专利名称：一种参芪扶正注射剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂，特别涉及一种参芪扶正注射剂的制备方法。
背景技术：
目前，中药注射剂临床应用品种已达200多种，但由于中药制剂成分复杂，除杂质常不够彻底，致使理化性质不够稳定。特别是中药注射液、大输液，在存放过程中易发生化学反应、产生沉淀物、澄明度不好和颜色改变等，而普遍存在着药疹、热源和过敏反应发生率高的问题。统计460篇1291例重要不良反应报告中，中药注射液发生率占55.62％，甚至发生致死的报告。其中参芪扶正注射液就是其中的一种，已有不良反应的报道。
已有的参芪扶正注射液的制法均采用水提醇沉的常规方法，不仅费时费力，成本高，而且产品质量难以保障，在存放过程中有产生沉淀物、澄明度不好和颜色改变等现象，给患者造成了极大的安全隐患。
用膜分离技术制备中药注射剂，质量优于单纯用水醇法、醇水法、石硫醇法等制得的成品，可以达到静脉注射液的质量标准，也减少了不良反应。纳米膜分离法制备中药注射剂有以下优点①较大限度地除去杂质，提高药液澄明度；②对热原有一定滤除作用；③有明显的脱色作用；④使不良反应减少。
影响纳米膜分离的主要因素有药液的预处理、药液的浓度、纳米膜的选择、超滤时的压力及纳米膜的清洗再生程度。
本发明对参芪扶正注射液的制备方法进行了工艺改造，用纳米膜分离法取代或减少醇沉步骤，并针对纳米膜分离工艺的主要影响因素进行了筛选和优化，取得了意想不到的效果。
发明内容
本发明提供一种中药参芪扶正注射剂的制备方法，特别是在中药提取过程中进行了工艺改造和创新，本发明采用的制备方法包括以下步骤党参、黄芪水提，乙醇沉淀一次，过滤，回收乙醇，加入辅料，调pH值，加注射用水经微孔滤膜滤过，再经φ截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜滤过，分装，灭菌，或冷冻干燥，即得。
或党参、黄芪，水提，过滤，滤液经微孔滤膜滤过，再经φ截留相对分子量2~4万的中空纤维纳米膜滤过，加入辅料，调pH值，又经微孔滤膜滤过除菌，分装，或冷冻干燥，即得。
具体可以按照以下步骤进行取党参、黄芪，加热纯化水煎煮提取3次，加水量分别为10、8、6倍；煎煮时间分别为1、1、0.5小时。提取液滤过，浓缩至每1ml含药材量约1.3g，加入乙醇使含乙醇量达80％，搅拌后静置24小时，滤过，回收至无醇味。滤液加注射用水至每1ml含药材量0.08g，经φ0.45μm微孔滤膜滤过，再经φ截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜滤过。滤液浓缩，加入适量辅料溶解，活性炭煮沸吸附热源和脱色，除炭。调pH值，又经φ0.22μm滤膜滤过，分装，灭菌(注射液)或按特殊程序冷冻干燥(冻干粉针)而成。
或取党参、黄芪，加热纯化水煎煮提取3次，加水量分别为10、8、6倍；煎煮时间分别为1、1、0.5小时。提取液滤过。滤液加纯化水至每1ml含药材量0.08g，经φ0.3～0.8μm微孔滤膜滤过，再经φ截留相对分子量2万-4万的中空纤维纳米膜滤过，滤液浓缩，加入适量辅料溶解，活性炭煮沸吸附热源，除炭。调pH值，又经φ0.18～0.22μm微孔滤膜滤过。分装，灭菌(注射液)或按特殊程序冷冻干燥(冻干粉针)而成。
本发明的制备方法的要点是(1)采用80℃-100℃热纯水煎煮提取。这样，可以先破坏药材中存在的容易水解皂苷的酶，较用凉水提取时有效组分总皂苷得率高。
(2)一次醇沉后，采用φ截留相对分子量6万的中空纤维纳滤膜滤过；或不用醇沉步骤，直接用φ截留相对分子量2万-4万的中空纤维纳滤膜滤过。
φ截留相对分子量小于2万，对除去蛋白有利，但有效成份损失较多；φ截留相对分子量大于6万，除杂不彻底，容易漏过引起过敏反应的大分子蛋白等物质。
(3)中药制剂是个成分众多、质量配比各不尽相同的复杂有效成分混合物，这是由于不同工艺和技术、设备、参数条件应用的结果。本品党参、黄芪含有已知成分有144多种，制备工艺采用高效能纳滤膜材料分离、纯化后，只用一次醇沉或完全不用醇沉步骤，不仅是节省乙醇物料和工时，所得有效组分的种类和质量与二次醇沉结果相同。
(4)冻干粉冷冻干燥技术参数，是经26批小试和中试本品提取物和赋性剂配比，制订一定程序进行冷冻、干燥而成，只适合应用于本提取纯化工艺所得物料的专用条件。
(5)注射剂的辅料种类和用量，是经过长期稳定性试验考察确定的。
本发明的制备方法是经过大量的筛选和工艺研究得到的，以下为筛选和工艺研究的内容。
(1)药液的预处理 中药材成分复杂，杂质较多，药液需预先处理，否则会阻塞膜孔，影响纳滤效果。故本发明先将水提取液经3500r/min离心20min，经φ0.45μm微孔滤膜滤过进行预处理后，进行纳滤膜分离滤过实验。
另将水提醇沉液回收乙醇后，加入水至一定浓度，经φ0.45μm微孔滤膜滤过进行预处理，作为对照实验。
(2)药液的浓度和温度 药液的浓度直接影响过滤速度。低浓度的药液纳滤速度快，在常温下，中药液的粘滞性越大其滤速越慢；一定浓度下，温度越高，纳滤通量越大。本发明选择实际提取液的原浓度进行纳滤膜分离滤过，药液温度控制为40℃～80℃，此时效率最高。
(3)纳滤膜的选择 本原料药材的主要有效成分为多糖类、皂苷类和黄酮类，成分比较复杂。对膜孔径的选择时，必须考虑几种有效成分的相对分子量大小和含量，不造成有效成分的损失。本发明选择的φ0.45μm(和0.18、0.3μm、)微孔滤膜滤过做前处理，φ截留相对分子量为2万-6万(相当φ20-60nm)的中空纤维纳滤膜分离滤过是最佳选择。
(4)膜超滤时的压力 若在超滤初期施以较大压力，则会使可压性杂质迅速阻塞膜孔，影响纳滤效率，本发明经过筛选确定超滤时压力为0.2Mpa，效果最好。
筛选和工艺研究的试验方法与结果称取党参、黄芪各300g，按优选水提工艺进行水提。得水提药液约9000ml，分成9份，各约1000ml，分别试验如下
①水提对照液水提取药液经3500r/min离心20min，φ0.45μm微孔滤膜滤过后，浓缩至100ml备查。
②一次醇沉液照优选醇沉工艺进行醇沉，将醇沉液体回收乙醇至无醇味，加水至100ml(每1ml约含0.66g生药)；经3500r/min离心20min，φ0.45μm微孔滤膜滤过，备查。
③两次醇沉液照优选醇沉工艺浓缩提取液、醇沉2次，分别使含醇量达到70％和80％，滤过、回收乙醇。最后加水至100ml(每1ml约含0.66g生药)；经3500r/min离心20min，φ0.45μm微孔滤膜滤过，备查。
④水提液10万膜滤液水提取药液经3500r/min离心20min，φ0.45μm微孔滤膜滤过后，再经φ相当截留相对分子量10万的中空纤维纳米膜滤过，浓缩至100ml，备查。
⑤水提液6万膜滤液经3500r/min离心20min，φ0.45μm微孔滤膜滤过后，再经φ相当截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜滤过，浓缩至100ml，备查。
⑥水提液4万膜滤液经3500r/min离心，φ0.45μm微孔滤膜滤过后，再经φ相当截留相对分子量4万的中空纤维纳米膜滤过，浓缩至100ml，备查。
⑦水提液2万膜滤液经3500r/min离心，φ0.45μm微孔滤膜滤过后，再经φ相当截留相对分子量2万的中空纤维纳米膜滤过，浓缩至100ml，备查。
⑧一次醇沉6万膜滤液照优选醇沉工艺进行一次醇沉，经3500r/min离心20min，φ0.45μm微孔滤膜滤过后，再经φ相当截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜滤过，浓缩至100ml，备查。
⑨一次醇沉10万膜滤液照优选醇沉工艺进行一次醇沉，经3500r/min离心20min，φ0.45μm微孔滤膜滤过后，再经φ相当截留相对分子量10万的中空纤维纳米膜滤过，浓缩至100ml，备查。
分别精密量取以上①、②、③、④、⑤、⑥、⑦、⑧、⑨提取液各25ml，置250ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。检查总糖含量及相关项目。
供试品溶液的制备 精密量取上述①、②、③、④、⑤、⑥、⑦、⑧、⑨稀释溶液各50ml，加浓盐酸10ml，于沸水浴中水解3小时。冷却，移至100ml量瓶中，用水洗涤容器，洗液并入量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过。弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶<p>因为片剂需要粉碎干膏，加辅料(淀粉、乙醇)制粒，加崩解剂、润滑剂整粒、压片，用蔗糖、滑石粉包衣，包装。而胶囊只需将干膏粉碎，加润滑剂，灌装即得。节省三道工序，减少辅料占片重的50％左右。
原片芯含药.0.3g，加辅料制粒、压片、包衣后，片重0.56-0.60g片剂和胶囊对比
新复方大青叶胶囊处方组成为；
处方复方大青叶提取物200g 对乙酰氨基酚75g咖啡因7.5g 异戊巴比妥7.5g 维生素C 10g
制法以上五味分别粉碎，混匀，加辅料适量，制成颗粒，装成胶囊1000粒，即得。
本发明是针对新复方大青叶胶囊制剂提出质量控制方法的，但也不限与新复方大青叶胶囊，还可包括片剂、颗粒剂等其他口服制剂。
本发明包括的新复方大青叶其他制剂形式其处方与胶囊制剂相同。
其中所述复方大青叶提取物由五味中药大青叶、山银花、大黄、羌活、拳参，按重量比例大青叶∶山银花∶大黄∶羌活∶拳参＝4∶2∶1∶1∶1配比后经过提取加工制备，所述提取加工方法可以按照现有技术如部颁标准，专利和非专利文献中复方大青叶制剂的制备中有关提取方法提取。
复方大青叶制剂是一种已知药物，已经列入部颁标准第五册。
结果表明(1)水提取液含多糖量高，但杂质多，蛋白质、鞣质、树脂、不溶性微粒检查项目不合格；(2)醇沉法提取液颜色变深，色素多，多糖活性成分丢失较多，鞣质不合格；两次醇沉多糖丢失52.0％；(3)膜分离对多糖活性成分保留较多，膜φ相当分子量4万时，糖类含量下降22.7％；φ相当分子量为6万时，糖类含量下降14.5％；10万时，糖类基本不丢失(降低0.2％)，但φ相当分子量为6万、10万时蛋白质截留不合格(见图1)；(4)膜分离液体清澈透明，颜色明显变浅，呈桔黄色，检查项目均优于醇沉液工艺。显示对色素和杂质的去除较醇沉液彻底。膜分离对提取药液澄明度和色度的影响见图2。
综合上述结果，采用一次醇沉外加φ截留分子量为6万的中空纤维纳米膜过滤，或不用醇沉步骤直接选用φ截留分子量为2万-4万的中空纤维纳米膜超滤，所得产品各项指标符合要求。
本发明依据膜高分子材料理论及中药有效组分相对分子量特性，经研究采用φ截留分子量2万～6万的中空纤维纳米膜滤过，分离和纯化中药提取组分，收到既能较大限度地保留有效组分，又能最大限度地除去杂质的效果。提高了注射剂的质量，疗效提高，副作用减少，缩短了生产工期，环保、节能、增效。
图1超滤醇沉对蛋白质的影响，其中a 6万超滤液 b一次醇沉液 c一次醇沉液+6万超滤液a、b蛋白质检查阳性 c蛋白质检查阴性图2超滤醇沉对澄明度和色度的影响a 6万超滤液 b醇沉液 c 4万超滤液a、c超滤澄明度极好 b澄明度合格，但不如超滤清澈透明
具体实施方式
以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
实施例1取党参、黄芪各300g，加热纯化水煎煮提取3次，加水量分别为10、8、6倍；煎煮时间分别为1、1、0.5小时。提取液滤过，浓缩至每1ml含药材量约1.3g，加入乙醇使含乙醇量达80％，搅拌后静置24小时，滤过，回收乙醇至无醇味。滤液加注射用水至每1ml含药材量0.08g，经φ0.45μm微孔滤膜滤过。滤液经φ截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜滤过，滤液浓缩，加入适量辅料溶解，活性炭煮沸吸附热源和脱色，除炭。调pH值，又经φ0.22μm微孔滤膜滤过。分装，灭菌，制成注射液。
实施例2取党参、黄芪各300g，加热纯化水煎煮提取3次，加水量分别为10、8、6倍；煎煮时间分别为1、1、0.5小时。提取液经φ0.45μm(或φ0.18、0.3μm)微孔滤膜滤过。滤液再经φ截留分子量3万(或2万、4万)的中空纤维纳米膜滤过，滤液浓缩，加入适量辅料溶解，活性炭煮沸吸附热源和脱色，除炭。调pH值，又经φ0.22μm微孔滤膜滤过，分装，灭菌，制成注射液。
实施例3取党参、黄芪各300g，加热纯化水煎煮提取3次，加水量分别为10、8、6倍；煎煮时间分别为1、1、0.5小时。提取液滤过，浓缩至每1ml含药材量约1.3g，加入乙醇使含乙醇量达80％，搅拌后静置24小时，滤过，回收至无醇味。滤液加注射用水至每1ml含药材量0.08g，经0.45μm微孔滤膜滤过。滤液经孔径为截留相对分子量为6万的中空纤维纳米膜超滤，滤液浓缩，加入适量辅料溶解，活性炭煮沸吸附热源和脱炭，除炭。调pH值，又经0.22μm微孔滤膜滤过，分装，冷冻干燥制成冻干粉针。
实施例4取党参、黄芪各300g，加热纯化水煎煮提取3次，加水量分别为10、8、6倍；煎煮时间分别为1、1、0.5小时。提取液经φ0.45μm(或φ0.18、0.3μm)微孔滤膜滤过，再φ截留分子量3万(或2万、4万)的中空纤维纳米膜滤过，滤液浓缩至每1ml含药材量0.08g，滤液浓缩，加入适量辅料溶解，活性炭煮沸吸附热源和脱色，除炭。调pH值，又经0.22μm滤孔滤膜滤过，分装，冷冻干燥制成冻干粉针。
权利要求
1.一种参芪扶正注射液的制备方法，包括活性提取物的制备和活性提取物与药物辅料混合的步骤，其特征在于，所述步骤如下党参、黄芪水提，乙醇沉淀一次，过滤，回收乙醇，滤液加注射用水，经微孔滤膜滤过。再经φ截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜滤过。滤液浓缩，加入辅料，调pH值，经微孔滤膜滤过，分装，灭菌，或分装后冷冻干燥；或党参、黄芪，水提，滤过，滤液经微孔滤膜滤过，再经φ截留相对分子量2~4万的中空纤维纳米膜滤过，滤液浓缩，加入辅料，调pH值，又经微孔滤膜滤过，分装，灭菌，或冷冻干燥。
2.权利要求1的制备方法，其特征在于，所述步骤如下取党参、黄芪，加热纯化水煎煮提取3次，加水量分别为10、8、6倍；煎煮时间分别为1、1、0.5小时。提取液滤过，浓缩至每1ml含药材量约1.3g，加入乙醇使含乙醇量达80％，搅拌后静置24小时，滤过，回收乙醇至无醇味。滤液加注射用水至每1ml含药材量0.08g，经0.45μm微孔滤膜滤过。再经φ截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜滤过。滤液浓缩，加入适量辅料溶解，活性炭煮沸吸附热源，除炭，调pH值，又经0.22μm微孔滤膜滤过，分装，灭菌，或冷冻干燥；或取党参、黄芪，加热纯化水煎煮提取3次，加水量分别为10、8、6倍；煎煮时间分别为1、1、0.5小时，提取液经0.45μm微孔滤膜滤过，再经φ截留相对分子量2~4万的中空纤维纳米膜滤过。滤液浓缩，加入适量辅料溶解，活性炭煮沸吸附热源，除炭，调pH值，又经0.22μm微孔滤膜滤过，分装，灭菌，或冷冻干燥。
3.权利要求1的制备方法，其特征在于，提取液如果先用80％乙醇沉淀一次，所述纳米膜为截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜。
4.权利要求1的制备方法，其特征在于，提取液如果不用乙醇沉淀，直接用纳米膜分离提纯，所述纳米膜为截留相对分子量2~4万的中空纤维纳米膜。
5.权利要求1的制备方法，其特征在于，所述加热纯化水是80℃-100℃的热纯水。
6.权利要求1的制备方法，其特征在于，所述纳米膜滤过，药液温度控制为40℃～80℃。
7.权利要求1的制备方法，其特征在于，所述纳米膜滤过时压力为0.2Mpa。
全文摘要
本发明涉及一种参芪扶正注射剂的制备方法包括以下步骤党参、黄芪水提，乙醇沉淀一次，过滤，回收乙醇，加入辅料，调pH值，加注射用水经微孔滤膜滤过，再经φ截留相对分子量6万的中空纤维纳米膜滤过，分装，灭菌，或冷冻干燥，即得；或党参、黄芪，水提，过滤，滤液经微孔滤膜滤过，再经φ截留相对分子量2－4万的中空纤维纳米膜滤过，加入辅料，调pH值，又经微孔滤膜滤过除菌，分装，或冷冻干燥，即得。
文档编号A61K9/19GK1857379SQ20061005718
公开日2006年11月8日 申请日期2006年3月14日 优先权日2006年3月14日
发明者王振国, 贾志丹, 刘贺之, 周颖, 苏彦珍, 王涛, 吴素林 申请人:北京国丹药物技术开发有限公司