一种虾青素的提取方法
【专利摘要】本发明公开了一种虾青素的提取方法，属于提取技术领域。本发明取硝酸盐、钾、胺类物质与蒸馏水混合，再添加2,4?二氯苯氧乙酸、萘乙酸和6苄基嘌呤制得营养物，经灭菌后，与无菌水混合制得培养液，将雨生红球藻移入其中培养，用有机物对培养后的雨生红球藻反复淋洗，得发霉物，取1/2发霉物萃取得雨生红球藻酶，与剩下的1/2发霉物混合酶解后，经过滤、离心分离、浓缩、冷冻、干燥得到虾青素。本发明的有益效果是：本发明制备步骤简单，对设备要求低，成本低于其他成本21.2%以上；所得产品虾青素含量高于其他产品19.5%以上，纯度高。
【专利说明】
一种虾青素的提取方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种虾青素的提取方法，属于提取技术领域。
【背景技术】
[0002]虾青素是目前具有最强抗氧化活性的类胡萝卜素，其抗氧化活性是维生素E、β_胡萝卜素的500倍以上。虾青素还具有抗肿瘤、降血脂、延缓衰老等功能，在食品、化妆品以及其他行业具有广泛用途，市场前景广阔。同时，作为脂溶性的鲜红色色素，在食品工业中可为多种食品着色，增加食品的色泽美感;用于观赏性鱼虾的养殖中，也可增加色泽，增强观感，提高其经济价值。虾青素具有水不溶性和亲脂性，溶于吡啶、苯、二氯甲烷等有机溶剂，微溶于石油醚、乙醇、甲醇、乙醚等大多数有机溶剂。虾青素为长链不饱和双键结构体系，性质不稳定，易于氧化和降解，对热、氧、自然光、紫外光敏感。因此，生物体中的虾青素大多以单酯或双酯的形式存在。虾青素结构中具有羟基，可与羧基结合生成较为稳定的虾青素酯。目前，用于虾青素提取的方法主要有溶剂浸提法和超临界二氧化碳萃取法。主要应用的是超临界二氧化碳萃取，虽可以有效地提取虾青素并最大限度地避免其降解，但对设备的要求很高，价格昂贵，且二氧化碳用量大，提取物中虾青素含量较低，阻碍了其大规模工业生产。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题:针对超临界二氧化碳萃取虾青素，对设备的要求高，且二氧化碳用量大，提取物中虾青素含量较低的弊端，提供了一种取硝酸盐、钾、胺类物质与蒸馏水混合，再添加2，4_ 二氯苯氧乙酸、萘乙酸和6苄基嘌呤制得营养物，经灭菌后，与无菌水混合制得培养液，将雨生红球藻移入其中培养，用有机物对培养后的雨生红球藻反复淋洗，得发霉物，取1/2发霉物萃取得雨生红球藻酶，与剩下的1/2发霉物混合酶解后，经过滤、离心分离、浓缩、冷冻、干燥得到虾青素的方法。本发明制备步骤简单，所得产品虾青素含量高。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是:
(1)按重量百份比计，分别称取5?10份硝酸钾、5?10份硝酸铵、5?10份磷酸二氢钾、2?3份硫酸镁、3?5份氯化钙、5?8份碘化钾、3?5份七水硫酸锌、7?14份七水合硫酸亚铁、35?65份蒸馈水，在300r/min下搅拌混合，得混合物；
(2)将上述所得混合物置于300?500W超声分散器中，进行超声分散处理4?6h，随后向其中加入混合物质量5?7%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物质量3?5%萘乙酸和混合物质量4?6%6苄基嘌呤，搅拌使其充分混合均匀，得营养物；
(3)将上述所得的营养物在压力为97?99kPa，温度为120?121°C下，灭菌18?20min，随后按质量比3:2，将无菌水添加至灭菌后的营养物中，制得培养液，再将雨生红球藻移入培养液中，在25?28 °C下培养8?10天；
(4)待培养完后，将培养后的雨生红球藻置于阴暗潮湿处，放置7?9天，每隔6?8h依次用30?40mL乙酸乙酯和25?35mL油酸将雨生红球藻淋洗一次，使其自然发霉，待其霉菌长至1?15cm时，停止淋洗，得发霉物；
(5)称取1/2上述所得的发霉物，放入萃取机中，同时向萃取机中加入发霉物质量35?40%醋酸丁酯，逆流萃取4?6h，得丁酯萃取液，向其中加入10?12mL枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液，浸泡20?30min，再向其中加入30?40mL醋酸丁酯，逆流萃取2?3h，得雨生红球藻酶；
(6)按质量比3:2，将剩余1/2发霉物添加至上述所得的雨生红球藻酶中，搅拌混合均勾，酶解2?3天，过滤得酶解液，并将酶解液置于3200r/min离心机中离心分离10?15min，得上清液；
(7)将上述所得的上清液置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至原液体体积的1/3，并将其置于-5?1°C下冷冻I?2h，冷冻后将其放入密闭容器中，对其抽真空进行干燥2?3h，即得虾青素。
[0005]本发明的应用方法:将本发明制备的虾青素为原料制得护肤品，该护肤品抗氧化和抗紫外线性能好，可防止皮肤老化，预防皮肤癌的发生，延缓细胞衰老，减少皮肤皱纹和黑色素沉积，让皮肤更有弹性和润泽感。
[0006]本发明与其他方法相比，有益技术效果是:
(1)本发明制备步骤简单，对设备要求低，成本低于其他成本21.2%以上；
(2)所得产品虾青素含量高于其他产品19.5%以上，纯度高。
【具体实施方式】
[0007]按重量百份比计，分别称取5?10份硝酸钾、5?10份硝酸铵、5?10份磷酸二氢钾、2?3份硫酸镁、3?5份氯化钙、5?8份碘化钾、3?5份七水硫酸锌、7?14份七水合硫酸亚铁、35?65份蒸馈水，在300r/min下搅拌混合，得混合物;将上述所得混合物置于300?500W超声分散器中，进行超声分散处理4?6h，随后向其中加入混合物质量5?7%2，4_二氯苯氧乙酸、混合物质量3?5%萘乙酸和混合物质量4?6%6苄基嘌呤，搅拌使其充分混合均匀，得营养物；然后将上述所得的营养物在压力为97?99kPa，温度为120?121°C下，灭菌18?20min，随后按质量比3:2，将无菌水添加至灭菌后的营养物中，制得培养液，再将雨生红球藻移入培养液中，在25?28°C下培养8?10天;待培养完后，将培养后的雨生红球藻置于阴暗潮湿处，放置7?9天，每隔6?8h依次用30?40mL乙酸乙酯和25?35mL油酸将雨生红球藻淋洗一次，使其自然发霉，待其霉菌长至10?15cm时，停止淋洗，得发霉物;称取1/2上述所得的发霉物，放入萃取机中，同时向萃取机中加入发霉物质量35?40%醋酸丁酯，逆流萃取4?6h，得丁酯萃取液，向其中加入10?12mL枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液，浸泡20?30min，再向其中加入30?40mL醋酸丁酯，逆流萃取2?3h，得雨生红球藻酶;按质量比3:2，将剩余1/2发霉物添加至上述所得的雨生红球藻酶中，搅拌混合均匀，酶解2?3天，过滤得酶解液，并将酶解液置于3200r/min离心机中离心分离10?15min，得上清液;最后将上述所得的上清液置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至原液体体积的1/3，并将其置于-5?I °C下冷冻I?2h，冷冻后将其放入密闭容器中，对其抽真空进行干燥2?3h，即得虾青素。
[0008]实例I
按重量百份比计，分别称取10份硝酸钾、10份硝酸铵、10份磷酸二氢钾、3份硫酸镁、5份氯化钙、8份碘化钾、5份七水硫酸锌、14份七水合硫酸亚铁、35份蒸馏水，在300r/min下搅拌混合，得混合物;将上述所得混合物置于300W超声分散器中，进行超声分散处理4h，随后向其中加入混合物质量5%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物质量3%萘乙酸和混合物质量4%6苄基嘌呤，搅拌使其充分混合均匀，得营养物;然后将上述所得的营养物在压力为97kPa，温度为120°C下，灭菌18min，随后按质量比3: 2，将无菌水添加至灭菌后的营养物中，制得培养液，再将雨生红球藻移入培养液中，在25°C下培养8天;待培养完后，将培养后的雨生红球藻置于阴暗潮湿处，放置7天，每隔6h依次用30mL乙酸乙酯和25mL油酸将雨生红球藻淋洗一次，使其自然发霉，待其霉菌长至1cm时，停止淋洗，得发霉物;称取1/2上述所得的发霉物，放入萃取机中，同时向萃取机中加入发霉物质量35%醋酸丁酯，逆流萃取4h，得丁酯萃取液，向其中加入1mL枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液，浸泡20min，再向其中加入30mL醋酸丁酯，逆流萃取2h，得雨生红球藻酶；按质量比3: 2，将剩余1/2发霉物添加至上述所得的雨生红球藻酶中，搅拌混合均匀，酶解2天，过滤得酶解液，并将酶解液置于3200r/min离心机中离心分离lOmin，得上清液;最后将上述所得的上清液置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至原液体体积的1/3，并将其置于_5°C下冷冻lh，冷冻后将其放入密闭容器中，对其抽真空进行干燥2h，即得虾青素。
[0009]将本发明制备的虾青素为原料制得护肤品，该护肤品抗氧化和抗紫外线性能好，可防止皮肤老化，预防皮肤癌的发生，延缓细胞衰老，减少皮肤皱纹和黑色素沉积，让皮肤更有弹性和润泽感。
[0010]实例2
按重量百份比计，分别称取7份硝酸钾、7份硝酸铵、7份磷酸二氢钾、3份硫酸镁、4份氯化钙、6份碘化钾、4份七水硫酸锌、11份七水合硫酸亚铁、51份蒸馏水，在300r/min下搅拌混合，得混合物;将上述所得混合物置于400W超声分散器中，进行超声分散处理5h，随后向其中加入混合物质量6%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物质量4%萘乙酸和混合物质量5%6苄基嘌呤，搅拌使其充分混合均匀，得营养物;然后将上述所得的营养物在压力为98kPa，温度为121°C下，灭菌19min，随后按质量比3:2，将无菌水添加至灭菌后的营养物中，制得培养液，再将雨生红球藻移入培养液中，在27°C下培养9天;待培养完后，将培养后的雨生红球藻置于阴暗潮湿处，放置8天，每隔7h依次用35mL乙酸乙酯和30mL油酸将雨生红球藻淋洗一次，使其自然发霉，待其霉菌长至13cm时，停止淋洗，得发霉物;称取1/2上述所得的发霉物，放入萃取机中，同时向萃取机中加入发霉物质量38%醋酸丁酯，逆流萃取5h，得丁酯萃取液，向其中加入I ImL枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液，浸泡25min，再向其中加入35mL醋酸丁酯，逆流萃取3h，得雨生红球藻酶;按质量比3:2，将剩余1/2发霉物添加至上述所得的雨生红球藻酶中，搅拌混合均匀，酶解3天，过滤得酶解液，并将酶解液置于3200r/min离心机中离心分离13min，得上清液;最后将上述所得的上清液置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至原液体体积的1/3，并将其置于-2°C下冷冻2h，冷冻后将其放入密闭容器中，对其抽真空进行干燥3h，即得虾青素。
[0011]将本发明制备的虾青素为原料制得护肤品，该护肤品抗氧化和抗紫外线性能好，可防止皮肤老化，预防皮肤癌的发生，延缓细胞衰老，减少皮肤皱纹和黑色素沉积，让皮肤更有弹性和润泽感。
[0012]实例3
按重量百份比计，分别称取5份硝酸钾、5份硝酸铵、5份磷酸二氢钾、2份硫酸镁、3份氯化钙、5份碘化钾、3份七水硫酸锌、7份七水合硫酸亚铁、65份蒸馏水，在300r/min下搅拌混合，得混合物;将上述所得混合物置于500W超声分散器中，进行超声分散处理6h，随后向其中加入混合物质量7%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物质量5%萘乙酸和混合物质量6%6苄基嘌呤，搅拌使其充分混合均匀，得营养物;然后将上述所得的营养物在压力为99kPa，温度为121°C下，灭菌20min，随后按质量比3:2，将无菌水添加至灭菌后的营养物中，制得培养液，再将雨生红球藻移入培养液中，在28°C下培养10天;待培养完后，将培养后的雨生红球藻置于阴暗潮湿处，放置9天，每隔Sh依次用40mL乙酸乙酯和35mL油酸将雨生红球藻淋洗一次，使其自然发霉，待其霉菌长至15cm时，停止淋洗，得发霉物;称取1/2上述所得的发霉物，放入萃取机中，同时向萃取机中加入发霉物质量40%醋酸丁酯，逆流萃取6h，得丁酯萃取液，向其中加入12mL枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液，浸泡30min，再向其中加入40mL醋酸丁酯，逆流萃取3h，得雨生红球藻酶;按质量比3:2，将剩余1/2发霉物添加至上述所得的雨生红球藻酶中，搅拌混合均匀，酶解3天，过滤得酶解液，并将酶解液置于3200r/min离心机中离心分离15min，得上清液;最后将上述所得的上清液置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至原液体体积的1/3，并将其置于1°C下冷冻2h，冷冻后将其放入密闭容器中，对其抽真空进行干燥3h，即得虾青素。
[0013]将本发明制备的虾青素为原料制得护肤品，该护肤品抗氧化和抗紫外线性能好，可防止皮肤老化，预防皮肤癌的发生，延缓细胞衰老，减少皮肤皱纹和黑色素沉积，让皮肤更有弹性和润泽感。
【主权项】
1.一种虾青素的提取方法，其特征在于具体提取步骤为: (1)按重量百份比计，分别称取5?10份硝酸钾、5?10份硝酸铵、5?10份磷酸二氢钾、2?3份硫酸镁、3?5份氯化钙、5?8份碘化钾、3?5份七水硫酸锌、7?14份七水合硫酸亚铁、35?65份蒸馈水，在300r/min下搅拌混合，得混合物； (2)将上述所得混合物置于300?500W超声分散器中，进行超声分散处理4?6h，随后向其中加入混合物质量5?7%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物质量3?5%萘乙酸和混合物质量4?6%6苄基嘌呤，搅拌使其充分混合均匀，得营养物； (3)将上述所得的营养物在压力为97?99kPa，温度为120?121°C下，灭菌18?20min，随后按质量比3:2，将无菌水添加至灭菌后的营养物中，制得培养液，再将雨生红球藻移入培养液中，在25?28 °C下培养8?10天； (4)待培养完后，将培养后的雨生红球藻置于阴暗潮湿处，放置7?9天，每隔6?8h依次用30?40mL乙酸乙酯和25?35mL油酸将雨生红球藻淋洗一次，使其自然发霉，待其霉菌长至1?15cm时，停止淋洗，得发霉物； (5)称取1/2上述所得的发霉物，放入萃取机中，同时向萃取机中加入发霉物质量35?40%醋酸丁酯，逆流萃取4?6h，得丁酯萃取液，向其中加入10?12mL枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液，浸泡20?30min，再向其中加入30?40mL醋酸丁酯，逆流萃取2?3h，得雨生红球藻酶； (6)按质量比3:2，将剩余1/2发霉物添加至上述所得的雨生红球藻酶中，搅拌混合均勾，酶解2?3天，过滤得酶解液，并将酶解液置于3200r/min离心机中离心分离10?15min，得上清液； (7)将上述所得的上清液置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至原液体体积的1/3，并将其置于-5?1°C下冷冻I?2h，冷冻后将其放入密闭容器中，对其抽真空进行干燥2?3h，即得虾青素。
【文档编号】C12P23/00GK105838769SQ201610242639
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年4月19日
【发明人】汪巍, 盛海丰
【申请人】常州市蓝勖化工有限公司