专利名称：海洋链霉菌、吡喃型倍半萜类化合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于工业微生物领域，具体涉及一种能够产生新的具有独特香味的卩比喃型倍半職类(Pyranosesquiterpene)化合物和强活性环二肽类化合物 Cyclo (D) -Pro- (D) -Ile> Cyclo (D) -Pro- (D) -Leu 和 Cyclo (D) -trans-4-0H-Pro- (D) -Phe 的链霉菌(Streptomyces sp.) SCSIOO1689新种，以及利用该菌制备卩比喃型倍半職类(Pyranosesquiterpene)化合物和强活性环二妝类化合物 Cyclo(D)-Pro-(D)-Ile, Cyclo (D) -Pro- (D) -Leu, Cyclo (D) -trans-4-0H-Pro- (D) -Phe 的方法,还有卩比喃型倍半職类 (Pyranosesquiterpene)化合物及其用途。鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是世界范围内流行的水产养殖动物病原菌,可感染鲑鱼、虹鳟、鳗鲡、香鱼、鲈鱼、鳕鱼、大菱鲆、牙鲆、黄鱼等(高冬梅，李健，王群.鳗弧菌灭活疫苗对牙鲆免疫效果的研究.海洋水产研究，2004，25 (I) :486-492)。部分感染鳗弧菌的鱼体表最初出现局部褪色，鳍条、鳍基部及鳃骨下部充血发红，肛门红肿，继而肌肉组织有弥撒性或点状出血，体表发黑，鳍部出现溃烂；解剖检验时有明显的黄色粘稠腹水，肠粘膜组织腐烂脱落，部分鱼肝脏坏死(肖慧，李军，徐怀恕，等.鲈鱼苗烂鳃、烂尾病病原的研究.青岛海洋大学报，1999，29 (I) :89)。鳗弧菌是水产养殖中的重要病害。环妝类化合物Cyclo (D) -Pro- (D) -He (化合物 2)、Cyclo (D) -Pro- (D) -Leu (化合物3)和Cyclo (D)-trans-4-0H-Pro-(D)-Phe (化合物4)为已知化合物，其结构式如式
(II)所示，公开于以下文献 I、Journal of Natural Products, 2003,66 (10) :1299_1301。 2、Journal of Natural Products 1995,58(2) :201_208。3、Anal Bioanal Chem 2010， 396:1773-1779。并在 Fdhila F etal, . Journal of Natural Products, 2003,66 (10) 1299-1301 中公开 Cyclo (D)-Pro-(D)-lie (化合物 2)、Cyclo (D)-Pro-(D)-Leu (化合物 3) 和Cyclo (D) -trans-4-0H-Pro- (D) -Phe (化合物4)对鳗弧菌具有很好杀菌活性。
背景技术：
权利要求
1.链霉菌(Streptomycessp.) SCSIO 01689，保藏编号为CCTCC NO M 2011257。
2.如式(I)所示的批喃型倍半職类(Pyranosesquiterpene)化合物
3.权利要求I所述的链霉菌(Streptomycessp.) SCSIO 01689用于制备如权利要求2所述的卩比喃型倍半職类(Pyranosesquiterpene)化合物、Cyclo (D)-Pro-(D)-He、 Cyclo (D) -Pro- (D) -Leu 或 Cyclo (D) -trans-4-0H-Pro- (D) -Phe 的应用。
4.一种权利要求2所述的批喃型倍半職类(Pyranosesquiterpene)化合物、 Cyclo (D) -Pro- (D) -Ile> Cyclo (D) -Pro- (D) -Leu 或 Cyclo (D) -trans-4-0H-Pro- (D) -Phe 的制备方法，其特征在于，所述的卩比喃型倍半職类(Pyranosesquiterpene)化合物、 Cyclo (D)-Pro-(D)-Ile> Cyclo (D) -P ro- (D)-Leu 或 Cyclo (D)-trans-4-0H-Pro-(D)-Phe 是从链霉菌(Streptomyces sp.) SCSIO 01689的发酵培养物中制备分离得到的。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下a)制备链霉菌(Sti^ptomycessp.) SCSIO 01689的发酵培养物，将该发酵培养物的发酵液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯经蒸馏浓缩后得到浸膏；b)将浸膏经硅胶柱层析，用氯仿/丙酮作为洗脱剂，从体积比100: 0 0 : 100进行梯度洗脱，收集氯仿/丙酮体积比95 5和体积比60 40梯度洗脱下来的馏分分别为 Fr. I和Fr. 2，馏分Fr. I经过凝胶柱层析得到粗品，经纯化，得到权利要求2所述的吡喃型倍半職类(Pyranosesquiterpene)化合物；懼分Fr. 2经过凝胶柱层析得到粗品,经纯化,得到 Cyclo(D)-Pro-(D)_Ile、Cyclo(D)-Pro-(D)-Leu 和 Cyclo(D)-trans-4-0H-Pro-(D)-Pheo
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的a)步骤的制备链霉菌 (Streptomyces sp.) SCSIO 01689的发酵培养物是通过以下方法制备将活化的链霉菌 (Streptomyces sp. ) SCSIO 01689接入种子培养基中，28°C，180rpm,培养3天制得种子液， 将种子液以5%的接种量接入到发酵培养基中，28°C，180rpm，振荡培养8天，而制得发酵培养物，所述的种子培养基和发酵培养基的配方都为每升培养基中含有淀粉5g，大豆粉5g， 蛋白胨2g，葡萄糖20g，酵母膏2g，K2HPO4 0. 5g, MgSO4 7H20 0. 5g，粗海盐30g，余量为水，pH 7. 4，所述的步骤b)的纯化都为色谱柱分离。
7.权利要求I所述的链霉菌(Streptomycessp.) SCSIO 01689在制备脂肪酶或蛋白水解酶中的应用。
8.权利要求2所述的批喃型倍半職类(Pyranosesquiterpene)化合物在制备抗大肠杆菌药物或制备抗卤虫药物或作为呈味剂的前体化合物在制备呈味剂中的应用。
9.Cyclo(D)-Pro-(D)-Ile、Cyclo (D) - Pro - (D) -Leu 或 Cyclo (D) -trans-4-0H-Pro- (D) -Phe在制备抗齒虫药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种海洋链霉菌、吡喃型倍半萜类化合物及其制备方法和用途。链霉菌(S treptomyces sp.)SCSIO 01689于2011年7月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址中国武汉市武汉大学，保藏编号为CCTCC NOM 2011257。链霉菌(Streptomyces s p.)SCSIO 01689能够产生新的具有较好的抗大肠杆菌活性和抗卤虫活性的吡喃型倍半萜类(P yranosesquiterpene)化合物，和具有较好的抗鳗弧菌活性和抗卤虫活性的Cyclo(D)-Pro-(D)-I le、Cyclo(D)-Pro-(D)-Leu和Cyclo(D)-trans-4-OH-Pro-(D)-Phe，因此为制备Cyclo(D)-Pro-(D)-Ile、Cyclo(D)-Pro-(D)-Leu和Cyclo(D)-trans-4-OH-Pro-(D)-Phe提供了新的途径。吡喃型倍半萜类(Pyranosesquiterpene)化合物可以用于制备抗大肠杆菌药物、抗卤虫药物和作为呈味剂的前体化合物应用于呈味剂的制备。
文档编号A01N43/90GK102533600SQ20111046024
公开日2012年7月4日 申请日期2011年12月30日 优先权日2011年12月30日
发明者尹团, 李洁, 田新朋, 罗雄明, 齐振雄, 龙丽娟 申请人:中国科学院南海海洋研究所