专利名称：一种含银杏总黄酮药物组合物及其制备方法与用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含银杏总黄酮药物组合物及其制备方法与用途，更具体地说，涉及一种由磷酸川芎嗪和银杏总黄酮组合而成的药物组合物，其制备方法及其在制备治疗缺血性心脑血管疾病药物方面的应用。
背景技术：
银杏总黄酮为银杏中的主要活性成分，具有扩张冠脉血管、脑血管、活血化瘀，改善脑缺血产生的症状和记忆功能。总黄酮在银杏叶中的含量为0.5％～1％(W/W)，主要以苷形式存在，主要苷元为槲皮素、山柰素与异鼠李素。
磷酸川芎嗪为2，3，5，6-四甲基吡嗪磷酸盐一水合物(C8H12N2·H3PO4·H2O)，为白色或类白色结晶性粉末，具有抗血小板聚集作用，并对已聚集的血小板有解聚作用，扩张小动脉，改善微循环、增加脑血流和活血化瘀作用。磷酸川芎嗪吸收及排泄迅速，可以通过血脑脊液屏障。临床用于缺血性脑血管疾病(如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞)。
申请号为CN200410083882.9的专利文献公开了一种银杏药物组合物、其制备方法与用途，用的原料药为银杏叶提取物和磷酸川芎嗪。其中的银杏叶提取物采用醇提、大孔吸附树脂纯化的方法得到。所制备的银杏提取物是多种有效成分的混合物，除了含有银杏总黄酮(含量约为25％)之外，其次还含有大量的银杏内酯及其他成分。
但是在其后的药理实验和临床应用中，上述银杏药物组合物显示出了治疗作用的不稳定性。
发明内容
针对以上技术的不足，本发明研究人员对其进行了大量的后续研究。本发明研究人员在后续的药理实验和临床应用中发现，不同的银杏叶提取物(以银杏总黄酮计)和磷酸川芎嗪以相同的比例配伍，其药理作用和治疗效果都有着不同。由此看来，上述制剂中银杏提取物中的银杏总黄酮只能是含量的指标成分，银杏总黄酮含量的高低并不代表疗效的好坏。对此，本发明研究人员利用大量的动物实验进行了更深一步的研究。本发明研究人员发现，当银杏提取物中银杏总黄酮的含量达到50％以上时，本发明的药物组合物的药理作用和治疗效果的稳定性好，银杏总黄酮的含量指标和疗效指标达到了统一，质量可控和疗效可控达到了统一。
本发明的一个目的是公开一种含银杏总黄酮药物组合物。
本发明的又一目的是公开上述含银杏总黄酮药物组合物的制备方法。
本发明的另一目的是公开上述含银杏总黄酮药物组合物的用途。
本发明所述的含银杏总黄酮药物组合物可制备成各种药剂学上的可用剂型，因此可使用该组合物还可含有一种或多种辅剂；比如氯化钠、淀粉、滑石粉和硬脂酸镁等，药学领域可接受的辅剂。
本发明所述的磷酸川芎嗪可采用符合药用标准的原料。
本发明含银杏总黄酮药物组合物中，磷酸川芎嗪含量为银杏总黄酮的2-10倍；优选为磷酸川芎嗪含量为银杏总黄酮的4-6倍；更优选为磷酸川芎嗪含量为银杏总黄酮的5倍。
本发明所述的银杏总黄酮提取物，其中所含的银杏总黄酮的纯度必须达到50％以上。
本发明的银杏总黄酮提取物可以是任何方法制备的，只要其中所含的银杏总黄酮的纯度达到50％以上即可。
本发明所述的银杏总黄酮提取物也可以采用以下方法制备将中请号为CN200410083882.9中的银杏提取物或符合《中国药典》标准的银杏叶提取物作为起始原料。将原料用水溶解，冷藏，过滤，高速离心，聚酰胺柱纯化，洗脱液超滤，浓缩，干燥的方法即得本发明银杏总黄酮提取物。
具体的说，本发明银杏总黄酮提取物是通过以下方法制备的将原料用10-15倍量的水溶解，在4℃-10℃冷藏24小时，过滤，滤液以10000转/分的速度离心20分钟，上清液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再用4倍柱体积的10％-20％的乙醇溶液洗脱，再用5-6倍柱体积的60％-70％的乙醇溶液洗脱，收集高浓度的乙醇洗脱液，减压回收乙醇后，加水稀释至相对密度为1.05，用截留分子量为200和600的超滤膜过滤，收集富含分子量为200-600的溶液，浓缩，干燥，粉碎，即得本发明银杏总黄酮提取物。
本发明所述的含银杏总黄酮药物组合物可以制备成各种药剂学上的可用剂型，如粉针剂、冻干粉针剂、片剂、胶囊剂、小容量注射剂、大容量注射剂，优选的剂型为小容量注射剂、大容量注射剂。
本发明所述的含银杏总黄酮药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。比如使用磷酸川芎嗪、银杏总黄酮与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。
本发明所述的含银杏总黄酮药物组合物当制备成大容量注射剂时，需加入适量氯化钠作为等渗调节剂。
本发明研究人员进行大量实验发现，当银杏药物组合物中磷酸川芎嗪重量为银杏总黄酮重量的5倍配比时协同作用最好、疗效最佳。
本发明最优选银杏药物组合物大容量注射剂的规格为250ml/瓶，每瓶含有磷酸川芎嗪100mg，银杏总黄酮20mg。
用法如下静脉滴注，一次一瓶，10～15天为一疗程。
本发明所述的含银杏总黄酮药物组合物通过银杏总黄酮和磷酸川芎嗪相互补充协同作用，可起到意想不到的效果。银杏总黄酮具有扩张冠脉血管、脑血管、活血化瘀，改善脑缺血产生的症状和记忆功能。磷酸川芎嗪吸收及排泄迅速，可以通过血脑脊液屏障发挥作用。
本发明所述的含银杏总黄酮药物组合物为银杏总黄酮和磷酸川芎嗪按特定比例组配而成的复方制剂，其吸收及排泄迅速，可以通过血-脑脊液屏障。通过二者相互补充协同作用于机体，充分发挥活血化瘀，有抗血小板凝集，扩张血管，改善微循环作用，适用于缺血性心脑血管疾病的冶疗，如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞、脑血管痉挛、脑功能不全、老年性痴呆、帕金森氏综合症、脑中风、高血压、高血脂、动脉硬化、冠心病、心绞痛、心肌梗塞。也可用于肝纤维化、糖尿病引起的微循环病变，脉管炎等。
将市售的银杏叶采用申请号CN200410083882.9的专利文献中的方法制备成银杏提取物或直接应用市售的银杏叶提取物。将上述银杏叶提取物与磷酸川芎嗪制备成相同浓度(以银杏总黄酮计)的注射制剂，进行对小鼠缺氧耐力的影响、对小鼠心肌缺氧的保护、对大鼠体内血栓形成等动物实验，观察疗效的稳定性。实验结果见表1。
为了便于比较，用下述方法确定实验指标每组的实验结果均为各组实验结果平均值的比值。
表1实验结果
由上述实验结果可以看出，在银杏叶提取物(以银杏总黄酮含量计)含量相同的前提下，各组药物的药理作用仍有差别，显示出治疗效果的不稳定性。
将申请号CN200410083882.9的专利文献中的方法制备成银杏提取物或直接应用市售的银杏叶提取物用本发明的制备方法进行进一步提取得到本发明银杏总黄酮提取物，再与磷酸川芎嗪制备成相同浓度(以银杏总黄酮计)的注射制剂，进行动物实验，观察疗效的稳定性。实验结果见表2。
表2实验结果
由上述实验结果可以看出，本发明含银杏总黄酮药物组合物在银杏叶总黄酮提取物(以银杏总黄酮含量计)含量相同的前提下，各组药物的药理作用差别不大，显示出治疗效果的稳定性。
由此可以进一步推断，本发明含银杏总黄酮药物组合物在临床应用中显示出很好的治疗效果的稳定性之外，而且更容易进行临床用量的控制，因而可以大大降低不良反应的发生。
具体实施例方式
下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果更好的了解，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。
下述的用于制备本发明银杏总黄酮提取物的原料药是将市售的银杏叶采用申请号CN200410083882.9专利文献中的方法制备成的银杏提取物或直接为市售的银杏叶提取物。
实施例1将原料用10倍量的水溶解，在4℃冷藏24小时，过滤，滤液以10000转/分的速度离心20分钟，上清液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再用4倍柱体积的10％的乙醇溶液洗脱，再用5倍柱体积的60％的乙醇溶液洗脱，收集高浓度的乙醇洗脱液，减压回收乙醇后，加水稀释至相对密度为1.05，用截留分子量为200和600的超滤膜过滤，收集富含分子量为200-600的溶液，浓缩，干燥，粉碎，即得本发明银杏总黄酮提取物。含量测定银杏总黄酮含量为55％。
实施例2将原料用15倍量的水溶解，在10℃冷藏24小时，过滤，滤液以10000转/分的速度离心20分钟，上清液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再用4倍柱体积的20％的乙醇溶液洗脱，再用6倍柱体积的70％的乙醇溶液洗脱，收集高浓度的乙醇洗脱液，减压回收乙醇后，加水稀释至相对密度为1.05，用截留分子量为200和600的超滤膜过滤，收集富含分子量为200-600的溶液，浓缩，干燥，粉碎，即得本发明银杏总黄酮提取物。含量测定银杏总黄酮含量为60％。
实施例3将原料用12倍量的水溶解，在6℃冷藏24小时，过滤，滤液以10000转/分的速度离心20分钟，上清液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再用4倍柱体积的15％的乙醇溶液洗脱，再用5倍柱体积的65％的乙醇溶液洗脱，收集高浓度的乙醇洗脱液，减压回收乙醇后，加水稀释至相对密度为1.05，用截留分子量为200和600的超滤膜过滤，收集富含分子量为200-600的溶液，浓缩，干燥，粉碎，即得本发明银杏总黄酮提取物。含量测定银杏总黄酮含量为53％。
实施例4称取上述(含银杏总黄酮20g)银杏总黄酮提取物、磷酸川芎嗪100g，可配成100000ml药液，最终制成大容量注射剂400瓶(规格为250ml/瓶)。在浓配罐中加适量85℃注射用水，向浓配罐中投入900g氯化钠、充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入磷酸川芎嗪和银杏总黄酮提取物，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为4.8±0.2，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于输液瓶中，灌封时逐瓶充氮，灭菌，即得输液产品。
实施例5称取上述(含银杏总黄酮20g)银杏总黄酮提取物、磷酸川芎嗪40g，可配成100000ml药液，最终制成大容量注射剂400瓶(规格为250ml/瓶)。在浓配罐中加适量85℃注射用水，向浓配罐中投入900g氯化钠、充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入磷酸川芎嗪和银杏总黄酮提取物，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为4.8±0.2，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于输液瓶中，灌封时逐瓶充氮，灭菌，即得输液产品。
实施例6称取上述(含银杏总黄酮5g)银杏总黄酮提取物、磷酸川芎嗪50g，可配成2000ml药液，最终制成小容量注射剂1000支。在配制罐中加适量48℃注射用水，再加入磷酸川芎嗪和银杏总黄酮提取物，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为4.5，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于安瓿中，灌封时安瓿逐支充氮，灭菌，即得小容量注射剂。
实施例7称取上述(含银杏总黄酮50g)银杏总黄酮提取物、磷酸川芎嗪200g，可配成1000ml药液，最终制成小容量注射剂1000支。在配制罐中加适量48±2℃注射用水，再加入磷酸川芎嗪和银杏总黄酮提取物，充分搅拌使其完全溶解，加入右旋糖酐40赋形剂，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为4.8，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，药液经终端过滤后灌装(装量1.0ml/支)，半加塞后冻干，制成冻干粉针产品。
实施例8称取上述(含银杏总黄酮20g)银杏总黄酮提取物、磷酸川芎嗪100g，可最终制成片剂1000片。将银杏总黄酮提取物、磷酸川芎嗪混合与80克淀粉混匀后用淀粉浆制粒，过20目筛整粒，干燥，加1克硬脂酸镁压制成片，即得含银杏总黄酮药物组合物片剂。
实施例9称取上述(含银杏总黄酮2g)银杏总黄酮提取物、磷酸川芎嗪16g，可最终制成胶囊剂。将银杏总黄酮提取物、磷酸川芎嗪与80克淀粉、80克滑石粉混匀后，过100目筛，装胶囊，得含银杏总黄酮药物组合物胶囊剂。
实验例1本实验例为本发明实施例4的含银杏总黄酮药物组合物大容量注射剂(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，银杏总黄酮20mg，2.25g氯化钠)外观性状、pH值、重金属及其它规定的注射剂检查项目的检测。
√性状 本品为微黄色至浅黄色的澄明液体。
√pH值 pH值应为3.5-5.5(中国药典2000年版二部附录VI)。
√重金属 精密量取本品25ml，置坩埚中，水浴蒸干，依法检查(中国药典2000年版二部附录VIII H第二法)，含重金属不得过百万分之五。
√热原取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录XI D)，剂量按家兔体重每1kg缓缓注射10ml，应符合规定。
√其他应符合注射剂项下有关各项规定(中国药典2000版二部附录I B)。
实验例2本实验例为本发明实施例4的含银杏总黄酮药物组合物大容量注射剂(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，银杏总黄酮20mg，2.25g氯化钠)中主要组分的定性测定。
取本品2ml，加碘化铋钾2滴，即生成橙红色沉淀。
在银杏总黄酮和磷酸川芎嗪含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的保留时间应与对照品相对应的峰保留时间一致。
以上2种实验为本发明含银杏总黄酮药物组合物所含组份的定性反应，说明本发明含银杏总黄酮药物组合物中含有确定的组份。
实验例3本实验例为本发明实施例4的含银杏总黄酮药物组合物大容量注射剂(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，银杏总黄酮20mg，2.25g氯化钠)中组份的定量检测。每ml含银杏总黄酮应为72-88μg，磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)应为0.36-0.44mg。
银杏总黄酮含量测定 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD)测定。
色谱条件及系统适用性实验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4％磷酸(55∶45)为流动相；检测波长为368nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500，分离度按槲皮素与异鼠李素峰计算，应大于1.5。
对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥的槲皮素、山柰素与异鼠李素对照品，加甲醇制成每1ml各含0.03mg、0.03mg、0.02mg的混合溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密量取本品100ml，50℃减压浓缩至约5ml，加甲醇8ml、18％盐酸3ml，置水浴上加热回流1.5小时，迅速冷却至室温，移入25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经滤膜(孔径不得大于0.45μm)滤过，作为供试品溶液。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入高效液相色谱仪，测定，分别计算三种黄酮苷元的含量，以下式换算成总黄酮醇苷的含量。
总黄酮醇苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量)×2.51磷酸川芎嗪含量测定 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录V D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(50∶50)为流动相；检测波长为295nm。理论板数按磷酸川芎嗪峰计算应不低于2000。
测定法 取本品，加流动相溶解并稀释成每1ml中含20μg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取磷酸川芎嗪对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算。
按照本发明实施例4通过小试制备三批，每批200瓶，测定如下，每ml含量结果见表3。
表3含量测定结果
权利要求
1.一种含银杏总黄酮药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有磷酸川芎嗪和银杏总黄酮提取物，银杏总黄酮提取物中银杏总黄酮的纯度大于50％，磷酸川芎嗪含量为银杏总黄酮的2-10倍。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，其中磷酸川芎嗪含量为银杏总黄酮的4-6倍。
3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，其中磷酸川芎嗪含量为银杏总黄酮的5倍。
4.权利要求1～3之一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，其中银杏总黄酮提取物是将原料用水溶解，冷藏，过滤，高速离心，聚酰胺柱纯化，洗脱液超滤，浓缩，干燥的方法得到。
5.根据权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，其中银杏总黄酮提取物是将原料用10-15倍量的水溶解，在4℃-10℃冷藏24小时，过滤，滤液以10000转/分的速度离心20分钟，上清液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再用4倍柱体积的10％-20％的乙醇溶液洗脱，再用5-6倍柱体积的60％-70％的乙醇溶液洗脱，收集高浓度的乙醇洗脱液，减压回收乙醇后，加水稀释至相对密度为1.05，用截留分子量为200和600的超滤膜过滤，收集富含分子量为200-600的溶液，浓缩，干燥，粉碎，即得。
6.根据权利要求1～3之一所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物可以制备成各种药剂学上的可用剂型，如粉针剂、冻干粉针剂、片剂、胶囊剂、小容量注射剂、大容量注射剂，优选的剂型为小容量注射剂、大容量注射剂。
7.根据权利要求1～3之一所述的药物组合物，其特征在于，所述的制剂为大容量注射剂，大容量注射剂中含有适量氯化钠作为等渗调节剂。
8.根据权利要求1～3之一所述的药物组合物作为制备治疗缺血性心脑血管疾病，如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞、脑血管痉挛、脑功能不全、老年性痴呆、帕金森氏综合症、脑中风、高血压、高血脂、动脉硬化、冠心病、心绞痛、心肌梗塞各疾病药物方面的应用。
9.根据权利要求1～3之一所述的药物组合物作为制备治疗肝纤维化、糖尿病引起的微循环病变，脉管炎各疾病药物方面的应用。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，具体公开了一种含银杏总黄酮药物组合物，其中含有磷酸川芎嗪和银杏总黄酮提取物；药物组合物中所含磷酸川芎嗪重量为银杏总黄酮重量的2～10倍，还公开了该药物组合物的制备方法；药理实验表明，本发明药物组合物的疗效稳定。本发明药物组合物为磷酸川芎嗪和银杏总黄酮组成的复方制剂，通过二者相互补充协同作用于机体，充分发挥活血化瘀、抗血小板凝集、扩张血管、改善微循环作用，可应用于制备缺血性心脑血管疾病的药物。
文档编号A61P9/00GK1785216SQ20051010959
公开日2006年6月14日 申请日期2005年10月28日 优先权日2005年10月28日
发明者张玉梅 申请人:阿尔贝拉医药控股(通化)有限公司