一种海洋链霉菌及利用其制备Enterocin的方法以及该菌的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种海洋链霉菌及利用其制备Enterocin的方法以及该菌的应用。链霉菌（Streptomyces?qinglanensis）SCSIO?05256，其保藏编号为CGMCC?No.7865。本发明提供了一种新的海洋链霉菌SCSIO?05256，该菌能够发酵高效大量产生肠道菌素化合物Enterocin，有望将该菌株改造为化合物Enterocin的工程菌株，或将该菌作为食品添加剂等应用为轻工食品、饲料等防腐保鲜，实现应用。
【专利说明】-种海洋链霉菌及利用其制备Enterocin的方法以及该菌 的应用
【技术领域】：
[0001] 本发明属于工业微生物领域，具体涉及一种海洋链霉菌及利用其制备Enterocin 的方法以及该菌的应用。
【背景技术】：
[0002] 肠道菌素是重要的细菌素之一，能同时抑制G+和G-细菌，具有广谱抑菌作用，特 别是对食品腐败和保鲜相关的微生物等具有良好的抑制作用，如单核细胞增生李斯特菌等 多种李斯特菌及一些乳酸菌等；另外，肠道菌素具有良好的热稳定性、以及对多种蛋白酶、 还原剂等有较好的稳定性，是食品生产中优良的保鲜和防腐添加剂。因此，肠道菌素广谱抑 菌作用和良好的稳定性特性有望作为新型生物防腐剂用于食品的防腐保鲜及环保制剂。部 分肠道菌素产生菌株则可以作为益生菌和发酵剂应用于保健食品和发酵食品的生产。
[0003] 近年来，国外学者对肠道菌素及其产生菌株进行了大量研究，发现天然细菌素产 生量少且获得过程比较复杂，限制了对其的广泛应用。另外，有些肠球菌是条件致病菌，含 有毒力因子且具有抗生素抗性，引起了人们对其在食品应用中的安全性考虑。
[0004] Enterocin，其结构式如式1所不，公开于文献Seto H, Tsutomu S, Urano S, etal. Utilization of 13C_13C coupling in structural and biosynthetic studies. VII1) the structure and biosynthesis of vulgamycin[J]. Tetrahedron Lett,1976,17(48):4367-4370 和文献 KangH, Jensen P R,Fenical W. Isolation of microbial antibiotics from amarine ascidian of the genus didemnum[J]. J Org Chem, 1996, 61 (4) :1543-1546.中。
[0005]
【权利要求】
1. 链霉菌（str印tomyces qinglanensis)SCSIO 05256,其保藏编号为CGMCC No.7865。
2. -种化合物Enterocin的制备方法，其特征在于，化合物Enterocin是从权利要求1 所述的链霉菌SCSI0 05256的发酵培养物中制备分离得到的。
3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下： a、 制备链霉菌SCSI0 05256的发酵培养物； b、 将发酵培养物进行固液分离，得到发酵液和菌丝体，发酵液用丁酮萃取，丁酮萃取液 浓缩后得浸膏A，菌丝体用丙酮浸提，浸提液浓缩后得浸膏B ; c、 将浸膏A和浸膏B合并得到粗提物，粗提物经硅胶柱层析，以乙酸乙酯/石油醚为洗 脱剂，从体积比1:9, 2:8, 3:7,4:6, 5:5,6:4进行梯度洗脱，收集乙酸乙酯/石油醚5:5洗脱 的馏分，再用中压反相柱层析，用甲醇/水梯度洗脱，〇?60min, 5%?60%体积分数，流速 18mL/min，收集保留时间为30min的馏分，再经正相硅胶柱层析，以二氯甲烷/甲醇为洗脱 齐U，从体积比99:1，98:2,97:3,96:4,95:5,94:6梯度洗脱，收集二氯甲烷/甲醇96:4洗脱 的馈分，即为化合物Enterocin。
4. 权利要求1所述的链霉菌SCSI0 05256在制备化合物Enterocin中的应用。
5. 权利要求1所述的链霉菌SCSI0 05256及其发酵产物在制备防腐保鲜剂中的应用。
6. 权利要求1所述的链霉菌SCSI0 05256及其发酵产物在制备微生态制剂及环保制品 中的应用。
7. 化合物Enterocin在制备抗菌药物中的应用。
8. 根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的抗菌药物为抗藤黄微球菌、苏云金 芽孢杆菌或嗜水气单胞菌等该类微生物的药物。
【文档编号】C12N1/20GK104087523SQ201410025924
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年1月20日 优先权日:2014年1月20日
【发明者】张偲, 田新朋, 鞠建华, 罗明和, 尹浩 申请人:中国科学院南海海洋研究所