专利名称：胡黄连总甙提取物及制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药领域。具体涉及一种胡黄连总甙提取物及制备方法和应用。
背景技术：
西藏胡黄连为玄参科植物胡黄连Picrorhiza scrophulariifloraPennell的干燥根茎，具有清湿热、除骨蒸、消疳热的功效。可用于湿热泻痢、黄疸、痔疾、骨蒸潮热、小儿疳热，文献有报道同属植物印度胡黄连(Picrorhiza Kurrooa)的根和根茎提取物有抗肝毒作用，促进胆汁分泌作用和降血糖、降血脂作用。目前对西藏胡黄连的化学成份研究已有较大进展，但至今尚未有将西藏胡黄连甙分离，用于保肝降脂的报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种含有高含量活性成份的胡黄连总甙提取物。
本发明公开的胡黄连总甙提取物是以西藏胡黄连根茎为原料提取获得的干浸膏，胡黄连甙II的含量为35-50％(w/w)。
本发明所要解决的另一技术问题是提供上述胡黄连总甙提取物的制备方法。
本发明公开的制备胡黄连总甙提取物方法包括(1)西藏胡黄连粗提取物的提取a、乙醇提取法以西藏胡黄连根茎为原料，粉碎成细粉加6-8倍95％乙醇，加热回流提取2-3次，每次1小时，过滤，合并滤液，回收乙醇所得胡黄连干浸膏，得率15-20％，其中胡黄连II含量为7％-12.0％。或b、水提酒沉法取西藏胡黄连根茎粉碎成细粉，加6-8倍量蒸馏水加热提取2-3次，每次1小时，水提取液经浓缩至一定体积后用药用酒精调节至80％含醇量进行沉降，过滤后滤液回收乙醇并浓缩成浸膏后干燥所得粗提物，得率为15-20％，其中胡黄连II含量为7％-12.0％。
(2)西藏胡黄连总甙部分的分离以西藏胡黄连粗提取物为原料，用适量蒸馏水溶解后，上AB-8型大孔树脂柱吸附，干浸膏和树脂的比例为1∶10-15；先用水洗至Molish反应呈阴性，再用30-90％乙醇洗脱，1G粗提取物约用130-170ml溶剂洗脱，弃取最初和最后洗脱液。
中间部分洗脱液经浓缩后再次上柱，用30-50％乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩成浸膏，低温真空干燥，即得西藏胡黄连总甙部分提取物，其中胡黄连总甙II的含量为35-50％，得率为16-20％。
本发明所有要解决的再一技术问题是上述胡黄连总甙提取物在制备保肝降脂药物中的应用。
本发明胡黄连总甙提取物可作为保肝降脂药物的活性成份，与药用辅料配制成各种医学上可接受的药物制剂。
将本发明西藏胡黄连总甙提取物经口给予大鼠5G/KG体重后，未出现明显中毒症状，也未发生死亡，表明西藏胡黄连总甙部分对大鼠的急性最大耐受剂量均大于5G/KG。
将本发明西藏胡黄连总甙提取物分别以0.1-0.2G/KG/天经口服先给药四天，能够预防四氯化碳所致急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)的升高。
以0.2G/KG/天给药三天，能够降低由CCl4造模所致急性肝损伤小鼠血清谷草转氨酶(ALT)的升高(P＜0.001)，对照组联苯双酯无此作用。
以0.2G/KG/天给药三天，能够降低α-萘异疏氰酸酯造模后所致黄疸性肝损伤的(T-BIL)的升高(P＜0.05)，对照组去氰脂酸无此作用。
以0.05-0.1G/KG给药能降低由卡加苗加脂多糖所致免疫性肝损伤小鼠ALT升高(P0.05，P＜0.001)，0.1G/KG能降低AST升高(P＜0.01)，对照组联苯双酯无此作用。
用本发明西藏胡黄连总甙提取物对大鼠进行酒精性肝损伤的保肝作用试验(1)同步给予酒精和给药45天(2)同步给予酒精和给药60天(3)同步给予酒精和给药90天(4)上述三组的病理切片试验结果表明西藏胡黄连总甙部分0.5-0.1-0.2G/KG给药，能降低酒精所致肝损伤大鼠肝脏指数的升高(P＜0.01，P＜0.001，P＜0.001)，对照组联苯双酯也有作用(P＜0.01)；西藏胡黄连总甙部分0.5-0.1G/KG给药，能降低酒精所致肝损伤大鼠血清总胆固醇(TC)的升高(P＜0.05，P＜0.01)，对照组联苯双酯也有作用(P＜0.05)；0.5-0.1-0.2G/KG给药能降低血清甘油的升高(P＜0.001)；对照组联苯双酯也有作用(P＜0.05)。
西藏胡黄连总甙部分0.1-0.2G/KG给药能够使酒精所致慢性肝损伤大鼠体重增加(P＜0.001，P＜0.05)；肝重增加(P＜0.001，P＜0.001)，对照组无此作用。
0.5-0.1-0.2G/KG给药对ALT无明显影响，对AST和对照组联苯双酯一样引起升高(P＜0.001)，0.5-0.1-0.2G/KG给药使甘油三酯升高，对胆固醇无明显影响，而对照组使胆固醇、甘油三酯都降低(P＜0.001，P＜0.05)，各剂量组对总蛋白和白蛋白无明显影响。
西藏胡黄连总甙部分能够使酒精所致肝损伤大鼠体重增加；能够降低酒精所致慢性肝损伤大鼠肝脏指数得升高；能够降低酒精所致慢性肝损伤大鼠总胆固醇和甘油三酯的升高；能够降低酒精所致慢性肝损伤大鼠总蛋白的升高和白蛋白的升高。
本发明公开的胡黄连总甙提取物，活性成分含量高，保肝降脂作用显著，对制备保肝药物具有很好的应用前景。
具体实施例方式
实施例1采用水提酒沉法提取西藏胡黄连粗提取物，称取西藏胡黄连根茎细粉1000G，加8倍量蒸馏水加热提取三次，每次1小时，水提取液经浓缩至一定体积后用药用酒精调节至80％含醇量进行沉降，过滤后滤液回收乙醇并浓缩成浸膏后干燥所得粗提物。得率为20％，含量为19.37％(以胡黄连总甙II为标准)。取上述粗提物用水溶解，上AB-8型大孔树脂，用水洗去大量杂质后用75％乙醇洗脱，洗脱液浓缩至一定体积后再上AB-8型大孔树脂，用30％乙醇洗脱，洗脱液浓缩后于60℃真空干燥8小时，得胡黄连甙II为45.6％的提取物，得率为18％。
实施例2采用乙醇加热回流方法提取胡黄连粗提取物，称取西藏胡黄连根茎细粉1000G，用95％乙醇加热回流提取三次，每次1小时，提取液经回收乙醇后浓缩，干燥所得粗提物，得率为19.5％，其中胡黄连甙II含量为8.7％。取上述粗提物用水溶解后，上AB-8型大孔树脂，用水洗去杂质后用40％乙醇洗脱，洗脱液浓缩至一定体积后再上柱，用30％乙醇洗脱，洗脱液浓缩后于60℃真空干燥8小时，得到含胡黄连甙II44.2％的提取物，得率为18.5％。
权利要求
1.胡黄连总甙提取物，其特征在于该提取物是以西藏胡黄连根茎为原料提取获得的干浸膏，胡黄连甙II的重量百分含量为35-50％。
2.一种如权利要求1所述的胡黄连总甙提取物的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)西藏胡黄连粗提取物的提取以西藏胡黄连根茎为原料，粉碎成细粉，采用乙醇提取法或水提醇沉法制得胡黄连干浸膏，胡黄连II含量为7％-12.0％；(2)西藏胡黄连总甙部分的分离以西藏胡黄连粗提取物为原料，用适量蒸馏水溶解后，上AB-8型大孔树脂柱吸附，干浸膏和树脂的比例为1∶10-15；先用水洗至Molish反应呈阴性，再用30-90％乙醇洗脱，1G粗提取物约用130-170ml溶剂洗脱，弃取最初和最后洗脱液；中间部分洗脱液经浓缩后再次上柱，用30-50％乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩成浸膏，低温真空干燥，即得西藏胡黄连总甙部分提取物，其中胡黄连总甙II的含量为35-50％，得率为16-20％。
3.一种如权利要求2所述的胡黄连总甙提取物的制备方法，其特征在于其中所述的西藏胡黄连粗提取物的提取采用乙醇提取法步骤包括以西藏胡黄连根茎为原料，粉碎成细粉加6-8倍95％乙醇，加热回流提取2-3次，每次1小时，过滤，合并滤液，回收乙醇所得胡黄连干浸膏，得率15-20％，其中胡黄连II含量为7％-12.0％。
4.一种如权利要求2所述的胡黄连总甙提取物的制备方法，其特征在于其中所述的西藏胡黄连粗提取物的提取采用水提醇沉法步骤包括取西藏胡黄连根茎粉碎成细粉，加6-8倍量蒸馏水加热提取2-3次，每次1小时，水提取液经浓缩至一定体积后用药用酒精调节至80％含醇量进行沉降，过滤后滤液回收乙醇并浓缩成浸膏后干燥所得粗提物，得率为15-20％，其中胡黄连II含量为7％-12.0％。
5.一种如权利要求1所述的胡黄连总甙提取物在制备保肝降脂药物中的应用。
6.一种如权利要求4所述的胡黄连总甙提取物在制备保肝降脂药物中的应用，其特征在于其中所述的胡黄连总甙提取物可与药用辅料配制成各种医学上可接受的药物制剂。
全文摘要
本发明涉及一种胡黄连总甙提取物及制备方法和应用。本发明公开的胡黄连总甙提取物是以西藏胡黄连根茎为原料提取获得的干浸膏，胡黄连甙II的含量为35－50％(w/w)。本发明还公开了其制备方法以及在制备保肝降脂药物中的应用。
文档编号A61P3/00GK1498892SQ0214504
公开日2004年5月26日 申请日期2002年11月5日 优先权日2002年11月5日
发明者王智华, 洪筱坤, 蓝德刚, 王强 申请人:维京仲华(上海)生物医药科技有限公司, 维京仲华(上海)生物医药科技有限公