本发明涉及一种微生物发酵饲料，特别是一种以海芋叶粉为主要原料的微生物发酵饲料及其制备方法。
背景技术：
：我国粮食不足，饲料原料紧缺，发掘新的饲粮资源是一项紧迫的任务。据李恒(1979)和bradbury等(1988)的资料，海芋(alocasiamacrorrhiza)为天南星科海芋属大型常绿草本植物，广泛野生于热带、亚热带地区和国家的林区、杂草灌木丛中、水沟边或村庄附近，在广东和华南各地随处可见。其叶片亚革质草绿色、箭状卵形，长50~90cm，宽40~90cm。据作者初步观察，叶片鲜重50-150g，海芋的叶片繁茂，叶子再生特快，经割刈全株叶后不足两个月，植株就能再生出繁茂而浓绿的叶子。海芋鲜叶具辛辣味，经60-70℃烘干制成叶粉仍未能将其脱除。海芋叶粉干物质含代谢能4.92mj/kg，粗蛋白质244.1g/kg，粗纤维140.4g/kg，赖氨酸11.9g/kg，蛋氨酸4.4g/kg。温刘发等利用丙酮等有机溶剂能有效脱除海芋叶粉的辛辣味物质。丙酮处理的海芋叶粉的概略营养成分、代谢能和氨基酸组成与原海芋叶粉无明显差异。饲养肉用仔鸡的试验结果表明，以具辛辣味的海芋叶粉于40和60g/kg的水平添加于饲粮中，均降低鸡对饲料的采食量，极显著地降低鸡的增重(p>0.01)，但各组鸡的耗料增重比无明显差异;添加经丙酮处理而无辛辣味的海芋叶粉于40g/kg水平，肉鸡的采食量、增重和耗料增重比与对照组的差异均不显著(p>0.05)。这些试验结果表明，海芋叶粉的辛辣味影响了肉鸡对它的直接利用，因此适当方法处理脱除了辛辣味物质的海芋叶粉可作为畜禽饲料，具有较好的饲用价值。但还没有报道通过发酵的方法处理脱除了辛辣味物质的海芋叶粉可作为畜禽饲料的报道。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种海芋叶粉发酵饲料的制备方法，经过微生物固体发酵后得到的海芋叶粉发酵饲料，完全去除了海芋叶粉中的辛辣味，氰化物以及蛋白酶抑制因子，并且利用微生物的发酵作用，增加海芋叶粉中有益微生物的种类和数量，增加其真蛋白含量，并增加了其复合酶的含量。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种海芋叶粉发酵饲料的制备方法，其特征在于海芋叶粉发酵饲料的原料按重量份为：湿海芋叶粉850-950份，麦麸20-60份，硫酸铵2-5份，磷酸氢钙3-6份，硫酸镁0.1-0.2份，白地霉3-5份，米根霉3-5份，热带假丝酵母2-4份，植物乳杆菌5-10份等组成。其中，所述的一种海芋叶粉发酵饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：⑴、向混料罐中依次加入850-950份粉碎过2毫米筛的湿海芋叶粉，加入麦麸20-60份，硫酸铵2-5份，磷酸氢钙3-6份，硫酸镁0.1-0.2份，白地霉3-5份，米根霉3-5份，热带假丝酵母2-4份，植物乳杆菌5-10份，搅拌均匀。⑵、将搅拌均匀的发酵物料平铺在托盘或发酵槽内，物料厚度为8-12cm，在湿度为55%-75%，温度为25-32℃的发酵室中发酵48-72h，待发酵物料布满白色菌丝，检测其氰化物，蛋白酶抑制因子完全降解，且辛辣味基本消失，即可以结束第一阶段发酵。⑶、将已经布满白色菌丝的物料从托盘或发酵槽中倒入发酵池，30-35℃厌氧发酵36-48h，基本上闻不到辛辣味，闻起来有酸香味，ph小于4.5，测得其活菌总量大于10亿/克，酵母菌含量大于2亿/克，即可以结束发酵。⑷、将发酵物低温干燥至含水量小于13%，测得其真蛋白不低于26%，粗蛋白不低于30%，检测其纤维素酶活力大于400iu/克，酸性蛋白酶活力大于200iu/克，淀粉酶活力大于100iu/克，即可粉碎包装。上述步骤1中白地霉菌种、热带假丝酵母菌菌种、植物乳杆菌菌种、米根霉菌菌种、可采用现有技术，本发明提供以下方法：①植物乳杆菌液体菌种的制备取出菌种保藏管，用mrs固体培养基划平板进行复苏，37度厌氧培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升mrs培养基中，在培养箱中37度厌氧培养24小时。种子采用5%的接种量，接种后置100l乳酸菌种子培养基厌氧培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过30亿cfu/毫升，即可作为种子接种；mrs培养基：蛋白胨10g/l，酵母提取物5g/l，牛肉膏10g/l，葡萄糖20g/l，醋酸钠5g/l，柠檬酸二铵2g/l，吐温801ml/l，硫酸镁0.6g/l，硫酸锰0.05g/l，磷酸氢二钾2g/l，琼脂20g/l，碳酸钙20g/l，固体培养基中加入琼脂2%。；乳酸菌种子培养基：糖蜜5%，蛋白胨1.0%，牛肉膏0.75%，氯化钠0.1%，硫酸锰0.001%，硫酸镁0.02%，醋酸钠0.05%，碳酸钙5%，ph6.0。②热带假丝酵母菌液体菌种的制备取出菌种保藏管，用pda固体培养基划平板进行复苏，30度培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升pda培养基中，在培养箱中30度震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种5l酵母菌种子培养基置大三角瓶震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过5亿/毫升，即可作为种子接种；pda培养基：土豆200g，蔗糖20g，固体培养基中加入琼脂2%；酵母菌种子培养基：糖蜜30g/l，酵母膏3g/l，蛋白胨5g/l，硫酸铵5g/l，硫酸镁0.5g/l。③米根霉液体菌种的制备取出菌种保藏管，用pda固体培养基划平板进行复苏，30度培养120小时。在平板下挑取单个菌落接种茄子瓶中pda固体培养基中，30度培养120小时。用生理盐水将其菌落洗下，搅匀，检测其孢子含量大于1亿/毫升，即可作为液体菌种接种；pda固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，琼脂20g。④、白地霉液体菌种的制备取出菌种保藏管，用pda固体培养基划平板进行复苏，30度培养120小时。在平板下挑取单个菌落接种茄子瓶中pda固体培养基中，30度培养120小时。用生理盐水将其菌落洗下，搅匀，检测其孢子含量大于1亿/毫升，即可作为液体菌种接种；pda固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，琼脂20g。通过本发明方法取得的产品，经检验后主要技术指标为：1、完全去除了海芋叶粉中的辛辣味，氰化物以及蛋白酶抑制因子，有效活菌总数超过10亿/克，2、产品真蛋白含量不低于26%，粗蛋白不低于30%；3、测其纤维素酶活力大于400iu/克，酸性蛋白酶活力大于200iu/克，淀粉酶活力大于100iu/克。即采用上述技术方案的有益效果：1、本发明将不能直接作为饲料原料的海芋叶粉经过微生物固体发酵后得到的海芋叶粉发酵饲料，完全去除了海芋叶粉中的辛辣味，氰化物以及蛋白酶抑制因子，并且利用微生物的发酵作用，增加海芋叶粉中有益微生物的种类和数量，增加其真蛋白含量，并增加了其复合酶的含量。2、通过发酵对于海芋叶粉的生物利用率、适口性、促生长方面有明显提升，增加畜禽抗病能力，提高生产力，具体表现在：用不能直接利用的海芋叶粉结过发酵后，可以替代部分蛋白饲料以降低饲料总成本，可减少国家蛋白原料的进口，提高养殖的经济效益。海芋叶粉发酵饲料产品中含有丰富的微生物代谢产物，如各种有机酸、维生素、复合酶等，可有益于养殖动物消化机能的改善，提高饲料的利用率，增加养殖动物的生产性能；海芋叶粉发酵饲料产品中的各种有益微生物可有效改善养殖动物消化系统内的微生物组成，抑制消化道内致病菌的活动，提高养殖动物的抗应激能力和抵抗力，减少养殖动物各类消化道疾病的发病率，减少各类抗生素在养殖动物中的使用，从而达到提高食品安全性能的效果。下面结合试验说明本发明的海芋叶粉发酵饲料在育肥猪的养殖效果。试验地点：广东省清远市清新县某养猪场试验方法：选用长白×大约×本地猪杂交所产生的三元杂交仔猪60头，随机分成五个试验组和一个对照组，每组10头，各组性别均等，组间体重基本一致。对照组，使用自配全价料(2800元/吨)，五个试验组分别用海芋叶粉发酵饲料(不高于1500元/吨)替代全价料的5%、10%、15%、20%、25%，其它饮水饲喂条件相同。试验结果：试验90天后，结果如表1。从结果可以看出发酵饲料添加量不超过全价料的20%时，对育肥猪都有促生长作用，可以起到提高饲料报酬，节药成本，还可起到改善肉质等作用。我们知道猪的嗅觉灵敏比狗都要灵敏，如果海芋叶粉中的辛辣味没有除净，猪会拒食的，但经过发酵后，添加量达到25%时，都没有影响猪的采食量。表1海芋叶粉发酵饲料在育肥猪的养殖结果。项目\组别对照组试验组1试验组2试验组3试验组4试验组5平均始重（kg）36.435.535.836.235.535.6平均末重（kg）114115.6115.9116.8115.8113.4增重（kg）77.680.180.180.680.377.8日均增重0.8320.890.890.8960.8920.864料肉比3.10:13.08:12.97:13.02:13.05:13.11:1与对照组增重率03.22%3.22%3.87%3.47%0.25%具体实施方式本发明实质性特点可从下述实施例中得以体现，但这些实施例仅作为说明，而不是对本发明进行限制。实施例1制备该海芋叶粉发酵饲料的原料按重量份为：湿海芋叶粉930份，麦麸40份，硫酸铵4份，磷酸氢钙4份，硫酸镁0.2份，白地霉4份，米根霉4份，热带假丝酵母3份，植物乳杆菌8份等组成。该海芋叶粉发酵饲料的制备方法，包括如下步骤：⑴向混料罐中依次加入930份粉碎过2毫米筛的湿海芋叶粉，加入麦麸40份，硫酸铵4份，磷酸氢钙4份，硫酸镁0.2份，白地霉4份，米根霉4份，热带假丝酵母3份，植物乳杆菌8份，搅拌均匀；⑵将搅拌均匀的发酵物料平铺在托盘或发酵槽内，物料厚度为10cm，在湿度为65%，温度为30℃的发酵室中发酵60h，发酵物料布满白色菌丝，检测其氰化物，蛋白酶抑制因子完全降解，且辛辣味基本消失，即结束第一阶段发酵；⑶将已经布满白色菌丝的物料从托盘或发酵槽中倒入发酵池，33℃厌氧发酵40h，基本上闻不到辛辣味，闻起来有酸香味，ph小于4.5，测得其活菌总量为12亿/克，酵母菌含量为3亿/克，即结束发酵；⑷将发酵物低温干燥至含水量小于13%，测得其真蛋白为28.6%，粗蛋白为31.1%，检测其纤维素酶活力为424iu/克，酸性蛋白酶活力为220iu/克，淀粉酶活力为105iu/克，粉碎包装。当前第1页12