专利名称：治疗病毒感染的组合物的制作方法
技术领域：
本申请提供了胸腺五肽与更昔洛韦的组合物及其在治疗病毒感染中的应用。
背景技术：
乙型肝炎在各型肝炎中发病率最高，危害亦最劣。我国为乙型肝炎高发区，乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带者有1亿多人，约占全世界携带者的1/3以上，每年至少有120万慢性乙型肝炎患者死于乙型肝炎相关疾病(包括肝硬化、肝癌等)，疾病防治任务十分繁重。虽然疫苗控制乙型肝炎病毒感染发挥很大作用，但现存大量患者需要有效的治疗，以控制传染源，降低乙型肝炎相关疾病的病死率，改善患者生活质量。
目前乙型肝炎的治疗，主要采用抗病毒、免疫调节、改善肝功能和抗肝纤维化等方法进行治疗。临床观察发现，乙型肝炎病人如仅有肝功能如ALT的好转或恢复正常，而HBV(乙型肝炎病毒)并未消除，此类病人极易复发，且不能阻止肝脏病变的发展。因此，用抗病毒治疗来清除HBV是根本的治疗措施。目前国际公认的抗肝炎病毒有干扰素、拉米夫定和更昔洛韦等。但这类药物均有较严重的不良反应发生，且长期使用易产生耐药性。
胸腺五肽(TP5)是一种免疫调节剂，对机体免疫功能具有双向调节作用，能使过强或受到抑制的免疫反应趋向正常。其半衰期很短，却具有较长时间的生物学效应，能有效地调节机体失衡的免疫功能。
更昔洛韦是核苷类抗病毒药，鸟嘌呤核苷衍生物。进入细胞后迅速被磷酸化为单磷酸化合物，然后经细胞激酶的作用成为三磷酸化合物。更昔洛韦可竞争性抑制DNA多聚酶，并掺入病毒及宿主细胞的DNA中，从而抑制DNA合成。对病毒DNA多聚酶的抑制作用较宿主细胞多聚酶为强，有文献报道，更昔洛韦对乙肝病毒特别是慢性乙肝病毒有较强的抑制作用[邱望龙，李福元，实用肝脏病杂志，1998(4)，247-248]。
肝炎患者由于肝功能低下，一般免疫功能低下，对病人给予免疫功能调节剂增强病人本身机体的抵抗力，再辅以更昔洛韦等抗病毒药物，双管齐下，是治疗肝炎的有效手段。
巨细胞病毒(CMV)感染是导致大多数器官移植病人和爱滋病病毒感染者死亡的主要原因之一，更昔洛韦最初被研制出来正是针对巨细胞病毒感染，而胸腺五肽在外科手术及严重感染如心、脑、肺、肾、腹部盆腔和骨科手术等患者中应用，能明显地防止术后细胞免疫功能缺损和感染，严重感染患者使用胸腺五肽可调整宿主免疫应答水平。因此，通过试验证实，将胸腺五肽和更昔洛韦对CMV感染的患者同时使用，一方面可以增强患者自身免疫功能，通过调整宿主免疫应答水平杀灭病毒，再配合高效抗病毒药，可以减少抗病毒药的用量，降低抗病毒药带来的毒副作用。
发明内容
本申请人通过大量的试验发现，将免疫调节剂(例如胸腺五肽)与抗病毒剂(例如更昔洛韦)组合应用来治疗病毒感染，特别是乙肝或巨细胞病毒感染，具有特别的、意想不到的治疗效果。
基于上述发现，本申请提供一种用于治疗病毒感染的药物组合物，其中含有胸腺五肽与更昔洛韦。
由于胸腺五肽口服无效，因此优选非肠道给药，特别是皮下、静脉和肌内注射；更昔洛韦可以口服，也可以非肠道给药，优选皮下、静脉和肌内注射。胸腺五肽的用量为0.001mg～1000mg，优选0.1mg～500mg，更优选1mg～100mg，最优选10mg～50mg；而更昔洛韦单一用于抗病毒治疗时，每天用量在500mg左右时，对一些病人可以减轻症状，但会引起中性白细胞减少等副作用，因此，申请人在实验中将更昔洛韦控制在每天0.1mg～500mg，优选10mg～500mg，更优选50mg～250mg，最优选80mg～150mg，以期减少中性白细胞减少等副作用，同时实验发现其与胸腺五肽联合应用时对肝炎病毒和巨细胞病毒感染所具有的意想不到的作用效果。
基于此发现，本申请还提供一种用于治疗肝炎病毒感染的药物组合物，其中含有胸腺五肽与更昔洛韦，两者的比例为1000∶1-1∶1000，优选500∶1-1∶500，更优选100∶1-1∶100，最优选50∶1-1∶50。其中胸腺五肽的含量可以为0.001mg～1000mg，优选0.1mg～500mg，更优选1mg～100mg，最优选10mg～50mg；更昔洛韦的含量可以为0.1mg～500mg，优选10mg～500mg，更优选50mg～250mg，最优选80mg～150mg。
所述的用于治疗病毒感染药物组合物，其可以为各自单独制成的剂型(注射剂、口服剂等)的组合产品；也可以制成冻干粉针剂型，由适量的胸腺五肽和更昔洛韦加或不加适当的赋型剂经冷冻干燥或喷雾干燥工艺制成。
所述的用于治疗病毒感染药物组合物，其中的肝炎病毒感染优选是乙肝病毒感染，另外还优选巨细胞病毒感染。
本申请还提供一种用于治疗病毒感染药物组合形式或“药盒”，其中含有胸腺五肽与更昔洛韦，其中胸腺五肽与更昔洛韦可以单独地分开包装、或组合成一个整体包装，含有单独、同时、先后用药的方法说明。所述的用于治疗病毒感染药物组合形式或“药盒”，其中的病毒感染优选是乙肝病毒感染和巨细胞病毒感染。
本申请还提供一种通过联合给予胸腺五肽与更昔洛韦用于治疗病毒感染，特别是乙肝或巨细胞病毒感染类疾病的方法。其中胸腺五肽与更昔洛韦可以单独、同时、先后用药，以达到好的治疗效果。
本申请还提供一种胸腺五肽与更昔洛韦联合用于制备治疗病毒感染，尤其是乙肝或巨细胞病毒感染类疾病的药物中的应用。其中胸腺五肽与更昔洛韦可以单独、同时、先后用药，以达到好的治疗效果。
具体实施例方式
申请人通过大量试验发现，将免疫调节剂(例如胸腺五肽)与抗病毒剂(例如更昔洛韦)组合应用来治疗病毒感染，尤其是乙型肝炎和巨细胞病毒感染，具有特别的、意想不到的治疗效果。
以下所列举的实施例只是为了说明该申请，对其不具有限定意义。
制备实施例处方胸腺五肽10g，更昔洛韦100g，甘露醇4100g，注射用水10000ml制备方法将胸腺五肽、更昔洛韦和甘露醇用注射用水溶解后，调节Ph7.0，以混合纤维素酯微孔滤膜过滤，封装于10ml西林瓶中，冷冻干燥成粉针剂。真空下加瓶塞，铝盖封口。
上述处方也可不加甘露醇等辅料，或将甘露醇换成其他适宜的药用辅料；冻干过程可选择喷雾干燥。
药效学试验1、采用鸭乙肝病毒模型，观察了胸腺五肽加上更昔洛韦对鸭乙肝炎的治疗作用。
胸腺五肽和更昔洛韦联合用药对乙肝病毒的影响对腹腔接种了200μL DHBV感染毒种(5×107genomes/ml)的北京鸭，经采血用DHBV斑点杂交筛选阳性鸭，饲养3～4周龄，分离PDH作为慢性感染组；同时设立健康鸭对照。阳性对照药使用拉米夫定，用药组分别为①1mg胸腺五肽+20mg更昔洛韦；②10mg胸腺五肽+50mg更昔洛韦；③10mg胸腺五肽+80mg更昔洛韦；④10mg胸腺五肽+100mg更昔洛韦；⑤10mg胸腺五肽+150mg更昔洛韦；⑥20mg胸腺五肽+250mg更昔洛韦。
健康对照组灌服等容量生理盐水；阳性药物对照组腹腔注射拉米夫定20mg/kg，每日2次；治疗组分别灌服上述给药剂量每日2次，给药10天。于给药后第5、10天和停药后第5天采血，分离血清，270℃保存，同时检测DHBsAg和DHBV DNA。
表1试验后各组血清DHBsAg≥+++例数组别 n用药前 用药后5d 用药后10d 停药后5d健康对照 9 0 0 00拉米夫定 10 10 8 63①9 9 1099②9 9 8 68③10 10 8 56④10 10 6 42⑤9 9 5 42⑥9 9 7 53
表2试验后各组鸭血清DHBV DNA光密度(x±s)组别 用药前 用药后5d 用药后10d停药后5d健康对照0.02±0.09 0.05±0.05 0.02±0.06 0.01±0.05拉米夫定0.37±0.08 0.33±0.13 0.20±0.12 0.30±0.13① 0.38±0.05 0.34±0.12 0.27±0.12 0.33±0.13② 0.36±0.04 0.34±0.16 0.25±0.16 0.27±0.14③ 0.37±0.02 0.28±0.14 0.18±0.08 0.28±0.04④ 0.36±0.12 0.25±0.06 0.15±0.06 0.25±0.03⑤ 0.37±0.05 0.26±0.06 0.18±0.11 0.24±0.14⑥ 0.38±0.04 0.33±0.06 0.26±0.02 0.27±0.02结果显示，生理盐水组用药前后结果显示DHBsAg水平无变化；拉米夫定组在用药5天后DHBsAg含量开始降低，停药后第5天DHBsAg含量才有明显变化；拉米夫定组在用药后第10天DHBV DNA水平明显下降。“胸腺五肽+更昔洛韦”治疗结果显示，10mg胸腺五肽+100mg更昔洛韦以及10mg胸腺五肽+150mg更昔洛韦DHBsAg水平在治疗后第5天开始下降，治疗后第10天及停药后第5天下降到最低水平，DNA水平也相应明显下降，且较利拉米夫定组作用明显。因此，认为10mg胸腺五肽+100mg更昔洛韦以及10mg胸腺五肽+150mg更昔洛韦为较佳的剂量组。
2、采用病变抑制法，在豚鼠胚肺细胞培养上测定胸腺五肽联合更昔洛韦抗豚鼠巨细胞病毒的药效指标，观察胸腺五肽联合更昔洛韦用药1d对豚鼠巨细胞病毒的抑制作用，并与单独使用更昔洛韦对比。
将GPEC(豚鼠胚肺细胞)接种至小青瓶，每管1.0mL，待细胞生长呈单层片状后，倾去生长液。GPCMV(豚鼠巨细胞病毒)用细胞维持液按10倍梯度稀释成10-2，10-3，10-4，10-5，10-6，10-7共7个浓度。每个稀释度病毒接种4管小青瓶，每管0.1mL，同时设4管正常细胞对照，置37℃温箱培养7～14d，每日观察记录细胞病变情况，用Reed-Muench法[傅继华.病毒学实用实验技术[M].济南山东科学技术出版社，2001.60-63.]滴定病毒滴度，即半数细胞感染剂量(TCID50)。细胞病变(CPE)程度判定标准(-)示细胞无病变，(+)示25％的细胞出现病变，(++)示～50％的细胞出现病变，(+++)示～75％细胞出现病变，(++++)示～100％细胞出现病变。
分别用①0.2mg/L胸腺五肽+5mg/L更昔洛韦；②0.2mg/L胸腺五肽+10mg/L更昔洛韦；③0.5mg/L胸腺五肽+5mg/L更昔洛韦；④50mg/L更昔洛韦处理感染了豚鼠巨细胞病毒的豚鼠胚肺细胞，观察1d，评价效果，结果如下
结果可见，0.2mg/L胸腺五肽+10mg/L更昔洛韦和0.5mg/L胸腺五肽+5mg/L更昔洛韦与50mg/L更昔洛韦对豚鼠巨细胞病毒的抑制作用相近，由此可以推测，胸腺五肽的加入可以大大降低更昔洛韦的用量，从而降低更昔洛韦的毒副作用，而疗效不变。
2、将胸腺五肽10mg，更昔洛韦100mg加适当辅料经冷冻干燥制成冻干粉针剂型，并经上述实验证明，二者制成冻干粉针后对鸭乙肝病毒的抑制作用以及对豚鼠巨细胞病毒的抑制作用和上述实验时无显著性差异。
由此可见，胸腺五肽与更昔洛韦组合应用来治疗病毒感染，特别是乙肝或巨细胞病毒感染，具有特别的、意想不到的治疗效果。
权利要求
1.一种用于治疗病毒感染的药物组合物，其中含有胸腺五肽与更昔洛韦。
2.权利要求1所述的药物组合物，其含有合适的载体或赋形剂。
3.权利要求1所述的药物组合物，其中胸腺五肽和更昔洛韦可以为各自单独制成的形式。
4.权利要求3所述的药物组合物，其中胸腺五肽可以是非肠道给药形式，例如皮下、静脉和肌内注射。
5.权利要求3所述的药物组合物，其中更昔洛韦可以是口服形式，也可以是非肠道给药形式，优选皮下、静脉和肌内注射。
6.权利要求1所述的药物组合物，其中胸腺五肽和更昔洛韦可以制成冻干粉针剂型，由适量的胸腺五肽和更昔洛韦加或不加适当的赋型剂经冷冻干燥或喷雾干燥工艺制成。
7.权利要求1所述的药物组合物，其中胸腺五肽的用量为0.001mg～1000mg，优选0.1mg～500mg，更优选1mg～100mg，最优选10mg～50mg。
8.权利要求1所述的药物组合物，其中更昔洛韦的用量为0.1mg～500mg，优选10mg～500mg，更优选50mg～250mg，最优选80mg～150mg。
9.权利要求1所述的药物组合物，其中胸腺五肽与更昔洛韦的比例为1000∶1-1∶1000，优选500∶1-1∶500，更优选100∶1-1∶100，最优选50∶1-1∶50。
10.权利要求1所述的药物组合物，其中所述的病毒是乙肝病毒或巨细胞病毒。
11.一种用于治疗病毒感染的药物组合形式或“药盒”，其中含有胸腺五肽与更昔洛韦，其中胸腺五肽与更昔洛韦可以单独地分开包装、或组合成一个整体包装，含有单独、同时、先后用药的方法说明。
12.权利要求11所述的药物组合形式或“药盒”，其中胸腺五肽与更昔洛韦组合成一个整体进行包装。
13.权利要求11所述的药物组合形式或“药盒”，其中胸腺五肽和更昔洛韦可以为各自单独地分开包装。
14.权利要求12或13所述的药物组合形式或“药盒”，其中胸腺五肽可以是非肠道给药形式，例如皮下、静脉和肌内注射。
15.权利要求12或13所述的药物组合形式或“药盒”，其中更昔洛韦可以是口服形式，也可以是非肠道给药形式，优选皮下、静脉和肌内注射。
16.权利要求11所述的药物组合形式或“药盒”，其中胸腺五肽和更昔洛韦可以制成冻干粉针形式，由适量的胸腺五肽和更昔洛韦加或不加适当的赋型剂经冷冻干燥或喷雾干燥工艺制成。
17.权利要求11所述的药物组合形式或“药盒”，其中胸腺五肽的用量为0.001mg～1000mg，优选0.1mg～500mg，更优选1mg～100mg，最优选10mg～50mg。
18.权利要求11所述的药物组合形式或“药盒”，其中更昔洛韦的用量为0.1mg～500mg， 优选10mg～500mg，更优选50mg～250mg，最优选80mg～150mg。
19.权利要求11所述的药物组合形式或“药盒”，其中胸腺五肽与更昔洛韦的比例为1000∶1-1∶1000，优选500∶1-1∶500，更优选100∶1-1∶100，最优选50∶1-50∶1。
20.权利要求11所述的药物组合形式或“药盒”，其中所述的病毒是乙肝病毒或巨细胞病毒。
21.胸腺五肽与更昔洛韦联合用于制备治疗病毒感染类疾病的药物中的应用。
22.权利要求21所述的应用，其制备的药物中含有合适的载体或赋形剂。
23.权利要求21所述的应用，其中胸腺五肽和更昔洛韦可以为各自单独制成的剂型。
24.权利要求23所述的应用，其中胸腺五肽可以是非肠道给药形式，例如皮下、静脉和肌内注射。
25.权利要求23所述的应用，其中更昔洛韦可以是口服形式，也可以是非肠道给药形式，优选皮下、静脉和肌内注射。
26.权利要求21所述的应用，其中胸腺五肽和更昔洛韦可以制成冻干粉针剂型，由适量的胸腺五肽和更昔洛韦加或不加适当的赋型剂经冷冻干燥或喷雾干燥工艺制成。
27.权利要求21所述的应用，其中胸腺五肽的用量为0.001mg～1000mg，优选0.1mg～500mg，更优选1mg～100mg，最优选10mg～50mg。
28.权利要求21所述的应用，其中更昔洛韦的用量为0.1mg～500mg，优选10mg～500mg，更优选50mg～250mg，最优选80mg～150mg。
29.权利要求21所述的应用，其中胸腺五肽与更昔洛韦的比例为1000∶1-1∶1000，优选500∶1-1∶500，更优选100∶1-1∶100，最优选50∶1-50∶1。
30.权利要求21所述的应用，其中所述的病毒是乙肝病毒或巨细胞病毒。
全文摘要
本发明提供了胸腺五肽与更昔洛韦的组合物或组合形式，以及其在治疗病毒感染，特别是乙肝或巨细胞病毒感染中的应用。
文档编号A61P31/00GK1628842SQ200410058528
公开日2005年6月22日 申请日期2004年8月18日 优先权日2004年8月18日
发明者关屹, 闫冬 申请人:关屹, 闫冬