一种乳酸菌发酵型草鱼湿软饲料的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种乳酸菌发酵型草鱼湿软饲料的制备方法，本发明制备方法操作简便，易于推广普及，所需人力、物力少，能源消耗低，原材料广泛，生产投资少、成本低，适用范围广，不仅可以促进草鱼生长发育，提高草鱼的成活率，降低死淘率，提高饲料效率，节省投入成本，实现草鱼的高产、高效养殖，而且可以实现鱼产品及其下脚料的合理利用，减轻环境污染，减少饲料中抗生素的使用，保障鱼肉产品的绿色安全。
【专利说明】
一种乳酸菌发酵型草鱼湿软饲料的制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及水产饲料制备领域，具体涉及一种乳酸菌发酵型草鱼湿软饲料的制备 方法。
【背景技术】
[0002] 鱼产品及其下脚料中含有丰富的蛋白质，将其开发生产为水产饲料对于减轻环境 污染、实现废弃物的综合利用具有重要意义。原料鱼经水解得到的液体蛋白，其营养成分与 优质鱼粉营养成分相近，且其含有的赖氨酸、蛋氨酸的含量均高于鱼粉，所含的必需氨基酸 种类齐全、比例适当，维生素和微量元素的含量也十分丰富。相对于鱼粉而言，液体鱼蛋白 不仅品种多、功能多、无毒副作用、香味浓郁，而且其加工制作简单，生产成本低，所需人力、 物力少，原料广泛，适用范围广。
[0003] 谷胱甘肽(glutathione，GSH)是由γ-谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸组成的生物活性 肽，分为还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽。通常所称谷胱甘肽是指还原型谷胱甘肽，是机 体内的重要活性物质，具有清除自由基、解毒、促进铁质吸收及维持红细胞膜的完整性、维 持DNA的生物合成、细胞的正常生长及细胞免疫等多种生理功能。目前，谷胱甘肽在畜禽生 产中研究较多，已证实谷胱甘肽可以提高猪卵母细胞成熟率及显微受精胚的卵裂率，提高 泌乳动物的泌乳性能，解除黄曲霉毒素对雏鸡的毒性，解除鱼体微囊藻毒素引起的中毒症 等。迄今为止，有关谷胱甘肽在水产动物饲料方面应用极少，而关于谷胱甘肽在草鱼饲料中 的应用则更为罕见。
[0004] 草鱼(Ctenophary ngodon idella)是中国重要的淡水养殖经济鱼类，营养丰富， 经济价值高。年产量约占中国淡水鱼总产量的30%，年产值500亿元以上。草鱼还作为出口 品种，畅销罗马尼亚、香港、澳门等10多个国家和地区。然而，草鱼是低等脊椎动物，其免疫 系统功能低下，疾病极易暴发流行，从鱼苗养到成鱼，成活率不到30%。由于谷胱甘肽具有 抗氧化作用和整合解毒等作用，还能够帮助保持正常的免疫系统的功能，因此，可以在草鱼 饲料中添加适量的谷胱甘肽以增强其抗病力，提高其成活率，实现草鱼的高产、多产。
【发明内容】
[0005] 为了实现鱼产品及其下脚料的合理利用和草鱼的高产、高效养殖，本发明提供了 一种新的饲料加工制备方法，本发明方法是通过乳酸菌发酵将鱼废弃物转化为液体蛋白， 再经一系列步骤最终制备成能够提高免疫机能且便于摄食的草鱼湿软饲料，本发明的技术 方案如下：
[0006] -种乳酸菌发酵型草鱼湿软饲料的制备方法，方法如下：
[0007] (1)按质量比1:1的比例取食品级葡萄糖与食品级蔗糖各一份，加水配成质量浓度 为2%的糖溶液，再按1%的接种量将乳酸菌接种于糖溶液中，置于30°C的条件下培养活化 24小时，得到乳酸菌液；
[0008] (2)将鱼废弃物绞碎，按其重量15%的比例加入糖蜜或甘蔗制糖的下脚料并搅拌 均匀，得到混合料；
[0009] (3)将步骤（1)的乳酸菌液洒入步骤(2)的混合料中并搅拌均匀，乳酸菌液的用量 为混合料总重量的2% ;
[0010] (4)将步骤(3)的混合料装入密闭容器内进行厌氧发酵，发酵时间约30天；
[0011] (5)将厌氧发酵得到的产品与其重量20-40%的辅料混合并搅拌均匀，其中辅料为 100目以上的高粱粉、血粉、膨化豆柏粉、糠麸粉、干草粉的混合料；
[0012] (6)将步骤(5)的混合料边搅拌边加热至50-60 °C，在此温度下保温继续搅拌20-30 分钟；
[0013] (7)将还原型谷胱甘肽加入到步骤(6)的混合料中并使其终浓度为350mg/kg;
[0014] (8)取步骤(7)的混合料总重量2.5 %的琼脂粉加少量水稀释后加热至95°C熔化， 将熔化后的琼脂加入到混合料中搅拌均匀，然后趁热灌入模具中，待其冷却，即成湿软饲 料。
[0015] 本发明的有益效果：
[0016] 1、本发明制备方法操作简便，易于推广普及，所需人力、物力少，能源消耗低，原材 料广泛，生产投资少、成本低，适用范围广，不仅可以促进草鱼生长发育，提高草鱼的成活 率，降低死淘率，提高饲料效率，节省投入成本，实现草鱼的高产、高效养殖，而且可以实现 鱼产品及其下脚料的合理利用，减轻环境污染，减少饲料中抗生素的使用，保障鱼肉产品的 绿色安全。
[0017] 2、本发明所制得的湿软饲料比传统的颗粒饲料适口性更好，消化率更高，诱食性 更佳，比颗粒饲料更经济、环保。
[0018] 3、乳酸菌发酵的原理是在密闭缺氧的环境下乳酸菌大量繁殖并产生大量乳酸，降 低了鱼废弃物的PH值，抑制了腐败菌的生长，同时由于乳酸的作用使鱼废弃物液化自溶，蛋 白质分解，氨基酸、维生素和微量元素溶出，增加了饲料的营养含量，提高了消化率。
[0019] 4、还原型谷胱甘肽(GSH)能够清除自由基、过氧化物、重金属、微囊藻毒素及黄曲 霉毒素等毒物，促进Fe、无机Se和Ca的吸收，保护胃肠道黏膜上皮，防止因炎症、局部缺血、 有毒物质、氧化物质等对肠黏膜造成的损伤，其在免疫系统抗感染和炎症反应中发挥着重 要作用，并参与白细胞三烯、MIF、IL-2等细胞因子的调节，促进淋巴细胞和单核细胞增殖， 从而影响机体的生理机能。
【具体实施方式】
[0020] 下面将结合本发明实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，凡是其 他在不脱离本发明核心的情况下做出的简单的变形或修改均落入本发明的保护范围。
[0021 ] -种乳酸菌发酵型草鱼湿软饲料的制备方法，方法如下：
[0022] (1)按质量比1:1的比例取食品级葡萄糖与食品级蔗糖各一份，加水配成质量浓度 为2%的糖溶液，再按1%的接种量将乳酸菌接种于糖溶液中，置于30°C的条件下培养活化 24小时，得到乳酸菌液；
[0023 ] (2)将鱼废弃物绞碎，按其重量15 %的比例加入糖蜜并搅拌均匀，得到混合料；
[0024] (3)将步骤（1)的乳酸菌液洒入步骤(2)的混合料中并搅拌均匀，乳酸菌液的用量 为混合料总重量的2% ;
[0025] (4)将步骤(3)的混合料装入密闭容器内进行厌氧发酵，发酵时间约30天；
[0026] (5)将厌氧发酵得到的产品与其重量30 %的辅料混合并搅拌均匀，其中辅料为100 目以上的高粱粉、血粉、膨化豆柏粉、糠麸粉、干草粉的混合料；
[0027] (6)将步骤(5)的混合料边搅拌边加热至50-60°C，在此温度下保温继续搅拌30分 钟；
[0028] (7)将还原型谷胱甘肽加入到步骤(6)的混合料中并使其终浓度为350mg/kg;
[0029] (8)取步骤(7)的混合料总重量2.5 %的琼脂粉加少量水稀释后加热至95°C熔化， 将熔化后的琼脂加入到混合料中搅拌均匀，然后趁热灌入模具中，待其冷却，即成湿软饲 料。
[0030] 下面将结合试验实例进一步说明本发明的积极作用：
[0031] (1)试验鱼:平均体重约8.5g的草鱼幼鱼。
[0032] (2)试验方法:将300尾草鱼幼鱼随机分成对照组与试验组两组，对照组与试验组 各设3个重复，每个重复50尾，饲养在300L的循环流水过滤水族箱中。对照组喂普通饲料，试 验组喂本发明所制饲料，试验期间定量投喂，每日分别于8:30、11:30和16:30分3次投喂，日 投喂量为体质量的4%。每天观察鱼只健康状况，记录死亡情况，每2周称重1次，试验期为8 周。水温18_30°C，pH 7.5,溶氧高于5mg/L，氨氮低于0.02mg/L。
[0033] (3)试验数据采集:试验结束时，统计每箱草鱼的存活数量和称量每箱草鱼的总体 质量，计算草鱼的特定生长率、存活率、饲料效率。每个重复随机取10尾草鱼，以无菌的IOmL 注射器及5号针头自尾动脉取血，分为2份，1份以肝素抗凝，制备抗凝血供测定白细胞数目； 1份血液置于离心管中，经4000r/min离心5min，取上清血浆测定胰岛素样生长因子-UIGF-1)。取抽过血的5尾草鱼，解剖，取肝胰脏称重，测定肝胰指数。
[0034] (4)试验结果分析：
[0035]表1:饲喂普通饲料与本发明所制饲料对草鱼特定生长率、存活率、饲料效率的影 响
[0037] 注:表中同一栏内，右上角标有不同英文字母的数据之间具有显著差异(P〈0.05)。
[0038] 特定生长率（％ ) = ( In末体体重-In初体体重)/饲养天数X 100;
[0039] 存活率（％ )=(末尾数-初始尾数)/初始尾数X 100;
[0040] 饲料效率（％ )=(末体体重-初体体重)/投饲总质量X 100。
[0041] 由表1可见，饲喂本发明所制饲料比普通饲料的草鱼在特定生长率、存活率、饲料 效率方面均有显著提高，说明本发明所制饲料可以促进草鱼的生长发育，具有显而易见的 积极作用。
[0042] 表2:饲喂普通饲料与本发明所制饲料的草鱼的肝胰指数、胰岛素样生长因子-1含 量和白细胞计数
[0044] 注:表中同一栏内，右上角标有不同英文字母的数据之间具有显著差异(P〈0.05)。
[0045] 由表2可见，本发明所制饲料由于添加了350mg · kg-1的还原型谷胱甘肽(GSH)，因 而饲喂出的草鱼其肝胰指数、胰岛素样生长因子-1及白细胞计数均比对照组显著提高。
[0046] 鱼类的肝胰指数是对长期和短期营养方式都很敏感的指标，肝脏的生长和发育往 往受到饲料成分的影响。与对照组相比，试验组草鱼肝胰指数有不同程度升高，这可能是 GSH促进了肝脏细胞DNA的合成，进而表现在草鱼肝胰指数有所增加。大量研究证实，血循环 中的胰岛素样生长因子-I(IGF-I)大部分由肝脏合成分泌。而本试验中摄食本发明所制饲 料的试验组草鱼IGF-I活性明显提高，表明GSH促进了肝脏合成和分泌IGF-I的能力，进一步 增强了肝脏细胞DNA合成能力，最终提高了肝胰指数。
[0047]血循环中的IGF-I生物作用仅受生长激素的调节，而生长激素的促生长作用是通 过IGF-I介导的，本试验中对照组草鱼IGF-I水平的提高说明在草鱼饲料中添加 GSH能够调 节草鱼生长激素水平，并最终达到促进草鱼生长的作用。这也恰与试验中草鱼特定生长率、 饲料效率显著提高相对应。
[0048]鱼类的嗜中性白细胞和单核细胞已经被证实具有很强的吞噬能力，相对于特异性 免疫机能而言，这种能力对于比较低等的水生动物更为重要。白细胞的吞噬功能是动物非 特异性免疫的重要组成部分。白细胞的溶酶体中含有溶菌酶、蛋白水解酶、髓过氧化酶等， 这些酶对大多数微生物是致死性的。当白细胞受适当的刺激后，可产生前列腺素、凝血恶烷 和三烯酸。因此，测定动物的白细胞数目在一定程度上能反映动物非特异性免疫能力。鱼类 血液中白细胞数目可能因机体接触抗原性物质或者受到环境因子的刺激而上升。本试验结 果表明，在草鱼饲料中添加 GSH能够增加草鱼血液中白细胞数目，这恰与试验中草鱼存活率 提高相对应，说明GSH通过刺激草鱼血液白细胞的产生从而进一步增强了草鱼的非特异性 防御功能，进而达到增强抗病力的作用。
【主权项】
1. 一种乳酸菌发酵型草鱼湿软饲料的制备方法，其特征在于，方法如下： (1) 按质量比1:1的比例取食品级葡萄糖与食品级蔗糖各一份，加水配成质量浓度为2% 的糖溶液，再按1 %的接种量将乳酸菌接种于糖溶液中，置于30°C的条件下培养活化24小 时，得到乳酸菌液； (2) 将鱼废弃物绞碎，按其重量15%的比例加入糖蜜或甘蔗制糖的下脚料并搅拌均匀， 得到混合料； (3) 将步骤（1)的乳酸菌液洒入步骤(2)的混合料中并搅拌均匀，乳酸菌液的用量为混 合料总重量的2%; (4) 将步骤(3)的混合料装入密闭容器内进行厌氧发酵，发酵时间约30天； (5 )将厌氧发酵得到的产品与其重量20-40 %的辅料混合并搅拌均匀，其中辅料为100 目以上的高粱粉、血粉、膨化豆柏粉、糠麸粉、干草粉的混合料； (6) 将步骤（5)的混合料边搅拌边加热至50-60°C，在此温度下保温继续搅拌20-30分 钟； (7) 将还原型谷胱甘肽加入到步骤(6)的混合料中并使其终浓度为350 mg/ kg; (8 )取步骤(7 )的混合料总重量2.5%的琼脂粉加少量水稀释后加热至95 °C熔化，将熔化 后的琼脂加入到混合料中搅拌均匀，然后趁热灌入模具中，待其冷却，即成湿软饲料。
【文档编号】A23K10/18GK105981995SQ201610015716
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2016年1月7日
【发明人】武为照
【申请人】凤阳县兴科农业生态发展有限公司