本发明涉及酵素领域，具体讲涉及一种解酒护肝酵素及其制备方法。
背景技术：
酵素俗称“酶”，是一种具有催化活性的蛋白质。无论动物还是植物，一切生物的活动都需要酶的参与，人体也不例外，每天所摄取食物的消化吸收、体内各器官的运作、细胞的新陈代谢等都需要酶的活动，可见，酶对人体的健康有重要影响；
现代研究表明，酵素是生命现象中各种生理功能的总表现，疾病与体内代谢酵素的保有量以及特定酵素缺乏有直接关系。酵素治病是通过调节人体代谢平衡，均衡营养，改善体内环境，从而提高机体免疫力，激发人体自愈功能与生命活力来达到防病治病的目的。
酒精中毒俗称醉酒，是指患者一次饮大量酒精(乙醇)后发生的机体机能异常状态，对神经系统和肝脏伤害最严重。医学上将其分为急性中毒和慢性中毒两种，前者可在短时间内给患者带来较大伤害，甚至可以直接或间接导致死亡。后者给患者带来的是累积性伤害，如酒精依赖、精神障碍、酒精性肝损伤及诱发某些癌症(口腔癌、舌癌、食管癌、肝癌)等，可见醉酒对人体的伤害不容小觑。
其中，酒精性肝损伤是指长期大量饮酒或含有酒精的饮料造成的肝脏疾患，20世纪90年代以前酒精性肝病(alcoholic liverdisease)是发达国家常见的肝脏疾病，经常饮酒可导致脂肪肝，可加快脂肪性肝炎、肝纤维化及肝硬化的进程。酒精会导致多器官损伤，其中以肝脏损伤尤为显著，其发病机制复杂，较为公认的是氧化应激可能是酒精性肝损伤的驱动力[6－9]。临床上采用传统抗氧化剂维生素A和维生素E治疗酒精性肝损伤，但疗效不佳。因此酒精性肝损伤的防治已成为医学上的一个重要研究课题。
随着社会的进步和人们生活水平的提高，人们的健康意识日益增强，崇尚天然、养生、安全的健康生活方式逐步成为社会的潮流，而酵素液作为一种天然、养生，无污染的健康饮品，已成为备受瞩目的保健品之一；因此，需要提供一种解酒护肝酵素。
技术实现要素：
为了克服现有技术存在的不足，本发明提供一种解酒护肝酵素及其制备方法，不仅可以补调节人体生命活动，还具有解酒护肝的功效。
本发明通过以下技术方案实现：
一种解酒护肝酵素，其改进之处在于，按重量份计，其包括：葛根80-90、绿茶50-70、甘草50-100、红枣50-150、枸杞70-80、辅助糖60-70、益生菌10-20和酶1-8。
优选的，按重量份计，其包括：葛根83、绿茶53、甘草77、红枣63、枸杞73、辅助糖64、益生菌14和酶3。
优选的，按重量份计，其包括：葛根85、绿茶61、甘草92、红枣86、枸杞76、辅助糖67、益生菌15和酶4。
优选的，所述辅助糖为从绵白糖、红糖、砂糖或蜂蜜中选取一种。
优选的，所述益生菌为从罗伊氏杆菌、保加利亚乳酸杆菌、乳双歧杆菌、嗜热链球菌、凝结牙孢乳酸菌或红曲菌中选取一种或两种。
优选的，所述酶为从蔗糖酶、胶原酶、木聚糖酶、透明质酸酶、溶菌酶或花青素酶中选取一种或两种。
一种如权利要求1所述的解酒护肝酵素的制备方法，该法包括以下步骤：
(1)原料制备：用0.9％食盐水对葛根、绿茶、甘草、红枣和枸杞分别浸泡5-10min，粉碎和混合；
(2)酶解：在混匀的原料中加入酶，控制酶解温度在35-45℃，酶解pH在5.0-6.5，酶解6-9小时得到酶解液；
(3)制备发酵液：于密闭容器中，加入辅助糖和益生菌密封发酵；
(4)制备酵素液：将上述发酵液密封静置。
优选的，所述步骤(3)中，发酵温度为34-41℃，发酵时间为100-150天。
优选的，所述的密封容器为带有水封盖的陶罐、瓷坛或瓦坛。
优选的，所述步骤(4)中，发酵液密封静置之前要对其进行过滤去渣，过滤装置为双端进出料板框式过滤机。
葛根：《本草纲目》载，葛根具清热祛火，生津止渴，解酒醒脾等作用。《千金方》言“治酒醉不醒”。葛根是中国传统医学最具代表性的解酒药物之一。现代科学研究证明葛根富含蛋白质、氨基酸、葛根素和人体所需的铁、钙、硒等微量元素，改善酒精引起的新陈代谢异常，增强和提高机体抗病能力。
绿茶中含有茶多酚、咖啡碱、叶绿素、儿茶素等成分，具有降低血脂、助消化，养肝护肝，且其中的咖啡碱具有利尿的作用，可以使体内的酒精迅速排出体外。
甘草的主要功效为补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药，其中的调和作用可以调和酒精对人体的危害。
红枣可以健脾养胃，补气养血，缓和药性的作用，而且药理研究发现，红枣能促进白细胞的形成，降低血清胆固醇，提高血清蛋白，保护肝脏；
枸杞具有滋阴补肾、美白养颜、养肝明目的功效，枸杞中含有的甜菜碱，可以抑制脂肪在肝细胞中内的沉积，促进肝细胞的再生，具有保护肝脏的作用。
益生菌可以增强肠道抵抗力，维持菌群平衡，加强肠道粘膜屏障，维持酸性环境，从而抑制致病菌的繁殖，抑制部分肠道疾病。
与最接近的现有技术相比，本申请还具有如下有益效果：
(1)本发明提供的一种解酒护肝酵素，不仅可以调节人体机能活动，而且具有解酒护肝的功效，起到综合调理养生的效果。
(2)本发明采用双端进出料板框式过滤机，通过密封板、上液管、下液管、安装座以及过滤板等的配合，提高了啤酒发酵液的过滤效率，在上液管的两端分别设置有出液口和进液口；在下液管的两端分别设置有出液口和进液口，使用一段时间后，可以改变过滤的方向，防止一直使用过滤板一面过滤容易造成堵塞的问题，提高了过滤板的过滤效果。减少了液体走短路的几率，提高了整个设备的利用率，降低了生产成本。
(3)本发明的制备方法简单，无添加剂，安全可靠。
附图说明
图1为本发明所用的双端进出料板框式过滤机的结构示意图；其中，1—密封板，2—上液管，3—下液管，4—出液口，5—进液口，6—安装座，7—过滤板。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明：
实施例1
1)原料准备：
葛根80绿茶50甘草50红枣50枸杞70绵白糖60红曲菌10蔗糖酶1。
2)制备方法如下：
(1)原料制备：用0.9％食盐水对葛根、绿茶、甘草、红枣和枸杞分别浸泡5min，粉碎和混合；
(2)酶解：在混匀的原料中加入蔗糖酶进行酶解，控制酶解温度在35℃，酶解pH在5.0，酶解6小时得到酶解液；
(3)制备发酵液：将所述酶解液置于密闭容器中，加入绵白糖和红曲菌，混合均匀，于34℃下密封发酵100天，然后得到发酵液；
(4)制备酵素液：将上述发酵液沉降、过滤去渣，密封静置3天，得到酵素液。
实施例2
1)原料准备：
葛根83绿茶53甘草77红枣63枸杞73红糖64乳双歧杆菌14胶原酶3。
2)制备方法如下：
(1)原料制备：用0.9％食盐水对葛根、绿茶、甘草、红枣和枸杞分别浸泡7min，粉碎和混合；
(2)酶解：在混匀的原料中加入胶原酶进行酶解，控制酶解温度在40℃，酶解pH在5.4，酶解7.5小时得到酶解液；
(3)制备发酵液：将所述酶解液置于密闭容器中，加入红糖和乳双歧杆菌，混合均匀，于37℃下密封发酵129天，然后得到发酵液；
(4)制备酵素液：将上述发酵液沉降、过滤去渣，密封静置4天，得到酵素液。
实施例3
1)原料准备：
葛根85绿茶61甘草92红枣86枸杞76砂糖67保加利亚乳酸杆菌15透明质酶+木聚糖酶4。
2)制备方法如下：
(1)原料制备：用0.9％食盐水队葛根、绿茶、甘草、红枣和枸杞分别浸泡8min，粉碎和混合；
(2)酶解：在混匀的原料中加入透明质酶和木聚糖酶进行酶解，控制酶解温度在43℃，酶解pH在6.1，酶解9小时得到酶解液；
(3)制备发酵液：将所述酶解液置于密闭容器中，加入砂糖和保加利亚乳酸杆菌，混合均匀，于39℃下密封发酵148天，然后得到发酵液；
(4)制备酵素液：将上述发酵液沉降、过滤去渣，密封静置4天，得到酵素液。
实施例4
1)原料准备：
葛根90绿茶70甘草100红枣150枸杞80蜂蜜70罗伊氏杆菌+保加利亚乳酸杆菌20花青素酶+溶菌酶8。
2)制备方法如下：
(1)原料制备：用0.9％食盐水对葛根、绿茶、甘草、红枣和枸杞分别浸泡10min，粉碎和混合；
(2)酶解：在混匀的原料中加入花青素酶和溶菌酶进行酶解，控制酶解温度在45℃，酶解pH在6.5，酶解11小时得到酶解液；
(3)制备发酵液：将所述酶解液置于密闭容器中，加入蜂蜜、罗伊氏杆菌和保加利亚乳酸杆菌，混合均匀，于41℃下密封发酵150天，然后得到发酵液；
(4)制备酵素液：将上述发酵液沉降、过滤去渣，密封静置5天，得到酵素液。
本发明中，和其它辅助糖原料相比，以蜂蜜作为辅助糖制备的酵素不容易有酒的味道，制得的酵素口感更醇正，且能更好的抑制发酵过程中有害霉菌的产生。
本发明所述的密封容器为带有水封盖的陶罐、瓷坛或瓦坛；为防止漏气，水封盖的密封水要保持充足。
本发明过滤步骤使用的过滤机为双端进出料板框式过滤机，如图1，所述双端进出料板框式过滤机包括密封板1、上液管2、下液管3、安装座6以及过滤板7，所述的密封板1为两块且平行相对放置；所述的上液管2和下液管3均垂直贯穿两块密封板1，且分别靠近密封板1的顶部和底部；在上液管2的两端分别设置有出液口4和进液口5；在下液管3的两端分别设置有出液口4和进液口5；所述的安装座6为多个，且间隔安装在上液管2和下液管3外表面，所述的过滤板7为多块，且两端分别安装在液管2外表面的安装座6和下液管3外表面的安装座6上；每两块过滤板7之间形成过滤通道8，该过滤通道8与上液管2或下液管3交错连通。本发明所采用的双端进出料板框式过滤机，通过密封板1、上液管2、下液管3、安装座6以及过滤板7等的配合，提高发酵液的过滤效率，在上液管2的两端分别设置有出液口4和进液口5；在下液管3的两端分别设置有出液口4和进液口5，使用一段时间后，可以改变过滤的方向，防止一直使用过滤板7一面过滤容易造成堵塞的问题，提高了过滤板7的过滤效果。减少了液体走短路的几率，提高了整个设备的利用率，降低了生产成本。使用时，可以上液管2的进液口5打开出液口4关闭，下液管3的出液口4打开进液口5关闭，待滤液从进液口5进入，经过过滤板7的过滤进入下液管3，然后从出液口4流出进入下一道工序。使用一段时间后，可以调转方向，下液管3的进液口5打开出液口4关闭，上液管2的出液口4打开进液口5关闭，待滤液从进液口5进入，经过过滤板7的过滤进入上液管2，然后从出液口4流出进入下一道工序。
所述的过滤板7可以采用细孔网过滤，但是这种网制作难度大，而且一旦堵塞难以清理，因此作为优选的方式是所述的过滤板7为由透水纸板制作而成，不仅过滤效果好，而且取材方便，便于更换。
表1：实施例1-4酵素原料组成
本发明提供的酵素不仅可以调节人体机能活动，例如调理内分泌、调节新陈代谢、维持体内正常环境、平衡身体酸碱度的作用等，还具有解酒养肝的功效。
下面以小鼠为实验对象，进一步说明本发明实施例1-4提供的解酒护肝酵素对肝脏的保护功效。
1材料与方法
1材料与试剂
(1)SPF级昆明小鼠60只，雄性，由三峡大学实验动物中心提供[湖北省实验动物质量合格证：SCXK(鄂2011－0061]；
(2)实施例1-4所述解酒护肝酵素；
(3)丙二醛(MDA)、三酰甘油(TG)、还原性谷胱甘肽(GSH)试剂盒、乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)标准品及组织测定试剂盒购自南京建成生物工程公司；
(4)乙醇及其他主要试剂均为国产分析纯，由三峡大学医学院肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室提供。
1.2
仪器与设备MIKRO120高速离心机(德国Zentrifogen公司)；DL－600S型三用恒温水箱(上海精宏实验设备有限公司)；组织切片机HM340E(德国Microm公司)；CS－Ⅵ型摊片烤片机(孝感市宏业医用仪器有限公司)；包埋机EG1150H，多功能显微镜NPS60(德国Leica公司)。
1.3方法
1.3.1
动物模型的建立及分组：将小鼠分为6组，组1、组2、组3、组4、模型组和空白对照组，每组12只。将小鼠禁食12h后，组1-4分别灌胃本发明实施例1-4所述的解酒护肝酵素10ml，模型组和空白对照组分别灌胃等量的蒸馏水。30min后，组1-4和模型组灌胃42％的酒精8ml，空白对照组灌胃等量的蒸馏水，连续灌胃60d。实验期间每2天称1次体质量，根据体质量变化调整灌胃剂量。
1.3.2样品处理
实验结束后将小鼠禁食12h，眼球取血，离心后取血清，待测其生化指标天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性。将小鼠颈椎脱臼处死后，取出小鼠肝脏：(1)肝脏称质量计算脏体系数；(2)取小块肝组织匀浆，进行MDA、TG、GSH、ADH及ALDH水平测定；(3)取部分肝组织进行病理组织学检查，取出动物肝脏观察形态学变化，立即用10％甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，6μm切片，普通苏木素－伊红(HE)染色，光镜下观察，以肝细胞变性及坏死作为观察指标。
1.4统计学处理
采用SPSS18.0软件进行数据处理，计量资料以x±s表示，组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用SNK检验，以P＜0.0为差异有统计学意义。
2结果
模型构建情况：与空白对照组比较、模型组血清AST、ALT，肝组织MDA、TG、GSH、ADH，ALDH等指标差异有统计学意义，说明酒精性肝损伤小鼠模型构建成功，见表2～3。
表2：本发明实施例1-4所述酵素酵素对各组小鼠血清AST、ALT的活性及肝指数的影响
a：P＜0.05，b：P＜0.01，与模型组比较。
上述实验数据表明：各组小鼠血清AST、ALT的活性及肝指数变化中，组3和组4的AST、ALT的活性明显低于模型组(P＜0.01)，组1-4的肝指数低于模型组(P＜0.05)。
表3：解酒护肝酵素对各组小鼠ADH、ALDH活性及TG、GSH、MDA水平的影响
a：P＜0.05，b：P＜0.01，与模型组比较。
上述实验数据表明：各组小鼠肝组织ADH、ALDH的活性及TG、GSH、MDA水平变化各组肝组织的ADH、ALDH活性及GSH水平明显高于模型组(P＜0.05)，TG、MDA水平低于模型组(P＜0.05)。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换，这些未脱离本发明精神和范围的任何修改或者等同替换，均在申请待批的本发明的权利要求保护范围之内。