一种海盘车多糖的应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种海盘车多糖在预防和治疗神经退行性疾病包括帕金森病和老年性痴呆疾病中的应用。所述的海盘车多糖来源于罗氏海盘车和多棘海盘车，系采用稀酸提取，经过过滤，脱盐等步骤制得海盘车多糖。海盘车多糖具有显著的神经保护作用，对神经毒素损伤两种细胞系具有明显的修复作用，表明它们可以用于神经系统疾病如帕金森病和老年性痴呆的治疗药物和保健品的制备。
【专利说明】一种海盘车多糖的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及海盘车多糖在制备治疗帕金森病和老年性痴呆药物或保健品中的应用。
【背景技术】
[0002]随着人类平均寿命的逐年增加，世界正步入全球老龄化时代。与年龄有关的神经退化性疾病也随之增加，在中枢神经系统方面，主要表现为兴奋与抑制过程减弱，大脑功能降低，记忆力减退和丧失，随后出现识别功能的进行性减退和情绪紊乱的加重等。老年性痴呆已成为心脑血管疾病和肿瘤之后的第四位疾病。目前，全世界65岁以上人群中老年性痴呆患病率约为5%。而老年性痴呆因其复杂的发病机理，近期在防治上不可能取得突破性进展，故西方有专家预言，老年性痴呆将是21世纪人类第一杀手。帕金森病又称震颤麻痹，是中老年人常见的中枢神经系统变性疾病，帕金森病的主要病理特征是是因位于中脑部位"黑质"中的细胞发生病理性改变后，多巴胺的合成减少，抑制乙酰胆碱的功能降低，则乙酰胆碱的兴奋作用相对增强。两者失衡的结果便出现了“震颤麻痹”。最新资料表明，中国有I 7 O万帕金森病患者，其中5 5岁以上的人群中每I O O人就有I个帕金森病人，估计每年新增帕金森病人约I Q万人。老年性痴呆和帕金森病对患者、家庭和社会都带来巨大的压力，使得全世界对其给予众多的关注，老年痴呆和帕金森病等神经退行性疾病的治疗药物研究成为老年医学领域中的一个重要课题。
[0003]海洋是地球上所占面积最大的区域，因此开发海洋药物越来越受到重视，而海洋物质提取在制备和开发抗帕 金森药物及在神经保护方面有着不可估计的社会和经济效益。
[0004]海盘车，属于棘皮动物门，海星纲，生活在潮间带和近岸的平静海域，以吞食各种贝类、软体动物、海胆等为食。海盘车作为中药已有几千年的历史，具有镇惊安神、和胃止痛、厚肠止泻，清热解毒等功效，主治胃酸过多、胃溃疡、腹泻、癫痫等症。近年来，海盘车体内的活性成分相继被发现，如留类糖苷，留醇，蛋白酶，氨基酸，多肽，蛋白多糖，脂类，生物碱等。但是以往的研究倾向于海盘车提取物中留类糖苷化合物的药理学活性及其作用机理。而对海盘车多糖的研究却不多。少量的文献报道了海盘车酸性粘多糖具有抗凝血，抑制红细胞凝聚及血栓形成等作用，但海盘车中其他多糖及生物活性却鲜有报道。
【发明内容】
[0005]为解决上述问题，本发明提供了一种海盘车多糖在预防和治疗神经退行性疾病包括帕金森病和老年性痴呆疾病中的应用。
[0006]为实现上述目的，本发明发现一种海盘车多糖在治疗和预防神经退行性疾病包括帕金森病和老年性痴呆疾病中的应用。
[0007]并进一步提供所述海盘车多糖的制备方法:首先采用异丙醇和乙醇分别处理海盘车脱脂，然后将脱脂后的海盘车采用稀酸提取法提取，过滤，提取液用碱调PH至接近中性，透析脱盐，浓缩透析袋内溶液，将浓缩液喷雾干燥、冷冻干燥或乙醇沉淀法制得海盘车多糖。
[0008]其中，所述的海盘车多糖主要组成单糖为甘露糖和葡萄糖，两者的比例为1:3-1:10，硫酸基含量为5%-20%。
[0009]优选的，所述的海盘车多糖来源于海星纲钳棘目海盘车科海盘车属罗氏海盘车{Asterias roBesiofli)或多棘海盘车(A amurensis')。
[0010]优选的，所述的海盘车多糖分子量为IKD~1000KD。
[0011]神经细胞凋亡在神经细胞损伤中起十分重要的作用，药物可通过干预凋亡过程阻止其进一步 发展，对神经细胞起到保护作用。SH-SY5Y细胞来源于人的神经母细胞瘤，其形态和生理功能与正常神经元相似，呈锥形，且具有明显的轴突，是目前国际上研究神经细胞功能较好的一种细胞。SY5Y细胞和MES23.5多巴胺能细胞分别是研究阿尔茨海默病和帕金森病常用的神经细胞模型，本发明首次发现海盘车多糖分别对神经毒素损伤两种细胞系具有明显的修复作用，表明它们可以用于神经系统疾病如帕金森病和老年性痴呆的治疗药物和保健品的制备。
【专利附图】
【附图说明】
[0012]图1海盘车多糖SF-1对6-OHDA损伤的多巴胺能神经细胞的保护作用。其结果以平均值土SD表示。** (P<0.01)与6-OHDA进行对比，具有统计学意义；
图2海盘车多糖SF-2对6-OHDA损伤的多巴胺能神经细胞的保护作用。其结果以平均值土SD表示。* (P〈0.05)，与6-OHDA进行对比，具有统计学意义。
【具体实施方式】
[0013]下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附后权利要求书限定的范围。
[0014]本发明指出一种海盘车多糖，可在制备治疗或预防帕金森病和老年性痴呆药物或保健品中应用。所述葡聚糖的制备方法如下:
实施例1:罗氏海盘车多糖的制备
(I)将200g干罗氏海盘车粉碎，分别用3倍体积的异丙醇处理两次，过滤，弃去异丙醇，然后将海盘车继续用3倍体积的乙醇处理两次，过滤，弃去乙醇,将海盘车干燥。得率为80%。
[0015](2)将脱脂的海盘车160g，用3倍体积的0.1 M HCl溶液提取2h，过滤，提取液用碱调PH至5-8，浓缩，用截留分子量为3500Da透析袋透析2天，浓缩透析袋内溶液，冻干得海盘车多糖(以SF-1表示)18.02g，得率为9.01%。
[0016]罗氏海盘车多糖的化学组分分析，单糖比例分析，硫酸根含量，分子量测定结果见表1。IR谱图结果表明SF-1为硫酸多糖，在1240 cm-1和840 cm-1左右出现硫酸基特征吸收峰。
[0017]实施例2:多棘海盘车多糖的制备
(I)将200g干多棘海盘车粉碎，分别用3倍体积的异丙醇处理两次，过滤，弃去异丙醇，然后将海盘车继续用3倍体积的乙醇处理两次，过滤，弃去乙醇,将海盘车干燥。得率为84%。
[0018](2)将脱脂的海盘车168g，用3倍体积的0.01 M HCl溶液提取3h，过滤，提取液用碱调pH至5-8,浓缩,用截留分子量为3500Da透析袋透析2天,浓缩透析袋内溶液,加至食用乙醇中至乙醇终浓度为75%，得白色沉淀，将沉淀以95%乙醇洗涤，减压干燥后得海盘车多糖(以SF-2表示)20.3g，得率为10.15%。
[0019]多棘海盘车多糖的化学组分分析，单糖比例分析，硫酸根含量，分子量分析结果见表1。IR谱图结果表明SF-2为硫酸多糖，在1240 cm-1和840 cm-1左右出现硫酸基特征吸收峰。
[0020]表1海盘车多糖及其分级样品的化学分析
【权利要求】
1.一种海盘车多糖的应用，其特征在于，所述海盘车多糖可在制备治疗或预防帕金森病和老年性痴呆药物或保健品中应用。
2.根据权利要求1所述海盘车多糖的应用，其特征在于，所述海盘车多糖按照以下方法制备:首先采用异丙醇和乙醇分别处理海盘车脱脂，然后将脱脂后的海盘车采用稀酸提取法提取，过滤，将提取液中和，透析脱盐，将透析截留液浓缩，将浓缩液喷雾干燥、冷冻干燥或乙醇沉淀法制得海盘车多糖。
3.根据权利要求1所述海盘车多糖的应用，所述的海盘车多糖主要组成单糖为甘露糖和葡萄糖，两者的摩尔比例为(1-3):10，硫酸基含量为5%-25%。
4.根据权利要求1所述海盘车多糖的应用，其特征在于:所述的海盘车多糖来源于海星纲钳棘目海盘车科海盘车属罗氏海盘车(Asieria1S roIIestoni )或多棘海盘车(Aamurensis)。
5.根据权利要求1所述海盘车多糖的应用，其特征在于:所述的海盘车多糖分子量范围为 1-1OOkD。
【文档编号】A23L1/29GK103919801SQ201310010387
【公开日】2014年7月16日 申请日期:2013年1月11日 优先权日:2013年1月11日
【发明者】张全斌, 张文静, 王晶, 金维华 申请人:南通中国科学院海洋研究所海洋科学与技术研究发展中心, 中国科学院海洋研究所