肽的延长释放的制作方法

专利名称：肽的延长释放的制作方法
本申请是于1994年4月7日向中国专利局提交的申请号为94104491.2的申请的分案申请。
本发明涉及治疗糖尿病的组合物和方法。更具体地说，本发明涉及延长施用类高血糖素肽1(GLP-1)及其衍生物的组合物。这些组合物用于治疗与非胰岛素相关的糖尿病(NIDDM)。
已知GLP-1的氨基酸顺序是His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)在Lopez，L.C.等人P.N.A.S.，USA805485-5489(1983)；Bell，G.I.等人，Nature302716-718(1983)；Heinrich，G.等人，Endocrinol.1152176-2181(1984)和Ghiglione，M.等人，Diabetolgia27599-600(1984)中都已公开GLP-1。
在胰腺和肠中处理时，GLP-1转化成具有GLP-1的氨基酸7-37的31个氨基酸肽，在下文将这种肽称为GLP-1(7-37)。
曾指出这种肽具有促胰岛活性，即它能刺激或引起刺激激素胰岛素的合成或表达。因为这种促胰岛活性，GLP-1(7-37)还能称为促胰岛激素(insulinotropin)。
GLP-1(7-37)具有以下氨基酸顺序
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)。
GLP-1(7-37)、其某些衍生物，以及其在治疗哺乳动物的糖尿病的用途已在美国专利号5118666(′666专利)和5120712(′712专利)中公开，这些专利引入本文作参考。在′666和′712专利中公开的GLP-1(7-37)衍生物包括多肽，它含有或缺少在自然存在的顺序中所不存在的多种氨基酸中的一种。在′666和′712专利中公开的GLP-1(7-37)其他衍生物包括某些C-末端盐、酯和酰胺，其盐和酯定义为OM，其中M是药物学上可接受的阳离子或低级(C1-C6)支链或直链的烷基，酰胺定义为-NR2R3，其中R2和R3是相同的或不相同的，并选自氢和低级(C1-C6)支链或直链烷基。
某些其他的多肽，或者称为平截的GLP-1或平截的促胰岛激素，它具有促胰岛活性，并且它们的衍生物已公开于PCT/US 89/01121(WO 90/11296)中。这些多肽，在这里称为GLP-1(7-36)、GLP-1(7-35)和GLP-1(7-34)，它们分别具有下述氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序NO3)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)；和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；在PCT/US 89/01121中公开的多肽衍生物包括具有不连贯氨基酸取代的多肽，或另外氨基酸以提高与载体蛋白质的偶合，或提高它们的促胰岛作用。在PCT/US 89/01121中公开的促胰岛激素的其他的衍生物包括某些C-末端盐、酯和酰胺，其中盐和酯定义为OM，而M是在药物学上可接受的阳离子或低级的支链或直链烷基，酰胺定义为-NR2R3，其中R2和R3是相同的或不相同的，并选自氢和低级支链或直链烷基。


图1表明延长时间注入(7小时)4ng/kg/分促胰岛激素对患NIDDM病人的血浆葡萄糖含量的影响。
图2表明短时间注入(60分钟)10ng/kg/分促胰岛激素对患NIDDM病人的血浆葡萄糖含量的影响。
图3表明延长时间注入(7小时)2ng/kg/分和4ng//kg/分促胰岛激素对患NIDDM病人的血浆葡萄糖含量的影响。
图4以不同的含水悬浮液(AS)在皮下施药单次剂量0.5mg/0.5ml后，鼠中促胰岛激素的平均(n＝3)血浆浓度。
图5以不同的含水悬浮液(AS)在皮下施药单次剂量0.5mg/0.5ml后，鼠中促胰岛激素的平均(n＝3)血浆浓度。
图6以不同的含水悬浮液(AS)在皮下施药单次剂量0.5mg/0.5ml后，鼠中促胰岛激素的平均(n＝3)血浆浓度。
图7以不同的含水悬浮液(AS)在皮下施药单次剂量0.5mg/0.5ml后，鼠中促胰岛激素的平均(n＝3)血浆浓度。
图8以不同的含水悬浮液(AS)在皮下施药单次剂量0.5mg/0.13ml后，鼠中促胰岛激素的平均(n＝3)血浆浓度。
图9以不同的含水悬浮液(AS)在皮下施药单次剂量0.5mg/0.13ml后，鼠中促胰岛激素的平均(n＝3)血浆浓度。
图10表明促胰岛激素锌沉淀的药物动力学研究。
在一个实施方案中，本发明的目的在于需要治疗哺乳动物中与非胰岛素相关的糖尿病时治疗这种病的方法，其中包括在长时间内重复给药一种每次用药后具有延长时间作用的化合物，所述的延长时间作用对于达到这种哺乳动物中持续糖血控制是必要的，所述的化合物选自下述化合物(a)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly；(顺序ID NO2)(b)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-GLy，(C)Lys-GLy-Arg；(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自如下的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO.6)在哺乳动物中处理时，这种衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包括下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH其中R是选自如下的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly；(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg；(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly；(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys；(顺序ID NO5)以及(e)从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述的衍生物选自如下(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺。
优选的所述给药方法是皮下给药。
另外的优选的给药方法是肌内用药。
另外的优选的给药方法是经皮肤的给药。
另外特别优选的给药方法是用注入泵给药。
另外的优选的给药方法是通过口吸入给药。
另外的优选的给药方法是通过鼻吸入给药。
另外的优选的给药方法是胃肠给药。
在另外的实施方案中，本发明的目的在于包括下述化合物的物质组合物(i)一种选自以下的化合物(a)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly；(顺序ID NO2)(b)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自以下(A)Lys，(B)Lys-GLy，(C)Lys-GLy-Arg；(c)含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自如下的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包括下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH其中R是选自下述的一种氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及从所述(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述的药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺。
(ii)能够延长所述化合物的作用以便达到持续糖血控制的聚合物。
特别优选的组合物是其中所述的聚合物是低分子量聚合物。
另外特别优选的组合物是其中所述的聚合物选自聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、选自纤维素、纤维素衍生物、脱乙酰壳多糖、阿拉伯胶、刺梧桐树脂、瓜耳树胶、Xanthan树脂、黄蓍胶、藻酸、角叉胶、琼脂糖和furce-llarans的多糖、葡聚糖、淀粉、淀粉衍生物、透明质酸、聚酯、聚酰胺、聚酸酐和聚正酯，而特别优选的聚合物选自聚乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮。
在另外的实施方案中，本发明的目的在于含有下述化合物的物质组合物(i)选自下述化合物一种化合物(a)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；(b)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自以下的化合物(A)Lys，(B)Lys-GLy，(C)Lys-Gly-Arg；(c)含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自下述的一种氨基酸顺序
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)在哺乳动物中处理时，该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH其中R是选自以下的一种氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO；4)；和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及所述的从(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自于下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；
(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺。
(ii)药学上可接受的与水不混溶的油悬浮液它能延长所述化合物的用药。
特别优选的组合物是其中所述的油选自花生油、芝麻油、杏仁油、蓖麻油、山茶油、棉籽油、橄榄油、玉米油、豆油、红花油、椰子油、脂肪酸的酯类和脂肪醇的酯类。
另外特别优选的组合物是还包括润湿剂，尤其是非离子表面活性剂。
更特别优选的组合物是还包括悬浮剂。
在另外实施方案中，本发明的目的在于含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自于下列的化合物(a)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；(b)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自以下化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg；
(c)含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自下述的一种氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)在哺乳动物中处理时，该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH其中R是选自下述的一种氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及所述从(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自下列化合物(1)药学上适用的所述肽的酸加成盐；
(2)药学上适用的所述肽的羧酸盐；(3)药学上适用的所述肽的碱加成盐；(4)药学上适用的所述肽的低级烷基酯；(5)药学上适用的所述肽的酰胺，其中所述药学上适用的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺。
(ii)与肽络合的锌(II)。
优选的组合物能持续糖血作用。
特别优选的是其中锌产品是无定形的组合物。
也特别优选的是其中锌产品是晶体的组合物。
在另一实施方案中，本发明的目的在于含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自下列的化合物(a)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；(b)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自于下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg；(c)包括下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH
其中W是选自下述的一种氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)并且在哺乳动物中处理时，该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包括下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH其中R是一种选自于下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及所述(a)到(d)肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；
(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，(ii)选自Ni(II)、Co(II)、Mg(II)、Ca(II)、K(I)、Mn(II)、Fe(II)和Cu(II)的一种金属。
在另一个实施方案中，本发明的目的在于包含下述化合物的组合物(i)选自下述的一种化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自于下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg；(c)包含下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是一种选自于下述的氨基酸顺序
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包括下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH其中R是一种选自下列的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)；和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及所述(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；以及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，(ii)一种碱性多肽，其中这种组合物是一种能持续糖血控制的含水悬浮液。
特别优选的是其中碱性多肽是鱼精蛋白的组合物。
在另一个实施方案中，本发明的目的在于包括下述化合物的物质组合物(i)一种选自下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg；(c)包含下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是一种选自下述的氨基酸顺序
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序-ID NO6)在哺乳动物中处理时，该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包含下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH其中R是一种选自如下的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)；和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及所述(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)苯酚化合物，其中这种组合物是一种能持续控制糖血的含水悬浮液。
特别优选的组合物是其中所述苯酚化合物选自苯酚、甲酚、间苯二酚和对羟苯甲酸甲酯。
在另外的实施方案中，本发明的目的在于包含下述化合物的物质组合物(i)一种选自下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自于下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg；(c)包含下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是一种选自下述的氨基酸顺序
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包含下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH其中R是一种选自下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)；和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及所述从(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；
(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)碱性多肽和苯酚化合物，其中这种组合物是能持续控制糖血的含水悬浮液。
在另一个实施方案中，本发明的目的是包括下述的物质组合物(i)一种选自下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly；(顺序ID NO2)(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg；(c)包括下述基本结构的多肽化合物H2N-W-COOH其中W是选自下述的一种氨基酸顺序
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)在哺乳动物中处理时，该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包括下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH其中R是选自下述的一种氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly；(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg；(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly；(顺序IDNO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys；(顺序ID NO5)以及所述从(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；以及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)碱性多肽、苯酚化合物和金属离子，其中所述的组合物是能持续控制糖血的含水悬浮液。
优选的组合物是其中所述碱性多肽是鱼精蛋白。
也优选的组合物是其中所述金属离子是锌。
在另一实施方案中，本发明的目的是包括下述化合物的物质组合物(i)选自下述的一种化合物(a)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；(b)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg；(c)包含下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自下述的一种氨基酸顺序
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)在哺乳动物中处理时，该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包含下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH其中R是选自下述的一种氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)；和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及所述从(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；以及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)所述的肽及其衍生物经受导致无定形或晶形形成的条件。
优选的组合物是其中所述的条件是高切力、与盐接触、或它们的组合。
特别优选的组合物是其中所述的盐选自硫酸铵、硫酸钠、硫酸锂、氯化锂、柠檬酸钠、柠檬酸铵、磷酸钠、磷酸钾、氯化钠、氯化钾、氯化铵、乙酸钠、乙酸铵、硫酸镁、氯化钙、硝酸铵和甲酸钠，以及其组合。
在还有的另一实施方案中，本发明目的是包含下述化合物的物质组合物(i)选自下述的一种化合物(a)具有下述氨基酸顺序的多肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；(b)具有下述氨基酸顺序的多肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg；(c)包括下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH
其中W是选自下述的一种氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)在哺乳动物中处理时，该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包含下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH其中R是选自下述的一种氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)；His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)；和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及所述从(a)到(d)肽的衍生物，其中所述的衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐；(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐；(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯；以及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)脂质体释放系统。
特别优选的组合物是其中所述脂质体为磷脂基(based)的。
也是特别优选的组合物是其中所述脂质体是非磷脂基的。
本发明还有一个目的在于治疗哺乳动物中非胰岛素相关的糖尿病，在需要这种治疗时，该治疗包括延长时间施用本发明的组合物。
除非另外指明外，本说明书及其附属的权利要求书中所使用的术语“衍生物”包括(但不限于)含有所指出的基本结构的多肽，其中包括在其C-端的一种或一种以上L-氨基酸；其中C-端羧基与(C1-C6)直链或支链烷基形成酯；其中C-端羧基形成羧基酰胺(car-boxamide)或取代的羧基酰胺；其中酸性氨基酸残基(Asp和/或Glu)生成酯或羧基酰胺；以及其组合。
与上面叙述的肽具有同系现象的多肽包括在本发明范围之内，其同系现象足以使这种多肽具有促胰岛活性。上面所述多肽的变体也包括在本发明范围中，这些变体包含不连贯氨基酸取代作用，且具有促胰岛活性。
类高血糖素肽-1(7-37)、其分离、表征，以及在治疗糖尿病中的用途都已在US 5118666和5120712中公开。这些专利文献以其全文引入本文作参考。
在本发明中，现在已发现，GLP-1和相关多肽的延长时间的血浆升高对于患有非胰岛素相关的糖尿病人在进食期间及以后的时间达到持续糖血控制是必要的。令人惊奇地发现，只是在进食时期前后，甚至达1小时以上，GLP-1和相关肽的升高都不会充分控制其葡萄糖的含量。因此，服用GLP-1和相关的肽要求延长释放系统。这种延长释放系统导致提高胰岛素作用。
本说明书与所附权利要求书所使用的短语“提高胰岛素作用”包括(但不限于)提高胰岛素合成、提高胰岛素分泌、增加肌肉和脂肪摄取葡萄糖、并降低肝产生的葡萄糖中的一种或多种作用。
本发明多肽可通过本技术领域技术人员所熟知的各种方法而制备。例如，多肽可用自动肽合成器合成，如Applied Biosystem(ABI)430A固相肽合成器。或者，本发明的多肽可以用重组体DNA的工艺制备，其中编码多肽的DNA顺序在操作上连结到表达载体上并用于转化适宜的宿主细胞。然后，已转化的宿主细胞在多肽将表达的条件下培养。再从其培养物中回收多肽。还可以将合成与重组体DNA技术结合使用以得到本发明的酰胺和酯衍生物和/或得到所需多肽的片段，再用本技术领域的技术人员所熟知的方法将这些片段连接起来。
本发明多肽衍生物可通过本技术领域技术人员所熟知的方法制备。例如，在诸如HCl之类的催化酸存在下，将所需要的(C1-C6)链烷醇与所需要的多肽反应而制备本发明的多肽的C-端烷基酯衍生物。生成这种烷基酯的适宜反应条件包括反应温度约50℃，反应时间约1小时至约3小时。同样地，在多肽中含有Asp和/或Glu残基的(C1-C6)烷基酯的本发明的多肽衍生物也可如此生成。
本发明多肽的羧基酰胺衍生物也可通过本技术领域的技术人员所熟知的固相肽合成方法而制备。例如，参见Solid Phase Pep-tide Synthesis，Stewart，J.M.等人，Pierce Chem.Co.Press，1984。
另一方面，或与上面所述相结合，本发明的多肽衍生物可以通过改变这种多肽的DNA编码顺序而制备。因此，用不同的碱性氨基酸残基或用酸或酸性或中性氨基酸残基取代碱性氨基酸残基，或用不同的酸性氨基酸残基或用碱性或中性氨基酸残基取代酸性氨基酸残基，或用不同的中性氨基酸残基或用酸性的或碱性的氨基酸残基取代中性氨基酸残基。也可通过直接合成该衍生物而实施多肽基本顺序中的这种变化。这种方法本技术领域的技术的员是熟知的。因此，这些衍生物在实施本发明时是有用的，它们必须达到促胰岛作用。
按如下方法测定本发明多肽衍生物的促胰岛活性。
采用Lacy，P.E.等人Diabetes，1635-39(1967)的改进方法从正常鼠的胰腺组织中分离胰岛，其中以Ficoll梯度(在Hanks′平衡盐溶液中，pH7.4 27％、23％、20.5％和11％)分离胰腺组织的胶原酶消化液。从20.5％/11％界面收集其胰岛、洗涤并在立体显微镜下手捡除去外分泌物和其它组织。在补加10％牛胎血清和含有11mM葡萄糖的RPMI 1640介质中于37℃和95％空气/5％CO2条件下培养该胰岛过夜。然后将该岛转移到补加10％牛胎血清和含5.6mM葡萄糖的RPMI 1640介质中。在37℃、95％空气/5％CO2条件下培养该岛60分钟。将要研究的多肽衍生物在含10％牛胎血清和16.7mM葡萄糖的RPMI介质中制备成1nM和10nM浓度。然后用移液管将约8-10个已分离的胰岛转移到在96孔微滴盘中总体积为250μl的含介质的多肽衍生物中。在多肽衍生物存在下于37℃、95％空气/5％CO2条件下培养该胰岛90分钟。然后收集等分无胰岛介质，采用Equate胰岛素RIA药盒(Binax，Inc.，Portland，ME)以放射免疫试验分析其100μl的所存在的胰岛素的量。
当本发明多肽衍生物通过如静脉内、肌肉内或皮下给药时，有效治疗成人初期糖尿病的剂量为每天约1Pg/kg至1000μg/kg。在进食期间和进食之间静脉注入的优选剂量范围，按100kg病人计，为约4～10ng/kg/分或约0.6～1.4μg/天。然而，人们认识到，超出这个范围的剂量也是可能的，并且也在本发明的范围之内。开药方的医师可以并应该决定适宜的剂量，并且是要治疗的条件以及服用衍生物所得的反应和病人年令、体重、性别和药史的严格结果。
通过皮下、肌肉内或经皮肤的方法、口吸入、鼻吸入、胃肠道或者通过注入泵的方法都可达到延长时间用药。
采用在各种水溶性聚合物中配制成溶液也可达到GLP-1和相关的肽的延长时间用药。这些聚合物一般是低分子量(＜15KDa)聚合物。这种低分子量聚合物的非限制实例包括聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇和聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物。也可以使用较高分子量聚合物。较高分子量聚合物的非限制实例包括多糖，如纤维素及其衍生物、脱乙酰壳多糖、阿拉伯胶、刺梧桐树胶、瓜耳树胶、Xanthan树胶、黄蓍胶、藻酸、角叉胶、琼脂糖、furcelleran。在后者情况下，在体内通过酶催地或水解而降解的聚合物是优选的，例如葡聚糖、淀粉及其衍生物、透明质酸、聚酯、聚酰胺、聚酸酐和聚正酯。通过使用低分子量聚合物或生物可降解聚合物可以避免与高分子量非生物降解聚合物相关的组织积累。该制剂一般含有GLP-1或相关的肽，其浓度约1mg/ml，浓度取决于该聚合物，但是一般浓度可高到其粘度为50cp，以及可以有适宜的缓冲液、张力剂和防腐剂。鼠和人的体内数据证明该制剂能达到可测量的血液促胰岛素激素含量，例如达24小时以上。相反地，例如配制在磷酸盐缓冲的盐水溶液中的促胰岛激素造成快速(-15分钟)最高血浆含量，在刚超过4小时血浆含量就降到检测极限以下。血浆浓度与时间的关系图表明在聚合物存在下大大降低了如从注射点开始的促胰岛激素的吸附速率。
还可以将GLP-1和相关的肽配制成悬浮在药学上可接受的油中的颗粒。优选的油是甘油三酯。这种油的非限制实施例包括花生油、芝麻油、杏仁油、蓖麻油、山茶油、棉籽油、橄榄油、玉米油、豆油、红花油和椰子油。其它类型的油是也可以使用，例如脂肪酸的酯类和脂肪醇的酯类，只要该油与水是不混溶，并且是肽的不良溶剂。该制剂还可含有适当的防腐剂、润湿剂和悬浮剂。在该制剂中促胰岛激素的重量百分数例如可以在0.01～10％范围内。在鼠体内的数据证明，这些制剂如在长达24小时都能达到可测量的促胰岛激素血液含量。相反地，例如配制在磷酸盐缓冲的盐水中的促胰岛激素造成快速(-15分钟)高峰血浆含量，在刚超过4小时时血浆量降低到可监测极限以下。血浆浓度与时间的关系图表明从注射点开始的促胰岛激素吸收率在油悬浮液中大大降低。
通过与金属离子，最好以盐形式相结合，也可将GLP-1和其相关的肽制成低溶解度形式而给药。优选离子是锌(II)。这种结合可能造成组合物呈非结晶的或结晶的。还可使用的其它金属离子包括Ni(II)、Co(II)、Mg(II)、Ca(II)、K(I)、Mn(II)、Fe(II)和Cu(II)。
其它延长给药的形式包括脂质体，或多层薄片或单层薄片，其制备是本技术领域技术人员所熟知的。脂质体，无论是多层还是单层都可以是磷脂基或非磷脂基。
其它延长释放制剂是通过使用沉淀剂和/或使用高切力而形成的促胰岛激素沉淀或聚集体的含水悬浮液，沉淀剂如苯酚化合物或碱性多肽或金属离子或盐。可以同时使用一种以上的沉淀剂。沉淀可以是晶形式的无定形的。
通过使用pH梯度法(或者由高到低，或者由低到高)和/或温度梯度法和/或降低溶解度的盐方法都可以从在水中的药物溶液得到促胰岛激素的晶体。盐包括柠檬酸铵、磷酸钠或钾、氯化钠或钾或铵、乙酸钠或铵、硫酸镁、氯化钙、硝酸铵、甲酸钠以及其它可以降低该药物溶解度的任何盐。若用于结晶的盐不是药学上可接受的，则可以在完成结晶之后用药学上可接受的介质代替其母液。若需进一步降低药物溶解度以达到所要求的药物动力学图形，则可以用金属离子如锌或钙和/或苯酚化合物处理晶体。该处理可以通过简单地将这些添加剂加入晶体悬浮液中而进行。
促胰岛激素沉淀或聚集体的溶解度在生理学条件下可以从1μg/ml以下到500μg/ml。鼠体内的数据证明，在至少30小时该制剂能够达到可测量的促胰岛激素血液量。
上述制剂所用的含水介质可以是任何可供注射的缓冲系统，或者甚至用纯水。最终制剂的pH可以是任何值，只要该制剂是可注射的。鱼精蛋白可以按任何盐的形式(如硫酸盐、氯化物等)或鱼精蛋白碱加入。可用于制剂制备的组分的实例浓度范围如下苯酚(0.5～5.0mg/ml)、m-甲酚(0.5～5.5mg/ml)、鱼精蛋白(0.02～1.0mg/ml)、锌(0.1～6的锌/促胰岛激素的摩尔比)、氯化钠(最高达100mg/ml)以及磷酸盐缓冲液(5～500mM)。
还可使用其它苯酚化合物或非苯酚化合物。这类化合物的非限制性的实例包括间苯二酚、羟苯甲酸甲酯、对羟苯甲酸丙酯、苯甲醇、氯代甲酚、甲酚、苯甲醛、邻苯二酚、焦棓酚、对苯二酚、棓酸正丙酯、丁基化的羟苯甲醚、丁基化的羟甲苯。碱性多肽的非限制性实例是多赖氨酸、多精氨酸等。
已按一般性描述了本发明，现在参看具体的实施例。应理解这些实施例并不意味着限制本发明，本发明范围是由所附的权利要求书决定。
实施例1促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A1的制备称取10mg促胰岛激素放入5ml容量瓶中。将约4ml磷酸盐缓冲的盐水(PBS)加到容量瓶中以便分散和溶解该药物。加入足量的PBS(适量)以充满容量瓶。称取20mg促胰岛激素于10ml容量瓶中。将约8ml PBS加到瓶中以便分散与溶解该药物。往瓶中加入适量PBS。用玻璃注射器将两个瓶中的溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)过滤到10ml玻璃管形瓶而将它们合并在一起。
溶液A1的PBS中含有2mg/ml的促胰岛激素。
溶液B1的制备称取8mg硫酸鱼精蛋白和44mg苯酚于10ml容量瓶中。加适量PBS以溶解硫酸鱼精蛋白和苯酚。将这种溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B1在PBS中含有0.6mg/ml鱼精蛋白碱和4.4mg/ml苯酚。
含水悬浮液1将1.5ml溶液A1吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B1吸移到该管形瓶中时，用磁方法搅拌瓶中的溶液。管形瓶用铝壳盖住并密封。缓慢搅拌管形瓶中的溶液16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液1在PBS中含有1mg/ml促胰岛激素、0.3mg/ml鱼精蛋白碱、2.2mg/ml苯酚。该悬浮液用于老鼠体内药物动力学的研究。
实施例2促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A2的制备称取10mg促胰岛激素于5ml容量瓶中。在瓶中加入约4mlPBS以便分散和溶解该药。往瓶里加适量PBS。称取20mg促胰岛激素于10ml容量瓶中，将约8ml PBS加入该瓶里以便分散和溶解该药物。在该瓶中添加适量PBS。用玻璃注射器将两个瓶的溶液通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A2的PBS中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B2的制备称取2mg硫酸鱼精蛋白和44mg苯酚于10ml容量瓶中。在瓶中加适量PBS以溶解硫酸鱼精蛋白和苯酚。这种溶液通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B2的PBS中含有0.15mg/ml鱼精蛋白碱和4.4mg/ml苯酚。
含水悬浮液2将1.5ml溶液A2吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B2吸移到该瓶中时，用磁方法搅拌瓶中的溶液。瓶用铝壳盖住并密封。将瓶里的溶液搅拌16小时以便能形成悬浮液。含水悬浮液2的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素、0.075mg/ml鱼精蛋白碱和2.2mg/ml苯酚。这种悬浮液用于老鼠体内药物动力学的研究。
实施例3促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A3的制备称取20mg促胰岛激素于10ml容量瓶中。在瓶中加入约8mlPBS以便分散和溶解该药物。往瓶里加入适量PBS。用注射器将溶液A3通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A3的PBS中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B3的制备称取8mg硫酸鱼精蛋白、44mg苯酚和323mg甘油于10ml容量瓶中。在瓶中加入适量PBS以便溶解硫酸鱼精蛋白、苯酚和甘油。用注射器将这种溶液通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B3的PBS中含有0.6mg/ml鱼精蛋白碱4.4mg/ml苯酚和32mg/ml甘油。
含水悬浮液3吸移1.5ml溶液A3于3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B3吸移到该瓶时，用磁方法搅拌瓶中的溶液。管形瓶用铝壳盖住并密封。将瓶中的溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液3的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素、0.3mg/ml鱼精蛋白碱、2.2mg/ml苯酚和16mg/ml甘油。该悬浮液用于老鼠体内药物动力学的研究。
实施例4
促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A4的制备称取20mg促胰岛激素于10ml容量瓶中。在瓶中加入约8mlPBS以分散和溶解该药物。往瓶中加适量PBS。用玻璃注射器将溶液A4经过0.22μ过滤器(Millipore Millex-GV)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A4的PBS中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B4的制备称取8mg硫酸鱼精蛋白和52mg m-甲酚于10ml容量瓶中。在瓶中加适量PBS以便溶解硫酸鱼精蛋白和m-甲酚。将这种溶液通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B4的PBS中含有0.6mg/ml鱼精蛋白碱和5mg/ml m-甲酚。
含水悬浮液4将1.5ml溶液A4吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B4吸移到该瓶中时，用磁方法搅拌瓶中的溶液。管形瓶用铝壳盖住并密封。瓶中的溶液搅拌16小时以便形成晶体。含水悬浮液4的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素、0.3mg/ml鱼精蛋白碱和2.5mg/ml m-甲酚。这种悬浮液用于老鼠体内药物动力学的研究。
实施例5促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A5的制备称取50mg促胰岛激素于25ml容量瓶中。在瓶中加入约23ml PBS以便分散和溶解该药物。往瓶里加入适量PBS。用注射器将溶液A5通过0.22μ过滤器过滤到50ml玻璃管形瓶中。溶液A5的BPS中含有2mg/ml促胰岛激素。
苯酚料液的制备称取0.44g苯酚于100ml容量瓶中。在瓶中加入约95mlPBS以溶解苯酚。往瓶中加入适量PBS以溶解苯酚。得到的溶液(4.4mg/ml苯酚)用于制备溶液B5。
溶液B5的制备将25ml苯酚料液通过0.2μ过滤器过滤到50ml玻璃管形瓶中而制备溶液B5。溶液B5的PBS中含有4.4mg/ml苯酚。
含水悬浮液5将1.25ml溶液A5吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.25ml溶液B5吸移到该瓶中时，用磁方法搅拌瓶中的溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。瓶内的溶液搅拌16小时以形成悬浮液。含水悬浮液5的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素和2.2mg/ml苯酚。这种悬浮液用于老鼠体内药物动力学的研究。
实施例6促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A6的制备称取50mg促胰岛激素于25ml容量瓶中。在瓶中加入约23ml PBS以分散和溶解该药物。往瓶中加入适量PBS。用注射器将溶液A6通过0.22μ过滤器过滤到50ml玻璃管形瓶中。溶液A6的PBS中含有2mg/ml促胰岛激素。
苯酚料液的制备称取0.44g苯酚于100ml容量瓶中。在瓶中加入约95mlPBS以溶解苯酚。往瓶中加入适量PBS以溶解苯酚。得到的溶液(4.4mg/ml苯酚)用作制备溶液B6。
溶液B6的制备将称取的1.25mg硫酸鱼精蛋白于25ml容量瓶中而制备溶液B6。在瓶中加入约20ml苯酚料液以溶解硫酸鱼精蛋白。往瓶中加适量苯酚料液。溶液B6通过0.22μ过滤器过滤到50ml玻璃管形瓶中。溶液B6的PBS中含有4.4mg/ml苯酚和0.038mg/ml鱼精蛋白碱。
含水悬浮液6将1.25ml溶液A6吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.25ml溶液B6吸移到管形瓶中时，用磁方法搅拌管形瓶中的溶液。管形瓶用铝壳盖住并密封。瓶中的溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液6的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素、2.2mg/ml苯酚、0.019mg/ml鱼精蛋白碱。这种悬浮液用于老鼠体内药物动力学的研究。
实施例7促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A7的制备称取50mg促胰岛激素于25ml容量瓶中。往瓶中加入约23ml PBS以分散和溶解该药物。在瓶中加入适量PBS。用注射器将溶液A7通过0.22μ过滤器过滤到50ml玻璃管形瓶中。溶液A7的BPS中含有2mg/ml促胰岛激素。
苯酚料液的制备称取0.44g苯酚于100ml容量瓶中。往该瓶中加入约95mlPBS以溶解苯酚。往该瓶中加入适量PBS以溶解苯酚。得到的溶液(4.4mg/ml苯酚)用于制备溶液B7。
溶液B7的制备称取2.5mg硫酸鱼精蛋白于25ml容量瓶中而制备溶液B7。往该瓶中加入约20ml苯酚料液以溶解硫酸鱼精蛋白。往瓶里加适量苯酚料液。将溶液B7通过0.22μ过滤器过滤到50ml玻璃管形瓶中。溶液B7的PBS中含有4.4mg/ml苯酚和0.075mg/ml鱼精蛋白碱。
含水悬浮液7移取1.25ml溶液A7于3.5ml I型玻璃管形瓶中。当1.25ml溶液B7吸移到该瓶中时，用磁方法搅拌瓶中的溶液。用铝壳将瓶盖住且密封。瓶中溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液7的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素、2.2mg/ml苯酚和0.038mg/ml鱼精蛋白碱。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例8促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A12的制备称取20mg促胰岛激素于10ml容量瓶中。往瓶中加入约8mlPBS以分散和溶解该药。瓶中加入适量PBS。用注射器将溶液A12通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A12的BPS中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B12的制备称取20mg苯酚于10ml容量瓶中而制备溶液B12。往瓶中加入约8ml PBS以溶解苯酚。瓶中加适量PBS。将溶液B12通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B12的BPS中含有2mg/ml苯酚。
含水悬浮液12吸移4ml溶液A12于10ml I型玻璃管形瓶中。当将4ml溶液B12吸移到管形瓶中时搅拌瓶中的溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。瓶中溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液12的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素和1mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例9促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A15的制备称取20mg促胰岛激素于10ml容量瓶中。往瓶中加入约8ml磷酸盐缓冲液(PB)以溶解该药物。瓶中加入适量PB。用注射器将溶液A15通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A15的PB中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B15的制备称取8mg硫酸鱼精蛋白于10ml容量瓶中以制备溶液B15。往瓶中加入约8ml PB以溶解硫酸鱼精蛋白。瓶中加适量PB。将溶液B15通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B15的PB中含有0.6mg/ml鱼精蛋白碱。
含水悬浮液15将3ml溶液A15吸移到10ml I型玻璃管形瓶中。当将3ml溶液B15吸移到该瓶中时搅拌瓶中的溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。瓶中溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液15的PB中含有1mg/ml促胰岛激素和0.3mg/ml鱼精蛋白碱。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的试验。
实施例10促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A16的制备称取20mg促胰岛激素于10ml容量瓶中。往瓶里加入约8mlPB以溶解该药物。瓶中加适量PB。用注射器将溶液A16通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A16的BP中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B16的制备称取44g苯酚于10ml容量瓶中而制备溶液B16。往容量瓶中加入约8ml PB以溶解苯酚。瓶中加入适量PB。将溶液B16通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B16的PB中含有4.4mg/ml苯酚。
含水悬浮液16将3ml溶液A16吸移到10ml I型玻璃管形瓶中。当将3ml溶液B16吸移到该瓶中时用磁方法搅拌瓶中的溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。瓶中的溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液16的PB中含有1mg/ml促胰岛激素和2.2mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例11促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液含水悬浮液17称取10mg促胰岛激素于10ml容量瓶中。往瓶里加入约8mlPB以溶解该药物。瓶里加适量PB。用注射器将瓶里的溶液通过0.22μ过滤器过滤到10ml I型玻璃管形瓶中。该瓶用铝壳盖住并密封。瓶里溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液17的PB中含有1mg/ml促胰岛激素。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例12促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液含水悬浮液18称取10mg促胰岛激素于10ml容量瓶中。往瓶里加入约8mlPBS以溶解该药物。瓶里加适量PBS。用注射器将瓶中的溶液通过0.22μ过滤器过滤到10ml I型玻璃管形瓶中。该瓶用铝壳盖住并密封其瓶。缓慢搅拌瓶中溶液16小时(确保不形成泡沫或泡)以便形成悬浮液。含水悬浮液18的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例13促胰岛激素(0.2mg/ml)悬浮液溶液A22的制备称取2mg促胰岛激素于5ml容量瓶中而制备溶液A22。往瓶里加入约3ml PBS以溶解该药物。瓶中加入适量PBS。用注射器将溶液A22通过0.22μ过滤器过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A22的PBS中含有0.4mg/ml促胰岛激素。
溶液B22的制备称取44mg苯酚于10ml容量瓶中而制备溶液B22。往瓶里加入约8ml PBS以溶解苯酚。瓶里再加适量PBS。将溶液B22通过0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B22的PBS中含有4.4mg/ml苯酚。
含水悬浮液22
吸移1.5ml溶液A22于3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B22吸移到瓶中时用磁方法搅拌瓶中溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。搅拌瓶中溶液16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液22的PBS中含有0.2mg/ml促胰岛激素和2.2mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例14促胰岛激素(0.2mg/ml)悬浮液溶液A23的制备称取2mg促胰岛激素于5ml容量瓶中而制备溶液A23。往瓶里加入约3ml PBS以溶解该药物。瓶里加适量PBS。用注射器将溶液A23通过0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A23的PBS中含有0.4mg/ml促胰岛激素。
溶液B23的制备称取8.8mg苯酚于10ml容量瓶中而制备溶液B23。往瓶中加入约8ml PBS以溶解苯酚。瓶中加适量PBS。将溶液B23通过0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B23的PBS中含有0.88mg/ml苯酚。
含水悬浮液23将1.5ml溶液A23吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B23吸移到瓶中时用磁方法搅拌该瓶中溶液。该瓶用铝壳盖住和密封。搅拌瓶中溶液16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液23的PBS中含有0.2mg/ml促胰岛激素和0.44mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例15
促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A24的制备称取10mg促胰岛激素于5ml容量瓶中而制备溶液A24。往瓶里加入约3ml PBS以溶解药物。瓶里加适量PBS。采用注射器将溶液A24通过0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A24的PBS中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B24的制备称取8mg硫酸鱼精蛋白于10ml容量瓶中而制备溶液B24。往瓶里加入约8ml PBS以溶解硫酸鱼精蛋白。瓶里加适量PBS。将溶液B24通过0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B24的PBS中含有0.6mg/ml鱼精蛋白碱。
含水悬浮液24将1.5ml溶液A24吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当1.5ml溶液B24吸移到该瓶时用磁方法搅拌瓶中的溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。搅拌瓶中溶液16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液24的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素和0.3mg/ml鱼精蛋白碱。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例16促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A25的制备称取10mg促胰岛激素于5ml容量瓶中而制备溶液A25。瓶中加入约3ml PBS以溶解该药物。瓶中加入适量PBS。采用注射器将溶液A25通过0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A25的PBS中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B25的制备称取53mg m-甲酚于10ml容量瓶中而制备溶液B25。瓶中加入约8ml PBS以溶解m-甲酚。往瓶里加入适量PBS。将溶液B25通过0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B25的PBS中含有5.3mg/ml m-甲酚。
含水悬浮液25将1.5ml溶液A25吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B25吸移到瓶中时用磁方法搅拌该瓶中溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。瓶中溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液25的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素和2.5mg/ml m-甲酚。该悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例17促胰岛激素(0.5mg/ml)悬浮液溶液A29的制备称取25mg促胰岛激素于25ml容量瓶中而制备溶液A29。往瓶中加入约20ml PBS以溶解该药物。瓶中加入适量PBS。用注射器将溶液A29通过0.22μ过滤器而过滤到50ml玻璃管形瓶中。溶液A29的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素。
溶液B29的制备称取50mg苯酚于50ml容量瓶中以制备溶液B29。往瓶中加入约40ml PBS以溶解该苯酚。瓶中加适量PBS。将溶液B29通过0.22μ过滤器而过滤到50ml玻璃管形瓶中。溶液B29的PBS中含有1.0mg/ml苯酚。
含水悬浮液29
将1.5ml溶液A29吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B29吸移到该瓶中时用磁方法搅拌瓶中溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。搅拌瓶中溶液16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液29的PBS中含有0.5mg/ml促胰岛激素和0.5mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例18促胰岛激素(1mg/ml)悬浮液溶液A31的制备称取10mg促胰岛激素于5ml容量瓶中。往瓶中加入约4mlPBS以便分散和溶解该药物。瓶中加入适量PBS。用注射器将溶液A31通过0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A31的PBS中含有2mg/ml促胰岛激素。
溶液B31的制备称取50mg苯酚于50ml容量瓶中以制备溶液B31。往瓶中加入约40ml PBS以溶解苯酚。瓶中加入适量PBS。将溶液B31通过0.22μ过滤器而过滤到50ml玻璃管形瓶中。溶液B31的PBS中含有1mg/ml苯酚。
含水悬浮液31将1.5ml溶液A31吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B31吸移到该瓶中时用磁方法搅拌该瓶中溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。瓶中溶液搅拌16小时以便形成悬浮液。含水悬浮液31的PBS中含有1mg/ml促胰岛激素和0.5mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例19
促胰岛激素(4mg/ml)悬浮液溶液A51的制备称取22.2mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。吸移5ml PBS到该瓶中以溶解该药物。将这种溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A51的PBS中含有4.44mg/ml促胰岛激素。
溶液B51的制备称取110mg苯酚和30mg硫酸鱼精蛋白于5ml容量瓶中。往瓶中加入约4ml PBS以溶解苯酚和硫酸鱼精蛋白。用PBS将容量瓶充至标记处。让溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B51的PBS中含有22mg/ml苯酚和4.5mg/ml鱼精蛋白碱。
含水悬浮液51将3ml溶液A51和0.33ml溶液B51吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。缓慢振荡瓶中溶液以保证均匀混合。将瓶置于室温下16小时。含水悬浮液51的PBS中含有4mg/ml促胰岛激素、0.44mg/ml鱼精蛋白碱和2.2mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例20促胰岛激素(4mg/ml)悬浮液溶液A52的制备称取22.2mg促胰岛激素于10ml玻璃瓶中。将5ml PBS吸移到该瓶中以溶解该药物。将这种溶液通过0.22μ过滤器(低蛋白质结合)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A52的PBS中含有4.44mg/ml促胰岛激素。
溶液B52的制备称取110mg苯酚和15.6mg乙酸锌二水合物于5ml容量瓶中。瓶中加入约4ml注射用水以溶解苯酚和乙酸锌二水合物。用注射用水充填容量瓶至刻度。将溶液通过0.22μ过滤器(蛋白质结合低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B52的注射用水中含有22mg/ml苯酚和7.8mg/ml乙酸锌二水合物。
含水悬浮液52吸移3ml溶液A52和0.33ml溶液B52于3.5ml I型玻璃管形瓶中。缓慢摇动瓶中溶液以保证均匀混合。将瓶置于室温下16小时。含水悬浮液52的PBS中含有4mg/ml促胰岛激素、0.78mg/ml乙酸锌二水合物和2.2mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例21促胰岛激素(4mg/ml)悬浮液苯酚溶液的制备称取244mg苯酚于100ml容量瓶中。往瓶中加入约90ml注射用水以溶解苯酚。用注射用水充填容量瓶至刻度。用5％NaOH溶液调节这种溶液的pH到pH9.0。苯酚溶液在pH9.0的注射用水中含有2.44mg/ml苯酚。
溶液A71的制备称取22.2mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。将5ml苯酚溶液吸移到瓶中以溶解该药物。将这种溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A71在注射用水中含有4.44mg/ml促胰岛激素和2.44mg/ml苯酚。
溶液B71的制备称取116mg硫酸鱼精蛋白于10ml容量瓶中。往瓶里加入约8ml注射用水以溶解硫酸鱼精蛋白。容量瓶用注射用水充至刻度。将溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B71在注射用水中含有8.7mg/ml鱼精蛋白碱。
溶液C71的制备称取156mg乙酸锌二水合物和1.632g NaCl于10ml容量瓶中。往瓶中加入约8ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物和NaCl。容量瓶用注射用水充至刻度。将溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液C71在注射用水中含有15.6mg/ml乙酸锌二水合物和163.2mg/ml NaCl。
含水悬浮液71将3ml溶液A71、0.165ml溶液B71和0.165ml溶液C71吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。缓慢摇动瓶中溶液以保证均匀混合。将管形瓶置于室温下16小时。含水悬浮液71在注射用水中含有4mg/ml促胰岛激素、0.435mg/ml鱼精蛋白碱、0.78mg/ml乙酸锌二水合物、8.16mg/ml NaCl和2.2mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例22促胰岛激素(4mg/ml)悬浮液m-甲酚溶液的制备称取244mg m-甲酚于100ml容量瓶中。往瓶里加入约90ml注射用水以溶解m-甲酚。容量瓶用注射用水充至刻度。用5％NaOH溶液调节这种溶液的pH到pH9.0。m-甲酚溶液在pH9.0注射用水中含有2.44mg/ml m-甲酚。
溶液A100的制备称取22.2mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。将5ml m-甲酚溶液吸移到瓶中以溶解该药物。将这种溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A100在注射用水中含有4.44mg/ml促胰岛激素和2.44mg/ml m-甲酚。
溶液B100的制备称取116mg硫酸鱼精蛋白于10ml容量瓶中。往瓶里加入约8ml注射用水以溶解硫酸鱼精蛋白。容量瓶用注射用水充至刻度。将这种溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B100的注射用水中含有8.7mg/ml鱼精蛋白碱。
溶液C100的制备称取156mg乙酸锌二水合物和1.632g NaCl于10ml容量瓶中。往瓶里加入约8ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物和NaCl。容量瓶用注射用水充至刻度。将这种溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液C100的注射用水中含有15.6mg/ml乙酸锌二水合物和163.2mg/ml NaCl。
含水悬浮液100将3ml溶液A100、0.165ml溶液B100和0.165ml溶液C100吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。缓慢摇动瓶中的溶液以保证混合均匀。将管形瓶置于室温16小时。含水悬浮液100的注射用水中含有4mg/ml促胰岛激素、0.435mg/ml鱼精蛋白碱、0.78mg/ml乙酸锌二水合物、8.16ml/ml NaCl和2.2mg/ml m-甲酚。这种该悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例23促胰岛激素(4mg/ml)悬浮液溶液A68的制备称取22.2mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。将5ml PBS吸移到管形瓶中以溶解该药物。将这种溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A68的PBS中含有4.44mg/ml促胰岛激素。
溶液B68的制备称取116mg硫酸鱼精蛋白于10ml容量瓶中。往瓶里加入约8ml注射用水以溶解硫酸鱼精蛋白。容量瓶用注射用水充至刻度。将溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B68的注射用水中含有8.7mg/ml鱼精蛋白碱。
溶液C68的制备称取156mg乙酸锌二水合物和440mg苯酚于10ml容量瓶中。往瓶中加入约8ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物和苯酚。用注射用水将瓶充至刻度。将该溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液C68的注射用水中含有15.6mg/ml乙酸锌二水合物和44mg/ml苯酚。
含水悬浮液68将3ml溶液A68、0.165ml溶液B68和0.165ml溶液C68吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。缓慢摇动瓶中溶液以保证混合均匀。将管形瓶置于室温下达16小时。含水悬浮液68的PBS中含有4mg/ml促胰岛激素、0.435mg/ml鱼精蛋白碱、0.78mg/ml乙酸锌二水合物和2.2mg/ml苯酚。该悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例24促胰岛激素(4mg/ml)悬浮液溶液A67的制备称取22.2mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。将5ml PBS吸移到管形瓶中以溶解该药物。将这种溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A67的PBS中含有4.44mg/ml促胰岛激素。
溶液B67的制备称取116mg硫酸鱼精蛋白于10ml容量瓶中。往瓶中加入约8ml注射用水以溶解硫酸鱼精蛋白。用注射用水将容量瓶充至刻度。将该溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B67的注射用水中含有8.7mg/ml鱼精蛋白碱。
溶液C67的制备称取156mg乙酸锌二水合物和440mg m-甲酚于容量瓶中。往瓶中加入约8ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物和m-甲酚。用注射用水将容量瓶充至刻度。将该溶液通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液C67的注射用水中含有15.6mg/ml乙酸锌二水合物和44mg/ml m-甲酚。
含水悬浮液67将3ml溶液A67、0.165ml溶液B67和0.165ml溶液C67吸移到3.5ml I型玻璃管形瓶中。缓慢摇动瓶中溶液以保证混合均匀。将该管形瓶置于室温下16小时。含水悬浮液67的PBS中含有4mg/ml促胰岛激素、0.435mg/ml鱼精蛋白碱、0.78mg/ml乙酸锌二水合物和2.2mg/ml m-甲酚。这种该悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例25溶液A39的制备称取67.6mg促胰岛激素于玻璃管形瓶中。往瓶中加入约22ml注射用水以溶解促胰岛激素。用NaOH将管形瓶中溶液的pH调节到9.6使其成清彻溶液。在管形瓶中加入注射用水使最终药物浓度达到2.5mg/ml。
溶液B39的制备称取386.8mg乙酸锌二水合物于100ml容量瓶中。往瓶中加入约80ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物。用注射用水将容量瓶充至刻度。溶液B39的注射用水中含有3.9mg/ml乙酸锌二水合物。
溶液C39的制备称取1.095g苯酚于50ml容量瓶中。往瓶中加入约40ml注射用水以溶解苯酚。用注射用水将容量瓶充至刻度。溶液C39的注射用水中含有21.9mg/ml苯酚。
溶液D39的制备称取2.25g NaCl于25ml容量瓶中。往瓶中加入约20ml溶液C39以溶解NaCl。用溶液C39将容量瓶充至刻度。溶液D39的注射水中含有9％(w/v)NaCl和21.9mg/ml苯酚。
含水悬浮液39将所有溶液都经0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)过滤。将9ml溶液A39转移到10ml样品管形瓶中。往瓶中加1ml溶液B39，同时缓慢搅拌。立刻生成沉淀。测定pH是7.0。将管形瓶置于室温约18小时。将4ml样品转移到另一个10ml管形瓶中，并往瓶中加入0.44ml溶液D39。缓慢搅拌该样品5分钟，然后将它置于室温下过夜。
含水悬浮液39含有2mg/ml促胰岛激素、2.2mg/ml苯酚、0.9％NaCl和0.39mg/ml乙酸锌。该悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例26溶液A53的制备称取32.5mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。往瓶中加6ml注射用水。用1％(w/v)NaOH将管形瓶中溶液的pH调至9.6而使其变成清彻溶液。加适量的注射用水使该药物浓度为5.0mg/ml。
溶液B53的制备称取390mg乙酸锌二水合物于50ml容量瓶中。往瓶中加入约40ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物。用注射用水将瓶充到刻度。溶液B53的注射用水中含有7.8mg/ml乙酸锌二水合物。
含水悬浮液53所有溶液都经0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤。将2.4ml溶液A53转移到3.5ml管形瓶中。瓶中加300μl溶液B53，同时缓慢搅拌。在加完之后立刻生成双折射沉淀，测定其pH是6.8。在将管形瓶置于室温下20小时后，直接把7.5μl m-甲酚加到已沉降悬浮液的上清液中。然后缓慢地搅拌悬浮液以溶解m-甲酚。将300μl 9％NaCl溶液在搅拌下加到悬浮液中。含水悬浮液53的注射用水中含有4mg/ml促胰岛激素、0.9％NaCl、0.78mg/ml乙酸锌和2.5mg/ml m-甲酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例27溶液A54的制备称取32.5mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。往瓶中加6ml注射用水。用1％(w/v)NaOH将管形瓶中溶液的pH调节到9.6以使其变成清彻溶液。加入适量注射用水使药物浓度达到5.0mg/ml。
溶液B54的制备称取390mg乙酸锌二水合物于50ml容量瓶中。往瓶中加入约40ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物。用注射用水将其容量瓶充到刻度。溶液B54的注射用水中含有7.8mg/ml乙酸锌二水合物。
溶液C54的制备称取1.1g苯酚和4.5g NaCl于50ml容量瓶中。往瓶里加入约40ml注射用水以溶解苯酚和NaCl。用注射用水将容量瓶充到刻度。溶液C54含有22mg/ml苯酚和90mg/ml NaCl。
含水悬浮液54所有溶液都经0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤。将2.4ml溶液A54转移到3.5ml管形瓶中。在搅拌下往瓶里加入300μl溶液B54。加完后立刻生成双折射沉淀。测定其pH是6.8。将样品置于室温下20小时。在缓慢搅拌下加入300μl溶液C54。含水悬浮液54的注射用水中含有4mg/ml促胰岛激素、0.78mg/ml乙酸锌二水合物、2.2mg/ml苯酚和9mg/ml NaCl。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例28溶液A57的制备称取15mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。往瓶中加3ml注射用水。用5％NaOH将该瓶中溶液的pH调节至9.9以完全溶解该药物。溶液A57的注射用水中含有5.0mg/ml。
溶液B57的制备称取780mg乙酸锌二水合物于100ml容量瓶中。往瓶里加约80ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物。用注射用水将容量瓶充到刻度。溶液B57的注射用水中含有7.8mg/ml乙酸锌二水合物。
溶液C57的制备称取2.2g苯酚和9g NaCl于100ml容量瓶中。往瓶中加入80ml注射用水以溶解苯酚和NaCl。用注射用水将容量瓶充到刻度。溶液C57的注射用水中含有22mg/ml苯酚和90mg/ml NaCl。
含水悬浮液57将2.4ml溶液A57转移到3.5ml管形瓶中。在加入300μl溶液B57时缓慢搅拌该溶液。在加入溶液B57之后立刻生成沉淀。测定其pH是7.1。将样品置于室温下24小时。在缓慢搅拌下加300μl溶液C57。含水悬浮液57的注射用水中含有4mg/ml促胰岛激素、0.78mg/ml乙酸锌二水合物、2.2mg/ml苯酚和9mg/ml NaCl。
这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例29溶液A64的制备称取53.3mg促胰岛激素于30ml玻璃管形瓶中。在加11ml注射用水后，用5％NaOH(w/v)将管形瓶溶液的pH调节到8.3以溶解促胰岛激素。用稀HCl将pH调节下降到6.0以保证溶液仍然是清的。加入适量注射用水使药物浓度达到4.4mg/ml。将溶液A64通过0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)而过滤到3.5ml样品管形瓶中。将1.8ml已过滤的溶液转移到另外灭菌的3.5ml管形瓶中，并将该瓶置于室温下以结晶3天。
溶液B64的制备称取780mg乙酸锌二水合物于50ml容量瓶中。往瓶中加入约40ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物。用注射用水将容量瓶充到刻度。溶液B64的注射用水中含有15.6mg/ml乙酸锌二水合物。
溶液C64的制备称取18g NaCl于100ml容量瓶中。往瓶中加入约80ml注射用水以溶解NaCl。用注射用水将容量瓶充到刻度。溶液C64的注射用水中含有180mg/ml NaCl。
含水悬浮液64在溶液A64结晶完成之后，将100μl溶液B64加到缓慢搅拌的1.8ml晶体悬浮液中。然后将样品置于室温下3天。在缓慢搅拌下将100μl溶液C64加到晶体悬浮液中。用稀的NaOH将悬浮液的pH调节到pH7.3。直接将5.0μm-甲酚加到调节pH的晶体悬浮液中。含水悬浮液64的注射用水中含有4mg/ml促胰岛激素、0.78mg/ml乙酸锌二水合物、9mg/ml NaCl和2.5mg/ml m-甲酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例30溶液A69的制备称取1g NaCl于100ml容量瓶中。往瓶中加入约80ml注射用水以溶解NaCl。用注射用水将瓶充到刻度。溶液A69的注射用水中含有1％(w/v)NaCl。
溶液B69的制备称取390mg乙酸锌二水合物于100ml容量瓶中。往瓶中加入约80ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物。用注射用水将容量瓶充到刻度。溶液B69的注射用水中含有3.9mg/ml乙酸锌二水合物。
乳化液C69的制备将2.5ml灭菌过滤(0.22μ低蛋白质结合的)的m-甲酚转移到100ml容量瓶中。用注射用水将容量瓶充到刻度，并用声处理以得到均匀悬浮液。乳化液C69的注射用水中含有25mg/ml m-甲酚。
含水悬浮液69称取35.74mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。加7ml溶液A69。将该瓶中溶液的pH调节到9.2以溶解该药物。再用稀HCl将溶液的pH调节到6.5。加入适量注射用水使药物浓度为4.4mg/ml。将溶液经0.22μ过滤器(低蛋白质结合)过滤。将溶液置于室温下6天，在此期间结晶出促胰岛激素。将1.5ml晶体悬浮液转移到另一个管形瓶中。在缓慢搅拌下加入167μl溶液B69。将样品置于室温下1天。将167μl乳化液C69加到澄清悬浮液的上清液中。搅拌样品使m-甲酚溶解。含水悬浮液69的注射用水中含有3.6mg/ml促胰岛激素、0.36mg/ml乙酸锌、8.17mg/ml NaCl和2.28mg/mlm-甲酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例31溶液A101的制备称取10g乙酸钠于100ml容量瓶中。往瓶中加入约80ml注射用水以溶解乙酸钠。用注射用水将容量瓶充到刻度。溶液A101的注射用水中含有100mg/ml乙酸钠。
含水悬浮液101称取44.4mg促胰岛激素于10ml玻璃管形瓶中。往瓶中加入8ml注射用水。将瓶中溶液的pH调节到9.3以得到清彻溶液。把1ml溶液A101加到促胰岛激素溶液中。然后将pH调节到6.5。将溶液经0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)过滤。将滤液于室温下放置3天以出现结晶。含水悬浮液101的注射用水中含有4.9mg/ml促胰岛激素和11.1mg/ml乙酸钠。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例32溶液A82的制备称取9g NaCl于100ml容量瓶中。往瓶中加入约80ml注射用水以溶解NaCl。用注射用水将瓶充到刻度。溶液A82的注射用水中含有9％(w/v)NaCl。
溶液B82的制备称取789mg乙酸锌二水合物于100ml容量瓶中。往瓶中加入约80ml注射用水以溶解乙酸锌二水合物。用注射用水将容量瓶充到刻度。溶液B82的注射用水中含有7.89mg/ml乙酸锌二水合物。
乳化液C82的制备将2.5ml灭菌过滤过的(0.22μ低蛋白质结合)的m-甲酚转移到100ml容量瓶中。用注射用水将瓶充到刻度，并用声处理以得到均匀悬浮液。乳化液C82的注射用水中含有25mg/ml m-甲酚。
含水悬浮液82所有溶液经0.22μ过滤器(低蛋白质结合)过滤。往10ml管形瓶中(加有8ml水)加入45.34mg促胰岛激素。用5％NaOH将pH调节到9.3。在将1ml溶液A82加到管形瓶之后，用稀HCl将溶液的pH调节到6.55。该溶液(5mg/ml促胰岛激素)经0.22μ过滤器(结合蛋白质低的)过滤。往灭菌过滤的促胰岛激素溶液中加入81μl含水悬浮液101(参见实施例31)，并摇动样品使其分散。然后将样品在室温下放置72小时以便生成晶体悬浮液。将2.4ml悬浮液转移到3.5ml管形瓶中。往瓶中加入300μl溶液B82，同时缓慢搅拌。用稀NaOH将瓶中溶液的pH调节到7.3。往沉降悬浮液的上清液中加入300μl乳化液C82。含水悬浮液82的注射用水中含有4mg/ml促胰岛激素、0.79mg/ml乙酸锌二水合物、2.5mg/mlm-甲酚和0.9％NaCl。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例33GLP-1(7-36)酰胺(1mg/ml)悬浮液溶液A26的制备称取10mg GLP-1(7-36)酰胺于5ml容量瓶中以制备溶液A26。往瓶中加入约3ml PBS以溶解药物。瓶中加入适量PBS。将溶液A26经0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液A26的PBS中含有2mg/ml GLP-1(7-36)。
溶液B26的制备称取44mg苯酚于10ml容量瓶中以制备溶液B26。往瓶中加入约8ml PBS以溶解苯酚。再往瓶中加适量PBS。将溶液B26经0.22μ过滤器而过滤到10ml玻璃管形瓶中。溶液B26的PBS中含有4.4mg/ml苯酚。
含水悬浮液26吸移1.5ml溶液A26于3.5ml I型玻璃管形瓶中。当将1.5ml溶液B26吸移到管形瓶中时用磁方法搅拌管形瓶中的溶液。该瓶用铝壳盖住并密封。缓慢搅拌(保证无泡沫或不生成泡)瓶中溶液18小时以生成悬浮液。含水悬浮液26的PBS中含有1mg/ml GLP-1(7-36)酰胺和2.2mg/ml苯酚。这种悬浮液用于鼠体内药物动力学的研究。
实施例34按照本发明的一种形式，将在pH为7-8.5的缓冲液中的2-15mg/ml GLP-1(7-37)与一种金属离子盐溶液合并得到1-8mg/ml GLP-1(7-37)溶液，其中锌与GLP-1(7-37)的摩尔比为1∶1至270∶1，这样制备出低溶解度形式的GLP-1(7-37)。生成重沉淀并在室温下放置过夜。GLP-1(7-37)在金属离子溶液中的溶解度随所用金属而有所不同。接着测定GLP-1(7-37)沉淀在不含金属的溶剂如PBS或水中的溶解度表明，锌、钴和镍离子产生低溶解度形式的GLP-1(7-37)。
表1各种金属离子盐生成低溶解度GLP-1(7-37)能力金属离子盐在金属溶液中的溶解度在PBS中的溶解度乙酸锌 0.04μg/ml 0.04μg/ml氯化锌 0.04μg/ml 0.03μg/ml氯化钴 0.11μg/ml 0.04μg/ml硫酸镍 0.14μg/ml 0.07μg/ml氯化锰 0.23μg/ml 1.64μg/ml氯化镁 1.75μg/ml 无沉淀氯化钙 1.98μg/ml 无沉淀注在每种情况下，将100μl 5mM金属离子溶液加到100μl5mg/ml GLP-1(7-37)中，混合并放置过夜。离心除去不溶的沉淀。测定金属离子溶液中GLP-1(7-37)的浓度。再将沉淀悬浮于磷酸盐缓冲盐水(PBS)中，声处理并放置过夜。再将不溶物质成团并测量GLP-1(7-37)浓度。
实施例35将在pH7-8.5缓冲溶液中的GLP-1(7-37)溶液与某些盐同低分子量聚乙二醇(PEG)的组合物混合而可以得到微晶形式GLP-1(7-37)。表2描述了得到微晶形式GLP-1(7-37)的六个特定组的条件。
表2得到微晶体所选定的试剂试剂 盐 缓冲液 沉淀剂1无 无0.4M酒石酸钾、钠20.2M柠檬酸钠0.1M Tris pH8.5 30％PEG 40030.2M MgCl20.1M HEPES pH7.5 28％PEG 40040.2M MgCl20.1M HEPES pH7.5 30％PEG 40050.5M K2HPO4无20％PEG 80006无 无30％PEG 1500注按1∶1与试剂一起加入在50mM Tris pH8.1中的5mg/mlGLP-1(7-37)料液。观察降落情况并记录晶形或无定形的不溶GLP-1(7-37)存在或不存在。一般来说，低的mW PEG呈现易于产生晶形。Tris是三(羟甲基)氨基甲烷，HEPES是N-2-(羟乙基)哌嗪-N-2-乙烷磺酸。
实施例36要求将GLP-1(7-37)与PEG浓度特定组合以得到微晶形式和高产率。表3表明PEG 600与GLP-1(7-37)浓度的特定组合，与药物的无定形相反，而得到微晶形。也列出不溶形式GLP-1(7-37)的产率。
表3晶形GLP-1(7-37)的形式/产率GLP-1(7-37) 15％22.5％ 30％PEG 600 PEG 600 PEG 6002.0mg/ml 无定形/8％ 无定形/10％ 无定形/8％(形式/产率)3.5mg/ml 晶形/62％ 晶形/26％晶形/59％(形式/产率)5.0mg/ml 无定形/34％ 晶形/63％晶形/72％(形式/产率)6.5mg/ml 无定形/52％ 晶形/76％晶形/82％(形式/产率)8.0mg/ml 无定形/55％ 晶形/82％无定形/66％(形式/产率)9.5mg/ml 无定形/69％ 晶形/85％无定形/83％(形式/产率)
注将在pH8 Tris缓冲液中的20mg/ml GLP-1(7-37)溶液与在H2O和pH8 Tris缓冲液的60％聚乙二醇600(PEG 600)合并得到最终浓度为15～30％PEG和3～10mg/ml GLP-1，而制备GLP-1(7-37)微晶体。在放置过夜后，GLP-1(7-37)微晶体在溶液中产率为50～85％。
实施例37本实施例说明本发明的另一种方式，它包括用各种金属离子处理预生成的GLP-1(7-37)微晶体而得到低溶解度的微晶形。按照实施例22描述，以8mg/ml GLP-1(7-37)和22.5％PEG制备的GLP-1(7-37)微晶体具有与纯的冻干GLP-1(7-37)同样的溶解度。为了具有长效药释放所要求的低溶解度性质，可以按金属∶GLP-1(7-37)以1∶1至260∶1之比的金属盐溶液在室温下处理这些预生成的微晶体过夜。过量金属盐可采用离心/洗涤法予以除去。表4列出了用几种二价阳离子金属盐处理的结果。
表4不同处理时GLP-1(7-37)晶体的溶解度GLP-1(7-37) GLP-1(7-37) GLP-1(7-37)添加剂 (mg/ml) (mg/ml) (mg/ml)(在处理溶液)(在PBS) (在PBS/EDTA)无(PBS)1.2 1.2 未测柠檬酸盐 pH5.2 0.15 未测 未测ZnCl2pH5.2 0.03 0.03 1.1ZnAc pH5.20.01 0.02 1.1ZnAc pH5.20.06 0.02 0.92MgSO4pH5.2 0.50 0.55 未测NiSO4pH5.2 0.10 0.04 0.45MnCl2pH5.2 0.10 0.10 未测CaCl2pH5.2 0.40 0.27 未测注GLP-1(7-37)晶体由在50mM Tris pH8的8mg/ml IST并有加入水中的22.5％PEG 600的溶液中生长。所有附加处理的溶液都是在10mM柠檬酸钠pH5.2或Na MES pH6.5中的100mM二价离子盐。
实施例38采用本文描述的方法，无定形的和微晶形两种低溶解度制剂都是用乙酸锌制备。鼠中皮下注射(每种制剂三个动物)，并在24小时用放射免疫检验法测定GLP-1(7-37)的血浆含量。图8表示与可溶的GLP-1(7-37)皮下对照注射相比，延长药物在血浆中的时间。
实施例3945％(w/v)聚乙二醇3350(PEG)1mg/ml促胰岛激素20mM磷酸盐缓冲液适量灭菌的注射用水(SWFI)用SWFI制备50％(w/w)PEG溶液。另外用无水磷酸二氢钠(26.85mg/ml)和磷酸一氢钠一水合物(1.41mg/ml)制备200mM磷酸盐缓冲液。如必要的话，用氢氧化钠或盐酸将缓冲液的pH调节到pH8。将适量的促胰岛激素溶于足够的缓冲液中以达到10mg/ml促胰岛激素溶液。往促胰岛激素溶液里加入适量PEG溶液，用足量SWFI将该溶液调到所要求的体积。最后的溶液是用0.2μ过滤器无菌过滤并无菌装入管形瓶中。将该溶液(0.5ml)皮下注入鼠中，用RIA检测血浆促胰岛激素含量。
实施例401.32％(w/v)羟乙基纤维素(HEC)1mg/ml促胰岛激素20mM磷酸盐缓冲液100mM氯化钠适量无菌注射用水(SWFI)用SWFI制备2％(w/w)羟乙基纤维素溶液。另外用无水磷酸二氢钠(26.85mg/ml)和磷酸氢二钠一水合物(1.41mg/ml)制备200mM磷酸盐缓冲液，如有必要，用氢氧化钠或盐酸将缓冲液的pH调到pH8。将适量促胰岛激素和氯化钠溶于足量缓冲溶液中以得到10mg/ml促胰岛激素溶液。往促胰岛激素溶液中加入适量的HEC溶液，并用足够量的SWFI将溶液调节到所要求的体积。最后的溶液是用0.2μ过滤器灭菌过滤，并且无菌装入管形瓶中。将这种溶液(0.5ml)皮下注入鼠中，再用RIA检测血浆促胰岛激素量。
实施例4118％(w/v)Pluronic F1271mg/ml促胰岛激素20mM磷酸盐缓冲液适量无菌注射用水(SWFI)用SWFI制备20％(w/w)Pluronic F127溶液。采用有冰浴的Polytron(探针均匀器)溶解该聚合物。另外用无水磷酸二氢钠(26.85mg/ml)和磷酸氢二钠一水合物(1.41mg/ml)制备200mM磷酸盐缓冲液。如必要的话，用氢氧化钠或盐酸将缓冲液的pH调到pH8。将适量促胰岛激素溶于足量缓冲液中以便得到10mg/ml促胰岛激素溶液。将适量Pluronic溶液加到促胰岛激素溶液中，并用足够量的SWFI将该溶液调节到所要求的体积。最后的溶液是用0.2μm过滤器灭菌过滤，并且无菌装入管形瓶中。将该溶液(0.5ml)皮下注入鼠中，接着用RIA检测血浆促胰岛激素含量。
实施例42花生油悬浮液(球磨)1mg/ml促胰岛激素1％Tween 80将Tween 80以1％加到花生油中。这种溶液是用0.2μm过滤器灭菌过滤。然后将固体促胰岛激素悬浮于该油中。采用有SzesvariAttritor的球磨机以40RPM研磨18小时(冷水套)而降低其颗粒度。然后将这种悬浮液装入管形瓶中。将悬浮液(0.5ml)皮下注入鼠中，接着用RIA检测血浆促胰岛激素的含量。
实施例4322.6％(w/v)葡聚糖1mg/ml促胰岛激素20mM磷酸盐缓冲液适量无菌注射用水用SWFI制备50％(w/w)葡聚糖(Dextran)溶液。另外用无水磷酸二氢钠(26.85mg/ml)和磷酸氢二钠一水合物(1.41mg/ml)制备200mM磷酸盐缓冲液。如必要的话，用氢氧化钠或盐酸将该缓冲液的pH调节到pH8。将适量促胰岛激素溶于足够量的缓冲溶液中以得到5.0mg/ml促胰岛激素溶液。将适量重量的葡聚糖溶液加到促胰岛激素溶液中，用足够量的SWFI将溶液调节到所要求的体积。最后的溶液是经0.2μm过滤器无菌过滤，并且无菌充入管形瓶中。将这种溶液(0.5ml)皮下注射到鼠中，接着用RIA检测血浆促胰岛激素含量。
实施例44由磷酸盐缓冲的盐水(PBS)、乙醇和m-甲酚混合物中结晶促胰岛激素。在玻璃管形瓶中用PBS制备均匀的促胰岛激素的浆体(10mg/ml)，并且往瓶里加入很大体积的乙醇(多达浆体的9倍)，同时用磁方法搅拌该瓶中的溶液。生成了很细的无定形促胰岛激素颗粒。往瓶里加入m-甲酚以便得到的m-甲酚浓度为1％(v/v)。盖紧瓶以防止溶液蒸发。结晶混合物于室温下贮存二天，从无定形颗粒长成针形结晶片。晶体长度为50～200μm，宽为2～4μm。
实施例45将促胰岛激素(1～4mg/ml)溶于pH值高于8的1％硫酸钠(或乙酸钠、氯化钠或硫酸铵)溶液中，用稀HCl将该溶液的pH降低到6.0～7.5。将清彻溶液置于室温下，二天后，根据结晶条件可得到针形或片形晶体。
实施例46将GLP-1(7-37)溶于含有0.1～0.2M NaCl，pH8.5～9.5的50mM甘油缓冲液中，其量为1～5mg/ml。加入锌盐(乙酸盐或氯化物)溶液以得到锌与GLP-1(7-37)摩尔比为0.5∶1至1.5∶1的锌盐溶液。GLP-1(7-37)晶体在室温下生长过夜，产率为70～97％。
实施例47采用溶于pH8～9.5的100mM Tris中的10～20mg/ml的肽，使用蒸汽扩散法可以生长出GLP-1(7-37)晶体。肽溶液与含有0.5～2.5M NaCl的相同缓冲溶液按1∶1混合，然后在密封系统中对很高浓度缓冲溶液(即有0.5～2.5M NaCl的TRis)平衡。
顺序表(1)Seq.ID No.1资料(i)顺序特征(A)长37氨基酸(B)类型氨基酸(C)股单的(D)拓扑结构直线(ii)分子类型肽(iii)假设无(iv)反义无(v)片段类型N-端(vi)来源(A)生物体N/A(B)菌株N/A(C)个体分离物N/A(E)单模标本N/A(H)细胞株N/A(vii)直接来源(A)库N/A(B)克隆N/A(viii)基因组中的位置(A)染色体/节N/A(B)图的位置N/A
(C)单位N/A(xi)顺序描述Seq.ID.No.1His Asp Glu Phe Glu Arg His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val1 5 10 15Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu20 25 30Val Lys Gly Arg Gly35(2)Seq.ID No.2的资料(i)顺序特征(A)长31氨基酸(B)类型氨基酸(C)股单的(D)拓扑结构直线(ii)分子类型肽(iii)假设的无(iv)反义无(v)片段类型N-端(vi)来源(A)生物体N/A(B)菌株N/A(C)个体分离物N/A(E)单模标本N/A(H)细胞株N/A(vii)直接来源(A)库N/A
(B)克隆N/A(viii)基因组中位置(A)染色体/节N/A(B)图位置N/A(C)单位N/A(xi)顺序描述SEQ.ID.No.2His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly1 5 10 15Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly20 25 30(3)SEQ.ID No.3资料(i)顺序特征(A)长30个氨基酸(B)类型氨基酸(C)股单的(D)拓扑结构直线(ii)分子类型肽(iii)假设无(iv)反义无(v)片段类型N-端(vi)来源(A)生物体N/A(B)菌株N/A(C)个体分离物N/A
(E)单模标本N/A(H)细胞株N/A(vii)直接来源(A)库N/A(B)克隆N/A(viii)基因组中位置(A)染色体/节N/A(B)图位置N/A(C)单位N/A(xi)顺序描述SEQ.ID.No.3His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly1 5 10 15Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg20 25 30(4)SEQ.ID No.4资料(i)顺序特征(A)长29个氨基酸(B)类型氨基酸(C)股单的(D)拓扑结构直线(ii)分子类型肽(iii)假设无(iv)反义无(v)片段类型N-端
(vi)来源(A)生物体N/A(B)菌株N/A(C)个体分离物N/A(E)单模标本N/A(H)细胞株N/A(vii)直接来源(A)库N/A(B)克隆N/A(viii)基因组中位置(A)染色体/节N/A(B)图位置N/A(xi)顺序描述SEQ.ID.No.4His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Glyl 5 10 15Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly20 25(5)SEQ.ID No.5资料(i)顺序特征(A)长28个氨基酸(B)类型氨基酸(C)股单的(D)拓扑结构直线(ii)分子类型肽
(iii)假设无(iv)反义无(v)片段类型N-端(vi)来源(A)生物体N/A(B)菌株N/A(C)个体分离物N/A(E)单模标本N/A(H)细胞株N/A(vii)直接来源(A)库N/A(B)克隆N/A(viii)基因组中位置(A)染色体/节N/A(B)图位置N/A(xi)顺序描述SEQ.ID.No.5His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly1 5 10 15Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys20 25(6)SEQ.ID No.6资料(i)顺序特征(A)长36个氨基酸
(B)类型氨基酸(C)股单的(D)拓扑结构直线(ii)分子类型肽(iii)假设无(iv)反义无(v)片段类型N-端(vi)来源(A)生物体N/A(B)菌株N/A(C)个体分离物N/A(E)单模标本N/A(H)细胞株N/A(vii)直接来源(A)库N/A(B)克隆N/A(viii)基因组中位置(A)染色体/节N/A(B)图位置N/A(xi)顺序描述SEQ.ID.No.6
His Asp Glu Phe Glu Arg His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val1 5 10 15Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu20 25 30Val Lys Gly Arg35(7)SEQ.ID No.7资料(i)顺序特征(A)长27个氨基酸(B)类型氨基酸(C)股单的(D)拓扑结构直线(ii)分子类型肽(iii)假设无(iv)反义无(v)片段类型N-端(vi)来源(A)生物体N/A(B)菌株N/A(C)个体分离物N/A(E)单模标本N/A(H)细胞株N/A(vii)直接来源(A)库N/A(B)克隆N/A
(viii)基因组中位置(A)染色体/节N/A(B)图位置N/A(xi)顺序描述SEQ.ID.No.7His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly1 5 10 15Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val20 2权利要求
1.在需要治疗哺乳动物中与非胰岛素相关的糖尿病时治疗这种病的方法，该方法包括在长时间内重复给药一种在每次给药后具有延长时间作用的化合物，所述延长时间作用对于达到哺乳动物中持续糖血控制是必需的，所述的化合物选自下列化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly；(顺序ID NO2)(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)式中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH式中W是选自于下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-A la-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时其衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物；(d)包括下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH式中R是选自下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-GlyGln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly；(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg；(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly；(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys；(顺序ID NO5)以及(e)从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，所述给药是皮下、肌肉内、经皮肤的通过注入泵、口吸、鼻吸或胃肠道的。
2.含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自下述的化合物(a)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)(b)具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH式中W是选自下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时其衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH式中R是选自下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys；(顺序1D NO5)从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)一种能够延长所述化合物作用以达到持续糖血控制的聚合物，所述聚合物选自聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、选自纤维素、纤维素衍生物、脱乙酰壳多糖、阿拉伯胶、刺梧桐树脂、瓜耳树胶、Xanthan树胶、黄蓍胶、藻酸、角叉胶、琼脂糖和furcellarans的多糖、葡聚糖、淀粉、淀粉衍生物、透明质酸、聚酯、聚酰胺、聚酸酐和聚正酯。
3.一种含有如下化合物的物质化合物(i)一种选自下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自于下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH式中W是选自下述的氨基酸His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种含下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH式中R是选自下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly；(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg；(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly；(顺序ID NO4)andHis-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys；(顺序ID NO5)以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，(ii)一种药学上可接受的与水不相混的油悬浮液，它能延长所述化合物的作用以达到持续糖血控制，所述的油选自花生油、芝麻油、杏仁油、蓖麻油、山茶油、棉籽油、橄榄油、玉米油、豆油、红花油、椰子油、脂肪酸的酯类和脂肪醇的酯类。
4.根据权利要求3所述的组合物，它还含有润湿剂，其中所述润湿剂是非离子表面活性，所述组合物还含有悬浮剂。
5.一种含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自于下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自以下的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时其衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-R-COOH式中R是选自下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)，以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)锌(II)，它与肽络合，所述组合物能达到持续糖血控制并且呈无定形、结晶形或含水悬浮液形式。
6.一种含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自于下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH式中W是选自于下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6在哺乳动物中处理时其衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种含有下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH式中R是选自如下的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)，以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)一种选自Ni(II)、Co(II)、Mg(II)、Ca(II)、K(I)、Mn(II)、Fe(II)和Cu(II)的金属，所述组合物能达到持续糖血控制。
7.一种含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自下列的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自于下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH式中W是选自下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序D NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Aia-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序NO6)当在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种含有下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH式中R是选自如下的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg，(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly，(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys，(顺序ID NO5)以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)一种碱性多肽，其中所述组合物是能持续糖血控制的含水悬浮液。
8.一种含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)，(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH式中W是选自下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种含有下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH式中R是选自下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Serr-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-TrP-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)，His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)，His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)，和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-TrP-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)，以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)一种苯酚化合物，其中所述组合物是能持续糖血控制的含水悬浮液，所述苯酚化合物选自苯酚、甲酚、间苯二酚和对羟基苯甲酸甲酯。
9.一种含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自于下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)，(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自于下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种含有下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH式中R是选自如下的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)，His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)，His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)，和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)，以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)碱性多肽和苯酚化合物，其中这种组合物是能持续血糖控制的含水悬浮液。
10.一种含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自于下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种含有下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH其中R是选自如下的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Aa-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg，(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly，(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys，(顺序ID NO5)以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)碱性多肽、苯酚化合物以及金属离子，其中所述组合物是能持续糖血控制的含水悬浮液。
11.一种含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自于下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)，(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自于下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种含有下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH式中R是选自下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO2)，His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO3)，His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly(顺序ID NO4)，和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(顺序ID NO5)；以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐，(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)所述的肽及其衍生物，经受形成无定形或晶形物质的条件，其中所述的条件是高切力、与盐接触或它们的结合。
12.根据权利要求11所述的组合物，其中所述的盐选自硫酸铵、硫酸钠、硫酸锂、氯化锂、柠檬酸钠、柠檬酸铵、碗酸钠、磷酸钾、氯化钠、氯化钾、氯化铵、乙酸钠、乙酸铵、硫酸镁、氯化钙、硝酸铵和甲酸钠以及其组合物。
13.一种含有下述化合物的物质组合物(i)一种选自于下述的化合物(a)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)(b)一种具有下述氨基酸顺序的肽His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X(顺序ID NO7)其中X选自下述化合物(A)Lys，(B)Lys-Gly，(C)Lys-Gly-Arg，(c)一种含有下述基本结构的多肽衍生物H2N-W-COOH其中W是选自下述的氨基酸顺序His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly(顺序ID NO1)和His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg(顺序ID NO6)当在哺乳动物中处理时该衍生物形成具有促胰岛活性的多肽衍生物，(d)一种包括下述基本结构的多肽衍生物，H2N-R-COOH其中R是选自下述的氨基酸顺序His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly，(顺序ID NO2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg，(顺序ID NO3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly，(顺序ID NO4)和His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-TrpLeu-Val-Lys，(顺序ID NO5)以及从(a)到(d)所述肽的衍生物，其中所述衍生物选自下述化合物(1)药学上可接受的所述肽的酸加成盐；(2)药学上可接受的所述肽的羧酸盐，(3)药学上可接受的所述肽的碱加成盐，(4)药学上可接受的所述肽的低级烷基酯，及(5)药学上可接受的所述肽的酰胺，其中所述药学上可接受的酰胺选自酰胺、低级烷基酰胺和低级二烷基酰胺，以及(ii)能持续糖血控制的脂质体释放系统。
14.在需要治疗哺乳动物中与非胰岛素相关的糖尿病时治疗这种病的方法，其中包括延长时间给药根据权利要求2、3、5、6、7、8、9、10、11或13中的任一权利要求所述的组合物。
全文摘要
本发明公开了一种治疗哺乳动物中与非胰岛素相关的糖尿病的方法，其中包括延长时间给药GLP－1(7－37)及其相关的肽。还公开了用于延长肽的给药的组合物。
文档编号A61K38/00GK1544084SQ0210237
公开日2004年11月10日 申请日期1994年4月7日 优先权日1993年4月7日
发明者丹尼斯·Ｅ·丹利, 罗伯特·A·盖尔芬德, 基兰·F·盖根, 金睿淑, 威廉·J·兰伯特, 戚洪, A 盖尔芬德, F 盖根, J 兰伯特, 丹尼斯 E 丹利 申请人:西奥斯公司