羊胎盘素提取新工艺的制作方法

文档序号:13705600阅读:1280来源:国知局
技术领域本发明涉及的是一种羊胎盘素提取新工艺。

背景技术:
“胎盘素”为常用保健品,是由胎盘提取的具有免疫活性的小分子化合物的总称又称“胎盘肽”。中医理论认为,胎盘性干、咸、归肺、肾经。功能为补气、养血、益精,可用作滋补、养颜、强壮之功能。其功效主要有以下几点:对皮肤有保健作用、对免疫能力和运动能力有很大影响、抗疲劳作用、抗衰老作用、细胞免疫作用。正因为胎盘有上述诸多功效,所以用现代生物工程技术及现代化学方法提取、分离其有效成分——多肽、SOD、ATP、HASF、EGF、等有效成分,成为重要课题。用透析、超滤的方法提取羊胎盘素并把其加工成高科技产品应用于临床医学的方法早在80年代已有报道。但特种保健食品、护肤化妆品等已成为诱人用溶剂提取的方法还未见报道。本文介绍的方法是利用混合有机溶剂提取羊胎盘素的新工艺。并对提取的羊胎盘素进行了生物活性及营养成分分析测定。

技术实现要素:
本发明的目的是提供一种羊胎盘素提取新工艺。本发明的目的是这样实现的:a、脱雌性激素:无菌条件下取一定量的羊胎素结晶按1:10的比例加入丙酮(0-4℃)搅拌提取数小时高速低温离心机以12000r/min离心15min;分出丙酮液,用于雌二醇、雌酮等的检测,沉淀重新冷冻干燥得脱激素羊胎素,测其活性;分离少量的大分子,无菌少量的大分子,无菌低温条件下,取3.450g羊胎素结晶用12000-14000的透析膜,加入无菌水在0-4℃无菌透析,4h换一次水共用3000ml水透析12h,浓缩(温度不超过37℃),冷冻干燥得12000以下3.154g,大分子0.2870g,比例为3.154、0.287-11:1,测其活性;用同样方法准确称取羊胎素1.000g,用8000的透膜透析得分子量8000以下0.8377g,分子量8000以上0.1623g,比例为5.1:1;b、ATP含量的测定:ATP标样,配成0.1mg/ml溶液作工作曲线;c、磷的测定:用钼镝抗法测定磷的含量,取样品0.4949g,配成25ml溶液,取此液0.1ml,依次加入钼镝抗显色剂2.5ml,5滴氢氧化钠溶液,2.4-二硝基酚,定容25ml;d、微量元素测定:Z-8000原子吸收光谱议,采用空气乙炔火焰测定,采用标准曲线法;e、氨基酸含量的测定:人体必须氨基酸之一的色氨酸,在盐酸水解条件下全部被破坏,用日立835-50型氨基酸分析仪测定其含量有困难因此未测定样品中色氨酸分析仪进行分析:分馏柱为4×150mm,树脂为日立2619F,茚三酮显色泵流速为0.675ml/min,柱温为55-57℃,流动相为柠檬酸缓冲液,标准品浓度为5.00mol。具体实施方式实施例:a、脱雌性激素:无菌条件下取一定量的羊胎素结晶按1:10的比例加入丙酮(0-4℃)搅拌提取数小时高速低温离心机以12000r/min离心15min。分出丙酮液,用于雌二醇、雌酮等的检测,沉淀重新冷冻干燥得脱激素羊胎素,测其活性;分离少量的大分子,无菌少量的大分子,无菌低温条件下,取3.450g羊胎素结晶用12000-14000的透析膜,加入无菌水在0-4℃无菌透析,4h换一次水共用3000ml水透析12h,浓缩(温度不超过37℃),冷冻干燥得12000以下3.154g,大分子0.2870g,比例为3.154、0.287-11:1,测其活性;用同样方法准确称取羊胎素1.000g,用8000的透膜透析得分子量8000以下0.8377g,分子量8000以上0.1623g,比例为5.1:1;b、ATP含量的测定:ATP标样,配成0.1mg/ml溶液作工作曲线;c、磷的测定:用钼镝抗法测定磷的含量,取样品0.4949g,配成25ml溶液,取此液0.1ml,依次加入钼镝抗显色剂2.5ml,5滴氢氧化钠溶液,2.4-二硝基酚,定容25ml;d、微量元素测定:Z-8000原子吸收光谱议,采用空气乙炔火焰测定,采用标准曲线法;e、氨基酸含量的测定:人体必须氨基酸之一的色氨酸,在盐酸水解条件下全部被破坏,用日立835-50型氨基酸分析仪测定其含量有困难因此未测定样品中色氨酸分析仪进行分析:分馏柱为4×150mm,树脂为日立2619F,茚三酮显色泵流速为0.675ml/min,柱温为55-57℃,流动相为柠檬酸缓冲液,标准品浓度为5.00mol。
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