉花叶病毒、威特沃特斯兰病毒、王盖病毒、王戈尔病毒、冬季呕吐病毒、土拨鼠乙肝病毒、土拨鼠旱獭疱疹1、毛猿肉瘤相关病毒、伤口肿瘤病毒、WRSV病毒(WRSV virus)、WVU病毒2型937、ffff病毒7型l到212、北美瓶草蚊核型多角体病毒、Wyeomyia病毒、黄单胞菌噬菌体CF、黄单胞菌噬菌体CFLT、黄单胞菌噬菌体RR66、黄单胞菌噬菌体XF、黄单胞菌噬菌体XF2(黄单胞菌噬菌体XP5、非洲爪蟾病毒T21、Xiburema病毒、鑫谷病毒、木冬夜蛾核型多角体病毒、Y73肉瘤病毒、雅巴猴肿瘤病毒、雅巴-1病毒、雅巴-7病毒、Yacaaba病毒、山药花叶病毒、雅温得病毒、亚奎纳头病毒、亚塔痘病毒属、黄热病病毒、约格病毒、约卡痘病毒、Yokase病毒、鲁豫东梨区蝽核型多角体病毒、豫东梨区蝽核型多角体病毒、豫东梨区蝽核型多角体病毒、豫东梨区蝽帕代拉核型多角体病毒、丝兰杆状病毒、尤格Bogdanovac病毒、扎利夫特帕尼亚病毒、玉米病毒、泽格拉病毒、红杉小卷蛾病毒、松线小卷叶蛾核型多角体病毒、泽夸病毒、结缕草花叶病毒、西葫芦黄色斑点病毒、小西葫芦黄花叶病毒、和蟹爪兰病毒。
63.一种适于与多核苷酸目标相互作用的多核苷酸探针，其中所述多核苷酸探针包括确切I个嵌入物分子。
64.一种适于与互补多核苷酸目标相互作用的多核苷酸探针，其中所述多核苷酸探针包括至少2个嵌入物分子。
65.根据任一权利要求63和64所述的多核苷酸探针，其中所述多核苷酸探针由选自:RNA、a -L-RNA, β _D_RNA、2’-R-RNA、DNA、锁核酸、肽核酸、吗啉寡聚体，苏糖核酸、甘油核酸、寡核苷酸 N3’ 一 P5’ 氨基磷酸酯、BNA、a -L-LNA, HNA、MNA、ANA、CAN、INA、CeNA、(2，-NH)-TNA、(3，-NH)-TNA、a -L-核糖-LNA、a -L-木-LNA、β -D-核糖-LNA、β -D-木-LNA、[3.2.1]-LNA、二环-D`NA、6-氨基-二环-DNA, 5-表二环-DNA、a - 二环-DNA、三环-DNA、二环[4.3.0]-DNA、二环[3.2.1]-DNA、二环[4.3.0]氨酰 DNA、β -D-吡喃核糖基-NA、a -L-来苏糖基_NA、2’ _0R_RNA、2’ -AE-RNA、及它们的结合物和修饰物的核苷酸制成，如选自DNA探针、RNA探针、LNA探针和PNA探针的探针。
66.根据任一权利要求63-65所述的多核苷酸探针,其中嵌入物分子的总数可选自2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20 和大于 20 个嵌入物分子。
67.根据任一权利要求63-66所述的多核苷酸探针，其中嵌入物分子的插入增加了互补探针与目标DNA和/或RNA组成的多核苷酸双链的熔点。
68.根据任一权利要求63-67所述的多核苷酸探针,其中嵌入物分子的数量与多核苷酸探针碱基总数的比率为1:50-1:2，如1:50-1:40，例如1:40-1:30，如1:30-1:20，例如1:20-1:10，如1:10-1:5，例如1:5-1:2，或这些间隔的任何结合。
69.根据任一权利要求63-68所述的多核苷酸探针，其中一个且唯一的嵌入物分子选自 TINA、INA、邻-TINA、对-TINA、AMANY。
70.根据权利要求69所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入物分子是TINA。
71.根据权利要求69所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入物分子是INA。
72.根据权利要求69所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入物分子是邻-TINA。
73.根据权利要求69所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入物分子是对-TINA。
74.根据权利要求69所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入物分子是AMANY。
75.根据任一权利要求63-69所述的多核苷酸探针，其中两个或多个嵌入物分子可选自 TINA、INA、邻-TINA、对-TINA、AMANY。
76.根据任一权利要求63-69所述的多核苷酸探针，其中所述多核苷酸探针包括一种以上类型的嵌入物分子，如2、3、4、5或大于5种不同类型的嵌入物分子。
77.根据任一权利要求63-76所述的多核苷酸探针，其中所述多核苷酸探针连接支撑物。
78.根据权利要求77所述的多核苷酸探针，其中所述支撑物选自颗粒物质、珠子、磁珠、非磁珠、聚苯乙烯珠子、磁性聚苯乙烯珠子、Sepharose珠子、聚丙烯酰胺葡聚糖珠子、聚苯乙烯珠子、琼脂糖珠子、多糖珠子和聚碳酸酯珠子。
79.根据任一权利要求77-78所述的多核苷酸探针，其中所述支撑物为固体支撑物。
80.根据权利要求79所述的多核苷酸探针，其中所述固体支撑物为选自微量滴定板或其他板格式、试剂管、载玻片和其他用于阵列或微阵列分析的支撑物，微流控室或设备的管道或通道和Biacore芯片。
81.根据任一权利要求63 -76所述的多核苷酸探针，其中所述多核苷酸探针包括一个或多个标签。
82.根据权利要求81所述的多核苷酸探针，其中所述一个或多个标签可选自生物素、荧光素标签、5-(和6)羧基荧光素、5-或6-羧基荧光素、6-(荧光素)-5-(和6)-羧酰胺己酸、异硫氰酸荧光素氰酸(FITC)、罗丹明、四甲基罗丹明、染料、Cy2、Cy3和Cy5、PerCP、藻胆蛋白、R-藻红蛋白(RPE)、异藻红蛋白(APC)、德克萨斯(Texas)红、Princeston Red、绿色突光蛋白(GFP)及它们的类似物、R-藻红蛋白(RPE)或异藻红蛋白(APC)的共缀物、基于半导体纳米晶体(像量子点和Qdot?纳米晶体)的无机荧光标签、基于镧系元素如Eu3+和Sm3+的时间分辨荧光、半抗原、DNP、地高辛、酶标签、辣根过氧化物酶(HRP)、磷酸酶(AP)、β -半乳糖苷酶(GAL)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、β -N-乙酰氨葡萄糖苷酶、β -葡萄糖醛酸酶、黄嘌呤氧化酶、蔗糖酶、萤火虫荧光素酶和葡萄糖氧化酶(GO)、夜光标签、鲁米诺(Iuminol)、异鲁米诺、吖啶酯、1，2-二氧环乙烷、吡啶哒嗪、放射性标签、同位素碘、同位素钴、同位素硒、同位素氚和同位素磷。
83.根据任一权利要求63-76所述的多核苷酸探针，其中嵌入物的嵌入单元优选包括选自多环芳烃和杂多环芳烃的化学基团。
84.根据权利要求83所述的多核苷酸探针，其中所述多环芳烃或杂多环芳烃组成至少2个芳环，如3，例如4，如5，例如6，如7，例如8，如大于8个芳环。
85.根据权利要求83-84所述的多核苷酸探针，其中所述杂多环芳烃包括至少一个芳环，其中至少一个碳原子被选自氮和氧的杂原子取代。
86.根据权利要求83-84所述的多核苷酸探针，其中杂多环芳烃包括至少2个杂原子，如3个杂原子，例如4个杂原子，如5个杂原子，例如大于5个个杂原子。
87.根据权利要求83-84和86所述的多核苷酸探针，其中所述杂多环芳烃包括作为唯一杂原子的氧。
88.根据权利要求83-84和86所述的多核苷酸探针，其中所述杂多环芳烃包括作为唯一杂原子的氮。
89.根据权利要求83-84和86所述的多核苷酸探针，其中所述杂多环芳烃包括两种杂原子氮和氧。
90.根据权利要求83-84所述的多核苷酸探针，其中所述多环芳烃或杂多环芳烃被一个或多个取代基取代、所述取代基选自羟基、卤素、疏基、硫代基、氰1基、烧硫基、杂环基、芳基、杂芳基、羧基、Carboalkoyl、烷基、烯基、炔基、硝基、氨基、烷氧基和酰氨基或两个相邻的取代基一起形成N=C-CH或C=C。
91.根据任一权利要求83-90所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入物的嵌入单元为选自能够增加多核苷酸双链结构稳定性的多环芳烃或杂多环芳烃。
92.根据任一权利要求84-91所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入物的嵌入单元为选自邻菲罗啉、吩嗪、菲啶、芘、蒽、萘、菲、二萘品苯、屈、并四苯、苯并蒽、芪、叶啉以及任何前述嵌入物被一个或多个取代基取代、所述取代基选自羟基、卤素、疏基、硫代基、氛基、烧硫基、杂环基、芳基、杂芳基、羧基、Carboalkoyl、烷基、烯基、炔基、硝基、氨基、烷氧基和酰氨基或两个相邻的取代基一起形成N=C-CH或C=C。
93.根据任一权利要求63-76所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入单元为选自双环芳香环系、三环芳香环系、四环芳香环系、五环芳香环系和它们的杂芳类似物，在一个特定的实施方式中，所述嵌入单元为选自芘，菲并咪唑和萘二甲酰亚胺。
94.根据任一权利要求63-76所述的多核苷酸探针，其中所述嵌入单元为选自修饰的核碱基，其非限制性例子有MPyu、AMPyu、0x°-pyu和其中U被本发明披露的任何其他核碱基所取代的类似物。一个特定的实施方式是针对选自、、―匕-、的嵌入单元。
95.根据任一权利要求1-43所述的方法在遗传物质的识别和捕获中的用途，所述方法用于选自以下一个或多个领域: -诊断癌症或不是癌症的遗传性疾病或产前诊断领域； -监测反义治疗； -家族亲属鉴定； -个性化治疗； -法医遗传学； -定量RNA分析； -微生物检测； -考古学和古病理学； -食品污染；及 -环境污染 包括从受测试个体的基因组中检测目标多核苷酸。
【文档编号】C12Q1/68GK103517991SQ201180063227
【公开日】2014年1月15日 申请日期:2011年10月27日 优先权日:2010年10月27日
【发明者】乌费·维斯特·施奈德, 尼娜·约恩克, 简·G·里斯贝 申请人:昆特拜克股份公司