专利名称：一种梓醇的提取方法
技术领域：
本发明涉及中药有效成分的提取方法，具体涉及从地黄或地黄茎中提取梓醇的提 取方法。
背景技术：
梓醇是地黄最主要有效成分之一，是其“滋阴，，作用的有效活性成分，为一种不很 稳定的环烯醚萜苷类化合物，常与多种环烯醚萜苷类成分如桃叶珊瑚苷和胡黄连苷等同时 存在于植物组织中，具有利尿、缓泻、降血糖、保肝及抗衰老等多种药理活性。研究表明，在 暂时缺血情况下，梓醇有显著的神经保护功能，并发现梓醇能激活脑神经元，可以治疗因外 伤、代谢障碍、脑缺血和帕金森氏病等引起的脑神经病。地黄为玄参科植物地黄Rehmarmia glutinosa Libsch的块根。是常用补益中药之 一，临床应用极为广泛。据文献报道，主要成分含有植物留醇类、糖类、氨基酸、梓醇等。梓 醇是地黄中含量最高的环烯醚萜单糖苷，为地黄的主要活性，现代药理研究表明其具有降 血糖、利尿、缓泻、抗癌、抗炎等作用，另外对脑缺血受损神经还有保护作用，有望成为潜在 的治疗帕金森病和早老性痴呆的药物。国内专家学者的研究和发明主要是从地黄根中提取梓醇，匡岩巍等(匡岩巍，卢 兖伟，吴祖泽.大孔吸附树脂分离纯化鲜地黄叶中梓醇的初步研究，军事医学科学院院刊， 2009,33(6),550-553)研究了采用大孔吸附树脂从鲜地黄叶中提取分离梓醇的方法。地黄 茎通常是在种植和收割时，仅作为饲料、肥料，甚至往往是被废弃的。通过研究发现，相比地 黄根，在地黄茎中梓醇含量比较多，糖类相对较少，能够有效的作为梓醇提取的材料。本方 法利用废弃的地黄茎，采用废物利用的新工艺，具有很好的实用价值和经济效益。梓醇在加热条件下易水解和氧化，所以现有技术中在提取梓醇方面有很大限制。
发明内容
本发明的一个目的是为解决上述现有技术提取时间长，转化率低，技术操作复杂 等问题，提供一种操作便捷、转化的可靠性、产品回收率高，可达到工业化生产要求的梓醇 的提取方法。工艺研究(1)选用鲜地黄或鲜地黄茎，洗净、切片，以质量计，加入0. 1-0. 5%的复合酶溶液 酶解1-3小时，然后加5-20质量倍数的70-95%乙醇，常温下在勻浆提取装置中勻浆提取 5-10min,连续2次或2次以上，勻浆液转移后在超声波作用下5-30min，合并勻浆液，滤渣取 液，滤液减压浓缩成稠浸膏。(2)将稠浸膏用2倍以上的水稀释，加到预先用95%乙醇浸泡过的大孔树脂，洗 脱，将洗脱液减压浓缩成浸膏；(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均勻，过硅胶柱，用混合溶剂冲洗柱子，收集混合 溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到纯度达到99 %的梓醇纯品。
步骤O)中洗脱时用5-20%的乙醇洗脱。步骤O)中洗脱时也可以先用水洗，水的量为稠浸膏量的0.01-0. 5倍，再用 5-20%的乙醇洗脱。步骤(3)中混合溶剂为甲醇乙酸乙酯1-3 1或者正丁醇乙酸乙酯甲醇 2-4 1-3 1。所用超声波功率为80-100W的超声波。所述复合酶溶液是质量百分含量为0. 1-0. 5 %的溶液，所述复合酶溶液质量 浓度为0. 1-0.5% ；所述复合酶为纤维素酶与酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶的混合物；纤维素 酶与酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，比例为1 0.5-1 0.01-0.5 0.01-1 ； 所述复合酶中，纤维素酶与酒曲、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，优选比例为 1 0. 6-0. 8 0. 05-0. 2 0. 05-0. 5。所述蛋白酶优选酸性蛋白酶。所述酶解时间1-3小时，酶解温度40_50°C，酶解时Wi值为4_6。Ph值通过盐酸或硫酸调节，优选盐酸。本发明的有益效果在于本发明在总结前人的工作和自己探索的基础上，经反复的研究改进，采用酶法协 同超声波法进行提取，解决了常规生产中梓醇在加热条件下易水解和氧化的难题，使原料 中的有效物质最大程度的被提取出来，极大地地提高了生产效率和转化率，使得产品质量 更进一步提高，且产品纯度高，适合工业化生产。在提取过程中加入抗氧化剂，进一步解决了常规生产中梓醇在加热条件下易水解 和氧化的难题，提高了产率和产量，梓醇遇到部分酶，如β葡萄糖苷酶，可以使梓醇降解， 本发明中采用复合酶，本复合酶很好的破坏细胞壁等影响梓醇析出的壁垒，提高生产效率， 并且因为复合酶中各种成分相互作用避免了使梓醇降解的情况。本发明可以利用废弃的地黄茎，采用废物利用的新工艺，具有很好的实用价值和 经济效益，适宜推广应用。
具体实施例方式下面结合实施例来进一步说明本发明，但并不作为对本发明的限定。实施例1(1)选用IOOkg鲜地黄茎，洗净、切片，以质量计，加入0.2kg的复合酶溶液酶解2 小时，然后加500kg的75%乙醇，分为3份，加入1份在酶解后的原料中，常温下在勻浆提取 装置中勻浆提取8min，转移勻浆液，然后将剩余的乙醇溶液中的1份加入勻浆后的物质中， 重复勻浆过程，勻浆过程完成后，再次重复操作，勻浆液转移后在超声波作用下15min，合并 勻浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩成稠浸膏；得到5kg稠浸膏。(2)将稠浸膏用IOkg水稀释，加到预先用95%乙醇浸泡过的大孔树脂中，过树脂， 然后洗脱，将洗脱液减压浓缩成浸膏，得到3kg浸膏；(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均勻，过硅胶柱，用甲醇乙酸乙酯2 1的混合 溶剂冲洗硅胶柱，收集混合溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。所述步骤O)中洗脱时先用少量水洗，再用5-20%的乙醇洗脱。所用水的量为
40. 5kg。所用超声波功率为80-100W的超声波。所述复合酶溶液为质量百分含量为0. 2 %的溶液，所述复合酶中，纤维素酶与酒 曲、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，比例为1 0.8 0. 1 0.3。所述酶解时间1-3小时，酶解温度40_50°C，酶解时Wi值为4_6。产量为368g，产率达90%以上，产品纯度为99. 13%。原料选用河南武陵生产的地黄的茎，经精密测量，原料中的梓醇含量不超过 4. 2mg/g0实施例2为避免梓醇的损失，直接用10%乙醇洗脱，而不用水先洗，可提高产量、提高制备 样品纯度。其余同实施例1。产量为370g，产品纯度为99. 07%。实施例3所述酶解液为纤维素酶、酒曲酶、淀粉酶、酸性蛋白酶复合酶，比例为 1 0. 6 0. 2 0.3，其余同实施例2。产量为365g，产品纯度为99. 12%。实施例4(1)选用IOOkg鲜地黄，洗净、切片，以质量计，加入0. Ikg的复合酶溶液酶解1-3 小时，然后加800kg质量倍数的95%乙醇，常温下在勻浆提取装置中勻浆提取5min，连续4 次，勻浆液转移后在超声波作用下5min，合并勻浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩成稠浸膏；(2)将稠浸膏用2倍以上的水稀释，加到预先用95%乙醇浸泡过的大孔树脂，先用 0. 8kg水洗，再用5-20%的乙醇洗脱；将洗脱液减压浓缩成浸膏；(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均勻，过硅胶柱，用正丁醇乙酸乙酯甲醇 2:1: 1混合溶剂冲洗柱子，收集混合溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。 其余同实施例1，产量为367g，产品纯度为98.9%。实施例5(1)选用鲜地黄和鲜地黄茎，洗净、切片，以质量计，加入0. 5kg的复合酶溶液酶解 3小时，然后加20质量倍数的70%乙醇，常温下在勻浆提取装置中勻浆提取lOmin，连续5 次，勻浆液转移后在超声波作用下30min，合并勻浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩成稠浸膏；(2)将稠浸膏用5倍的水稀释，加到预先用95%乙醇浸泡过的大孔树脂，洗脱，将 洗脱液减压浓缩成浸膏；(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均勻，过硅胶柱，用正丁醇乙酸乙酯甲醇 4:3: 1混合溶剂冲洗柱子，收集混合溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。所述步骤(2)中洗脱时用5-20%的乙醇洗脱。其余同实施例1，产量为366g，产品 纯度为98.9%。实施例6-13所述酶解液为纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶的复合酶以下表比例的 组合；酶解温度，酶解时间也如下表所示，其余同实施例2。
权利要求
1.一种梓醇的提取方法，其特征在于所述工艺如下(1)选用鲜地黄或鲜地黄茎，洗净、切片，以质量计，加入0.1-0. 5%的复合酶溶液酶 解1-3小时，然后加5-20质量倍数的70-95%乙醇，常温下在勻浆提取装置中勻浆提取 5-10min,连续2次或2次以上，勻浆液转移后在超声波作用下5-30min，合并勻浆液，滤渣取 液，滤液减压浓缩成稠浸膏；(2)将稠浸膏用2倍以上的水稀释，加到预先用95%乙醇浸泡过的大孔树脂，洗脱，将 洗脱液减压浓缩成浸膏；(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均勻，过硅胶柱，用混合溶剂冲洗柱子，收集混合溶 剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。
2.如权利要求1所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于所述步骤O)中洗脱时用 5-20%的乙醇洗脱。
3.如权利要求2所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于所述步骤O)中洗脱时先 用水洗，再用5-20%的乙醇洗脱。
4.如权利要求1所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于所用超声波功率为80-100W 的超声波；所述步骤(3)中混合溶剂为甲醇乙酸乙酯1-3 1或者正丁醇乙酸乙酯 甲醇 2-4 1-3 1。
5.如权利要求1所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于所述复合酶溶液质量浓度 为0. 1-0. 5% ；所述复合酶为纤维素酶与酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶的混合物；纤维素酶与酒 曲酶、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，比例为1 0.5-1 0.01-0.5 0.01-1;酶解时间为 0. 5-24小时，酶解温度为15-700C O
6.如权利要求5所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于所述复合酶中，纤维素酶与 酒曲、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，比例为1 0.6-0.8 0. 05-0. 2 0.05-0.5。
7.如权利要求5所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于所述酶解时间1-3小时，酶 解温度40-50°C，酶解时Wi值为4-6。
8.如权利要求5所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
全文摘要
本发明涉及药物制备领域，是一种梓醇的制备方法，解决了现有技术梓醇的制备转化率低，产量低，产品品质不好的问题，工艺如下原料洗净、切片，后酶解，然后加乙醇，常温下在匀浆提取装置中匀浆提取2次或2次以上，合并匀浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩，稠浸膏加水稀释，加到大孔树脂中，洗脱，将洗脱液减压浓缩成浸膏；在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均匀，过硅胶柱，洗脱液减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。通过本发明的方法极大地提高了生产效率和转化率，促使原料中的有效物质更多的转化为梓醇，使得产品质量更进一步提高，且产品纯度高，适合工业化生产。
文档编号C07H1/08GK102127131SQ20101052943
公开日2011年7月20日 申请日期2010年11月3日 优先权日2010年11月3日
发明者张守力 申请人:张守力