酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂的制作方法
【专利摘要】本发明涉及酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，包括以下组成成分：赖氨酸0.2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海藻糖600-1000g/L、硫酸钴0.023-0.12g/L、硫酸锌0.1-0.45g/L、酵母硒0.1-0.5g/L、甘露聚糖酶100000-200000U/L；本发明不仅可以增加酵母菌、芽孢杆菌或乳酸菌单菌/混菌发酵后的益生菌的活菌数量，缩短发酵时间，提高生产效率，降低发酵成本，还可以提高酵母菌、芽孢杆菌和乳酸菌的保存时间，增强生物活性，具有良好的经济、生态及社会效益。
【专利说明】酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂
【技术领域】：
[0001] 本发明涉及一种增效剂，特别涉及一种酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效 剂。
【背景技术】：
[0002] 微生物发酵饲料是以微生物发酵技术为核心生产的动物饲料，微生物饲料不仅能 够改善饲料营养吸收水平，降解饲料原料中存在的抗营养物质和可能存在的毒素，提高营 养物质的含量，还能大大减少抗生素等药物类添加剂的使用，提高禽蛋和肉产品等的食品 安全性。
[0003] 目前利用饲用益生菌发酵生产生物饲料，大部分都是采用固体发酵技术。使用微 生物发酵饲料一定要保证微生物发酵饲料产品中的活菌数。发酵产品中活菌数含量高能说 明发酵效果好，并且活菌数含量高才能在动物肠道中成为优势菌群，抑制致病菌的生长繁 殖，发挥防病治病和助生长的作用。但是由于发酵技术综合水平较差，发酵产品中杂菌数 高，发酵周期长，成本高，发酵产品存在益生菌活菌数低等问题，大大降低了生物饲料的效 果。尤其是对于产品中芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌此类益生菌来说，在工业生产中在室温保 存时活菌存留率低、死亡率高是普遍存在的问题。
【发明内容】
：
[0004] 本发明的目的就是提供酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，能有效的克 服现有技术中发酵产品杂菌数高，发酵周期长，成本高，发酵产品存在益生菌活菌数低、降 低生物饲料的应用效果等问题；尤其是能解决产品保存过程中芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌 活菌存留率低这个现实问题。
[0005] 为实现上述目的，本发明提供了酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，包 括以下组成成分：赖氨酸0. 2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海藻糖600-1000g/L、硫酸钴 0· 023-0. 12g/L、硫酸锌 0· 1-0. 45g/L、酵母硒 0· 1-0. 5g/L、甘露聚糖酶 100000-200000U/L。
[0006] 用于在酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌发酵过程中的用途；所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢 杆菌为：酿酒酵母菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌中的一种或两种或三种的混合菌。
[0007] 在发酵前按照0. 2-1. 8% (v/w)的添加量，添加到固体培养基中；添加前，需要先 配制成水溶液，再添加到固体培养基中。
[0008] 所用的固体培养基为：麸皮70-85%、豆柏5-10%、玉米粉5-10%、红糖0.5-3%、 酵母粉0.5-2%、生物素0.01-0. 04%，pH自然。
[0009] 酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，其发酵方法为：
[0010] 第一步：配置固体培养基
[0011] 按照添加比例称取各组分原料并混合均匀。麸皮70-85%、豆柏5-10%、玉米粉 5-10 %、红糖 0· 5-3 %、酵母粉 0· 5-2 %、生物素 0· 01-0. 04 % ;
[0012] 第二步：配置增效剂溶液
[0013] 配制增效剂水溶液，使各组分浓度为赖氨酸0. 2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海 藻糖 600-1000g/L、硫酸钴 0· 023-0. 12g/L、硫酸锌 0· 1-0. 45g/L、酵母硒 0· 1-0. 5g/L、甘露 聚糖酶 100000-200000U/L ;
[0014] 第三步：将增效剂加入固体培养基中
[0015] 按照0. 2-1. 8% (v/w)的增效剂添加量，计算需要添加的增效剂溶液的体积；量取 增效剂水溶液先混合入一定体积的蒸馏水中，使得发酵的料水比为1 : 0.6-1. 0。搅拌均匀 后再将增效剂、种子液和蒸馏水混合液拌入第一步配好的固体培养基中，pH自然。发酵温 度30-37°C，发酵时间为48-60h。
[0016] 本发明提供的一种用于固体发酵生物饲料的增效剂具有以下优点：本发明立足于 提高微生物发酵饲料中的益生菌活菌数，提高发酵饲料产品质量，缩短发酵时间，节约生产 成本，研制了一种用于酵母菌、芽孢杆菌和乳酸菌单菌/混菌固体发酵生物饲料的增效剂。 本发明不仅可以增加酵母菌、芽孢杆菌或乳酸菌单菌/混菌发酵后的益生菌的活菌数量， 缩短发酵时间，提高生产效率，降低发酵成本，还可以提高酵母菌、芽孢杆菌和乳酸菌的保 存时间，增强生物活性，具有良好的经济、生态及社会效益。
【具体实施方式】：
[0017] 下面通过实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细说明。
[0018] 三种种子液的培养方法：
[0019] 酿酒酵母种子液：从试管斜面上挑取一环酿酒酵母菌种，接种至麦芽汁培养基， 28°C、180rpm条件下振荡培养24h，种子液待用。
[0020] 植物乳杆菌种子液：从试管斜面上挑取一环植物乳杆菌菌种，接种至MRS培养基， 37°C静置培养24h，种子液待用。
[0021] 枯草芽孢杆菌种子液：从试管斜面上挑取一环枯草芽孢杆菌菌种，接种至肉汤培 养基，37°C、180rpm条件下振荡培养20h，种子液待用。
[0022] 实施例1 :
[0023] 酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，包括以下组成成分：赖氨酸0. 28g/ L、山梨糖醇150g/L、海藻糖300g/L、硫酸钴0. 03g/L、硫酸锌0. 3g/L、酵母硒0. lg/L、甘露聚 糖酶110000U/L ;混合均匀，加入水至完全溶解；在发酵前按照1. 2% v/w的添加量，添加到 固体培养基中；
[0024] 固体培养基为麸皮80%、豆柏10%、玉米粉7%、红糖1.5%、酵母粉1.47%、生物 素0.03%的培养基中，pH自然；再加入水和种子液（5%接种量），料水比1 : 0.6,发酵温 度为30°C，发酵池中堆放发酵时间48h。
[0025] 所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌为：酿酒酵母菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌的混 合菌（三种种子液体积比1 : 1 : 1)。
[0026] 实施例2 :
[0027] 酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，包括以下组成成分：赖氨酸1. 5g/ L、山梨糖醇320g/L、海藻糖600g/L、硫酸钴0. 08g/L、硫酸锌0. 25g/L、酵母硒0. 3g/L、甘露 聚糖酶160000U/L ;混合均匀，加入水至完全溶解；在发酵前按照1. 0% v/w的添加量，添加 到固体培养基中；
[0028] 固体培养基为：麸皮76%、豆柏9%、玉米粉10%、红糖2. 98%、酵母粉2%、生物 素0.02%，pH自然；再加入水和种子液（5%接种量），料水比1 : 0.8,发酵温度为30°C，发 酵池中堆放发酵时间48h。
[0029] 所述的菌为：酿酒酵母菌、植物乳杆菌的混合菌（两种种子液体积比1 : 1)。
[0030] 实施例3 :
[0031] 酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，包括以下组成成分：赖氨酸3g/L、 山梨糖醇500g/L、海藻糖1000g/L、硫酸钴0. lg/L、硫酸锌0. 45g/L、酵母硒0. 45g/L、甘露聚 糖酶200000U/L ;混合均匀，加入水至完全溶解；在发酵前按照0. 7% v/w的添加量，添加到 固体培养基中；
[0032] 固体培养基为：麸皮85%、豆柏6%、玉米粉7%、红糖0. 56%、酵母粉1.4%、生物 素0.04(%，？!1自然；再加入水和种子液（5 (%接种量），料水比1:0.8，发酵温度321：，发酵 池中堆放发酵时间48h。
[0033] 所述的菌为：枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌的混合菌（两种种子液体积比1 : 1)。
[0034] 实施例4 :
[0035] 酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，包括以下组成成分：赖氨酸2. 2g/ L、山梨糖醇430g/L、海藻糖960g/L、硫酸钴0. 03g/L、硫酸锌0. lg/L、酵母硒0. 5g/L、甘露聚 糖酶200000U/L ;混合均匀，加入水至完全溶解；在发酵前按照0. 3% v/w的添加量，添加到 固体培养基中；
[0036] 固体培养基为：麸皮78%、豆柏10%、玉米粉10%、红糖0.9%、酵母粉1.065%、 生物素0.035%，pH自然；加入水和种子液（5%接种量），料水比1 : 1，发酵温度为30°C， 发酵池中堆放发酵时间48h。
[0037] 所述的菌为：酿酒酵母菌。
[0038] 实施例5 :
[0039] 酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，包括以下组成成分：赖氨酸0. 2g/ L、山梨糖醇100g/L、海藻糖800g/L、硫酸钴0. lg/L、硫酸锌0. 35g/L、酵母硒0. 4g/L、甘露聚 糖酶190000U/L ;加入水至完全溶解；在发酵前按照1. 7% v/w的添加量，添加到固体培养 基中；
[0040] 在发酵前按照（v/w)的添加量，加入水至完全溶解后，添加到固体培养基中；所 用的固体培养基为：麸皮84%、豆柏5%、玉米粉9%、红糖0.5%、酵母粉1.49%、生物素 0.01%，pH自然；加入水和种子液（5%接种量），料水比1 : 0.8,发酵温度为35°C，发酵池 中堆放发酵时间48h ;
[0041] 所述的菌为：植物乳杆菌。
[0042] 下面通过具体的实验来说明本发明的显著功效：
[0043] 通过加速试验测定发酵产品的存放时间。选择401：±21：、冊75(%±5 (%条件下 进行6个月存放试验。在试验期间第0、1、2、3、6个月末取样检测考察指标。其中1为添加 了本发明酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂进行的固体发酵产品，2为未添加本 发明常规固体发酵产品。
[0044]
【权利要求】
1. 酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，其特征在于：包括以下组成成分：赖 氨酸 0· 2-3g/L、山梨糖醇 100-500g/L、海藻糖 600-1000g/L、硫酸钴 0· 023-0. 12g/L、硫酸锌 0· 1-0. 45g/L、酵母硒 0· 1-0. 5g/L、甘露聚糖酶 100000-200000U/L。
2. 根据权利要求1所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，其特征在于： 用于在酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌发酵过程中的用途；所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌为： 酿酒酵母菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌中的一种或两种或三种的混合菌。
3. 根据权利要求1所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，其特征在于： 在发酵前按照0.2-1.8% (v/w)的添加量，添加到固体培养基中；添加前，需要先配制成水 溶液，再添加到固体培养基中。
4. 根据权利要求3所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂，其特征在于： 所用的固体培养基为：麸皮70-85 %、豆柏5-10 %、玉米粉5-10 %、红糖0. 5-3 %、酵母粉 0· 5-2%、生物素 0· 01-0. 04%，pH 自然。
5. 根据权利要求1或2或3或4所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 其特征在于：其发酵方法为： 第一步：配置固体培养基 按照添加比例称取各组分原料并混合均匀；麸皮70-85 %、豆柏5-10%、玉米粉 5-10%、红糖 0· 5-3%、酵母粉 0· 5-2%、生物素 0· 01-0. 04% ; 第二步：配置增效剂溶液 配制增效剂水溶液，使各组分浓度为赖氨酸〇. 2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海藻糖 600-1000g/L、硫酸钴 0· 023-0. 12g/L、硫酸锌 0· 1-0. 45g/L、酵母硒 0· 1-0. 5g/L、甘露聚糖 酶 100000-200000U/L ; 第三步：将增效剂加入固体培养基中 按照0.2-1. 8% (v/w)的增效剂添加量，计算需要添加的增效剂溶液的体积；量取增 效剂水溶液先混合入一定体积的蒸馏水中，使得发酵的料水比为1 : 0. 6-1. 0 ;搅拌均匀后 再将增效剂、种子液和蒸馏水混合液拌入第一步配好的固体培养基中，pH自然；发酵温度 30-37 °C，发酵时间为48-60h。
【文档编号】C12N1/38GK104140946SQ201410355239
【公开日】2014年11月12日 申请日期:2014年7月25日 优先权日:2014年7月25日
【发明者】于长青, 蔺兴盛, 李俊霞 申请人:内蒙古斯隆生物技术有限责任公司