乳酸杆菌发酵方法
【专利摘要】本发明公开了一种乳酸杆菌发酵方法，由葡萄糖20g，酵母浸膏4g，蛋白胨10g，牛肉膏8g，吐温801ml，KH2PO42g，NaAc5g，柠檬酸二铵2g，MgSO40.2g，MnSO40.04g，蒸馏水1000ml配置而成活化培养基，经过菌种活化，菌种扩大培养和发酵培养完成乳酸杆菌的发酵过程。提供了一种优化的乳酸杆菌发酵条件和发酵方法，使得乳酸杆菌的生产能力大大提高。
【专利说明】乳酸杆菌发酵方法
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明属于发酵【技术领域】，具体涉及乳酸杆菌发酵方法。
[0003]【背景技术】
[0004]乳酸细菌多属于兼性厌氧菌，发酵过程一般为厌氧高温发酵，不需通风搅拌。乳酸菌属于化能异养型微生物，它们缺乏对许多有机化合物的合成功能，必须提供多种营养物质和生长因子。乳酸菌由于蛋白酶活性较弱甚至缺乏必要的蛋白酶，因此，需要以蛋白水解物、氨基酸、肽和蛋白质等物质作为氮源。乳酸菌大多需要某些维生素和氨基酸等生长因子，如核黄素、烟酸、生物素、嘧啶等。由于乳酸菌比较复杂的营养需求及原料成本的问题，在目前的乳酸研究中，发酵培养基的研究是重中之重。通过发酵培养基的研究，可以有效的提高产量，大大降低生产成本。发酵培养基一般应包含有足够的碳源、氮源、无机盐和水，某些合成能力差的微生物还需添加适当的生长辅助类物质，才能维持其正常的生长。在乳酸细菌的氮源研究中，酵母膏仍是目前发酵产量最高的氮来源，研究者们认为，酵母膏中的某些B族维生素、小肽类物质对乳酸的生产起着重要的作用。但由于酵母膏价格较高，酵母膏成本约占整个乳酸生产成本的1/3以上，使得乳酸菌的生产成本一直居高不下。对生产中廉价氮源的筛选也已成为近年来研究的热点。现人们多倾向于选择廉价辅料(麦芽提取物、玉米浆、甜菜糖蜜、厨房垃圾等)部分替代酵母膏，从而达到高产、低成本的目的。
[0005]发酵是一种复杂的生化过程，受很多因素的影响，如菌体自身的生产性能、培养基的配比、种子的质量、发酵条件和发酵过程控制等都与目的产物的产出有密切的关系。在工业生产中，为 了最大限度的发挥菌体的生产能力，应该提供最优的生产培养基和培养条件。因此，探索菌株高产特性充分表达的最优培养条件是发酵生产的基础与关键。
[0006]
【发明内容】
[0007]为了克服现有【技术领域】存在的上述缺陷，本发明的目的在于，提供一种乳酸杆菌发酵方法，解决现有技术乳酸杆菌的生产培养基和培养条件无法满足菌体发挥最大生产能力的问题。
[0008]本发明提供的乳酸杆菌发酵方法，包括以下步骤:
(1)菌种活化，从乳酸杆菌菌种斜面上挑取菌种，接种至活化培养基中，37°c培养48小
时；
(2)菌种扩大培养，以无菌吸管按5%比例将MRS培养液转接于种子培养基中，37°C密封培养24小时；
(3)发酵培养，将菌种液按10%比例接入装有150ml发酵培养基的250 ml的盐水瓶中37°C静置培养72小时，发酵初期加入一定量的碳酸钙。
[0009]所述步骤(1)中活化培养基是由葡萄糖20g，酵母浸膏4g，蛋白胨10g，牛肉膏Sg，吐温 801 ml, KH2PO4 2g，NaAc5g，柠檬酸二铵 2g，MgSO40.2g，MnSO40.04g，蒸馏水 1000 ml 配置而成。
[0010]本发明提供的乳酸杆菌发酵方法，其有益效果在于，提供了一种优化的乳酸杆菌发酵条件和发酵方法，使得乳酸杆菌的生产能力大大提高。
[0011]
【具体实施方式】
[0012]下面结合一个实施例，对本发明提供的乳酸杆菌发酵方法进行详细的说明。
[0013]
实施例
[0014]本实施例的乳酸杆菌发酵方法，包括以下步骤:
(1)菌种活化，从乳酸杆菌菌种斜面上挑取菌种，接种至活化培养基中，37°c培养48小
时；
(2)菌种扩大培养，以无菌吸管按5%比例将MRS培养液转接于种子培养基中，37°C密封培养24小时；
(3)发酵培养，将菌种液按10%比例接入装有150ml发酵培养基的250 ml的盐水瓶中37°C静置培养72小时，发酵初期加入一定量的碳酸钙。 [0015]所述步骤(1)中活化培养基是由葡萄糖20g,酵母浸膏4g,蛋白胨IOg,牛肉膏8g,吐温 801 ml, KH2PO4 2g，NaAc5g，柠檬酸二铵 2g，MgSO40.2g，MnSO40.04g，蒸馏水 1000 ml 配置而成。
【权利要求】
1.一种乳酸杆菌发酵方法，其特征在于:包括以下步骤: (1)菌种活化，从乳酸杆菌菌种斜面上挑取菌种，接种至活化培养基中，37°c培养48小时； (2)菌种扩大培养，以无菌吸管按5%比例将MRS培养液转接于种子培养基中，37°C密封培养24小时； (3)发酵培养，将菌种液按10%比例接入装有150ml发酵培养基的250 ml的盐水瓶中37°C静置培养72小时，发酵初期加入一定量的碳酸钙。
2.根据权利要求1所述的乳酸杆菌发酵方法，其特征在于:所述步骤(1)中活化培养基是由葡萄糖20g，酵母浸膏4g，蛋白胨10g，牛肉膏8g，吐温801 ml, KH2P04 2g，NaAc5g，柠檬酸二铵 2g，MgS040.2g，MnS040.`04g，蒸馏水 1000 ml 配置而成。
【文档编号】C12R1/225GK103865831SQ201210550694
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2012年12月18日 优先权日:2012年12月18日
【发明者】张述智, 夏伟, 朱绍辉, 张 浩, 王晓丽, 徐权汗, 李之详, 许团辉 申请人:青岛中仁药业有限公司